桃熱激轉錄因子PpHSF18 基因的克隆及功能分析

李天豪 張杰 高紅珠 魏鵬程 鄭先波 連曉東 王小貝 張海朋 程鈞 王偉 譚彬 馮建燦

摘要：【目的】克隆桃熱激轉錄因子PpHSF18 基因，分析其在2 種樹型桃中的表達，探究其在分枝角度形成中的功能?！痉椒ā繙y定一年生普通型桃大久保和柱型桃灑紅龍柱枝條不同生長時期分枝角度，并分析11 個桃PpHSFAs 基因在2 種樹型中的表達；克隆PpHSF18 基因，構建PpHSF18 基因的過表達載體，并進行擬南芥遺傳轉化，探究其對擬南芥株型和分枝角度的影響。【結果】柱型桃品種灑紅龍柱枝條分枝角度顯著小于普通型桃大久保，大久保桃分枝角度隨著枝條生長逐漸增大，而灑紅龍柱桃分枝角度變化不明顯；11 個桃A類HSF轉錄因子家族基因在2 種樹型桃莖尖中的表達呈3 種趨勢，其中PpHSF18 與PpLAZY1 呈相同表達趨勢，即在柱型桃中表達量顯著高于普通型桃，且與水稻OsHSFA2D同源性最高；PpHSF18 三個轉基因株系分枝角度均小于野生型擬南芥分枝角度，表明PpHSF18 參與植物分枝角度的形成?！窘Y論】過表達PpHSF18 導致轉基因擬南芥分枝角度變小，為進一步解析PpHSF18 在桃分枝角度形成中的作用提供理論依據。

關鍵詞：桃；熱激轉錄因子；分枝角度；柱型

中圖分類號：S662.1 文獻標志碼：A 文章編號：1009-9980（2023）05-0852-09

分枝（蘗）角度是形成“理想樹（株）型”的重要組成部分，其與產量形成、環境適應和競爭能力密切相關。遺傳因素、植物激素、重力向地性和環境因素等在植物分枝（蘗）角度形成中發揮重要作用[1]。

熱激轉錄因子（heat shock transcription factor，HSFs）是植物中研究最廣泛的轉錄因子家族之一，根據蛋白質結構的差異，植物HSFs 可分為A、B、C三類[2]，其中只有A類HSFs 成員C末端含有具有轉錄激活功能的AHA基序，因此現有的對植物熱激轉錄因子的研究主要集中在A類，B類和C類研究相對較少[3]。A類熱激轉錄因子作為熱脅迫的重要調控因子，通過調控熱激蛋白（heat shock protein，HSPs）等多種類型基因的表達來參與植物熱脅迫響應[4-5]；此外，A類熱激轉錄因子還參與了干旱、鹽等非生物脅迫[6-7]。近年來對A類熱激轉錄因子的研究發現其在植物樹（株）型相關性狀的形成中也發揮了重要的作用。Zhang 等[8]研究發現水稻hsfa2d 突變體植株表現分蘗角度增大，hsfa2d/lazy1 雙突變體表現出比二者單突變體更大的分蘗角度，且OsLAZY1基因過表達能夠挽救hsfa2d 突變體表型，而LAZY1基因屬于IGT 基因家族，在分蘗（枝）角度形成中具有非常重要的作用。過表達AtHsfA3、AtHsfA2 和OsHsfA2e 的轉基因擬南芥植株均出現（極）矮化表型[9-10]；過表達苣苔（Boea hygrometrica）A類BhHsf1的轉基因擬南芥和煙草植株生長受阻，均表現矮化表型，同時轉基因擬南芥植株的葉片、花序、果莢均變小[11]。

桃（Prunus persica L.）是世界最重要的果樹之一，原產中國，種質資源豐富。依據樹高和分枝角度的不同，桃樹型可分為普通型、矮化型、半矮化型、柱型、直立型、垂枝型和曲枝型[12-13]。目前桃生產上主栽品種主要為普通型，其樹型開張，分枝角度過大，隨著結果年限延長，樹冠內枝葉密集，中下部透光差，是限制桃園產量的主要因素，也在一定程度上影響了果實品質提升。柱型桃是桃資源中的一類特異種質，與普通型桃相比，柱型桃樹冠較小，具有分枝角度小、側枝數量少等特點[14-15]。發掘控制桃分枝角度相關基因，通過分子育種手段對現有主栽桃品種樹型進行改良具有重要意義。筆者在本研究中以普通型桃大久保和柱型桃灑紅龍柱為試驗材料，分析2 個品種一年生植株分枝角度差異，通過2 個品種莖尖轉錄組數據，篩選出與水稻中調控分蘗角度的關鍵轉錄因子OsHSFA2D 基因[8]的同源基因桃A 類HSF轉錄因子PpHSF18，克隆PpHSF18 基因并對其功能進行研究，為后續桃分枝角度分子機制研究提供理論支撐。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

一年生普通型桃大久保（Okubo，O）和柱型桃灑紅龍柱（Sahonglongzhu，S）于2019 年12 月栽植于河南農業大學三區果樹試驗站，采取莖尖進行轉錄組測序分析，采取嫩葉用于RNA的提取和后續基因克隆等試驗，所有樣品采集后迅速置于液氮中速凍，帶回實驗室后放于-80 ℃超低溫冰箱保存；并以大久保和灑紅龍柱一年生植株為試材進行分枝角度測定。采用一年生大久保和灑紅龍柱分枝連接處進行PpHSFA18 基因相對表達量測定。采用野生型擬南芥（Arabidopsis thaliana ecotype Columbia）進行PpHSFA18基因功能驗證。

1.2 一年生桃植株分枝角度測量

從5 月5 日開始到5 月30 日，每隔5 d 用SC-K1原位活體植物分枝角自動測量儀系統（杭州萬深）分別測量大久保和灑紅龍柱一年生枝條的基角（一年生枝與主干的夾角），每處理選取3 棵長勢一致的植株，從每棵植株隨機選取3 個枝條測定其分枝角度并記錄，3 次重復。

1.3 轉錄組測序和表達分析

大久保（O）和灑紅龍柱（S）莖尖轉錄組數據參考譚彬等[16]的研究，基于轉錄組測序數據分析桃中11個HSF家族A類基因[17（] 包含PpHSF18基因）、PpLAZY1 基因和PpTAC1 基因在大久保和灑紅龍柱莖尖中的表達量，并利用TBtools v0.6733 軟件[18]繪制表達量熱圖。利用實時熒光定量PCR 分析候選基因PpHSF18 在大久保和灑紅龍柱一年生枝條分枝連接處的表達量。

1.4 PpHSF18 基因克隆及過表達載體構建

利用Primer Premier 5.0設計PpHSF18基因CDS（Coding sequence，編碼區）全長引物PpHSF18-F1 和PpHSF18-R1（引物序列見表1），以普通型桃大久保葉片cDNA為模板進行PCR擴增，PCR反應體系和反應程序、PCR產物回收、連接及轉化大腸桿菌步驟參照譚彬等[19]的方法進行。將PCR檢測呈陽性的單菌落活化后送至武漢擎科生物科技有限公司進行測序，使用MEGA7.0軟件將測序結果與參考序列進行比對。

利用Primer premier 5.0設計含Hind Ⅲ和Xba Ⅰ酶切位點的引物PpHSF18-F2 和PpHSF18-R2（引物序列見表1），PCR擴增和載體構建參照譚彬等[19]的方法進行。

1.5 PpHSF18 遺傳轉化擬南芥及其鑒定分析

將構建好的pSAK277-35S：：PpHSF18 過表達載體轉化農桿菌GV3101 菌株，使用蘸花法侵染擬南芥[20]，待果莢成熟時收取T0代種子。T0代擬南芥植株培養、葉片DNA和RNA提取、PCR擴增和實時熒光定量PCR方法參照譚彬等[19]的方法進行，以擬南芥AtUBC 基因為內參基因，引物序列見表1。對T2代陽性擬南芥植株分枝角度進行測定，每株系選取3 株，每株選取3 個枝條，3 次重復。

1.6 數據統計與分析

利用SPSS 17.0 軟件對數據進行顯著性分析，采用Excel 2010 進行數據統計和作圖。

2 結果與分析

2.1 兩種樹型桃枝條不同發育期分枝角度變化

對一年生普通型桃大久保和柱型桃灑紅龍柱植株枝條不同發育階段分枝角度進行測量（圖1-A）。普通型桃大久保分枝角度顯著大于柱型桃品種灑紅龍柱分枝角度（圖1-B）。隨著枝條發育，大久保桃分枝角度逐漸增加，從62°顯著增加到76°，而灑紅龍柱桃枝條分枝角度在整個發育時期沒有顯著變化（31°～34°），但是均顯著低于大久保各個時期分枝角度。綜上分析，2 個品種間分枝角度及其分枝角度變化規律均存在差異。

2.2 PpHSFAs在2種不同樹型桃中的表達分析

PpTAC1 和PpLAZY1 是同屬于IGT 家族的一對作用相反的控制植物分枝角度的關鍵基因[21]。對普通型桃大久保和灑紅龍柱莖尖轉錄組數據中HSF家族中11 個A類基因、PpTAC1 和PpLAZY1 表達趨勢進行分析（圖2-A）。結果發現，PpTAC1 和PpLAZY1表達趨勢相反，PpTAC1 在大久保中表達量高于灑紅龍柱中表達量，而PpLAZY1 則相反。PpHSF16在2 種樹型中均不表達，其余PpHSFs 基因呈現2 種表達趨勢，PpHSF2、PpHSF3、PpHSF10、PpHSF11 和PpHSF14 與PpTAC1 表達趨勢一致，表現為在大久保中表達量高于灑紅龍柱（圖2-A）；而PpHSF1、PpHSF4、PpHSF7、PpHSF9、PpHSF18 與PpLAZY1 表達趨勢一致，表現為在灑紅龍柱中表達量高于大久保（圖2-A），其中，PpHSF18 與水稻OsHSFA2D高度同源（E-value = 1e-120）（圖2-B），OsHSFA2D是Os-LAZY1 上游正調節因子[8]，故推測PpHSF18 可能參與調控桃分枝角度。

為進一步明確PpHSF18 基因的表達模式，以一年生大久保和灑紅龍柱的分枝連接處（O 和S），分枝連接處上（O-Upper 和S-Upper）和分枝連接處下（O-Lower 和S-Lower）為材料檢測PpHSF18的相對表達量，分析發現PpHSF18 基因在灑紅龍柱分枝連接處及分枝連接處上下部相對表達量均顯著高于大久保。PpHSF18 基因相對表達量與2 種樹型桃枝條分枝角度大小呈負相關關系（圖3）。

2.3 PpHSF18 基因克隆與過表達載體構建

以大久保嫩葉cDNA為模板進行PpHSF18 基因CDS 區全長（1080 bp）擴增，結果顯示，PpHSF18 基因CDS 區大小為1000 bp 左右（圖4-A）；測序結果顯示，PpHSF18 基因CDS 區序列與參考基因組無差異，編碼359 個氨基酸，與OsHSFA2D蛋白序列比對顯示，均包含HSF家族基因保守結構域（圖2-B）。將PpHSF18 基因CDS區序列與酶切后的pSAK277 過表達載體進行連接和轉化（圖4-B），挑取單菌落進行PCR 驗證，結果顯示，PCR 產物條帶位于1000 bp 左右的位置，說明目的基因成功連接至pSAK277 載體，PpHSF18 基因過表達載體構建成功。

2.4 轉基因擬南芥篩選與鑒定

用包含pSAK277-35S：：PpHSF18 過表達載體的農桿菌進行擬南芥侵染，在含有卡那霉素的抗性培養基上篩選擬南芥種子，獲得4 株T0代抗性苗。進一步通過PCR 驗證，4 株T0代抗性苗均能擴出目的基因條帶（圖5-A），說明4 株抗性苗均為PpHSF18轉基因陽性苗。

利用qRT-PCR 檢測PpHSF18 基因在4 個T0 代轉基因植株中的相對表達量，結果（圖5-B）顯示，相較于WT植株，L1～L4 四個轉基因植株中PpHSF18表達量均顯著高于WT植株，其中L1 表達量最高，L4 次之，L2 和L3 之間沒有明顯差異，表明PpHSF18基因已成功整合到4 個轉基因植株的基因組中并發揮作用。

2.5 過表達PpHSF18 轉基因擬南芥表型觀察與分析

對3 個T2代陽性轉基因擬南芥株系進行分枝角度觀測和統計，結果顯示，與WT 植株相比，PpHSF18 過表達株系的分枝角度顯著減小（圖6-A），且WT擬南芥的“冠層”顯著大于3 個PpHSF18轉基因株系（圖6-B）。對WT和過表達株系分枝角度進行測量，WT植株分枝角度在60°左右；而過表達株系的分枝角度為40°左右。進一步的方差分析發現，過表達株系植株分枝角度極顯著低于WT（p＜0.01）（圖6-C），表明過表達PpHSF18 基因導致擬南芥分枝角度變小。

3 討論

桃樹型是影響果實產量和品質形成、栽培管理措施確定的基礎[13]。高而窄的樹型是適于目前果樹生產提出的“寬行密植”栽培理念的理想樹型，不僅有利于行間作業，通過逐步實現機械化，可以大大降低勞動強度和勞動力支出，而且改善了果園群體的通風透光條件，對減少病蟲發生、提升果實品質均具有重要意義[22]。前人研究發現柱型桃枝條接近直立，而普通型桃分枝角度大、鮮有近直立枝，且柱型桃的花梗與枝條夾角也顯著小于普通型桃[21，23]。筆者在本試驗中分析了一年生普通型桃大久保和柱型桃灑紅龍柱生長季枝條分枝角度的變化，發現柱型桃枝條在整個5 月份變化不大，且顯著低于普通型桃，研究結果與前人一致。

熱激轉錄因子HSFs 在植物的生長發育中發揮重要作用[2]。Wang 等[24]利用水稻幼苗響應重力誘導試驗的轉錄組數據篩選出一個具有時空特異性表達模式的差異表達基因OsHSFA2D，OsHSFA2D 基因響應重力信號后表達量升高并激活OsLAZY1 的表達，進而引發了生長素的不對稱分布導致水稻分蘗角度變小。LAZY1 是目前研究較多的一個控制植物分枝（蘗）角度的重要基因[24-27]，筆者團隊前期研究發現PpLAZY1 基因的異位表達導致轉基因擬南芥和煙草分枝角度（葉角）變小；Dardick 等[21]研究發現與PpLAZY1 同屬于IGT 家族的作用相反的PpTAC1 基因的突變是柱型桃Crimson Rocket 分枝角度小的主要原因?；赑pLAZY1 基因和PpTAC1 基因的表達模式，筆者在本研究中發現11 個PpHSFAs 基因在普通型桃大久保和柱型桃灑紅龍柱莖尖中呈現3 種表達模式，即普通型桃中表達量高于柱型桃、低于柱型桃和在兩種樹型中無差異。其中的PpHSF18 基因在2 種樹型中的表達模式與PpLAZY1 相同，這與水稻中OsHSFA2D 和OsLAZY1 的表達模式一致[8]，且PpHSF18 與水稻中的OsHSFA2D 高度同源（50.13%），推測PpHSF18 可能參與調控桃分枝角度形成。

過表達PpHSF18 基因的3 個轉基因擬南芥株系的分枝角度顯著小于野生型擬南芥。前人研究發現柱型桃側枝中和腋芽中生長素的含量明顯高于普通型桃[28]。水稻hsfs2d 突變體植株分蘗角度顯著大于野生型植株，OsHSFA2D和OsLAZY1 過表達均可恢復hsfa2d 突變體表型，推測OsHSFA2D 是OsLAZY1上游正調節因子，通過激活OsLAZY1 的表達調節生長素的不對稱分布進而影響水稻分蘗角度[8]。本試驗研究結果與前人研究結果一致。探究桃中PpHSF18 轉錄因子在2 種樹型桃中的表達特性及功能，可為HSF家族在桃樹型相關性狀形成中的作用研究奠定基礎。筆者在本研究中也發現PpLAZY1基因與PpHSF18 具有相同的表達趨勢，但二者之間的關系還需要進一步明確，研究與分枝角度形成的關鍵基因并開發標記基因，為利用分子育種手段進行桃樹型遺傳改良提供參考。

4 結論

筆者在本研究中成功克隆了桃熱激轉錄因子PpHSF18 基因，該基因在普通型桃一年生植株莖尖中表達量明顯低于柱型桃；異源轉化擬南芥后導致擬南芥分枝角度明顯變小，其調控的分子機制有待進一步研究。

參考文獻References：

[1] HOLLENDER C A，HILL J L，WAITE J，DARDICK C. Opposing

influences of TAC1 and LAZY1 on lateral shoot orientation

in Arabidopsis[J]. Scientific Reports，2020，10（1）：6051.

[2] NOVER L，SCHARF K D，GAGLIARDI D，VERGNE P，

CZARNECKA- VERNER E，GURLEY W B. The Hsf world：

Classification and properties of plant heat stress transcription

factors[J]. Cell Stress & Chaperones，1996，1（4）：215-223.

[3] 焦淑珍，姚文孔，張寧波，徐偉榮. 園藝植物熱激轉錄因子研

究進展[J]. 果樹學報，2020，37（3）：419-430.

JIAO Shuzhen，YAO Wenkong，ZHANG Ningbo，XU Weirong.

Research progress of heat stress transcription factors （Hsfs） in

horticultural plants[J]. Journal of Fruit Science，2020，37（3）：

419-430.

[4] NISHIZAWA A，YABUTA Y，YOSHIDA E，MARUTA T，YOSHIMURA

K，SHIGEOKA S. Arabidopsis heat shock transcription

factor A2 as a key regulator in response to several types of

environmental stress[J]. The Plant Journal，2006，48（4）：535-547.

[5] CHAN- SCHAMINET K Y，BANIWAL S K，BUBLAK D，

NOVER L，SCHARF K D. Specific interaction between tomato

HsfA1 and HsfA2 creates hetero-oligomeric superactivator complexes

for synergistic activation of heat stress gene expression[J].

The Journal of Biological Chemistry，2009，284（31）：20848-

20857.

[6] YU X Y，YAO Y，HONG Y H，HOU P Y，LI C X，XIA Z Q，

GENG M T，CHEN Y H. Differential expression of the Hsf family

in cassava under biotic and abiotic stresses[J]. Genome，

2019，62（8）：563-569.

[7] CAI S Y，ZHANG Y，XU Y P，QI Z Y，LI M Q，AHAMMED G

J，XIA X J，SHI K，ZHOU Y H，REITER R J，YU J Q，ZHOU J.

HsfA1a upregulates melatonin biosynthesis to confer cadmium

tolerance in tomato plants[J]. Journal of Pineal Research，2017，

62（2）：e12387.

[8] ZHANG N，YU H，YU H，CAI Y Y，HUANG L Z，XU C，

XIONG G S，MENG X B，WANG J Y，CHEN H F，LIU G F，

JING Y H，YUAN Y D，LIANG Y，LI S J，SMITH S M，LI J Y，

WANG Y H. A core regulatory pathway controlling rice tiller angle

mediated by the LAZY1-Dependent asymmetric distribution

of auxin[J]. The Plant Cell，2018，30（7）：1461-1475.

[9] OGAWA D，YAMAGUCHI K，NISHIUCHI T. High-level overexpression

of the Arabidopsis HsfA2 gene confers not only increased

themotolerance but also salt/osmotic stress tolerance

and enhanced callus growth[J]. Journal of Experimental Botany，

2007，58（12）：3373-3383.

[10] YOKOTANI N，ICHIKAWA T，KONDOU Y，MATSUI M，HIROCHIKA

H，IWABUCHI M，ODA K. Expression of rice heat

stress transcription factor OsHsfA2e enhances tolerance to environmental

stresses in transgenic Arabidopsis[J]. Planta，2008，

227（5）：957-967.

[11] ZHU Y，WANG Z，JING Y J，WANG L L，LIU X，LIU Y X，

DENG X. Ectopic over-expression of BhHsf1，a heat shock factor

from the resurrection plant Boea hygrometrica，leads to increased

thermotolerance and retarded growth in transgenic Arabidopsis

and tobacco[J]. Plant Molecular Biology，2009，71（4）：451.

[12] 王力榮，朱更瑞，方偉超. 中國桃遺傳資源[M]. 北京：中國農

業出版社，2012.

WANG Lirong，ZHU Gengrui，FANG Weichao. Peach genetic

resource in China[M]. Beijing：China Agriculture Press，2012.

[13] 譚彬，程鈞，鄭先波，王志強，馮建燦. 桃樹型及其調控關鍵基

因研究進展[J]. 果樹學報，2020，37（4）：599-605.

TAN Bin，CHENG Jun，ZHENG Xianbo，WANG Zhiqiang，

FENG Jiancan. Progress on tree architecture and key genes of

its regulation in peach[J]. Journal of Fruit Science，2020，37（4）：

599-605.

[14] SCORZA R，BASSI D，DIMA A，RIZZO M. Developing new

peach tree growth habits for higher density plantings[J]. Compact

Fruit Tree，2000，33（1）：19-21

[15] WANG X B，WANG Q P，YAN L X，HAO Y H，LIAN X D，

ZHANG H P，ZHENG X B，CHENG J，WANG W，ZHANG L

L，YE X，LI J D，TAN B，FENG J C. PpTCP18 is upregulated

by lncRNA5 and controls branch number in peach （Prunus persica）

through positive feedback regulation of strigolactone biosynthesis[

J]. Horticulture Research，2023，10（1）：224.

[16] 譚彬，楊麗萍，陳立川，馮玫僑，連曉東，魏鵬程，程鈞，王小貝，

馮建燦. 桃PIN 蛋白基因家族鑒定及其在不同樹型桃中的表

達分析[J]. 農業生物技術學報，2020，28（10）：1747-1760.

TAN Bin，YANG Liping，CHEN Lichuan，FENG Meiqiao，LIAN

Xiaodong，WEI Pengcheng，CHENG Jun，WANG Xiaobei，

FENG Jiancan. Identification and expression analysis of PIN

gene family in different tree architectures of peach （Prunus persica）

[J]. Journal of Agricultural Biotechnology，2020，28（10）：

1747-1760.

[17] TAN B，YAN L，LI H N，LIAN X D，CHENG J，WANG W，

ZHENG X B，WANG X B，LI J D，YE X，ZHANG L L，LI Z Q，

FENG J C. Genome-wide identification of HSF family in peach

and functional analysis of PpHSF5 involvement in root and aerial

organ development[J]. PeerJ，2021，9：e10961.

[18] CHEN C J，CHEN H，ZHANG Y，THOMAS H R，FRANK M

H，HE Y H，XIA R. TBtools：An integrative toolkit developed

for interactive analyses of big biological data[J]. Molecular

Plant，2020，13（8）：1194-1202.

[19] 譚彬，魏鵬程，栗煥楠，連曉東，陳譚星，鄭先波，程鈞，王偉，王

小貝，馮建燦. 桃PEBP 基因家族全基因組鑒定及桃TFL1 基

因功能分析[J]. 果樹學報，2020，37（10）：1443-1454.

TAN Bin，WEI Pengcheng，LI Huannan，LIAN Xiaodong，

CHEN Tanxing，ZHENG Xianbo，CHENG Jun，WANG Wei，

WANG Xiaobei，FENG Jiancan. Genome-wide identification of

PEBP gene family and functional analysis of TFL1 gene in

peach （Prunus persica） [J]. Journal of Fruit Science，2020，37

（10）：1443-1454.

[20] CLOUGH S J ，BENT A F. Floral dip ：A simplified method for

Agrobacterium- mediated transformation of Arabidopsis thaliana[

J]. The Plant Journal，1998，16（6）：735-743.

[21] DARDICK C，CALLAHAN A，HORN R，RUIZ K B，ZHEBENTYAYEVA

T，HOLLENDER C，WHITAKER M，ABBOTT

A，SCORZA R. PpeTAC1 promotes the horizontal

growth of branches in peach trees and is a member of a functionally

conserved gene family found in diverse plants species[J].

The Plant Journal，2013，75（4）：618-630.

[22] 王志強，牛良，崔國朝，魯振華，曾文芳. 我國桃栽培模式現狀

與發展建議[J]. 果農之友，2015（9）：3-4.

WANG Zhiqiang，NIU Liang，CUI Guochao，LU Zhenhua，

ZENG Wenfang. Present situation and development suggestions

of peach cultivation mode in China[J]. Fruit GrowersFriend，

2015（9）：3-4.

[23] TWORKOSKI T，MILLER S，SCORZA R. Relationship of pruning

and growth morphology with hormone ratios in shoots of pillar

and standard peach trees[J]. Journal of Plant Growth Regulation，

2006，25（2）：145-155.

[24] WANG H，TU R R，SUN L P，WANG D F，RUAN Z Y，

ZHANG Y E，PENG Z Q，ZHOU X P，FU J L，LIU Q N，WU

W X，ZHAN X D，SHEN X H，ZHANG Y X，CAO L Y，

CHENG S H. Tiller angle control 1 is essential for the dynamic

changes in plant architecture in rice[J]. International Journal of

Molecular Sciences，2022，23（9）：4997.

[25] DONG Z B，JIANG C，CHEN X Y，ZHANG T，DING L，SONG

W B，LUO H B，LAI J S，CHEN H B，LIU R Y，ZHANG X L，

JIN W W. Maize LAZY1 mediates shoot gravitropism and inflorescence

development through regulating auxin transport，auxin

signaling，and light response[J]. Plant Physiology，2013，163（3）：

1306-1322.

[26] FURUTANI M，MORITA M T. LAZY1-LIKE-mediated gravity

signaling pathway in root gravitropic set-point angle control[J].

Plant Physiology，2021，187（3）：1087-1095.

[27] CHE X M，SPLITT B L，ECKHOLM M T，MILLER N D，

SPALDING E P. BRXL4-LAZY1 interaction at the plasma membrane

controls Arabidopsis branch angle and gravitropism[J].

The Plant Journal，2023，113（2）：211-224.

[28] TWORKOSKI T，WEBB K，CALLAHAN A. Auxin levels and

MAX1-4 and TAC1 gene expression in different growth habits of

peach[J]. Plant Growth Regulation，2015，77（3）：279-288.