銀屑病關(guān)節(jié)炎骨質(zhì)破壞骨代謝標(biāo)記物的篩查與研究

趙伊婷 馬潔 張裕祥

銀屑病關(guān)節(jié)炎(psoriatic arthritis,PsA)為銀屑病(psoriasis,Ps)中較為嚴(yán)重的關(guān)節(jié)病變,隨著病情進(jìn)展,將會出現(xiàn)不可逆轉(zhuǎn)的骨質(zhì)破壞[1,2]。骨代謝標(biāo)記物檢測一直是PsA領(lǐng)域研究的熱點,目前臨床上尚無提示與患者骨質(zhì)破壞情況有關(guān)的指標(biāo)[3]。因此,臨床急需尋找與PsA骨質(zhì)破壞具有內(nèi)在聯(lián)系的指標(biāo),以評估PsA患者骨質(zhì)破壞發(fā)生情況。研究表明,人體骨質(zhì)破壞情況與成骨及破骨細(xì)胞之間的平衡具有相關(guān)性,且骨代謝指標(biāo)中酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)、Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)與骨特異性堿性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)水平可明確骨吸收與骨形成的功能狀況,同時具有較高特異性,已成為判斷骨吸收水平的重要生化標(biāo)記物[4,5]。由此,推測骨代謝指標(biāo)在PsA骨質(zhì)破壞患者中具有異常表達(dá)情況且與骨質(zhì)破壞具有一定相關(guān)性。本研究分析骨代謝標(biāo)記物在PsA骨質(zhì)破壞中的特點,探討骨代謝標(biāo)記物與PsA骨質(zhì)破壞的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用前瞻性分析,選取2022年1月～10月新疆醫(yī)科大學(xué)第六附屬醫(yī)院收治20例PsA骨質(zhì)破壞患者為PsA骨質(zhì)破壞組,選擇同期20例Ps患者為Ps組,并納入同期20例健康志愿者為健康組。PsA骨質(zhì)破壞組中,男12例,女8例;年齡33～52歲,平均(43.60±5.06)歲;體重指數(shù)21.6～28.5 kg/m2,平均(25.36±2.04)kg/m2;以膝關(guān)節(jié)為主8例,以指關(guān)節(jié)為主2例,以髖關(guān)節(jié)為主6例,以踝關(guān)節(jié)為主4例。Ps組中,男13例,女7例;年齡36～53歲,平均(42.85±4.94)歲;體重指數(shù)17.2～31.8 kg/m2,平均(25.07±3.51)kg/m2。健康組中,男11例,女9例;年齡36～52歲,平均(43.25±4.97)歲;體重指數(shù)16.2～30.9 kg/m2,平均(23.51±4.03)kg/m2。3組性別、年齡、體重指數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn):①PsA骨質(zhì)破壞組均符合《實用骨科學(xué)》[6]中PsA診斷標(biāo)準(zhǔn):a就診時由醫(yī)生診斷具有銀屑病性皮膚或者頭皮病變,或者既往有銀屑病病史,或者一級親屬或者二級親屬中患有銀屑病;b典型的銀屑病指甲改變:包括甲剝離、頂針樣凹陷、過度角化等表現(xiàn);c類風(fēng)濕因子陰性;d手指、足趾炎癥或者既往有過指炎:即手指或者足趾炎癥;e影像學(xué)改變:發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)周圍有新骨形成,手足平片上可以看到異常骨化或者關(guān)節(jié)骨質(zhì)的破壞間隙變窄。滿足上述標(biāo)準(zhǔn)中三項即可明確診斷;②Ps組均符合《中國銀屑病診療指南(2018簡版)》[7]中Ps診斷標(biāo)準(zhǔn):臨床表現(xiàn)為皮膚局部出現(xiàn)白色鱗屑,刮除之后可見半透明薄膜,將薄膜刮除后見點狀出血,經(jīng)由組織病理檢查確診;③PsA骨質(zhì)破壞組、Ps組患者病程≤3個月;④年齡20～50歲;⑤所選研究對象及家屬均知情同意。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn):①近半年內(nèi)用過抗風(fēng)濕藥或接受過免疫抑制治療者;②半年內(nèi)接受過關(guān)節(jié)內(nèi)注射藥物、口服糖皮質(zhì)激素及影響骨代謝藥物治療者;③合并嚴(yán)重心腦血管疾病;④合并肝腎功能異常;⑤合并內(nèi)分泌疾病;⑥合并強(qiáng)直性脊柱炎、布魯氏菌性脊柱炎或結(jié)核性關(guān)節(jié)炎;⑦合并精神疾病;⑧妊娠或哺乳期女性。

1.3 方法

1.3.1 治療方法:PsA骨質(zhì)破壞組和Ps組患者均接受Ps治療,外用鹵米松乳膏(天津金耀藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字號H20173186,規(guī)格:10 g)2次/d,5 d/周,若出現(xiàn)皮膚萎縮或毛細(xì)血管擴(kuò)張者減量至1次/d,同時應(yīng)用紫外治療儀(北京天長福醫(yī)療設(shè)備制造有限公司,型號:TCF-2000III型)進(jìn)行照射治療,設(shè)定波長為310 nm,峰值為311 nm,初始照射劑量為70%最小紅斑量,后續(xù)每次照射量增加0.1 J/cm2,3次/周,若照射區(qū)出現(xiàn)水皰、痛性紅斑立即停止照射,待恢復(fù)后將照射量減少0.1 J/cm2繼續(xù)治療。PsA骨質(zhì)破壞組患者在此基礎(chǔ)上加用來氟米特片(齊魯制藥有限公司,國藥準(zhǔn)字號H20203195,規(guī)格:20 mg)10 mg/d進(jìn)行抗風(fēng)濕治療。2組患者均治療3個月。

1.3.2 骨代謝標(biāo)記物檢測方法:比較PsA骨質(zhì)破壞組及Ps組治療前、治療2個月、治療3個月時與健康組體檢時骨代謝指標(biāo),所有研究對象禁食>10 h,清晨取坐位經(jīng)肘靜脈采血5 ml,室溫靜置1 h,離心分離(3 600 r/min,10～15 min),放置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?yīng)用全自動紅細(xì)胞沉降率測定儀(北京普利生儀器有限公司,型號:LBY-XC408)檢測紅細(xì)胞沉降率(ESR);熒光免疫定量分析儀(基蛋生物科技股份有限公司,型號:Getein 1600)檢測C-反應(yīng)蛋白(CRP);免疫分析儀(艾德康生物科技有限公司,型號:Addcare ELISA 400)采用雙抗體夾心法將TRACP5b單抗包被于酶標(biāo)板,隨后將樣品及標(biāo)準(zhǔn)品中TRACP5b與單抗進(jìn)行結(jié)合,同時將生物素化后的抗人TRACP5b加入,從而形成免疫復(fù)合物在酶標(biāo)板上進(jìn)行連接,當(dāng)加入底物工作液呈藍(lán)色后將終止液硫酸加入,于450 nm波長處測定酶標(biāo)儀吸光度(吸光度與TRACP5b呈正比),進(jìn)而測定標(biāo)本中TRACP5b濃度;CTX-I測定方法同TRACP5b;在酶標(biāo)板上應(yīng)用酶法進(jìn)行反應(yīng),將樣品與標(biāo)準(zhǔn)品中的BALP與嘌呤核苷磷酸化酶底物工作液進(jìn)行顯色,顯色后加入終止液,于405 nm波長處測定酶標(biāo)儀吸光度(吸光度與BALP呈正比),通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線測定BALP濃度。

2 結(jié)果

2.1 臨床相關(guān)資料 PsA骨質(zhì)破壞組與Ps組Ps病程、Ps家族史、空腹血糖臨床資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 PsA骨質(zhì)破壞組與Ps組臨床相關(guān)資料比較 n=20

2.2 骨代謝指標(biāo)比較 PsA骨質(zhì)破壞組治療前ESR、CRP、TRACP5b、CTX-I、BALP水平均高于Ps組治療前及健康組體檢時,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);PsA骨質(zhì)破壞組治療2、3個月時ESR、CRP、TRACP5b、CTX-I、BALP水平均高于Ps組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組骨代謝指標(biāo)比較 n=20,

2.3 ESR、CRP、TRACP5b、CTX-I、BALP與骨質(zhì)破壞發(fā)生的相關(guān)性 經(jīng)點二列相關(guān)性分析顯示,ESR、CRP、TRACP5b、CTX-I、BALP水平與骨質(zhì)破壞均呈正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 ESR、CRP、TRACP5b、CTX-I、BALP與骨質(zhì)破壞發(fā)生的相關(guān)性分析

3 討論

PsA患者臨床多以皮膚表現(xiàn)為首發(fā),繼而出現(xiàn)關(guān)節(jié)癥狀,可發(fā)展為不可逆轉(zhuǎn)的骨質(zhì)破壞,甚至出現(xiàn)關(guān)節(jié)強(qiáng)直及殘疾[8,9]。研究表明,若能在早期治療,將有效降低骨質(zhì)破壞的發(fā)生率,提升PsA患者生活質(zhì)量[10]。研究表明,PsA患者存在潛在的骨轉(zhuǎn)換失衡情況,而骨代謝標(biāo)記物中TRACP5b、CTX-I、BALP等已被證實與骨形成和骨吸收密切相關(guān)[11]。由此,推測骨代謝指標(biāo)水平與PsA骨質(zhì)破壞具有一定相關(guān)性。

本研究結(jié)果表明PsA骨質(zhì)破壞患者骨代謝標(biāo)記物會異常升高,存在炎性反應(yīng)及骨代謝紊亂。分析其原因,PsA骨質(zhì)破壞為一種炎性關(guān)節(jié)病,當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)炎癥時,會導(dǎo)致血漿球蛋白及纖維蛋白原發(fā)生改變,使得異常蛋白進(jìn)入血液,進(jìn)而導(dǎo)致ESR水平不斷升高[12]。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)炎癥或受到病原微生物入侵時,肝臟將合成大量CRP以調(diào)節(jié)吞噬細(xì)胞,清除損傷及壞死組織[13]。TRACP5b主要參與骨基質(zhì)中固體鈣磷礦化底物的降解過程,在一定程度上可反映骨吸收情況[14]。CTX-I為骨組織細(xì)胞外基質(zhì)的主要有機(jī)成分;在骨吸收時,CTX的一部分會釋放入血,且僅來源于成熟Ⅰ型膠原,無法在體內(nèi)降解和重新利用,可作為重要的骨轉(zhuǎn)移及骨吸收指標(biāo)[15]。BALP主要存在于成骨細(xì)胞膜,能夠水解多種磷酸酯及焦磷酸鹽,削弱其對骨礦化的抑制作用,其水平的升高在一定程度上表明骨形成出現(xiàn)障礙。

因此,PsA患者出現(xiàn)骨質(zhì)破壞后骨代謝標(biāo)記物ESR、CRP、TRACP5b、CTX-I、BALP水平將異常升高。

此外,經(jīng)點二列相關(guān)性分析顯示,ESR、CRP、TRACP5b、CTX-I、BALP水平與PsA患者骨質(zhì)破壞發(fā)生存在正相關(guān)性,表明PsA骨質(zhì)破壞患者將出現(xiàn)骨代謝失衡,且骨代謝相關(guān)指標(biāo)與骨質(zhì)破壞發(fā)生密切相關(guān)。可反映為骨吸收及骨重建的TRACP5b、CTX-I、BALP指標(biāo)活性不斷增強(qiáng),表達(dá)水平迅速升高,在血液中的含量也隨之增加[16]。同時,炎性反應(yīng)會隨骨質(zhì)破壞的發(fā)生而逐漸加劇,此刻機(jī)體內(nèi)反映炎癥情況的ESR、CRP指標(biāo)水平也將不斷升高。因此,PsA骨質(zhì)破壞與骨代謝標(biāo)記物的水平升高具有正相關(guān)性。

綜上所述,ESR、CRP、TRACP5b、CTX-I、BALP在PsA骨質(zhì)破壞中呈高表達(dá)水平,且其表達(dá)水平與骨質(zhì)破壞發(fā)生存在正相關(guān)性,臨床可通過檢測PsA患者骨代謝指標(biāo)水平,及時采取干預(yù)措施,控制患者病情。