25%抗倒酯微乳劑氣相色譜方法研究

李 婷，高婷婷，趙 霞，李 靖，許艷秋，高立明*

(1.四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳植物保護(hù)站，四川 成都 610045；2.成都市食品檢驗(yàn)研究院，四川 成都 611135)

1 前言

抗倒酯(Trinexapac-ethyl)，CAS登錄號(hào)為95266-40-3，分子式C13H16O5，分子量為252，化學(xué)名稱為4-環(huán)丙基(羥基)亞甲基-3，5-二酮環(huán)己烷羧酸乙酯?？沟辊槌嗝顾嵘锖铣梢种苿?，通過降低赤霉酸的含量控制植物旺長(zhǎng)，可被植物莖、葉迅速吸收，根部吸收很少，是一種可有效降低株高，防治倒伏的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑[1]。

2008年由瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司首次在我國(guó)取得抗倒酯的臨時(shí)登記，2010年取得正式登記。截止目前，在我國(guó)有27個(gè)取得農(nóng)藥登記證的抗倒酯產(chǎn)品，其中原藥11個(gè)，微乳劑9個(gè)，乳油5個(gè)，可溶液劑1個(gè)，可濕性粉劑1個(gè)，登記作物和對(duì)象為：小麥防止倒伏、高羊茅草坪調(diào)節(jié)生長(zhǎng)和玉米防止倒伏[2]。同時(shí)有研究表明，抗倒酯在水稻上使用時(shí)株高能得到有效控制，結(jié)實(shí)率高；可作為提高抗倒伏能力的植調(diào)劑應(yīng)用于優(yōu)質(zhì)稻生產(chǎn)中[3-4]。抗倒酯在多花黑麥草、遮陰下狗牙根、甘蔗上也有相應(yīng)研究表明其具有較好的抗倒伏作用[5-7]。

在檢測(cè)分析方面，國(guó)內(nèi)抗倒酯原藥和乳油的液相色譜分析方法已有相關(guān)報(bào)道[8-9]，使用氣相色譜檢測(cè)抗倒酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的方法未見報(bào)道，因此本文建立了抗倒酯微乳劑的程序升溫氣相色譜內(nèi)標(biāo)方法進(jìn)行定量分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該方法操作簡(jiǎn)便、快速，準(zhǔn)確度和精密度均能達(dá)到定量分析的要求，可為企業(yè)生產(chǎn)過程質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)檢測(cè)提供參考。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 試劑和溶液 抗倒酯標(biāo)準(zhǔn)品，≥98.0%；25%抗倒酯微乳劑；磷酸三苯酯(分析純)；丙酮(分析純)；內(nèi)標(biāo)溶液配置：稱取磷酸三苯酯0.64 g 于100 mL 容量瓶中，加入丙酮溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

2.2 儀器和色譜操作條件 Agilent 7890A氣相色譜儀(帶FID檢測(cè)器和工作站)；色譜柱：Agilent HP-1 毛細(xì)管柱(0.32 mm×0.25 μm×30 m)。

柱溫(程序升溫)：120 ℃保持2 min，以10 ℃/min 升至280 ℃，保持5 min；氣化室溫度：280 ℃；檢測(cè)室溫度：280 ℃；載氣(N2)：1.0 mL/min；氫氣(H2)：40 mL/min；空氣：400 mL/min；分流比：40∶1；進(jìn)樣體積：1.0 μL；保留時(shí)間：抗倒酯約為12.3 min；磷酸三苯酯約16.3 min。典型的色譜圖(圖1、2)。

1-抗倒酯(12.246 min)2-磷酸三苯酯(16.263 min)圖1 抗倒酯+磷酸三苯酯氣相色譜圖

1-抗倒酯(12.246 min) 2-磷酸三苯酯(16.264 min)圖2 25%抗倒酯微乳劑+磷酸三苯酯氣相色譜圖

2.3 測(cè)定步驟

2.3.1 標(biāo)樣溶液的配制 準(zhǔn)確稱取抗倒酯標(biāo)準(zhǔn)品0.05 g(精確至0.000 2 g)，置于25 mL容量瓶中，用移液管準(zhǔn)確添加5 mL內(nèi)標(biāo)溶液，用丙酮溶解并定容至刻度，搖勻，備用。

2.3.2 試樣溶液的配制 準(zhǔn)確稱取25%抗倒酯微乳劑樣品0.2 g(精確至0.000 2 g)，置于25 mL容量瓶中，用移液管準(zhǔn)確添加5 mL內(nèi)標(biāo)溶液，用丙酮稀釋至刻度，搖勻，備用。

2.3.3 測(cè)定 在上述色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，當(dāng)相鄰2針抗倒酯和磷酸三苯酯的峰面積比值的相對(duì)變化<1.5%時(shí)，按照標(biāo)準(zhǔn)溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序進(jìn)樣進(jìn)行分析測(cè)定。

2.3.4 計(jì)算 將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針抗倒酯標(biāo)樣峰面積和內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值分別進(jìn)行平均，試樣中抗倒酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω(%)，按式(1)計(jì)算：

(1)

式中：A1——標(biāo)樣溶液中抗倒酯峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值的平均值；

A2——試樣溶液中抗倒酯峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值的平均值；

m1—抗倒酯標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2—試樣的質(zhì)量，g；

ωs—標(biāo)樣中抗倒酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

根據(jù)化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制要求[10]，精密度試驗(yàn)中的變異系數(shù)不能超過Horwitz方程計(jì)算結(jié)果，精確性結(jié)果才是可接受的，Horwitz方程按(2)計(jì)算：

Horwitz方程：CV=2(1-0.5lgω)

(2)

式中：Horwitz方程計(jì)算值(%)；

ω——測(cè)定質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)。

3 結(jié)果與討論

3.1 內(nèi)標(biāo)溶液的選擇 選擇合適的內(nèi)標(biāo)物才能準(zhǔn)確測(cè)定抗倒酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，本文使用癸二酸二丁酯、磷酸三苯酯、鄰苯二甲酸二丁酯等多種常用的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)，樣品在2～5 min有雜質(zhì)干擾。其中癸二酸二丁酯、鄰苯二甲酸二丁酯與待測(cè)樣品中的雜質(zhì)出峰位置相近，干擾其含量的測(cè)定，磷酸三苯酯的保留時(shí)間為16.3 min，在待測(cè)物質(zhì)后面，與樣品中的有效成分分離良好，且沒有雜質(zhì)干擾，樣品各組分雜質(zhì)能達(dá)到較好的分離，峰形對(duì)稱。通過對(duì)相同條件下的出峰情況的比較，確定磷酸三苯酯為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)。

3.2 分析方法的線性相關(guān)性 分別稱取98%抗倒酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)0.031 7、0.042 7、0.052 1、0.067 6、0.080 8 g于25 mL 容量瓶中，準(zhǔn)確添加內(nèi)標(biāo)溶液5 mL，用丙酮溶解并稀釋定容，配制5個(gè)不同質(zhì)量比的抗倒酯標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按標(biāo)準(zhǔn)操作條件分別測(cè)定，以質(zhì)量比為橫坐標(biāo)，以峰面積之比為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。抗倒酯線性關(guān)系數(shù)據(jù)(表1)，線性關(guān)系圖(圖3)。線性方程為y=0.684x+0.010 5，線性相關(guān)系數(shù)R2=1。

表1 抗倒酯分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn)結(jié)果

圖3 抗倒酯分析方法的線性關(guān)系圖

3.3 方法準(zhǔn)確度 準(zhǔn)確稱取98%的抗倒酯標(biāo)樣0.223 1 g (準(zhǔn)確至0.000 2 g)于100 mL容量瓶中，用丙酮溶解稀釋至刻度，得2.186 mg/mL的抗倒酯標(biāo)準(zhǔn)溶液。稱取已測(cè)定質(zhì)量分?jǐn)?shù)的不同質(zhì)量的樣品(準(zhǔn)確至0.000 2 g)，準(zhǔn)確加入10 mL已知質(zhì)量抗倒酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(2.186 mg/mL)，分別測(cè)定抗倒酯的回收率，其結(jié)果如(表2)?？沟辊サ奶砑踊厥章试?9.28%～100.43%之間，平均添加回收率在99.86%，滿足定量分析對(duì)回收率的要求。

表2 抗倒酯添加回收試驗(yàn)結(jié)果

3.4 方法精密度 取同一抗倒酯微乳劑樣品，按照上述分析條件6次平行測(cè)定，測(cè)得試樣中抗倒酯的平均含量為25.26%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.068 1，變異系數(shù)為0.27%(表3)，經(jīng)由Horwitz公式檢驗(yàn)，本分析方法的變異系數(shù)

表3 分析方法精密度試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

本文通過對(duì)氣相色譜分析條件的選擇與優(yōu)化，建立了抗倒酯微乳劑的程序升溫氣相色譜內(nèi)標(biāo)分析方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本方法對(duì)測(cè)定25%抗倒酯微乳劑的有效成分含量具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)，線性關(guān)系良好，準(zhǔn)確度和精密度高，可用于抗倒酯有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的質(zhì)量控制和檢測(cè)。