神經誘導損傷蛋白1聯合CK-MB檢測在急性心肌梗死中的診斷價值*

張林敏,張凱楠,伏建峰

1.石河子大學醫學院,新疆石河子 832000;2.新疆軍區總醫院全軍臨床檢驗診斷中心,新疆烏魯木齊 830000;3.新疆醫科大學研究生院,新疆烏魯木齊 830017

急性心肌梗死(AMI)是因突發心肌缺血缺氧導致的嚴重心血管疾病,發病率呈逐年上升趨勢[1]。臨床檢驗診斷學相關生物標志物檢測是AMI實驗室診斷的常規模式,其中以心肌損傷標志物,如肌鈣蛋白,以及心肌酶學指標,如肌酸激酶同工酶(CK-MB)檢測的應用最為廣泛。相關資料顯示,傳統心肌損傷標志物在AMI的診斷方面存在一定的局限性,如CK-MB,其活性通常在AMI患者出現胸痛癥狀6～8 h后才升高[2-3],影響和制約AMI的早診斷、早治療。因此,新型AMI診斷生物標志物的探尋成為本學科關注的焦點和熱點。神經誘導損傷蛋白1(Ninj1)是由152個氨基酸組成的進化保守表面蛋白,其相對分子質量約為16.3×103,基因定位于人類染色體9q22,包括4個外顯子和3個內含子,具有2個跨膜區域,在細胞質外部具有N和C末端。其中Pro26和Asn37之間的12個殘基區域為Ninj1的同源黏附結構域,參與了細胞與細胞間、細胞與組織間的嗜同性黏附[4]。有研究表明,Ninj1水平升高與患者左心房容積呈正相關,與左室射血分數呈負相關,有可能成為具有評估心功能標志物的潛力[5]。有研究報道顯示,高水平Ninj1與冠狀動脈粥樣硬化患者冠狀動脈狹窄程度呈正相關,并且對病情嚴重程度有提示意義[6]。本研究擬觀察AMI患者血清Ninj1的表達水平,分析Ninj1與AMI病情的相關性,并評估其在AMI中的臨床診斷效能,以期獲得可用于AMI診斷的新型生物標志物,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2022年7月至2023年3月新疆軍區總醫院心內科收治的以胸痛為首發癥狀、在胸痛24 h內入院的確診為AMI的29例患者作為AMI組,其中入院時胸痛時間6 h內共13例;根據冠狀動脈造影結果將AMI組患者按照Gensini評分中位數(45分)分為輕度狹窄組(≤45分,n=15)和中重度狹窄組(>45分,n=14)。另選取29例非AMI患者作為對照組,為同期住院行冠狀動脈造影術確認為冠狀動脈正常的患者。納入標準:(1)年齡≥18歲;(2)符合美國心臟病學會聯合委員會發布的AMI診斷標準[7];(3)臨床資料完整。排除標準:(1)合并惡性腫瘤、精神分裂癥和心理疾病;(2)各種原因導致的心肌病、急慢性心內膜炎及心肌炎;(3)肺源性心臟病、先天性心臟病、急慢性感染、血液病、自身免疫系統紊亂性疾病;(4)無法配合本研究的患者。所有研究對象均知情同意并簽署知情同意書。本研究經新疆軍區總醫院倫理委員會審核批準(倫理審批號:2023RR0602)。

1.2儀器與試劑 ADVIA Centaur XP全自動化學發光免疫分析儀(德國西門子股份公司)及配套CK-MB試劑(批號:69403201);ELX800酶標儀(美國BioTek儀器有限公司);Ninj1檢測試劑盒(批號:CSB-EL015808HU,武漢華美生物工程有限公司)。

1.3方法

1.3.1臨床基礎信息資料 收集所有研究對象性別、年齡、吸煙史、飲酒史、既往病史、收縮壓、舒張壓等臨床基礎信息資料。

1.3.2血液標本采集及前處理 采集所有研究對象靜脈血4 mL,在室溫下放置30 min,然后以3 000 r/min的速度離心10 min,分離血清,置于-80 ℃冰箱保存待測。

1.3.3血清Ninj1、CK-MB水平檢測 采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清Ninj1水平,采用全自動化學發光免疫分析儀及配套試劑檢測血清CK-MB水平,檢測步驟嚴格按照Ninj1及CK-MB配套試劑盒說明書進行。

2 結 果

2.1AMI組和對照組臨床基礎信息資料比較 兩組性別、年齡、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、收縮壓、舒張壓比較,差異均無統計學意義(P>0.05);兩組高脂血癥比較,差異有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 AMI組和對照組臨床基礎信息資料比較或n/n或M(P25,P75)]

2.2AMI組和對照組血清CK-MB、Ninj1水平比較 AMI組血清CK-MB、Ninj1水平均明顯高于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05),見表2。AMI組6 h內胸痛的13例患者CK-MB水平為[20.46(5.27,29.50)]ng/mL,Ninj1水平為[179.14(88.69,302.78)]pg/mL。

表2 AMI組和對照組血清CK-MB、Ninj1水平比較[M(P25,P75)]

2.3Ninj1水平與Gensini評分的相關性 中重度狹窄組Ninj1水平明顯高于輕度狹窄組,差異有統計學意義(P<0.05);中重度狹窄組和輕度狹窄組CK-MB水平比較,差異無統計學意義(P<0.05),見表3。Spearman相關分析結果顯示,血清Ninj1水平與Gensini評分呈正相關(r=0.587,P=0.001),CK-MB水平與Gensini評分無相關性(r=0.128,P=0.525)。

表3 輕度狹窄組和中重度狹窄組血清Ninj1與CK-MB水平比較[M(P25,P75)]

2.4Ninj1、CK-MB對AMI的診斷效能 ROC曲線分析結果顯示,Ninj1最佳截斷值為73.82 pg/mL時,診斷AMI的曲線下面積(AUC)為0.657,低于CK-MB診斷AMI的AUC(0.946);Ninj1診斷AMI的靈敏度為62.10%,特異度為72.40%,也低于CK-MB(86.20%、93.10%);Ninj1與CK-MB聯合檢測診斷AMI的AUC為0.989,靈敏度為93.10%,特異度為96.60%。見表4。29例AMI患者中有13例入院胸痛時間在6 h內,基于AMI早診斷、早治療利于患者康復的共識,進一步對Ninj1及早(6 h內)診斷AMI的效能進行評估,結果顯示,當胸痛時間在6 h內,Ninj1最佳截斷值為84.45 pg/mL時,診斷AMI的AUC為0.812,靈敏度為84.60%,特異度為75.90%,診斷效能明顯提升,尤其是靈敏度趨近于同時段CK-MB的靈敏度(86.60%);此時段Ninj1與CK-MB聯合檢測診斷AMI的AUC為0.989,靈敏度為92.30%,特異度為96.60%。見表5。

表4 血清Ninj1、CK-MB對AMI的診斷效能評估

表5 血清Ninj1、CK-MB對AMI發病6 h內的診斷效能

3 討 論

有研究表明,AMI發生的主要機制與不穩定的冠狀動脈粥樣硬化斑塊破裂有關,從而促進大量血小板聚集及血栓形成[8]。在AMI的發展進程中,梗死區域持續擴張可導致冠狀動脈閉塞和血流減慢,引發全身微循環紊亂,以及左心室進行性擴張和心臟功能減退[9]。盡管目前藥物治療和介入治療已取得明顯進展,但每年因AMI死亡的患者仍居高不下,嚴重威脅人們的生命健康。因此,對AMI的早診斷、早治療至關重要。

目前,AMI的診斷指標主要是心肌肌鈣蛋白和CK-MB,但其具有一定的局限性[10],難以滿足臨床早診斷、早治療所需。因此,探尋新型AMI診斷生物標志物,為臨床早診斷AMI提供可靠的實驗室參考依據,具有重要的科學價值和應用前景。

Ninj1是近年來發現的一種新型炎癥調控標志物,在缺氧和高糖條件下,其水平升高,參與調控細胞趨化、遷移、黏附等多種生理病理過程[11-13]。有研究表明,Ninj1與心血管疾病密切相關,大量Ninj1分泌不僅可促進炎癥細胞間的黏附,還可促進細胞活性氧簇的產生及機體炎癥介質產生、活化,此外,炎癥介質也可直接刺激Ninj1水平升高,并加速巨噬細胞聚集[14]。聚集的巨噬細胞可吞噬氧化型低密度脂蛋白形成脂質泡沫細胞,而脂質泡沫細胞增加反過來可進一步加重炎癥反應,兩種效應疊加造成內皮細胞嚴重損傷并促進斑塊形成,進而引發心血管疾病[15]?；贜inj1在心血管疾病發生和發展進程中的生物學效應特點和臨床急需AMI早篩查、早診斷生物標志物的迫切性,本課題組認為Ninj1值得進一步研究。

本研究結果顯示,AMI組血清 Ninj1水平明顯高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05)。CK-MB是目前臨床推薦AMI早篩查、早診斷的酶學指標,如前所述,CK-MB活性通常在AMI患者胸痛發作6～8 h后才升高。因此,在反映AMI發展進程方面,Ninj1可能比CK-MB更具有早篩查、早診斷的優勢,當然這需要更深層次的研究進一步證實。Gensini評分可反映AMI患者冠狀動脈的病變程度,Spearman相關分析結果顯示,血清Ninj1水平與Gensini評分呈正相關(P<0.05),而CK-MB水平與Gensini評分無相關性(P>0.05),提示在反映AMI預后方面,Ninj1也較CK-MB更具優勢。ROC曲線分析結果顯示,血清Ninj1診斷AMI的AUC為0.657,低于CK-MB。進一步分析顯示,Ninj1診斷AMI的靈敏度為62.10%,特異度為72.40%,也均低于CK-MB。究其原因可能是受限于方法學:Ninj1檢測方法為酶聯免疫吸附試驗,CK-MB檢測方法為全自動化學發光免疫分析法,一般而言酶聯免疫吸附試驗的檢測最低限和精密度均不及自動化分析。隨著日后Ninj1檢測方法學的逐漸完善,Ninj1作為新型生物標志物診斷AMI的潛力和前景可期。

近幾年來,新的臨床檢測指標不斷出現,相關檢測項目組合或聯合檢測取代過去單一指標檢測應用于臨床診療成為一種常規模式。為此,作者評估了Ninj1和CK-MB聯合檢測的臨床診斷效能,結果顯示,與各項指標單獨檢測比較,2項指標聯合檢測診斷AMI的AUC為0.989,靈敏度為93.10%,特異度為96.60%。提示Ninj1有可能采用與CK-MB聯合檢測的模式,作為新型AMI診斷生物標志物應用于臨床。如前所述,受限于方法學,單獨Ninj1檢測的診斷效能不及CK-MB。但當胸痛時間在6 h內,Ninj1的診斷效能明顯提升。從臨床診斷效能角度映證了Ninj1作為新型AMI生物標志物具有早篩查的優勢。

綜上所述,Ninj1對AMI的臨床診斷,尤其是早期篩查及早期診斷具有一定價值,Ninj1與CK-MB聯合檢測可提高其臨床診斷效能,Ninj1有可能成為新型AMI診斷生物標志物。