反芻動物溶血性曼氏桿菌病的診斷與防控

貢嘎次仁，格桑卓嘎，鄭林香，張煥容

（1.西藏自治區康馬縣農牧綜合服務中心，西藏 康馬 857500；2.西藏自治區日喀則市動物疫病預防控制中心，西藏 日喀則 857000；3.西南民族大學動物醫學四川省高等學校重點實驗室，四川 成都 610041）

溶血性曼氏桿菌常存在于牛、羊等反芻動物的上呼吸道中，正常情況下不易導致動物發病，為條件性致病菌，但在應激因素影響下，如氣候變化、長途運輸或者存在病毒、支原體、多殺性巴氏桿菌混合感染導致免疫力降低時，可引起牛地方流行性肺炎、奶牛急性胸膜肺炎、犢牛多發性血管炎、山羊肺炎、綿羊乳房炎和羔羊急性敗血癥等多種疾病，且其引發乳房炎的能力可能強于金黃色葡萄球菌。

1 病原

溶血性曼氏桿菌（Mh）原被劃為巴氏桿菌屬，后根據DNA雜交及16S rRNA序列的結果建立新屬，為曼氏桿菌屬。曼氏桿菌屬包含至少7個種，其中5個種已命名，包括肉芽腫曼氏桿菌、溶血性曼氏桿菌、葡萄糖苷酶曼氏桿菌、反芻獸曼氏桿菌和多源曼氏桿菌，溶血性曼氏桿菌是唯一發酵L-阿拉伯糖的革蘭陰性菌，致病性強。

溶血性曼氏桿菌菌體大小為（0.4～0.6）μm×（2～2.5）μm，兩端鈍圓，單獨、成對或短鏈狀排列，無鞭毛，不運動，具有莢膜，瑞氏染色呈兩極濃染。其對營養需求不高，可在普通營養瓊脂平板上培養，生成圓形、光滑、濕潤、半透明的菌落。在血液瓊脂上培養，新分離的菌落呈微弱的β溶血，但幾代連續培養之后，溶血能力逐漸減弱。該菌在麥康凱瓊脂上生長緩慢且單個菌落呈紅色。

2 臨床癥狀及病理變化

感染畜以出現咳嗽、呼吸急促、流鼻涕等呼吸道癥狀為特征，同時出現體溫升高、精神萎靡等癥狀，病死亡率高。研究發現除典型的呼吸道癥狀外，溶血性曼氏桿菌還可危害病畜生殖系統，如感染雄性動物生殖器官（附睪、輸精管、前列腺），以及使雌性動物黃體酮和雌激素濃度降低，干擾受精，造成雌性動物生殖力暫時喪失。

病畜主要病理變化為出現纖維素性滲出性肺炎、大葉性肺炎和胸膜肺炎。

3 診斷

溶血性曼氏桿菌檢測方法主要有細菌分離，進一步可通過分子檢測方法，如PCR、熒光定量PCR、iiPCR等分子生物學方法進行快速的分子鑒定或分子分型。環介導等溫擴增（LAMP）是一種新穎的核酸擴增技術，其靈敏度高、特異性強，可通過比色、目視比濁法直接觀察擴增結果，可將這種方法擴展到基層和流行病學調查領域，用于病原的快速檢測。

4 防控

4.1 免疫接種 接種疫苗仍是現階段預防該病的重要措施。國外已研制出針對牛Mh 的疫苗，主要有弱毒菌苗、類毒素疫苗和菌體-類毒素疫苗。該菌主要與多殺性巴氏桿菌、牛病毒性腹瀉病毒、牛傳染性鼻氣管炎病毒、牛呼吸道合胞體病毒等組成聯苗，用來預防牛呼吸道疾病。

4.2 抗生素治療 應用抗生素是治療該病的手段，但是效果欠佳，且大量研究表明該菌已對氨基糖苷類、四環素類、磺胺類、大環內酯類等藥物有一定程度的耐藥性。

4.3 應用生物制劑 在溶血性曼氏桿菌治療方面，抗菌肽和益生菌的研究越來越多。對抗菌肽研究發現，存在于哺乳動物外分泌物和中性粒細胞次級顆粒中的乳鐵蛋白（Lf）是一種多功能蛋白，具有抑制及殺滅微生物、抗病毒、免疫調節作用和抗癌活性。呼吸道益生菌也是研究熱點，牛鼻咽乳酸桿菌屬發展而來的鼻內細菌療法（BTs）可有效減少奶牛犢溶血性曼氏桿菌的鼻腔定植，且有證據表明牛鼻咽中的共生細菌可以通過多種機制阻止病原體的定植和增殖，包括直接拮抗作用（即抗菌特性）、對營養物質和粘附位點的競爭以及宿主免疫調節作用。