基于痰瘀生風理論探討動脈粥樣硬化與線粒體自噬的相關性*

肖福龍，宮麗鴻，趙 帥

（1．遼寧中醫藥大學附屬醫院，遼寧 沈陽 110032；2．遼寧中醫藥大學，遼寧 沈陽 110847）

動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病、腦卒中等血管疾病的主要致病因素，在此基礎上形成的血栓是人類死亡的主要原因，其患病率在我國逐年升高。關于AS的發病機制尚未研究清楚。近年來研究表明細胞線粒體自噬可抑制AS斑塊形成，穩定斑塊。其可通過緩解血管內皮細胞損傷、抑制巨噬細胞凋亡和核苷酸寡聚化結構域（NOD）樣受體熱蛋白結構域相關蛋白3（NLRP3）炎癥小體活化等發揮重要作用。線粒體自噬是一種選擇性清除多余或受損線粒體的自噬過程，在調節細胞內線粒體數量和維持線粒體正常功能等方面發揮重要作用。線粒體自噬的作用與中醫搜風祛痰的治法相符。筆者認為若脾失健運，產生痰濁沉積于脈道，瘀血阻滯，痰瘀互結，日久成風，最終導致AS。線粒體自噬參與的抗AS進程可能與中醫的痰瘀生風理論密切相關。本文將著眼于從痰瘀生風探討線粒體自噬在AS中的作用，以助開拓中西醫結合防治AS的新思路。

1 痰瘀生風理論與AS

AS是主要危害人類健康的常見病之一。中醫有關AS論述首見于《金匱要略》，主流學者認為AS病因病機多為“陽微陰弦”“脾腎不足”等，治法上以溫陽散寒、補益脾腎為主，但療效欠佳[1]。因此，進一步研究探討AS的病因病機及療效具有重要意義。現代人運動量減少，飲食多膏粱厚味致使脾虛生痰。百病皆由痰作祟，痰濁內生，阻塞血脈，停滯為瘀。痰瘀蘊結不解而生內癰毒熱，熱極生內風，風性善行而數變，可挾痰入絡。痰風內動，筋脈失養，攣急剛勁，痹阻心脈。《素問·陰陽應象大論篇》云：“風勝則動。”[2]即風邪太過，則會發生痙攣動搖。運用取類比象法，類似于AS不穩定斑塊的多樣臨床表現。故AS具有本虛標實特點，“虛”為發病基礎，“痰瘀”為致病條件，形成“風”似AS斑塊的“不穩定性”。可見，AS的病因病機不局限于陽虛寒凝、脾腎不足，還應包括痰瘀生風[3]。《素問·陰陽應象大論篇》論述：“血實宜決之，氣虛宜掣引之。”[4]故治療AS時應使用祛風藥物，予以搜風祛痰，祛瘀通絡治法，自擬搜風祛痰中藥復方。方中全蝎、蜈蚣息風止痙，攻毒散結，通絡止痛；地龍清熱息風，通絡，利尿，共為君藥。陳皮、半夏、白術合用，既能燥濕健脾，又能化痰散結，為臣藥。水蛭具有破血逐瘀而不傷新血特點，為佐藥。AS的痰瘀生風理論豐富了中醫理論基礎。臨床研究表明搜風祛痰中藥復方能顯著降低急性冠脈綜合征（ACS）患者的雌激素受體基因的甲基化率，并能升高基質金屬蛋白酶-9基因的甲基化率，提示搜風祛痰中藥復方可用于治療ACS患者[5]。實驗研究[6-13]表明搜風祛痰中藥復方可下調巨噬細胞源性泡沫細胞及ApoE基因敲除小鼠不穩定斑塊中B細胞淋巴瘤/白血病2關聯X（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）蛋白表達，上調B細胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）蛋白表達，抑制細胞凋亡；升高自噬體數量，上調自噬效應蛋白1（Beclin1）、微管相關蛋白1輕鏈3（LC3）蛋白表達，下調哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）蛋白表達，增強細胞自噬；減少誘導型一氧化氮合酶（iNOS）、內皮素-1（ET-1）、氧化低密度脂蛋白的內皮受體（LOX-1）mRNA表達，抑制血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）導致的人臍靜脈血管內皮損傷，改善血管內皮功能；還可抑制ApoE基因敲除小鼠NLRP3炎癥小體活化，穩定AS斑塊，抑制AS進展。

2 痰瘀生風理論與線粒體自噬的關系

在活性氧（ROS）的作用下，線粒體自噬以細胞內線粒體功能障礙和去極化損傷為特征，進一步被特異性包裹于自噬小體中，與溶酶體融合降解，從而維持細胞內穩態[14-16]。線粒體自噬在AS的治療中起著重要作用，線粒體自噬可通過清除受損的線粒體、促進線粒體更新及限制ROS大量堆積而發揮抗AS作用。線粒體功能障礙，其產生的有害物質屬于中醫“痰瘀生風”理論范疇，而負責清除損傷線粒體及受損的細胞器的線粒體自噬類似中醫方面搜風祛痰治法[17]。嗜食肥甘厚味等導致脾失健運，水濕津液停滯則生痰濁。氣血運行不暢，瘀血內生，進而生內癰毒熱，日久生風。風性善行數變，風性主動，風為百病之長，與心腦血管疾病之間的關系最為密切，是心腦血管疾病發病的重要因素，與線粒體自噬過程不謀而合[18-20]。這種內生的風痰之邪可通過線粒體自噬方式及時清除，維持細胞內的穩態，使陰陽處于一個平衡狀態中[21]。

3 線粒體自噬與AS的關系

線粒體自噬參與到包括心血管疾病的許多疾病的發病機制當中[22-23]。多種因素損害線粒體，ROS含量大幅升高，進一步加重線粒體結構紊亂和功能障礙，引起氧化應激損傷，導致內皮細胞功能發生障礙。研究[24-25]表明，在人和小鼠的動脈粥樣硬化模型中p62與LC3-Ⅱ水平降低，與穩定斑塊相比，不穩定斑塊中p62與LC3-Ⅱ的表達顯著降低。在以血管平滑肌細胞為研究對象的動脈粥樣硬化模型中線粒體自噬水平降低，對功能障礙的線粒體清除減少，造成細胞供能減少，細胞凋亡增加，提示可以通過抑制PTEN-PINK1/Parkin介導的線粒體自噬促進細胞凋亡[25-26]。研究發現通過抑制NIX介導的線粒體自噬加速巨噬細胞的凋亡，會增強巨噬細胞線粒體自噬[25]；真核起始因子2α通過抑制Parkin誘導的線粒體自噬途徑加重了高脂血癥引起的AS炎癥[25，27]；在主動脈內皮細胞中，ox-LDL可以導致核受體NR4A1過表達，引起Parkin介導的線粒體自噬過度激活，導致內皮細胞因線粒體數量過度減少、細胞能量供給不足而凋亡，從而加重AS[28]。MA S等[29]在實驗中發現褪黑素誘導Sirt3/FOXO3/parkin介導的線粒體自噬，減緩線粒體ROS的產生，從而減少巨噬細胞NLRP3炎性小體的激活去抑制動脈粥樣硬化的發展。HE L等[26]實驗表明AMPK增強APJ內源性配體誘導的PINK1/Parkin途徑的線粒體自噬，導致人主動脈血管平滑肌細胞增殖及ApoE基因敲除小鼠動脈粥樣硬化病變。還有研究[30]發現，由NIX介導的線粒體自噬可抑制ox-LDL誘導的AS巨噬細胞焦亡。綜上，在AS的發病進程中，線粒體自噬居于重要地位，可通過調節線粒體自噬來延緩及逆轉AS的發病進展。

4 中醫藥對線粒體自噬的干預與AS的防治

中醫學具有整體觀念、辨證論治的特點，近年來中醫學在AS防治方面的研究越來越受到關注。根據AS病理生理與中醫病因病機相結合，學者認為AS的治療主要采用活血法、補氣活血法、益氣養陰法、祛痰化瘀法、清熱解毒法、解毒活血法、搜風通絡法等。關于線粒體自噬的調控機制是錯綜復雜的，現明確的信號調控通路主要包含Pink1/Parkin、AMPK介導自噬、FUNDC1介導自噬等[30]，中醫藥可通過調控上述通路干預AS過程。化瘀祛痰方[31]主要由黨參、黃芪、絞股藍、丹參、茯苓、半夏、石菖蒲等組成，具有補氣健脾、化痰祛瘀功效。陳絲等[32]研究發現此方治療AS家兔可下調血清TC、TG、LDL-C含量，上調HDL-C含量，下調肝組織中線粒體自噬相關蛋白LC3、FUNDC1表達水平，上調P62表達水平。結果提示化瘀祛痰方可調控線粒體自噬相關蛋白，減輕AS家兔肝組織脂質沉積，延緩動脈粥樣硬化的發生與發展。王梓良[33]研究發現芹黃素可通過抑制TGF-β/SMAD信號通路，有效抑制心肌細胞缺氧復氧導致的心肌細胞凋亡，緩解心肌細胞的損傷，并可通過抑制miR-103水平上調，提升Parkin表達來誘導線粒體自噬，降低細胞凋亡，降低小鼠心肌梗死面積。黃芪甲苷Ⅳ可降低ApoE基因敲除小鼠血管內皮細胞中的自噬水平，并抑制DUSP5的表達，減輕心肌細胞損傷[34]。紅景天注射液可通過調節AKT/Beclin-1介導的線粒體自噬，激活AKT和ERK/mTOR通路，有效減少心肌梗死動物模型中心肌梗死面積[35]。楊紅星[36]亦發現通心絡可改善心肌缺血再灌注損傷，其機制可能與調控Pink1/Parkin通路介導的線粒體自噬密切相關。

5 結 語

線粒體自噬可清掃體內廢物，保持體內環境穩定。這與中醫搜風祛痰的治法相符。嗜食肥甘厚味等影響脾胃運化，脾失健運，水濕津液停滯則會聚生痰濁，進一步引發氣血運行不暢，瘀血內生，阻滯心脈，痰瘀蘊結生內癰毒熱，日久生風。從痰瘀生風理論論治可祛除體內的風痰之邪，減慢AS發展過程，其機制也許與線粒體自噬有關系。脾失健運，線粒體自噬乏力，炎癥反應增加，細胞凋亡，從而影響血管內皮的功能，導致AS相關疾病的出現。中醫藥對AS相關細胞的線粒體自噬有較好的調控作用，但基于痰瘀生風理論的搜風祛痰法在AS中的作用與其調控相關細胞的線粒體自噬是否有關，還未得到證實。深入探究線粒體自噬的有關機制，有望在今后研究中揭示基于痰瘀生風論治AS相關疾病的本象。