補(bǔ)腎化瘀方治療宮腔粘連的潛在靶點(diǎn)及機(jī)制研究

沈依瑤，王莉，孔德松，張曉甦

補(bǔ)腎化瘀方治療宮腔粘連的潛在靶點(diǎn)及機(jī)制研究

沈依瑤1，王莉2，孔德松3，張曉甦3

1.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇南京 210029；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京中醫(yī)院婦科，江蘇南京 210022；3.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京中醫(yī)院科研部，江蘇南京 210022

以網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)為主要研究思路，探討補(bǔ)腎化瘀方治療宮腔粘連的潛在靶點(diǎn)與可能機(jī)制，以期為后續(xù)進(jìn)一步臨床及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證提供可靠的理論依據(jù)。借助TCMSP、TCMID、PubChem、TCMSP、Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫對補(bǔ)腎化瘀方的活性成分、作用靶點(diǎn)進(jìn)行篩選，借助Disgenet、Genecards、OMIM數(shù)據(jù)庫獲得宮腔粘連疾病靶點(diǎn)，將兩者導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件篩選交集靶點(diǎn)并構(gòu)建“藥物–成分–靶點(diǎn)–疾病”網(wǎng)絡(luò)圖，獲得補(bǔ)腎化瘀方治療宮腔粘連的核心成分，并通過STRING數(shù)據(jù)庫構(gòu)建的蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)圖推測核心基因。最后通過R語言對交集靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體論（gene ontology，GO）與京都基因與基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）富集分析，推測可能作用機(jī)制。共獲得補(bǔ)腎化瘀方治療宮腔粘連的活性成分116個，起治療作用的核心基因可能為CXCL8、KDR、LCK、ITGAL。GO富集至上皮細(xì)胞增殖、修復(fù)等生物學(xué)過程。KEGG富集分析共涉及169條信號通路，以涉及炎癥、免疫激活的相關(guān)通路為主。補(bǔ)腎化瘀方治療宮腔粘連具有多靶點(diǎn)和多通路的復(fù)雜過程，基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)推測補(bǔ)腎化瘀方主要通過調(diào)控免疫–炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)化等途徑治療宮腔粘連。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；宮腔粘連；補(bǔ)腎化瘀；機(jī)制

宮腔粘連（intrauterine adhesion，IUA）是指子宮內(nèi)膜基底層由于宮腔操作、放化療、感染等因素造成損傷，功能層部分或全部缺失，導(dǎo)致子宮腔部分或完全閉塞的病理狀態(tài)。其以月經(jīng)量少、閉經(jīng)、周期性腹痛等為臨床表現(xiàn)。

補(bǔ)腎化瘀方由制鱉甲（先煎）10g、赤芍15g、川牛膝10g、莪術(shù)10g、紅花6g、牡丹皮10g、地龍10g、桃仁（搗碎）9g、菟絲子10g、香附10g、薏苡仁10g、紫河車10g組成，為南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京中醫(yī)院婦科王莉主任經(jīng)驗(yàn)方，在臨床上確有優(yōu)效[1]。本課題組既往研究亦表明，補(bǔ)腎化瘀方可降低IUA患者體內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）和結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）的表達(dá)，減少纖維化組織形成，從而達(dá)到治療及預(yù)防IUA的作用，但其完整機(jī)制有待于進(jìn)一步探討[2]。因此，本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)，利用多數(shù)據(jù)庫分析補(bǔ)腎化瘀方治療IUA的主要靶點(diǎn)，初步探討該方的作用機(jī)制，以期為后續(xù)臨床及實(shí)驗(yàn)室研究提供更多的科學(xué)支持。

1 資料與方法

1.1 補(bǔ)腎化瘀方藥物活性成分及作用靶點(diǎn)篩選

以口服生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30%、類藥性（drug-likeness，DL）≥0.18為篩選條件在TCMSP數(shù)據(jù)庫中檢索補(bǔ)腎化瘀方中藥物的成分。TCMSP數(shù)據(jù)庫未收錄的藥物使用TCMID數(shù)據(jù)庫進(jìn)行成分檢索，綜合兩者結(jié)果推測潛在活性成分。使用PubChem數(shù)據(jù)庫和TCMSP數(shù)據(jù)庫獲取潛在活性成分的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)入Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫，以預(yù)測得分>0分的靶點(diǎn)作為藥物靶點(diǎn)。

1.2 補(bǔ)腎化瘀方治療IUA相關(guān)靶點(diǎn)

以“intrauterine adhesion”為關(guān)鍵詞分別在Disgenet、Genecards、OMIM數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，獲得疾病治療過程中的關(guān)鍵靶點(diǎn)。在Venny 2.1在線作圖軟件工具平臺上輸入復(fù)方作用靶點(diǎn)與IUA治療靶點(diǎn)，繪制Venny圖，獲得藥物–疾病共同靶點(diǎn)。

1.3 中藥-成分-疾病靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析

將補(bǔ)腎化瘀方中潛在活性成分與藥物–疾病共同靶點(diǎn)輸入Cytoscape 3.8.2軟件中，繪制“藥物–成分–疾病靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖。運(yùn)用Network Analyzer功能拓?fù)浠治鏊镁W(wǎng)絡(luò)圖，得出補(bǔ)腎化瘀方中的核心成分。

1.4 補(bǔ)腎化瘀方治療IUA的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及核心基因篩選

將共同靶點(diǎn)輸入至STRING數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行檢索，設(shè)置蛋白種類為“Homo sapiens”，并以0.9為最低互作閾值，將靶點(diǎn)互作網(wǎng)絡(luò)關(guān)系數(shù)據(jù)化。將所得結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape軟件，繪制蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)圖。利用Network Analyzer工具將PPI網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行進(jìn)一步拓?fù)浞治觯⒂肕CODE模塊聚類分析，取兩者交集得出補(bǔ)腎化瘀方治療的核心基因。

1.5 GO、KEGG通路富集分析

在R 4.0.5軟件的基礎(chǔ)上使用Bioconductor生物信息軟件包以<0.05，<0.05為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行共同靶點(diǎn)的基因本體論（gene ontology，GO）與京都基因與基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路富集分析。獲取治療作用基因靶點(diǎn)參與的生物學(xué)功能、細(xì)胞組分、分子功能、信號通路。

2 結(jié)果

2.1 補(bǔ)腎化瘀方活性成分及作用靶點(diǎn)

以O(shè)B≥30%、DL≥0.18為篩選標(biāo)準(zhǔn)，在TCMSP、TCMID數(shù)據(jù)庫中篩選補(bǔ)腎化瘀方組方藥物的有效成分，共計(jì)獲得無重復(fù)潛在活性成分143個，見表1。使用Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫預(yù)測靶點(diǎn)并去重后獲得藥物靶點(diǎn)957個。

表1 補(bǔ)腎疏肝方活性成分信息

2.2 補(bǔ)腎化瘀方治療IUA相關(guān)靶點(diǎn)

以“intrauterine adhesion”為關(guān)鍵詞分別在Disgenet、Genecards、OMIM數(shù)據(jù)庫進(jìn)行篩選并去重，獲得疾病治療靶點(diǎn)1170個。在Venny 2.1在線作圖軟件工具平臺上輸入957個藥物靶點(diǎn)、1170個疾病靶點(diǎn)，繪制韋恩圖，去兩者交集后可獲得藥物–疾病共同靶點(diǎn)171個，見圖1。

2.3 中藥-成分-疾病靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析

將補(bǔ)腎化瘀方中143個潛在活性成分與171個藥物–疾病共同靶點(diǎn)輸入Cytoscape軟件中，去除與靶點(diǎn)無相關(guān)性的孤立成分。最終獲得116種與疾病靶點(diǎn)存在交集的活性成分，由此繪制出“藥物–成分–靶點(diǎn)–疾病”相互作用的網(wǎng)絡(luò)圖（圖2）。使用Network Analyzer功能拓?fù)浞治鏊镁W(wǎng)絡(luò)圖，得出各活性成分所含degree值，并由此認(rèn)為補(bǔ)腎化瘀方中起治療作用的核心成分主要為黃原素、去氧皮質(zhì)酮、黃芩素、槲皮素、二去甲氧基姜黃素。

圖1 補(bǔ)腎化瘀方與宮腔粘連共同靶點(diǎn)韋恩圖

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及核心基因篩選

利用STRING數(shù)據(jù)庫將補(bǔ)腎化瘀方治療IUA的171個共同靶點(diǎn)進(jìn)行PPI分析，見圖3。將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape中，利用Network Analyzer工具進(jìn)行拓?fù)浞治觯?jì)算出度值（degree）平均數(shù)為12，故可認(rèn)為degree>12的基因?yàn)檠a(bǔ)腎化瘀方起治療作用的核心靶點(diǎn)，使用R 4.0.5將前30個靶點(diǎn)繪制為條形圖（圖4）。應(yīng)用Cytoscape中的MCODE模塊將PPI網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行基因簇的分析和核心靶點(diǎn)的篩選。總共得到4個基因簇（圖5），其核心基因?yàn)镃XCL8、KDR、LCK、ITGAL。

圖中紫色代表藥物，綠色代表補(bǔ)腎化瘀方中的116種活性成分，藍(lán)色代表171個共同靶點(diǎn)，紅色代表疾病

圖3 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖（PPI）

圖4 核心靶點(diǎn)排序

圖5 基因簇

2.5 補(bǔ)腎化瘀方治療IUA的GO及KEGG富集分析

經(jīng)R語言運(yùn)行上述所得171個共同靶點(diǎn)，GO富集分析選取生物學(xué)過程、細(xì)胞組分及分子功能3部分，前20條通路如圖6所示。

GO富集分析結(jié)果表明，交集基因集合共富集至2703條生物過程通路中，主要包括上皮細(xì)胞增殖、蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的正調(diào)控等；交集基因集合共富集至82條細(xì)胞組分表達(dá)過程中，主要包括膜筏、質(zhì)膜微區(qū)、黏著斑等；交集基因集合共富集至177個與分子功能相關(guān)的過程中，主要包括酪氨酸激酶等酶活性激活、配體活性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合等。

將171個共同靶點(diǎn)經(jīng)R語言運(yùn)行后共得到169條KEGG通路，前20條通路形成了KEGG功能富集的條形圖（圖7）。包括過磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinas B，PI3K-Akt）信號通路、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信號通路、Ras信號通路等。

3 討論

IUA以月經(jīng)量減少為主要臨床表現(xiàn)，重度粘連者甚見閉經(jīng)，如粘連面積連及宮頸管則可見周期性腹痛，遠(yuǎn)期可繼發(fā)不孕、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)等病癥[3-4]。該病發(fā)病常與宮腔手術(shù)操作、感染、放射線等相關(guān)，其中宮腔手術(shù)操作為主要因素[5]。目前治療IUA以手術(shù)松解為第一手段，然而術(shù)后仍存在較高的復(fù)發(fā)率[6-8]。基于分子生物學(xué)對于該病發(fā)病機(jī)制的研究，本病的發(fā)生可能與纖維細(xì)胞增生、免疫–炎癥反應(yīng)、子宮內(nèi)膜修復(fù)等方面有關(guān)。

IUA無對應(yīng)中醫(yī)病名，根據(jù)該病臨床表現(xiàn)常將其歸類于“月經(jīng)過少”“不孕”“滑胎”等病。因金刃創(chuàng)傷，胞宮受損，腎氣亦虧，胞脈不通，沖任難榮，氣血不行，下焦瘀滯，故而經(jīng)血蓄溢無期，發(fā)為本病。故本病病機(jī)為腎虛血瘀，治以補(bǔ)腎益精，活血化瘀。

本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)初探補(bǔ)腎化瘀方的作用機(jī)制。通過數(shù)據(jù)收集及處理，共篩選到治療的活性成分116種，包括黃芩素、去雙甲基姜黃素、槲皮素、角蛋白等。黃芩素可以通過抑制硫氧還蛋白系統(tǒng)抑制細(xì)胞核因子κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）的反式激活，從而減少NF-κB依賴性炎癥反應(yīng)的發(fā)生[9]。去雙甲基姜黃素是中藥莪術(shù)中的活性成分，其可特異性誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞凋亡，在體內(nèi)外均可有效預(yù)防腎纖維化[10]。槲皮素有抗炎、抗纖維化、抗氧化等多種藥理特性，可直接抑制NF-κB發(fā)揮抗炎作用，同時下調(diào)包括PI3K-Akt、MAPK在內(nèi)的多種信號通路發(fā)揮抗多臟器纖維化作用[11-13]。細(xì)胞角蛋白是一類存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的水溶性聚合多肽，腺上皮多表達(dá)為Ⅰ型細(xì)胞角蛋白，其與其他輔助蛋白共同維護(hù)上皮細(xì)胞形態(tài)的完整性[14]。在發(fā)生IUA的大鼠中子宮內(nèi)膜角蛋白明顯降低[15]。

圖6 GO分析

圖7 KEGG富集

綜合中藥–成分–疾病靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)和PPI網(wǎng)絡(luò)，推測補(bǔ)腎化瘀方治療IUA的核心基因是CXCL8、KDR、LCK、ITGAL。CXCL8的編碼蛋白屬CXC趨化因子，可引導(dǎo)中性粒細(xì)胞到達(dá)感染部位，從而介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。在通過干細(xì)胞治療席漢綜合征的一項(xiàng)研究中表明，再生子宮內(nèi)膜組織中CXCL8呈低表達(dá)。通過下調(diào)CXCL8，或可改變局部內(nèi)膜免疫微環(huán)境，促進(jìn)內(nèi)膜組織的再生[16]。KDR又稱血管內(nèi)皮生長因子受體-2（vascular endothelial growth factor receptor-2，VEGFR-2），是血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的重要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)受體。雌激素可通過上調(diào)KDR以誘導(dǎo)VEGF表達(dá)，從而改變血管通透性，以達(dá)到引起子宮內(nèi)膜的修復(fù)與周期性變化的作用[17]。亦有研究表明，KDR在IUA患者體內(nèi)呈高表達(dá)，且其表達(dá)程度與IUA嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[18]。下調(diào)KDR可能通過TGF-β1/Smads信號通路減少炎癥反應(yīng)，從而減少纖維化形成。LCK是T細(xì)胞受體（T cell antigen receptor，TCR）通路的初始環(huán)節(jié)，在T細(xì)胞反應(yīng)中起關(guān)鍵作用，其活性反映了自身免疫的活躍度[19]。卵巢癌患者使用LCK抑制劑預(yù)處理可改善因免疫激活導(dǎo)致的順鉑耐藥[20]。ITGAL為細(xì)胞間黏附分子1（intercelluar adhesion molecule 1，ICAM1）的受體，參與多種免疫現(xiàn)象，在白細(xì)胞黏附中起核心作用。ITGAL的上游基因ENST00000433673在子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞與子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)，ITGAL的高表達(dá)可促進(jìn)細(xì)胞間黏附，改善子宮內(nèi)膜環(huán)境，在胚胎種植著床過程中起重要作用[21]。

由GO和KEGG富集分析結(jié)果可知，補(bǔ)腎化瘀方治療IUA涉及包括上皮細(xì)胞增殖修復(fù)、絲氨酸/蘇氨酸激酶激活等多種生物學(xué)功能。子宮內(nèi)膜的修復(fù)始于內(nèi)膜表面完全再上皮化，而上皮細(xì)胞可以進(jìn)一步通過細(xì)胞轉(zhuǎn)化重新形成功能性子宮內(nèi)膜[22-23]。絲氨酸/蘇氨酸激酶可激活PI3K-Akt、TGF-β信號通路，兩者在炎癥反應(yīng)與炎癥增生中起重要作用。KEGG富集分析表明，主要靶點(diǎn)通路包括PI3K-Akt信號通路、MAPK信號通路、Ras信號通路。PI3K-Akt通路下游信號復(fù)雜多樣，有研究表明，EGFR-PI3K-Akt信號通路激活可使子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞增生，內(nèi)膜腺體、血管生成增加[24]。而PI3K-Akt-mTOR支路過度激活可導(dǎo)致血管增生及炎癥介質(zhì)分泌，使得子宮內(nèi)膜中成纖維組織形成，加重IUA[25]。MAPK信號通路高表達(dá)可導(dǎo)致上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，破壞上皮內(nèi)穩(wěn)態(tài)，使子宮內(nèi)膜纖維化進(jìn)一步發(fā)展[26-27]。其中MAPK-p38支路在炎癥反應(yīng)中起重要作用，下調(diào)該信號通路可減少子宮內(nèi)膜局部炎癥反應(yīng)，減少纖維增生[28]。Ras信號通路可在術(shù)后損傷或缺氧后過度激活，可能導(dǎo)致慢性免疫反應(yīng)、氧化應(yīng)激的發(fā)生，并增加TGF-β等纖維化分子的表達(dá)，造成宮腔操作后IUA發(fā)生[29]。

綜上所述，本研究推測補(bǔ)腎化瘀方主要通過調(diào)控免疫–炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化等途徑治療IUA，其具體機(jī)制是一個多靶點(diǎn)、多通路參與的復(fù)雜過程。然而本研究忽視了不同藥物配比對療效的影響，以及烹煮熬制后產(chǎn)生新物質(zhì)的可能，所得結(jié)論仍存在一定的局限性，還需開展進(jìn)一步的研究論證。

[1] 王莉, 陳霞. 中西藥治療人流術(shù)后宮腔粘連臨床觀察[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報, 2015, 17(4): 78–80.

[2] 王莉, 張家瑜. 補(bǔ)腎化瘀法治療宮腔粘連術(shù)后及其對局部TGF-β1和CTGF表達(dá)的影響[J]. 中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育, 2018, 16(24): 45–47.

[3] ASHRAF D, AYMAN A, TOGAS T. Predisposing factors and treatment outcome of different stages of intrauterine adhesions[J]. J Obstet Gynaecol Canada, 2010, 32(8): 767–770.

[4] MAE W H, BRIAN S, MATTHEW T C, et al. Intrauterine adhesion prevention after hysteroscopy: a systematic review and meta-analysis[J]. Am J Obstet Gynecol, 2016, 215(3): 267–275.

[5] 高蜀君, 隋龍. 宮腔病變與不孕癥的關(guān)系及診治進(jìn)展[J]. 國際生殖健康/計(jì)劃生育雜志, 2016, 35(3): 237–240.

[6] 中華醫(yī)學(xué)會婦產(chǎn)科學(xué)分會. 宮腔粘連臨床診療中國專家共識[J]. 中華婦產(chǎn)科雜志, 2015, 50(12): 881–887.

[7] 王娜, 范艷艷, 徐文, 等. 宮腔粘連診斷及發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué), 2021, 25(6): 939–941.

[8] 邱丹兒, 張琬琳, 王曉紅. 宮腔粘連分離術(shù)后預(yù)防復(fù)發(fā)和改善生殖結(jié)局的輔助治療措施[J]. 國際生殖健康/計(jì)劃生育雜志, 2022, 41(1): 46–51.

[9] PATWARDHAN R S, SHARMA D, THOH M, et al. Baicalein exhibits anti-inflammatory effects via inhibition of NF-kappa B transactivation[J]. Biochem Pharmacol, 2016, 108: 75–89.

[10] JIN F, JIN Y, DU J, et al. Bisdemethoxycurcumin protects against renal fibrosis via activation of fibroblast apoptosis[J]. Eur J Pharmacol, 2019, 847: 26–31.

[11] 馬納, 李亞靜, 范吉平. 槲皮素藥理作用研究進(jìn)展[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報, 2018, 20(8): 221–224.

[12] LEE C S, JEONG E B, KIM Y J, et al. Quercetin-3-O- (2”-galloyl)-alpha-l-rhamnopyranoside inhibits TNF-alpha- activated NF-kappaB-induced inflammatory mediator production by suppressing ERK activation[J]. Int Immunopharmacol, 2013, 16(4): 481–487.

[13] 許火龍, 聶磊, 李春玉, 等. 槲皮素抗纖維化機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 微量元素與健康研究, 2021, 38(3): 70–73.

[14] 姜展紅, 吳宜勇, 劉冬戈, 等. 細(xì)胞角蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)[J]. 中華實(shí)用診斷與治療雜志, 2009, 23(4): 390–391.

[15] 黃博, 李雋, 董蘭, 等. Rho/ROCK激酶信號通路在大鼠宮腔粘連中的作用[J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2020, 30(15): 1–6.

[16] DE MIGUEL-GOMEZ L, FERRERO H, LOPEZ-MARTINEZS, et al. Stem cell paracrine actions in tissue regeneration and potential therapeutic effect in human endometrium: a retrospective study[J]. BJOG, 2020, 127(5): 551–560.

[17] HERVE M A, MEDURI G, PETIT F G, et al. Regulation of the vascular endothelial growth factor (VEGF) receptor Flk-1/KDR by estradiol through VEGF in uterus[J]. J Endocrinol, 2006, 188(1): 91–99.

[18] CHEN J X, YI X J, GU P L, et al. The role of KDR in intrauterine adhesions may involve the TGF-beta1/ Smads signaling pathway[J]. Braz J Med Biol Res, 2019, 52(10): e8324.

[19] KREUSSER L M, RENDALL A D. Autophosphorylation and the dynamics of the activation of lck[J]. Bull Math Biol, 2021, 83(6): 64.

[20] CREAN-TATE K K, BRALEY C, DEY G, et al. Pretreatment with LCK inhibitors chemosensitizes cisplatin-resistant endometrioid ovarian tumors[J]. J Ovarian Res, 2021, 14(1): 55.

[21] LI D, JIANG W, JIANG Y, et al. Preliminary functional inquiry of lncRNA ENST00000433673 in embryo implantation using bioinformatics analysis[J]. Syst Biol Reprod Med, 2019, 65(2): 164–173.

[22] LUDWIG H, SPORNITZ U M. Microarchitecture of the human endometrium by scanning electron microscopy: menstrual desquamation and remodeling[J]. Ann N Y Acad Sci, 1991, 622: 28–46.

[23] 鄧謀, 朱蘭. 子宮內(nèi)膜的再生及宮腔粘連干細(xì)胞修復(fù)的研究進(jìn)展[J]. 中國計(jì)劃生育和婦產(chǎn)科, 2016, 8(3): 6–8.

[24] 王春雪. 低分子肝素通過EGFR/PI3K/Akt信號通路改善子宮內(nèi)膜容受性的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 錦州: 錦州醫(yī)科大學(xué), 2020.

[25] 徐芳, 潘嬙微, 鄭加永, 等. 絲裂霉素C抑制PI3K/ AKT信號通路抗宮腔黏連SD大鼠子宮內(nèi)膜纖維化的機(jī)制研究[J]. 實(shí)用藥物與臨床, 2019, 22(5): 461–465.

[26] ZHOU Z, WANG H, ZHANG X, et al. Defective autophagy contributes to endometrial epithelial-mesenchymal transition in intrauterine adhesions[J]. Autophagy, 2022, 18(10): 1–16.

[27] WANG L, LIU D, WEI J, et al. MiR-543 inhibits the migration and epithelial-to-mesenchymal transition of TGF-beta-treated endometrial stromal cells via the MAPK and Wnt/beta-catenin signaling pathways[J]. Pathol Oncol Res, 2021, 27: 1609761.

[28] 王韋, 曾慶蘭, 王曼麗, 等. 血府逐瘀膠囊對子宮內(nèi)膜細(xì)胞炎癥模型影響的研究[J]. 遼寧中醫(yī)雜志, 2016, 43(8): 1600–1602.

[29] SHABANIAN S, KHAZAIE M, FERNS G A, et al. Local renin-angiotensin system molecular mechanisms in intrauterine adhesions formation following gynecological operations, new strategy for novel treatment[J]. J Obstet Gynaecol, 2022, 42(6): 1–7.

Study on the potential targets and mechanism of Bushen Huayu decoction in the treatment of intrauterine adhesion

SHEN Yiyao, WANG Li, KONG Desong, ZHANG Xiaosu

1.Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210029, Jiangsu, China; 2.Department of Gynecology, Nanjing Hospital of Chinese Medicine Affiliated to Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210022, Jiangsu, China; 3.Department of Science Research, Nanjing Hospital of Chinese Medicine Affiliated to Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210022, Jiangsu, China

To explore the potential targets and mechanism of action of Bushen Huayu decoction in the treatment of intrauterine adhesion, based on network pharmacology in order to provide more theoretical basis for further clinical and experimental verification.With the help of TCMSP, TCMID, PubChem, TCMSP and Swiss Target Prediction databases, the active components and targets of Bushen Huayu decoction were screened. With the help of Disgenet, Genecards and OMIM databases, the targets of intrauterine adhesion were obtained. The two components were imported into Cytoscape 3.8.2 software to screen the intersection targets and construct a ‘drug-component-target-disease’ network diagram to obtain the core components of the way that bushen huayu decoction in the treatment of intrauterine adhesion. The core genes of treatment were speculated by protein-protein interaction (PPI) network constructed by STRING database. Finally, gene ontology (GO) and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) enrichment analysis of the intersection targets was performed by R language to speculate the possible mechanism of action.A total of 116 active components of Bushen Huayu decoction were obtained for the treatment of intrauterine adhesion. The core genes that play a therapeutic role may be CXCL8, KDR, LCK and ITGAL. GO enrichment to biological processes such as enzyme activity activation and epithelial cell proliferation repair. KEGG enrichment analysis involved 169 signaling pathways, mainly related to inflammation and immune activation.The treatment of intrauterine adhesion with Bushen Huayu decoction has a complex process of multi-target and multi-channel. Based on network pharmacology, it is speculated that Bushen Huayu decoction mainly treats intrauterine adhesion by regulating immune-inflammatory response, cell proliferation and transformation.

Network pharmacology; Intrauterine adhesion; Bushen Huayu; Mechanism

R271.1

A

10.3969/j.issn.1673-9701.2023.29.019

張曉甦南京市名中醫(yī)工作室資助項(xiàng)目（ZXS-2017-NJ）

王莉，電子信箱：wlmercy@163.com

（2022–11–23）

（2023–09–14）