血清T淋巴細胞亞群水平變化與狼瘡性腎炎患者疾病轉歸的相關性

李飛，常潔，董少卿

（河南科技大學第一附屬醫院 腎內科，河南 洛陽 471003）

系統性紅斑狼 瘡（systemic lupus erythematosus,SLE）是一種累及腎臟、神經、肺臟、皮膚等多系統的自身免疫性結締組織病，狼瘡性腎炎（lupus nephritis,LN）屬于SLE 常見并發癥，其發病率占據SLE 的50%～80%［1］。臨床常采用糖皮質激素等免疫抑制劑治療，但不同患者病情轉歸不同，因而尋找新型非侵入性標志物對改善病情具有重要意義。CD4+、CD3+、CD16+/CD56+、CD19+屬于T 淋巴細胞亞群，其中CD4+、CD3+、CD19+屬于特異性免疫應答，CD16+/CD56+屬于非特異性免疫應答，可參與自身免疫性疾病發生過程［2］。CD19+屬于Ⅰ型跨膜糖蛋白，可刺激B 細胞分化，促進漿細胞分泌抗體，還可分泌細胞因子，進而調控免疫應答［3-4］。目前關于T 淋巴細胞亞群與LN 疾病轉歸相關性尚未明確，本研究將檢測其水平變化對疾病轉歸的預測價值，為LN 治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1 月至2022 年3 月河南科技大學第一附屬醫院收治的82 例LN 患者為研究對象，依據病情嚴重程度［5］分為輕度21 例、中度32 例、重度29 例。治療6 個月后根據疾病轉歸情況分為轉歸良好組65 例、轉歸不良組17 例。轉歸良好組：男25 例，女40 例；年齡24～42 歲，平均（32.16±2.72）歲；體重指數22～26 kg/m2，平均（24.01±0.52）kg/m2；病程1～3 年，平均（1.52±0.14）年。轉歸不良組：男10 例，女7 例；年齡23～43 歲，平均（33.52±2.85）歲；體重指數21～27 kg/m2，平均（23.85±0.41）kg/m2；病程1～2 年，平均（1.46±0.11）年。兩組一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經院倫理委員會批準。

1.2 納入與排除標準

納入標準：符合LN 診斷標準［6］且病理類型均為Ⅲ型及以上狼瘡；無血液疾病者；無過敏性疾病者；首次確診者；簽署知情同意書。排除標準：自身免疫性溶血性貧血者；合并其他腎病者；凝血功能異常者；精神障礙者；合并惡性腫瘤者；近3 個月內發生嚴重感染或發熱者；近期接受抑制機體免疫反應藥物治療者。

1.3 方法

1.3.1 治療方法 所有患者接受糖皮質激素治療，口服醋酸潑尼松片（輔仁藥業集團有限公司，國藥準字H20073323，規格：5 mg），1 mg/（kg·d）；口服免疫抑制劑霉酚酸酯（上海羅氏制藥有限公司，國藥準字H20031240，規格：0.25 g），1 g/次，2 次/d，連續治療6 個月。治療結束后評價疾病轉歸情況，轉歸良好定義為：臨床癥狀基本消失，尿蛋白含量降低50%，血清蛋白水平≥30 g/L，血肌酐恢復至正常水平，否則視為轉歸不良［7］。

1.3.2 檢測血清T 淋巴細胞亞群水平 分別于治療前、治療1 個月、3 個月后采集空腹外周靜脈血5 mL，放入含有肝素抗凝采血管內，分別加入CD4+、CD3+、CD16+/CD56+、CD19+標記的熒光抗體（美國Abnova 公司），使用FACSAriaⅡ流式細胞儀（美國貝克曼庫爾特公司）檢測CD4+、CD3+、CD16+/CD56+、CD19+。

1.4 觀察指標

①比較入組時兩組不同生化指標：包括血清白蛋白、血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白、補體C3、補體C4、白細胞、紅細胞沉降率（ESR）、尿沉渣紅細胞數。②比較治療前、治療1 個月、3 個月后兩組及不同病情嚴重程度（入組時）患者血清T淋巴細胞亞群水平。③分析各指標與生化指標、病情嚴重程度相關性。④分析治療1 個月、3 個月后各指標對疾病轉歸的預測價值。

1.5 統計學方法

采用SPSS 24.0 軟件處理數據。計數資料以百分率（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料以均數±標準差（）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析（兩兩間比較采用LSD-t檢驗）；應用Pearson 分析T淋巴細胞亞群與生化指標的相關性；應用Spearman 分析T 淋巴細胞亞群與病情嚴重程度相關性；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析T淋巴細胞亞群水平對疾病轉歸的預測價值，不同方案間的曲線下面積（AUC）比較采用DeLong 檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組生化指標比較

轉歸不良組血清白蛋白、補體C3、補體C4水平低于轉歸良好組，血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白水平，尿沉渣紅細胞數高于轉歸良好組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組生化指標比較（）

表1 兩組生化指標比較（）

2.2 兩組治療前后血清T 淋巴細胞亞群水平比較

治療1 個月、3 個月后兩組CD4+、CD3+、CD16+/CD56+高于治療前，CD19+低于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05）；治療1 個月、3 個月后轉歸良好組CD4+、CD3+、CD16+/CD56+高于轉歸不良組，CD19+低于轉歸不良組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組治療前后血清T 淋巴細胞亞群水平比較（）

表2 兩組治療前后血清T 淋巴細胞亞群水平比較（）

注：1）與治療前比較，P＜0.05；2）與治療1 個月后比較，P＜0.05。

2.3 不同病情嚴重程度患者各指標水平

隨著病情嚴重程度增加，CD4+、CD3+、CD16+/CD56+降低，CD19+升高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同病情嚴重程度患者各指標水平（）

表3 不同病情嚴重程度患者各指標水平（）

注：1）與輕度比較，P＜0.05；2）與中度比較，P＜0.05。

2.4 各指標與生化指標、病情嚴重程度相關性分析

CD4+、CD3+、CD16+/CD56+與白蛋白、補體C3、補體C4 呈正相關，而與尿素氮、病情嚴重程度呈負相關（P＜0.05）；CD19+與白蛋白、補體C3、補體C4 呈負相關，而與尿素氮、病情嚴重程度呈正相關（P＜0.05）。見表4。

表4 各指標與生化指標、病情嚴重程度相關性分析

2.5 ROC 分析各指標對疾病轉歸的預測價值

以轉歸不良組17 為陽性樣本，以轉歸良好組65 例為陰性樣本，繪制ROC 曲線，結果顯示，治療1 個月、3 個月后各指標聯合預測疾病轉歸的AUC 大于單項預測（P＜0.05），且治療3 個月后各指標聯合預測疾病轉歸的AUC 大于治療1 個月（P＜0.05）。見表5。

表5 ROC 分析各指標對疾病轉歸的預測價值

3 討論

LN 發病機制與免疫復合物形成、炎性反應、遺傳、免疫應答等有關，免疫細胞因子異常分泌可引起機體免疫功能紊亂，進而引發自身免疫系統疾病，其病情進展與疾病轉歸密切相關，因而尋找LN 發生發展相關分子標志物對疾病轉歸具有重要指導意義［8-9］。

CD3+與T 細胞受體結合，可傳遞T 細胞受體、抗原結合的信號，促進機體免疫抑制形成，可積極參與機體應對刺激、感染等過程；CD4+T 淋巴細胞可進一步分化為輔助性T 細胞1（Th1）、輔助性T 細胞2（Th2）、輔助性T 細胞17（Th17）、調節性T 細胞（Treg）亞群，不同亞群細胞因子可互相轉化，維持機體免疫平衡［10-11］。抗原刺激下T 淋巴細胞激活，可生成大量淋巴因子，并可維持機體免疫內環境穩定，若T 淋巴細胞亞群平衡異常可介導免疫性疾病發生過程［12-13］。本研究結果顯示，治療后兩組CD4+、CD3+、CD16+/CD56+高于治療前，CD19+低于治療前，治療后轉歸良好組CD4+、CD3+、CD16+/CD56+高于轉歸不良組，CD19+低于轉歸不良組，且CD4+、CD3+、CD16+/CD56+隨著病情嚴重程度增加而降低，CD19+隨著病情嚴重程度增加而升高，提示T 淋巴細胞亞群失衡可能促進LN 病情進展，并可增加LN 疾病轉歸不良發生風險。其原因可能為CD4+、CD3+、CD16+/CD56+水平降低主要為誘導細胞數目減少，促使機體中參與免疫抑制作用的細胞減少，破壞機體免疫平衡，降低其免疫抑制作用，進而激活自身反應性T 細胞；CD19+增加后可減弱T 抑制細胞功能，促使機體產生相應抗體，進而造成體液、細胞免疫異常，最終促進LN 轉歸不良。

補體是一種具有酶活性的球蛋白，補體C3、補體C4 水平降低表明補體活化功能異常，其水平變化與LN 疾病活動度呈負相關，研究表明免疫復合物可激活補體，促使SLE 腎臟受累［14］。尿蛋白、尿沉渣紅細胞數可反映腎臟病變程度［15］。本研究結果顯示，轉歸不良組血清白蛋白、補體C3、補體C4 水平低于轉歸良好組，血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白水平、尿沉渣紅細胞數高于轉歸良好組，進一步研究發現CD4+、CD3+、CD16+/CD56+與白蛋白、補體C3、補體C4 呈正相關，與尿素氮、病情嚴重程度呈負相關，而CD19+與之相反，表明T 淋巴細胞亞群可能通過調節機體免疫反應、炎性反應，進而促進LN 轉歸不良。本研究中治療后各指標聯合預測疾病轉歸的AUC 大于單項預測，提示T 淋巴細胞亞群對LN 疾病轉歸具有一定預測價值。考慮其原因為T 淋巴細胞亞群可誘導Th1、Th2 等其他因子產生，引起LN 患者機體免疫調節功能異常，促進LN 病情進展，進一步影響疾病轉歸。

綜上所述，CD4+、CD3+、CD16+/CD56+、CD19+聯合預測可提高對LN 患者疾病轉歸的預測價值，可為判斷LN 病情進展及治療方案制定提供科學依據。