重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達水平及臨床意義

孫源 趙立涵 曾瑋 吳寧濤

重癥肺炎是指因肺部炎癥發展擴散引起的呼吸道衰竭及加重、累積多個系統、器官,嚴重危及生命[1-2]。尋求可靠指標指導重癥肺炎患者進行準確治療,是改善重癥肺炎預后的關鍵[3]。膜聯蛋白A1(annexin A1, ANXA1)是一類鈣依賴的磷脂結合蛋白,在巨噬細胞、單核細胞中高表達,與細胞增殖、凋亡和吞噬有關,并參與細胞炎癥反應[4]。研究報道,ANXA1與多種炎癥疾病有關,可作為疾病預后評估的標志物[5]。T細胞免疫球蛋白黏蛋白-4(T-cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule 4,TIM-4)在樹突狀細胞、巨噬細胞、B細胞等免疫細胞中高表達,與炎癥反應有關[6]。目前有關ANXA1、TIM-4在重癥肺炎疾病中的研究報道較少。因此,本研究擬探討重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達水平及臨床意義,以期為臨床診治重癥肺炎提供參考。

資料與方法

一 、一般資料

選取2019年5月至2021年12月本院收治的90例重癥肺炎患者納入重癥肺炎組進行研究,并納入同期90例普通肺炎患者為普通肺炎組,同期在醫院接受常規體檢的90例健康體檢者為對照組。三組一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05)(見表1)。

表1 三組一般資料比較

納入標準:(1)符合《內科學(第9版)》[7]中肺炎相關診斷標準。(2)參與者病歷資料完整。(3)預計生存時間大于3天。排除標準:(1)合并其它感染性疾病患者。(2)近期有重大手術搶救史等。(3)伴有血液病或惡性腫瘤者。(4)肝、腎功能不全者。三組受試人員或其家屬對本研究知情并簽署知情同意書。本研究經醫院倫理委員會批準后進行(2019-0029)。

二 、研究方法

1 樣品采集 重癥肺炎組、普通肺炎組患者入院時(對照組于體檢日)收集5 mL靜脈血,靜置30min,后3000r/min離心10min,分離血清;血清樣本儲存在-80℃冰箱中,以供進一步分析。

2 ELISA法檢測血清ANXA1、TIM-4表達水平

采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清ANXA1、TIM-4水平,操作步驟按照ELISA試劑盒及儀器說明書進行。試劑盒均購自上海瑞番生物科技有限公司;酶標儀購自上海美谷分子儀器有限公司。

三、隨訪

90例重癥肺炎患者,根據治療28天生存情況分為生存組(67例)、死亡組(23例),并收集兩組重癥肺炎患者吸煙史、飲酒史、是否機械通氣、是否合并糖尿病、高血壓、冠心病等資料。

四、統計學分析

本研究數據用SPSS 25.0軟件進行分析。計量資料且符合正態分布的以均數±標準差表示,采用t檢驗比較兩組間的差異,三組間差異比較采用單因素方差分析,組間進一步兩兩比較采用SNK-q檢驗;以n(%)表示計數資料,采用χ2檢驗比較組間差異。Pearson相關用于評估血清ANXA1、TIM-4的相關性。影響重癥肺炎預后的危險因素采用多分類Logistic回歸分析;受試者工作特征(ROC)曲線分析血清ANXA1、TIM-4表達水平對重癥肺炎預后的預測價值,血清ANXA1、TIM-4聯合預測與兩者單獨預測ROC曲線下面積(AUC)比較采用Z檢驗;Kaplan-Meier曲線分析ANXA1、TIM-4表達與重癥肺炎預后的關系。P<0.05代表差異有統計學意義。

結 果

一、三組患者血清ANXA1、TIM-4表達水平分析

普通肺炎組、重癥肺炎組患者血清ANXA1、TIM-4水平明顯高于對照組(P<0.05)(詳見表2)。

表2 三組患者血清ANXA1、TIM-4表達水平分析

二、重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達水平的相關性分析

Pearson相關性分析結果顯示,重癥肺炎患者血清ANXA1和TIM-4表達水平呈正相關(r=0.439,P<0.001)(見圖1)。

圖1 血清ANXA1與TIM-4相關性分析

三、不同預后重癥肺炎患者臨床資料和血清ANXA1、TIM-4表達水平比較

重癥肺炎死亡組與生存組年齡、吸煙史、機械通氣、合并糖尿病、ANXA1、TIM-4水平相比有明顯差異(P<0.05)。與生存組相比,死亡組ANXA1、TIM-4水平顯著升高,差異有統計學意義(P<0.05),性別、BMI、飲酒史、合并高血壓、合并冠心病相比無明顯差異(P>0.05)(詳見表3)。

表3 不同預后重癥肺炎患者臨床資料和血清ANXA1、TIM-4表達水平比較

四、多分類Logistic回歸分析影響重癥肺炎患者預后的因素

將(表3)中具有統計學意義的臨床特征指標及ANXA1、TIM-4為自變量進行多元回歸分析(賦值見表4)。Logistic回歸模型分析顯示,年齡≥60歲、吸煙史、機械通氣、合并糖尿病、ANXA1高表達、TIM-4高表達是影響重癥肺炎患者預后的危險因素(P<0.05)(詳見表5)。

表4 Logistic回歸分析自變量賦值

五、血清ANXA1、TIM-4表達水平對重癥肺炎患者預后的評估價值

以重癥肺炎患者預后情況作為因變量(死亡=1,生存=0),血清ANXA1、TIM-4水平作檢驗變量,繪制ROC曲線圖,結果顯示單獨及兩者聯合預測重癥肺炎預后的AUC分別為0.859、0.840、0.958,兩者聯合預測的AUC顯著大于ANXA1單獨預測的AUC(Z=2.330,P=0.020),TIM-4單獨預測的AUC(Z=2.096,P=0.036)(見表6、圖2)。

表6 血清ANXA1、TIM-4預測重癥肺炎預后的ROC分析

六、血清ANXA1、TIM-4水平與重癥肺炎患者預后的關系

根據血清ANXA1、TIM-4水平中位數,將重癥肺炎患者分為ANXA1低表達組(ANXA1<457.23 ng/mL, 45例)、ANXA1高表達組(ANXA1≥457.23 ng/mL, 45例)和TIM-4高表達組(TIM-4≥74.37 pg/mL, 45例)、TIM-4低表達組(TIM-4<74.37 pg/mL, 45例)。28天隨訪結果顯示,90例重癥肺炎患者有67例生存,23例死亡,總生存率為74.44%。ANXA1高表達組生存29例(29/45, 64.44%)和ANXA1低表達組生存38例(38/45, 84.44%),TIM-4高表達組生存28例(28/45, 62.22%)和TIM-4低表達組生存39例(39/45, 86.67%)。Kaplan-Meier生存曲線分析表明ANXA1低表達組生存率顯著高于高表達組(χ2=4.731,P=0.030),TIM-4低表達組生存率顯著高于高表達組(χ2=7.067,P=0.008)(見圖3,4)。

圖3 ANXA1表達與重癥肺炎患者預后的關系

圖4 TIM-4表達與重癥肺炎患者預后的關系

討 論

重癥肺炎常伴有多種并發癥,容易導致死亡,具有病情兇險、高死亡率等特點[8-9]。王娜等[10]研究表明,重癥肺炎患者28天病死率為31.25%。而本研究,90例重癥肺炎患者28天病死23例,病死率為25.56%,與王娜的研究相近,表明重癥肺炎患者預后較差,早期預測患者預后非常重要。本研究主要探討重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達水平及臨床意義。

ANXA1是一種內源性抗炎蛋白,受糖皮質激素調節,參與炎癥疾病的發生[11]。ANXA1在關節炎等慢性炎癥性疾病和慢性阻塞性肺疾中發揮重要作用[12-13]。研究發現慢性阻塞性肺疾病合并肺部感染患者血清ANXA1異常高表達[14-15]。Gu等[16]研究發現社區獲得性肺炎患者血清ANXA1水平與病情嚴重程度及預后有關。TIM-4高表達于單核細胞、巨噬細胞中,已有研究證明TIM-4與多種炎癥疾病有關[17-18]。研究發現成人支氣管哮喘急性發作期患者TIM-4水平異常升高[18]。缺血性腦卒中患者外周血單核細胞上TIM-4的表達水平明顯升高,且與不良預后有關[19]。禹萌等[20]研究發現腦卒中后肺部感染患者血清TIM-4表達水平升高。本研究中,與對照組相比,普通肺炎組、重癥肺炎組患者血清ANXA1、TIM-4水平依次明顯上調。這表明ANXA1、TIM-4可能與肺炎的發生、發展有關。與Gu[16]、禹萌[20]等研究結果相似。Pearson相關性分析結果顯示,重癥肺炎患者血清ANXA1和TIM-4表達水平呈正相關。兩者之間可能存在一定聯系,共同影響著重癥肺炎的進展。

本研究單因素分析發現,重癥肺炎死亡組與生存組年齡、吸煙史、機械通氣、合并糖尿病、ANXA1、TIM-4水平相比有明顯差異;死亡組血清ANXA1、TIM-4水平明顯高于生存組。以上說明,重癥肺炎受多種因素影響,檢測血清ANXA1、TIM-4水平可以及時反映患者疾病情況且與患者預后有關。進一步多因素Logistic回歸分析顯示,年齡≥60歲、有吸煙史、機械通氣、合并糖尿病、ANXA1高表達、TIM-4高表達是影響重癥肺炎患者死亡的危險因素,它們與重癥肺炎的預后有關。本研究ROC曲線分析結果顯示,ANXA1、TIM-4聯合預測重癥肺炎預后的AUC顯著大于兩者單獨預測。表明兩者聯合可提高對重癥肺炎預后的預測價值。Kaplan Meier生存分析顯示,ANXA1、TIM-4低表達組生存率均顯著高于高表達組。ANXA1、TIM-4表達升高可能會造成患者預后不良。上述結果表明,早期檢測重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4水平,若發現二者異常變化,建議提前為患者實施治療及改善患者預后。

綜上所述,重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達水平升高,兩者是影響重癥肺炎預后的危險因素,兩者聯合能夠提高重癥肺炎患者預后預測價值,有望成為準確的預測指標。本研究納入的病例數較少,結果可能有一定的偏倚,后續需要一個樣本量大的、多中心的研究來驗證。