抗Hp治療對潰瘍性結(jié)腸炎患者腸道菌群及疾病活動的影響

陸筱祎, 段超勤, 華婷琰

蘇州市立醫(yī)院消化內(nèi)科,江蘇蘇州 215008

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)是一種累及回腸、直腸及結(jié)腸等范圍的非特異性腸道炎癥性疾病,其發(fā)病以青壯年人群多見,近年發(fā)病率呈明顯上升趨勢,已成為全球范圍內(nèi)的公共衛(wèi)生問題之一[1]。UC的發(fā)病機制尚不明確,可能與遺傳、免疫、環(huán)境及腸道菌群等密切相關(guān),其中腸道菌群失調(diào)是公認的影響UC發(fā)生發(fā)展的重要因素[2]。幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)是一種寄生于胃內(nèi)的革蘭氏陰性菌,其可通過免疫機制自我保護的同時造成胃腸道損傷,通過分泌機制引起胃腸道環(huán)境及胃腸道菌群的改變[3-4]。有研究發(fā)現(xiàn),Hp感染與UC疾病進展可能存在著某種聯(lián)系,但結(jié)論并不完全相同,抗Hp治療在一定程度上可能改變患者腸道菌群的數(shù)量、分布和比例[5-6]。本研究從這個角度出發(fā),探索抗Hp治療對UC患者腸道菌群及疾病活動的影響,為進一步明確UC與Hp之間的生物學(xué)聯(lián)系提供參考。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取本院2019年5月1日—2021年12月31日確診UC患者60例,根據(jù)Hp檢查結(jié)果分為Hp(+)組和Hp(-)組各30例,同時納入健康體檢者30例為對照組。各組一般資料比較差異無顯著性(P>0.05;表1),具有可比性。納入標準:①病理確診為UC,根據(jù)文獻[7]標準診斷為UC疾病活動期;②均行14C尿素呼氣試驗檢測Hp;③1個月內(nèi)未使用抗生素、抗炎、糖皮質(zhì)激素及免疫抑制藥物;④臨床資料齊全。排除標準:①克羅恩病;②對四聯(lián)療法藥物過敏;③嚴重心、肝、腎功能障礙;④妊娠、哺乳期女性;⑤惡性腫瘤;⑥系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關(guān)節(jié)炎;⑦不能配合完成研究。

表1 各組一般情況的比較(n=30)

1.2 常規(guī)治療和抗Hp治療方法

參照《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見(2018年·北京)》[7]標準對所有UC患者進行常規(guī)治療,輕中度患者采用5-氨基水楊酸制劑(美沙拉嗪腸溶片,Losan Pharma GmbH,H20100261)口服(每次2片,每天3次,或遵醫(yī)囑)聯(lián)合或不聯(lián)合灌腸(每晚1次,每次1支,或遵醫(yī)囑)。進行誘導(dǎo)緩解及維持治療,效果不佳則改用糖皮質(zhì)激素,根據(jù)患者實際情況聯(lián)合免疫抑制劑或5-氨基水楊酸等維持治療。Hp(+)UC患者進行抗Hp四聯(lián)療法,即阿莫西林(哈爾濱制藥集團,H23020932)、克拉霉素(揚子江制藥集團有限公司,H19990376)、托拉唑鈉腸溶膠囊(海南雙河藥業(yè)有限公司,H20093903)、檸檬酸鉍劑鉀片(麗珠集團制藥廠,H10900084),療程2周。

1.3 UC疾病活動性的評估

UC病變范圍采用蒙特利爾分型[8]。E1型:病變分布于直腸,腸鏡下所見病變最大范圍局限于直腸而未達乙狀結(jié)腸;E2型:病變分布于左半結(jié)腸,腸鏡下所見病變最大范圍局限于左半結(jié)腸;E3型:廣泛病變。

UC疾病活動性評估采用改良Mayo評分系統(tǒng)[9]。根據(jù)患者排便次數(shù)、便血程度、內(nèi)鏡結(jié)果及病情評價4個維度評分,每個維度0～4分,計算總分。臨床緩解:≤2分,且無單項評分>1分;輕度活動:3～5分;中度活動:6～10分;重度活動:11～12分。

1.4 腸道菌群的檢測

在無菌條件下獲取新鮮糞便10 g(治療前及治療后),按照日本光岡知足法的原則[10],選擇腸桿菌(enterobacter,EB)、腸球菌(enterococcus,EC)、酵母菌(saccharomycetes,SM)、葡萄球菌(staphylococcus,SP)、擬桿菌(bacteroidetes,BD)、乳桿菌(lactobacillus,LC)、雙歧桿菌(bifidobacterium,BF)、消化球菌(peprococcus,PC)、小梭菌(clostridiu,CD)及真桿菌(eubacterium,EU)共10種腸道微生物作為腸道菌群的評估指標。

將0.5 g新鮮糞便放入裝有4.5 mL稀釋液和4粒玻璃珠的無菌安培瓶中,旋渦混勻器上振蕩1 min(300 r/min),梯度稀釋后滴種于培養(yǎng)基,常溫干燥10 min,厭氧菌平板倒置于37 ℃厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h,需氧菌平板倒置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中24 h。所有菌落數(shù)據(jù)的結(jié)果均取lgN(CFU/g)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 不同Hp檢測結(jié)果UC患者疾病活動程度的比較

Hp(+)組與Hp(-)組治療前和治療后UC患者疾病活動程度均存在差異(P<0.05;表2)。

表2 不同Hp檢測結(jié)果UC患者疾病活動程度的比較(n=30) 例(%)

2.2 不同疾病活動程度患者腸道菌群的比較

治療前,臨床緩解0例,輕度活動32例,中度活動20例,重度活動8例,與對照組30名人群進行對比,結(jié)果顯示,不同疾病活動度UC患者SM、BD、LC、BF、PC菌群數(shù)量明顯高于對照組(P<0.05),EU菌群數(shù)量明顯低于對照組(P<0.05),其他類型微生物菌群數(shù)量對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05;表3)。隨疾病活動度增加,上述變化更明顯(P<0.05;表3)。

表3 不同疾病活動程度患者腸道菌群的比較

2.3 不同Hp檢測結(jié)果UC患者腸道菌群的比較

治療前后Hp(+)和Hp(-)UC患者SM、BD、LC、BF、PC菌群數(shù)量明顯高于對照組(P<0.05),EU菌群數(shù)量明顯低于對照組(P<0.05),其他類型微生物菌群數(shù)量對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05;表4)。治療前,Hp(-)UC患者較Hp(+)UC患者上述變化更明顯(P<0.05;表4)。

表4 不同Hp檢測結(jié)果UC患者治療前后腸道菌群的比較(n=30) lg CFU/g

3 討 論

Hp感染與包括炎癥性腸病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡及腎病等多種自身免疫性疾病相關(guān),特別是Hp感染所引起的腸道微生態(tài)的失調(diào)也與炎癥性腸病患者的疾病轉(zhuǎn)歸具有密切的關(guān)聯(lián),相關(guān)研究是當前的熱點問題[11]。目前對于UC與Hp的關(guān)系尚沒有統(tǒng)一的定論,不少研究在結(jié)論上完全相反,Owyang等[12]研究顯示,Hp基因組存在一種特殊的免疫調(diào)節(jié)序列,幽門定居的Hp可以將DNA釋放到腸腔中,腸固有層樹突狀細胞受到Hp免疫調(diào)節(jié)序列的影響后,通過介導(dǎo)人Toll樣受體-9信號途徑而導(dǎo)致I型干擾素生成減少,腸黏膜炎癥程度降低。Engler等[13]研究顯示,在動物實驗中,Hp感染可以一定程度緩解葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的慢性結(jié)腸炎和T細胞轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)的結(jié)腸炎大鼠的臨床癥狀。可見Hp在腸道微生態(tài)改變中的作用,而臨床常用的抗Hp四聯(lián)療法也可以在一定程度上改變腸道微生態(tài)。

本研究發(fā)現(xiàn),Hp(+)UC患者較Hp(-)UC患者具有相對更輕的疾病活動度,這可能是Hp存在對腸道微生態(tài)或腸道免疫反應(yīng)具有良好的調(diào)節(jié)作用。隨后進一步分析發(fā)現(xiàn),輕度活動、中度活動及重度活動的UC患者SM、BD、LC、BF、PC菌群數(shù)量明顯高于健康人群,EU菌群數(shù)量明顯低于健康人群,一些條件致病菌如EC和SM的增多,使腸黏膜屏障功能減退,容易引發(fā)腸道炎性改變,而諸如BF、LC等腸道保護細菌也增多,這可能是一種腸道自我保護機制,而真桿菌的數(shù)量顯著下降,這些微生物的動態(tài)改變與當前對UC的研究結(jié)果較為一致[14]。本文進一步研究顯示,治療前Hp(+)UC患者SM、BD、LC菌群數(shù)量均低于Hp(-)UC患者,EU菌群數(shù)量明顯高于Hp(-)UC患者,說明Hp(+)對腸道微生態(tài)的影響有助于緩解UC患者的活動狀態(tài)。抗Hp治療后,Hp(+)組中重度活動患者由9例增加到15例,Hp(-)組中重度活動患者由18例下降到5例,進一步表明Hp(+)對UC疾病的保護作用,提示Hp(+)可降低UC病變區(qū)域的炎癥反應(yīng)而緩解病情。

綜上所述,Hp(+)是UC的一個保護性因素,而抗Hp治療可能會誘發(fā)或加重UC的疾病進展。同時本研究也注意到自身存在樣本量少的缺陷,可能對本研究的結(jié)論造成一定的影響,有待后續(xù)進一步研究證實。