奇楠沉香超臨界提取物的化學成分研究△

陳德力，馬國需，2，劉會梅，王燦紅，劉洋洋，楊云*，魏建和，2*

1.中國醫學科學院 北京協和醫學院 藥用植物研究所 海南分所/海南省南藥資源保護與開發重點實驗室，海南 海口 570311；

2.中國醫學科學院 北京協和醫學院 藥用植物研究所，北京 100193

沉香為 瑞香科（Thymelaeaceae）沉 香屬（Aquilariaspp.）和擬沉香屬（Gyrinopsspp.）植物含樹脂的木材，作為名貴中藥材和傳統天然香料，在醫藥、日化、工藝品、宗教文化等領域廣泛應用[1-3]。沉香作為藥材，始載于漢魏時期陶弘景的《名醫別錄》，列為上品[4]。《中華人民共和國藥典》2020 年版中規定的沉香基原植物為白木香Aquilaria sinensis（Lour.）Gilg，主產于海南、廣東、廣西、云南和臺灣等地，其味辛、苦，性微溫，具有行氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘的功效，用于治療胸腹脹悶疼痛、胃寒嘔吐呃逆、腎虛氣逆喘急等病證[5]。近年來，廣東和海南等地大量種植的奇楠種質是采用嫁接普通白木香的方式繁育、通過鉆孔法生產的沉香，因其獨特的氣味和性狀可與普通沉香相區分，且與記載的奇楠沉香相似，現已開始批量上市銷售，其物種仍為白木香，是一種新的化學型[6-7]。

對普通沉香化學成分和藥理作用已有大量研究，其主要化學成分為倍半萜和色酮類化合物，具有抗菌、抗炎、抗腫瘤和抗焦慮等藥理活性[8-12]。奇楠沉香化學成分的研究報道較少，僅見從其乙醚提取物中分離鑒定出少量的2-(2-苯乙基)色酮類和倍半萜類化合物[13-19]。超臨界CO2提取工藝環保高效，已被廣泛應用于奇楠沉香揮發性成分的提取，但其提取物的化學成分研究尚未見報道。為了解奇楠沉香超臨界提取物的化學成分，本研究利用硅膠柱色譜、薄層色譜及半制備高效液相色譜對其超臨界提取物的化學成分進行了分離純化，采用譜學技術手段鑒定17 了個化合物（圖1），包括倍半萜12 個、色酮類4個及其他類化合物1 個，分別為12,15-二酮基-α-芹子烯（12,15-dioxo-α-selinen，1）、15-酮基-桉葉烷-4,11(13)-二烯-12-甲酯[methyl-15-oxo-eudesmane-4,11(13)-dien-12-oate，2]、petafolia A（3）、12-羥基-4(5),11(13)-桉葉二烯-15-醛[12-hydroxy-4(5),11(13)-eudesmadien-15-al，4]、12,15-二酮基-芹子-4,11-二烯（12,15-dioxo-selina-4,11-dine，5）、(7S,8R,10S)-(+)-8,12-二羥基-芹子-4,11-二烯-14-醛[(7S,8R,10S)-(+)-8,12-dihydroxy-selina-4,11-dien-14-al，6]、白 木香酸（7）、1α-羥基-7βH-荒漠木-9,11-二烯-8-酮（1αhydroxy-7βH-eremophil-9,11-dien-8-one，8）、7α-H-9(10)-烯-11,12-環氧-8-氧代荒漠木烷 [7α-H-9(10)-ene-11,12-epoxy-8-oxoeremophilane，9]、petafolia B（10）、11-羥基-瓦倫-1(10)-烯-2-酮[11-hydroxy-valenc-1(10)-en-2-one，11]、白木香醇（baimuxinol，12）、2-(2-苯乙基)色酮（13）、奇楠沉香酮A（qinanone A，14）、4'-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮（15）、6-甲氧基-2-[2-(4'-甲氧基苯乙基)色酮（16）和丁香醛（17），其中化合物1～7 為桉烷型倍半萜、化合物8～11 為艾里莫芬烷型倍半萜、化合物12 為沉香螺烷型倍半萜、化合物13～16 為色酮類化合物。同時，體外評價化合物對皮質酮（CORT）誘導的PC12 細胞損傷的保護作用，發現化合物2、4 和5 具有顯著保護皮質酮誘導的PC12細胞損傷的活性。

圖1 奇楠沉香超臨界提取物中分離鑒定的化合物1～17的化學結構

1 材料

1.1 試藥

奇楠沉香CO2超臨界提取物（100.0 g）由瑜豐沉香匯（廣東）科技有限公司提供（批號：QN2021042205）；水（杭州娃哈哈集團有限公司）；常規分析純（AR）試劑石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇等均購于廣州化學試劑廠。

1.2 儀器與耗材

Avance Ⅲ 600 型核磁共振波譜儀（德國布魯克公司）；Xevo G2-XS Qtof 型高分辨質譜儀（美國沃特世公司）；Nicolet iS5 FT-IR 型傅里葉紅外光譜儀（美國賽默飛公司）；Photophysics Chirascan 型圓二色譜儀（英國應用光物理公司）；MCP200 型自動旋光儀（德國安東帕公司）；BS110S 型分析天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；P230 型高效液相色譜儀、DAD230+二極管陣列檢測器（大連依利特分析儀器有限公司）；SB-Phenyl 色譜柱（250 mm×9.4 mm，5 μm，安捷倫公司）；柱色譜用硅膠（100～200 目），薄層色譜用硅膠G、H、GF254均購于青島海洋化工有限公司。

2 提取與分離

奇楠沉香CO2超臨界提取物100.0 g 經硅膠柱色譜分離，使用石油醚-乙酸乙酯溶劑系統進行梯度系統洗脫（40∶1、30∶1、20∶1、15∶1、10∶1、8∶1、6∶1、3∶1、1∶1、0∶1），得Fr.A～Fr.J。Fr.A 經硅膠柱色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯（100∶1、80∶1、60∶1、40∶1、20∶1、1∶1）梯度洗脫得Fr.A1～Fr.A6，其中Fr.A5 經半制備液相色譜分離，以65%甲醇等度洗脫得化合物7（1.5 mg，tR=21.3 min）。Fr.B經半制備液相色譜分離純化，乙腈-水（55∶45）等度洗脫，得到化合物1（20.3 mg，tR=25.3 min）和混合物Fr.B2；Fr.B2以乙腈-水（60∶40）等度洗脫，得到化合物2（2.6 mg，tR=38.5 min）。Fr.C 經半制備液相色譜分離，以60%甲醇等度洗脫得到混合物Fr.C-1，進一步使用45%甲醇等度洗脫得到化合物9（1.6 mg，tR=45.0 min）。

Fr.D 部位經硅膠柱色譜，以石油醚-乙酸乙酯（100∶1、50∶1、10∶1、8∶1、4∶1、2∶1、1∶1、0∶1）梯度洗脫，得Fr.D1～Fr.D8。Fr.D1經半制備液相色譜分離，以60%甲醇等度洗脫得到化合物13（5.8 mg，tR=55.9 min）。Fr.D2 經半制備液相色譜，以60%甲醇等度洗脫得到化合物5（22.9 mg，tR=45.3 min）和13（449.0 mg，tR=55.0 min）。Fr.D4經半制備液相色譜分離，以60%甲醇等度洗脫得到化合物15（95.7 mg，tR=57.3 min）。Fr.D5 經半制備液相色譜分離，以70%甲醇等度洗脫得到混合物Fr.D5-1、化合物15（930.6 mg，tR=27.3 min）和化合物16（6.9 mg，tR=34.8 min）。Fr.D5-1 經55%甲醇等度洗脫得到化合物3（17.8 mg，tR=48.4 min）和8（3.3 mg，tR=32.1 min）。Fr.D7 經半制備液相色譜分離，以55%甲醇等度洗脫得到化合物12（13.3 mg，tR=38.5 min）。Fr.E經半制備液相色譜分離，以60%甲醇等度洗脫得到化合物4（1.9 mg，tR=11.5 min）。Fr.F經重結晶，得到Fr.FA 和Fr.FB。Fr.FA 經半制備液相色譜分離，以60%甲醇等度洗脫，得化合物17（1.5 mg，tR=9.0 min）和混合物Fr.F-1。混合物Fr.F-1 經45%甲醇等度洗脫，得到化合物11（6.4 mg，tR=38.6 min）。Fr.FB 經半制備液相色譜分離，以60%甲醇等度洗脫得到化合物10（2.9 mg，tR=30.0 min）和11（3.9 mg，tR=33.2 min）。Fr.G 經半制備液相色譜分離，以70%甲醇等度洗脫，得化合物14（8.06 mg，tR=17.3 min）。Fr.I 經半制備液相色譜分離，以60%甲醇等度洗脫，得到混合物Fr.I-1，進一步使用50%甲醇等度洗脫，得到化合物6（8.1 mg，tR=28.4 min）。

3 結構鑒定

化合物1：無色油狀物，分子式為C15H20O2，電噴霧離子源-質譜法（ESI-MS）m/z: 233.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 9.51 (1H,s,12-CHO),6.27 (1H,s,H-13),5.97 (1H,s,H-13),0.84 (3H,s,H-14),9.40 (1H,s,15-CHO)；13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 39.7 (C-1),16.0 (C-2),142.2 (C-3),153.8(C-4),32.3 (C-5),27.2 (C-6),37.1 (C-7),27.2 (C-8),43.6 (C-9),36.6 (C-10),154.9 (C-11),133.8 (C-12),195.3 (C-13),26.6 (C-14),195.0 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[20]，故鑒定化合物1 為12,15-二酮基-α-芹子烯。

化合物2：淡黃色油狀物，分子式為C16H22O3，ESI-MSm/z: 263.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 6.25 (1H,s,H-13α),5.63 (1H,s,H-13β),1.21 (3H,s,H-14),10.17 (1H,s,15-CHO),3.77 (3H,s,12-OCH3);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 39.5 (C-1),18.0 (C-2),24.0 (C-3),133.2 (C-4),163.5 (C-5),30.0 (C-6),41.6 (C-7),27.4 (C-8),41.5 (C-9),36.8(C-10),144.4 (C-11),167.5 (C-12),123.8 (C-13),25.4 (C-14),191.1 (C-15),52.1 (12-OCH3)。以上數據與文獻報道基本一致[21-22]，故鑒定化合物2 為15-酮基-桉葉烷-4,11(13)-二烯-12-甲酯。

化合物3：無色油狀物，分子式為C15H24O2，ESI-MSm/z: 237.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 5.31 (1H,t,J=1.8 Hz,H-3),2.00 (1H,m,H-5),2.05 (1H,m,H-7),3.90 (1H,m,H-8),4.10 (2H,m,H-12),5.22 (1H,s,H-13),5.08 (1H,s,H-13),1.59(3H,s,CH3-14),0.85 (3H,s,CH3-15);13C-NMR(150 MHz,CDCl3)δ: 37.8 (C-1),22.9 (C-2),121.5(C-3),134.1 (C-4),46.6 (C-5),30.1 (C-6),51.6 (C-7),70.7 (C-8),48.5 (C-9),34.1 (C-10),151.1 (C-11),112.9 (C-12),66.1 (C-13),21.5 (C-14),16.9 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[23-24]，故鑒定化合物3為petafolia A。

化合物4：無色油狀物，分子式為C15H22O2，ESI-MSm/z: 235.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 1.39 (1H,m,H-1α),1.60 (1H,m,H-1β),1.65 (2H,m,H-2),2.35 (1H,m,H-3α),2.15 (1H,m,H-3β),1.50 (1H,m,H-6α),3.43 (1H,dd,J=10.8,1.8 Hz,H-6β),2.18 (1H,m,H-7),1.70 (1H,m,H-8α),1.15 (1H,m,H-8β),2.08 (2H,m,H-9),5.12 (1H,s,H-12α),5.00 (1H,s,H-12β),4.17 (2H,br s,H-13),1.21 (3H,s,CH3-14),10.17 (1H,s,H-15);13C-NMR(150 MHz,CDCl3)δ: 41.7 (C-1),17.9 (C-2),24.0 (C-3),133.0 (C-4),164.1 (C-5),29.8 (C-6),43.3 (C-7),27.8 (C-8),39.5 (C-9),36.9 (C-10),152.6 (C-11),65.4 (C-12),109.2 (C-13),25.3 (C-14),191.0 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[20,25]，故鑒定化合物4為12-羥基-4(5),11(13)-桉葉二烯-15-醛。

化合物5：無色油狀物，分子式為C15H20O2，ESI-MSm/z: 233.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 9.54 (1H,s,12-CHO),6.33 (1H,s,H-13),6.06 (1H,s,H-13),1.21 (3H,s,H-14),10.14 (1H,s,15-CHO);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 39.5 (C-1),17.9 (C-2),23.9 (C-3),133.3 (C-4),163.1 (C-5),29.1 (C-6),38.5 (C-7),26.9 (C-8),41.4 (C-9),36.6(C-10),153.6 (C-11),194.5 (C-12),133.8 (C-13),25.3 (C-14),191.1 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[20]，故鑒定化合物5 為12,15-二酮基-芹子-4,11-二烯。

化合物6：無色油狀物，分子式為C15H22O3，ESI-MSm/z: 251.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 1.42 (1H,m,H-1α),1.60 (1H,m,H-1β),1.65 (2H,m,H-2),2.34 (1H,m,H-3α),2.05 (1H,m,H-3β),1.49 (1H,m,H-6α),3.37 (1H,dd,J=14.4,3.6 Hz,H-6β),2.15 (1H,t,J=3.0 Hz,H-7),4.02 (1H,td,J=10.8,3.0 Hz,H-8),2.02 (1H,dd,J=10.2,4.2 Hz,H-9α),1.42 (1H,d,J=10.2 Hz,H-9β),5.29 (1H,s,H-12α),5.15(1H,s,H-12β),4.15 (1H,br s,H-13α),4.20 (1H,br s,H-13β),1.25 (3H,s,CH3-14),10.14(1H,s,H-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 39.2 (C-1),17.6 (C-2),23.8 (C-3),133.5 (C-4),161.3 (C-5),29.1 (C-6),51.6 (C-7),69.5 (C-8),49.1 (C-9),38.1(C-10),149.3 (C-11),65.9 (C-12),114.5 (C-13),26.2(C-14),191.3 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[26]，故鑒定化合物6 為 (7S,8R,10S)-(+)-8,12-二羥基-芹子-4,11-二烯-14-醛。

化合物7：無色油狀物，分子式為C15H24O3，ESI-MSm/z: 275.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 2.81 (1H,dd,J=13.2,4.2 Hz,H-4),1.25(3H,s,H-12),1.48 (3H,s,H-13),1.02 (3H,s,H-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 37.0 (C-l),20.4 (C-2),28.3 (C-3),47.8 (C-4),86.5 (C-5),36.5 (C-6),43.8(C-7),24.4 (C-8),35.6 (C-9),38.2 (C-10),84.8 (C-11),23.4 (C-12),30.8 (C-13),175.3 (C-14),23.5 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[27]，故鑒定化合物7為白木香酸。

化合物8：無色油狀物，分子式為C15H22O2，ESI-MSm/z: 235.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 4.44 (1H,t,J=3.0 Hz,H-1),1.60 (1H,m,H-4),3.02 (1H,dd,J=5.4,10.2 Hz,H-7),5.88 (1H,s,H-9),1.79 (3H,s,H-12),4.94 (1H,m,H-13),4.81(1H,m,H-13),1.30 (3H,s,CH3-14),0.97 (3H,d,J=6.6 Hz,CH3-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 74.8(C-1),32.5 (C-2),25.5 (C-3),40.7 (C-4),38.6 (C-5),42.6 (C-6),51.0 (C-7),200.8 (C-8),125.0 (C-9),168.1 (C-10),143.9 (C-11),21.4 (C-12),113.8 (C-13),21.3 (C-14),16.0 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[28]，故鑒定化合物8 為1α-羥基-7βH-荒漠木-9,11-二烯-8-酮。

化合物9：無色油狀物，分子式為C15H22O2，ESI-MSm/z: 235.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 1.85 (1H,m,H-4),2.00 (1H,m,H-7),5.74(1H,s,H-9),1.28 (3H,s,CH3-12),2.70 (1H,d,J=1.2 Hz,H-13),2.82 (1H,d,J=3.6 Hz,H-13),1.10(3H,s,CH3-14),0.95 (3H,d,J=4.8 Hz,CH3-15);13CNMR (150 MHz,CDCl3)δ: 33.3 (C-1),29.9 (C-2),30.4 (C-3),38.0 (C-4),40.4 (C-5),34.2 (C-6),49.7(C-7),197.0 (C-8),122.5 (C-9),173.6 (C-10),56.4(C-11),17.5 (C-12),56.2 (C-13),21.3 (C-14),16.4(C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[29]，故鑒定化合物9為7α-H-9(10)-烯-11,12-環氧-8-氧代荒漠木烷。

化合物10：無色油狀物，分子式為C15H22O2，ESI-MSm/z: 235.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 3.67 (1H,m,H-2),1.85 (1H,m,H-4),3.01 (1H,m,H-7),5.83 (1H,s,H-9),1.77 (3H,s,CH3-12),4.73(1H,t,J=1.8 Hz,H-13),4.95 (1H,t,J=1.8 Hz,H-13),1.00 (3H,s,CH3-14),0.97 (3H,d,J=7.2 Hz,CH3-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 42.4 (C-1),71.8 (C-2),37.1 (C-3),35.9 (C-4),39.4 (C-5),39.6 (C-6),50.7(C-7),199.6 (C-8),125.1 (C-9),166.5 (C-10),143.7(C-11),20.9 (C-12),114.1 (C-13),20.1 (C-14),15.9(C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[23-24]，故鑒定化合物10為petafolia B。

化合物11：無色油狀物，分子式為C15H24O2，ESI-MSm/z: 237.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 5.76 (1H,s,H-1),2.20～2.30 (2H,m,H-3),1.98(1H,m,H-4),2.03 (1H,m,H-6α),0.99 (1H,m,H-6β),1.72 (1H,m,H-7),1.18 (2H,m,H-8),2.47 (2H,m,H-9),1.19 (3H,s,CH3-12),1.21 (3H,s,CH3-13),1.08 (3H,s,CH3-14),0.97 (3H,d,J=6.6 Hz,CH3-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 124.7 (C-1),200.1 (C-2),42.3 (C-3),40.8 (C-4),39.4 (C-5),39.8 (C-6),44.1 (C-7),27.9 (C-8),33.2 (C-9),171.1 (C-10),72.7 (C-11),27.1 (C-12),27.6 (C-13),17.2 (C-14),15.2 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[30]，故鑒定化合物11為11-羥基-瓦倫-1(10)-烯-2-酮。

化合物12：無色油狀物，分子式為C15H26O2，ESI-MSm/z: 239.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 5.63 (1H,t,J=3.0 Hz,H-7),4.12 (2H,s,H-14),2.08 (1H,m,H-8a),2.05 (1H,m,H-3),1.95(1H,m,H-8b),1.75 (1H,m,H-4a),1.72 (1H,m,H-1a),1.70 (1H,m,H-9a),1.68 (1H,m,H-4b),1.67(1H,m,H-2a),1.61 (1H,m,H-10),1.43 (1H,m,H-9b),1.42 (1H,m,H-1b),1.38 (1H,m,H-2b),1.20(6H,s,CH3-12/13),0.90 (3H,d,J=6.6 Hz,CH3-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 35.9 (C-1),27.6 (C-2),53.1 (C-3),39.6 (C-4),47.6 (C-5),144.2 (C-6),122.7 (C-7),22.4 (C-8),27.1 (C-9),39.3 (C-10),72.1 (C-11),28.4 (C-12),28.4 (C-13),64.9 (C-14),15.5 (C-15)。以上數據與文獻報道基本一致[24]，故鑒定化合物12為白木香醇。

化合物13：淡黃色粉末，分子式為C17H14O2，ESI-MSm/z: 251.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 8.18 (1H,m,H-5),7.34 (8H,m,H-6～8,2'～6'),6.16 (1H,s,H-3),3.00 (4H,m,H-11/12);13CNMR (150 MHz,CDCl3)δ: 168.7 (C-2),110.5 (C-3),178.6 (C-4),125.2 (C-5),125.9 (C-6),133.8 (C-7),118.1 (C-8),123.9 (C-9),156.7 (C-10),36.4 (C-11),33.2 (C-12),139.9 (C-1'),128.9 (C-2'/6'),128.5 (C-3'/5'),126.8 (C-4')。以上數據與文獻報道基本一致[31]，故鑒定化合物13為2-(2-苯乙基)色酮。

化合物14：白色粉末，分子式為C18H16O4，ESIMSm/z: 297.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 6.14 (1H,s,H-3),8.17 (1H,dd,J=1.8,7.8 Hz,H-5),7.38 (1H,t,J=6.6 Hz,H-6),7.65 (1H,m,H-7),7.44 (1H,d,J=8.4 Hz,H-8),2.89 (2H,m,H-11),2.95 (2H,m,H-12),6.65 (1H,dd,J=1.8,7.8 Hz,H-2'),6.75 (1H,d,J=7.8 Hz,H-3'),6.79 (1H,d,J=1.8 Hz,H-6'),3.85 (3H,s,4'-OCH3);13C-NMR(150 MHz,CDCl3)δ: 168.8 (C-2),110.4 (C-3),178.6(C-4),125.8 (C-5),125.2 (C-6),133.8 (C-7),118.1(C-8),156.6 (C-9),123.8 (C-10),36.5 (C-11),32.5(C-12),133.1 (C-1'),119.8 (C-2'),110.9 (C-3'),145.5 (C-4'),145.9 (C-5'),114.7 (C-6'),56.1 (4'-OCH3)。以上數據與文獻報道基本一致[13]，故鑒定化合物14為奇楠沉香酮A。

化合物15：淡黃色粉末，分子式為C18H16O3，ESI-MSm/z: 281.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 6.13 (1H,s,H-3),8.17 (1H,d,J=6.6 Hz,H-5),7.63 (1H,t,J=8.4 Hz,H-6),7.35 (1H,t,J=15.0 Hz,H-7),7.43 (1H,d,J=8.4 Hz,H-8),3.00(2H,t,J=6.0 Hz,H-11),2.91 (2H,t,J=6.0 Hz,H-12),6.82 (2H,d,J=7.8 Hz,H-2'/6'),7.11 (2H,d,J=7.8 Hz,H-3'/5'),3.80 (3H,s,4'-OCH3);13C-NMR(150 MHz,CDCl3)δ: 168.6 (C-2),110.2 (C-3),178.3(C-4),125.0 (C-5),125.6 (C-6),133.6 (C-7),117.9(C-8),123.7 (C-9),156.4 (C-10),36.4 (C-11),32.1(C-12),131.7 (C-1'),129.3 (C-2'/6'),114.0 (C-3'/5'),158.2 (C-4'),55.2 (4'-OCH3)。以上數據與文獻報道基本一致[31]，故鑒定化合物15 為4'-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮。

化合物16：淡黃色粉末，分子式為C19H18O4，ESI-MSm/z: 311.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 6.13 (1H,s,H-3),7.54 (1H,s,H-5),7.25(1H,dd,J=3.6,9.0 Hz,H-7),7.37 (1H,d,J=9.0 Hz,H-8),2.89 (2H,m,H-11),3.00 (2H,m,H-12),7.11(2H,d,J=8.4 Hz,H-2'/6'),6.82 (2H,d,J=8.4 Hz,H-3'/5'),3.80 (3H,s,4'-OCH3),3.89 (3H,s,6-OCH3);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 168.6 (C-2),109.7 (C-3),178.5 (C-4),104.9 (C-5),151.5 (C-6),123.8 (C-7),119.5 (C-8),157.0 (C-9),124.5 (C-10),36.6 (C-11),32.4 (C-12),132.0 (C-1'),129.5 (C-2'/6'),114.2 (C-3'/5'),158.4 (C-4'),55.5 (4'-OCH3),56.2(6-OCH3)。以上數據與文獻報道基本一致[32]，故鑒定化合物16 為6-甲氧基-2-[2-(4'-甲氧基苯乙基)色酮。

化合物17：白色粉末，分子式為C9H10O4，ESIMSm/z: 183.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 9.82 (1H,s,-CHO),7.16 (2H,s,H-2/6),3.98 (6H,s,3/5-OCH3);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 191.1(-CHO),128.3 (C-1),106.9 (C-2/6),147.5 (C-3/5),142.3 (C-4),56.7 (3/5-OCH3)。以上數據與文獻報道基本一致[33-34]，故鑒定化合物17為丁香醛。

4 神經保護活性篩選

采用體外法測定化合物對CORT 誘導的PC12 細胞損傷的保護作用[35]。PC12 細胞按常規方法培養，在96孔板中接種對數生長期細胞，使細胞濃度為5×104個/mL，每孔加入100 μL，置于37 ℃含5% CO2的培養箱中培養24 h。設置空白組、模型組、陽性對照地西泮組、實驗組。空白組中加入不完全培養基200 μL，不做任何處理；模型組用CORT 200 μL（終濃度為200 μmol·L-1）處理；地西泮組加入3.125 μg·mL-1地西泮100 μL（地西泮產生毒性的血藥質量濃度為30 μg·mL-1，故給藥劑量設其1/10劑量）處理細胞；實驗組以CORT 100 μL（終濃度為200 μmol·L-1）和相應藥物（預實驗檢測化合物對PC12 細胞存活率影響，化合物以質量濃度50.000 0、25.000 0、12.500 0、6.250 0、3.125 0、1.562 5 μg·mL-1給藥）。各組細胞置于37 ℃含5%CO2的培養箱中培養24 h，精密吸取含藥培養基100 μL，加入CCK-8 10 μL，置于37 ℃含5% CO2的培養箱中孵育1～2 h 后，將96 孔板置于酶標儀450 nm 波長處測定吸光度（A），按照公式（1）計算細胞存活率。結果見表1。

表1 化合物對CORT誘導PC12細胞存活率的影響（±s,n=3）

表1 化合物對CORT誘導PC12細胞存活率的影響（±s,n=3）

注：與對照組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。

結果發現，CORT 誘導細胞損傷后的細胞存活率為48.78%，給予受試藥物后不同化合物不同質量濃度下細胞存活率出現不同程度升高，存活率為50.35%～91.36%，表明化合物對CORT 誘導的PC12細胞有明顯的保護作用，其中化合物2和4活性較強。

5 討論

本研究對奇楠種質產奇楠沉香的超臨界提取物化學成分進行分離與純化研究，共得到17 個化合物，其中12個倍半萜類化合物和4個色酮類化合物。從結構類型上分析，桉烷型和艾里莫芬烷型是奇楠沉香超臨界提取物中芳香倍半萜的主要成分，2-(2-苯乙基)色酮母核及其4'-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮是奇楠沉香中色酮類的大量成分。從結構特點上分析，桉烷型倍半萜普遍在C-12 位或C-15 位有醛基存在，艾里莫芬烷型倍半萜普遍存在α,β-不飽和酮片段。通過奇楠沉香超臨界提取物與水蒸氣蒸餾揮發油成分的研究比較[36-37]，發現2 種提取物均富含2-(2-苯乙基)色酮類化合物，其中2-(2-苯乙基)色酮與2-[2-(4'-甲氧基苯乙基)色酮的含量較高；但其倍半萜類成分存在差異，水蒸氣蒸餾的揮發油中倍半萜類成分有莫芬烷型、愈創木烷型及桉烷型等，而奇楠沉香超臨界提取物中倍半萜主要是按烷型、艾里莫芬烷型及沉香螺烷型，未見愈創木烷型倍半萜類成分。本研究豐富了奇楠沉香的化學成分數據，發現了化合物1、2、4 和5 具有較強的保護CORT 誘導的PC12細胞損傷活性，為奇楠沉香的進一步開發和利用提供了參考。