2018—2022 年四川省達州市獸醫系統實驗室檢測能力比對分析

李清竹，徐倚天，劉俐君，趙小波，楊 青，張 蕾，黎丁箕，李 成

（達州市動物疫病預防控制中心，四川達州 635000）

為科學評估達州市獸醫系統實驗室檢測水平，達州市動物疫病預防控制中心（以下簡稱市疫控中心）于2018—2022 年期間組織轄區內7個縣級獸醫實驗室開展獸醫系統實驗室檢測能力比對工作。本文通過對比對結果分析，提出針對性整改措施，以期進一步提高全市獸醫系統實驗室檢測水平，增強達州市動物疫病監測預警能力。

1 材料與方法

1.1 比對范圍

達州市內轄區7 個縣級獸醫實驗室，其中5個實驗室已通過省級考核或延展考核驗收。

1.2 比對項目、檢測方法、試劑來源和執行標準

2018—2022 年，每年比對3～5 個檢測項目，共比對項目17 個。比對項目包括禽流感、口蹄疫、布魯氏菌病、非洲豬瘟的病原學或血清學檢測（詳情見表1）。涉及5 種檢測方法：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、血凝與血凝抑制試驗（HA-HI）、熒光聚合酶鏈式反應（熒光PCR）、布魯氏菌試管凝集試驗（SAT）、以及布魯氏菌虎紅平板凝集試驗（RBT）。

表1 2018—2022 年檢測能力比對項目

1.3 比對樣品和試劑

比對樣品由市疫控中心自制或試劑廠家生產，經市疫控中心反復驗證、編號、分裝，標定樣品參考值后發放，各參考值的樣品數量不一致。每個比對項目設置4～6 個盲樣，各樣品外觀無差異，樣品量相同。除2022 年非洲豬瘟病毒核酸檢測、禽流感H5/H7 亞型核酸檢測2 個項目以外，其余比對項目試劑均由市疫控中心統一購置。

1.4 比對樣品發放方式

比對樣品由市疫控中心統一發放，縣級獸醫實驗室派專人在限定日期內到市疫控中心實驗室領取，放入裝有冰袋的保溫箱中保存，并在12h內送達各自實驗室后按具體要求存放。

1.5 評判標準

1.5.1 禽流感H5、H7 亞型抗體檢測

陰、陽性對照成立，檢測結果與參考值相同或者±1 個滴度，判定為結果正確。

1.5.2 O 型口蹄疫抗體檢測

陰、陽性對照成立，陽性樣品、若弱陽性樣品檢測結果為“陽性”，陰性樣品的結果為“陰性”，判定為結果正確。

1.5.3 非洲豬瘟病毒核酸、禽流感H5/H7 亞型核酸檢測

陰、陽性對照成立，陽性樣品、若弱陽性樣品的檢測結果為“陽性”，陰性樣品的結果為“陰性”，判定為結果正確。

1.5.4 布魯氏菌抗體檢測

使用試管凝集試驗，虎紅平板試驗進行檢測：陰、陽性對照成立，若陽性樣品的檢測結果為“陽性”，陰性樣品的結果為“陰性”，判定為結果正確。

1.6 比對結果報告

縣級實驗室每年在規定時間內獨立完成各項目檢測，及時向市疫控中心上報檢測結果，同時報送檢測報告及原始記錄。

2 結果分析

2.1 總體比對結果

2018—2022 年，7 個縣級獸醫實驗室共檢測602 份盲樣，檢測結果正確有573 份，總體正確率為95.18%。

2.2 不同年度比對結果

2018—2022 年，各年份檢測結果準確率分別為99.05%、85.71%、93.33%、95.24%、100%，呈先下降后穩步上升趨勢。

2.3 不同實驗室比對結果差異

2.3.1 不同年份

2018 年有6 個縣級實驗室檢測結果準確率為100%；2019 年有2 個實驗室準確率為100%，但也有3 個實驗室的準確率在85%以下；2020 年不同檢測準確率范圍（100%，85%～99%，85%以下）的縣級實驗室個數分別為：3、3、1；2021年100%準確的實驗室為5 個，但有1 個實驗室準確率在85%以下；2022 年7 個縣級實驗室的檢測準確率均為100%。

2.3.2 不同縣

2.3.2.1 總體情況

G 縣獸醫實驗室檢測準確率最高，為98.84%；E 縣實驗室準確率為90.70%，最低；7 個縣級實驗室檢測準確率均達到了90%以上。

2.3.2.2 不同年份

A 縣實驗室2018 和2022 年的檢測結果準確率均為100%，2019、2020 年分別為86.67%，2021 年為94.44%；

B 縣實驗室2019 年準確率為80%，其余各年檢測結果正確率均達100%；

C 縣實驗室2019 年檢測結果準確率為86.67%，其余各年的均為100%；

D 縣實驗室2021、2022 年檢測結果正確率均為100%，2018、2019、2020 年分別為93.33%、66.67%和93.33%；

E 縣實驗室2019、2021 年檢測準確率分別為80.00%、72.22%，其余3 年均為100%；

F 縣實驗室除2020 年檢測結果準確率為80.00%，其余4 年的均為100%；

G 縣實驗室除2020 年檢測結果準確率為93.33%，其余4 年的均為100%。

2.3.2.3 不同檢測方法

A～G 縣實驗室ELISA 檢測結果準確率在92.31%～100%；HA-HI 方法檢測結果準確率在61.90%～100%，其中E 縣的為61.90%，D 縣的為76.19%，其余縣的均在90%以上；除D 縣的SAT 方法檢測結果準確率為92.86%，其余縣的均為100%；熒光PCR 方法A、D、F、G 縣檢測結果準確率均為95.24%，B、C、E 縣的為100%；A～G 縣RBT 方法的準確率均為100%（圖1）。

圖1 不同縣級實驗室不同檢測方法檢測準確率

2.4 不同檢測項目比對結果差異

項目實驗室符合率在28.57%～100%，2019年禽流感H7 亞型抗體檢測項目實驗室符合率最低，僅為28.57%，2020 年非洲豬瘟病毒核酸檢測項目的為42.86%，其余各項目的實驗室符合率均在85%以上。各項目檢測結果準確率在62.86%～100%，除2019 年的禽流感H7 亞型抗體檢測項目的檢測結果準確率為62.86%，其余各項目的均在85%以上。

2.5 不同檢測方法比對結果差異

在2018—2022 年，ELISA、HA-HI、熒 光PCR、SAT 和RBT 的總體檢測結果正確率分別為97.80%、86.39%、97.28%、98.98%、100%（表2）。從各年份的檢測結果來看，除2019 年HA-HI 檢測準確率為62.86%，其余各年份各方法比對結果準確率均在85%以上。

表2 不同檢測方法檢測正確率統計 單位：%

3 討論

達州市獸醫系統實驗室檢測能力比對項目設置上，充分考慮了當地實際情況，針對各階段的重點防控病種，結合縣級獸醫實驗室基礎設施等條件，盡可能覆蓋實驗室檢測工作常用的ELISA、HA-HI、熒光PCR 等多種檢測方法。

3.1 總體水平

2018—2022 年總體準確率為95.18%，總體檢測水平高，能滿足非洲豬瘟、禽流感、口蹄疫等主要動物疫病檢測需要[1]，說明縣級獸醫實驗室能夠為達州市動物疫病監測預警乃至疫病防控體系提供堅實的技術支撐。除2019 年準確率為85.71%，其余年份準確率均在93.33%及以上，表明達州市獸醫系統實驗室整體檢測能力水平高但略微不穩定。

3.2 不同實驗室檢測水平差異

各縣級實驗室檢測能力不同，部分實驗室的檢測準確率較低。從檢測能力與穩定性來看，A、B、C、G、F 縣檢測水平高且穩定，D、E 縣檢測能力稍弱且波動起伏大，可能與D、E 縣的實驗室財政資金不足，個別檢測項目技術不熟練有關。總體而言，縣級實驗室能較好掌握常用的5種檢測方法，但個別縣的個別檢測方法檢測能力不足，如E 縣對HA-HI 方法掌握程度較低。

3.3 不同檢測項目差異

2019 年禽流感H7 亞型抗體檢測項目（HAHI 方法）和2020 年非洲豬瘟病毒核酸檢測項目（熒光PCR 方法）實驗室符合率或檢測準確率偏低。可能是HA-HI 法受器材、稀釋液、抗原、待檢血清、紅細胞、人員操作等因素影響，試驗結果易出現偏差[2]；2020 年各縣級實驗室初步具備熒光PCR 檢測能力，首次進行該項目比對，實際操作經驗不足，技術不熟練。且熒光PCR 從樣品處理、核酸提取、擴增到結果判定，步驟復雜，對操作人員技術要求較高，可能造成結果差別較大[3]。

3.4 不同檢測方法差異

HA-HI 法準確率僅有86.39%，其余4 種檢測方法準確率均在97.28%以上，說明縣級實驗室能熟練掌握RBT、SAT、ELISA、熒光PCR 4 種方法，但HA-HI 方法是檢測薄弱點，需強化培訓指導與實際操作。出現上述結果可能與各檢測方法的特點有關，RBT 是實驗室日常監測布魯氏菌病、基層大量初篩的最常見方法[4]，其特點是操作簡便、省時省力；SAT 是布病抗體檢測的復核方法，準確率高，特異性強，但耗時長[5]；ELISA是獸醫實驗室最常用的血清學檢測方法，通常采用商品化試劑且結果判定使用儀器讀數[6]，操作簡便，準確率高。相對而言，HA-HI 法和熒光PCR法的操作相對復雜，對操作人員技術要求較高。

3.5 檢測報告、原始記錄存在的問題

各縣獸醫實驗室遞交的檢測報告、原始記錄都存在一些問題，主要包括：①檢測原始記錄不完善，部分記錄出現原始記錄填寫不詳盡、不規范、不完整、不清晰等現象；②檢測報告不規范，存在蓋章不全、三級審核簽字不齊、檢測信息填寫不當等情況[7]。這些問題的出現與工作人員的職業素養相關，部分問題可能會對實驗結果造成一定的影響。

4 小結

在2018—2022 年達州市獸醫系統實驗室檢測能力比對中，各縣級獸醫實驗室均展現出了較高的檢測能力，但部分實驗室存在著檢測水平不穩定的問題、對個別檢測方法能力不足、也存在著檢測報告不規范、原始記錄不完善等問題。縣級獸醫實驗室應當以比對試驗為契機，針對出現的問題進行整改，提升自身檢測能力。可以通以下些工作提高檢測能力：認真總結經驗，深入查找不足，解決存在問題；積極爭取資金，升級檢測設施；深化實驗室建設，培養檢測人才；加強人員培訓考核，重視檢測質量。從而進一步提高全市獸醫系統實驗室檢測水平，增強達州市動物疫病監測預警能力。