江蘇草莓二斑葉螨對5種殺螨劑的抗藥性監測

江改青 黃孟麗 李雪銀 邢夢珂 張博文

（南京市食品藥品監督檢驗院，江蘇南京 211198）

二斑葉螨（TetranychusurticaeKoch） 隸屬蛛形綱（Arachnida）、蜱螨亞綱（Acari）、真螨目（Acariformes），廣泛分布于世界各溫帶、亞熱帶地區，是當前設施草莓生產上的首要害蟲（Bi et al.，2016；何秉青 等，2023）。成螨和若螨在草莓葉片背面吸食汁液，導致葉片沿葉脈兩側出現白色斑點，危害嚴重時大量二斑葉螨聚集吐絲結網，葉片逐漸焦枯脫落，植株生長受到抑制，影響草莓產量和品質，甚至造成絕收（Walsh et al.，2002；Wang et al.，2018；陳鵬和劉奇志，2022）。近年來，隨著江蘇省草莓種植面積的擴大，連作年份的增加，以及普遍采用的匍匐莖苗分株育苗方法，草莓二斑葉螨發生逐年加重。

化學防治仍是防治二斑葉螨的主要手段（韓旸 等，2023）。然而，由于二斑葉螨體型小，繁殖速度快，發育周期較短，世代重疊十分嚴重，而且既能兩性生殖也可孤雌生殖，加上化學藥劑的長期、大量及不合理使用等原因，導致二斑葉螨對多種化學藥劑產生了抗藥性（劉慶娟 等，2011；Xu et al.，2018；Chen et al.，2019；李鑒鑒 等，2020；韓旸 等，2023）。鑒于用藥種類和施藥頻率等方面的差異，不同地區二斑葉螨種群抗藥性不同，同一種群不同藥劑之間抗藥性也不同（Xu et al.，2018；Chen et al.，2019）。本研究采用葉片浸漬法測定了南京溧水、棲霞、高淳、江寧，鎮江白兔，泰州泰興，常州嘉澤，徐州碾莊等江蘇8 個地區草莓二斑葉螨田間種群對5 種常用殺螨劑的抗藥性水平，比較了殺螨劑在不同地區間的敏感性差異，旨在明確江蘇省草莓二斑葉螨田間種群的抗藥性現狀，為二斑葉螨的可持續防控提供數據支撐。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

二斑葉螨敏感種群：由江蘇省農業科學院提供，于室內不接觸任何藥劑情況下繼代飼養。

二斑葉螨抗性種群：分別于2022—2023 年，采自江蘇南京市溧水區白馬鎮、棲霞區八卦洲、高淳區漆橋鎮、江寧區江寧鎮，鎮江市白兔鎮，泰州市泰興鎮，常州市嘉澤鎮，徐州市碾莊鎮等8 個地區的草莓種植大棚（表1）。將采集到的二斑葉螨種群分別接種到盆栽草莓（品種為紅顏）葉片上飼養，飼養1 代，隨機取雌雄成螨進行生物測定。室內飼養條件：溫度（25 ± 1）℃，相對濕度60% ± 5%，光周期（晝∶夜） = 16 h∶8 h。

表1 草莓二斑葉螨田間種群采集點信息

1.2 供試藥劑

30%乙唑螨腈懸浮劑（沈陽科創化學品有限公司），43%聯苯肼酯懸浮劑（愛利思達生物化學品有限公司），30%腈吡螨酯懸浮劑（日產化學株式會社），20%丁氟螨酯懸浮劑（江蘇省蘇州富美實植物保護劑有限公司），3%阿維菌素微乳劑（陜西上格之路生物科學有限公司）。

1.3 藥劑毒力測定方法

所有藥劑均采用改進的葉片浸漬法進行測定（李鑒鑒 等，2020）。在預備試驗的基礎上，首先將每個藥劑稀釋成5 個系列濃度藥液，并設置清水處理作為空白對照，每個濃度重復3 次。選取生理狀態一致的成螨，接種到新采集草莓葉片背面，每片復葉接30 頭成螨，待二斑葉螨在葉片上穩定取食后（約12 h，以將有螨葉片放入水中，螨掉落數＜ 20%為標準），將有成螨的葉片浸入各濃度藥液中，輕輕搖動，5 s 后取出，用濾紙吸去多余藥液。然后將草莓葉片葉柄放入一次性水杯（150 mL）中，加入50 mL 自來水。待藥液晾干后，統計葉片上的二斑葉螨數量，作為供試基數。將處理的葉螨置于溫度（25 ± 1）℃、相對濕度60% ± 5%、光周期（晝∶夜） = 16 h∶8 h 培養箱中飼養，并于48 h 后記錄死亡的螨數。用毛筆輕觸螨體，螨足不動者視為死亡。統計各處理的總螨蟲數、死亡數及存活數。

1.4 數據分析

采用DPS v7.05 數據處理軟件處理數據，根據劑量對數和校正死亡率幾率值的直線回歸法，求出毒力回歸方程、LC50值95%置信區間和相關系數r。抗性倍數（RR） = 田間種群的LC50值/室內敏感種群的LC50值。二斑葉螨抗藥性水平的分級標準（Xu et al.，2018）：敏感水平（RR ＜ 3）、敏感度下降（3≤ RR ＜ 5）、低水平抗性（5 ≤ RR ＜ 10）、中水平抗性（10 ≤ RR ＜ 40）、高水平抗性（40 ≤ RR ＜160）、極高水平抗性（RR ≥ 160）。

2 結果與分析

2.1 草莓二斑葉螨對乙唑螨腈的抗藥性

不同地區草莓二斑葉螨對30%乙唑螨腈懸浮劑的抗藥性水平有明顯差異（表2）。8 個田間種群對30%乙唑螨腈懸浮劑處于敏感至中水平抗性（RR = 1.524～36.267）。其中，南京溧水、鎮江白兔、泰州泰興、徐州碾莊4 個地區種群均處于敏感水平；南京棲霞和常州嘉澤種群處于敏感度下降階段；南京高淳種群已有低水平抗性；南京江寧種群達到中水平抗性。

表2 草莓二斑葉螨田間種群對30%乙唑螨腈懸浮劑的抗性水平

2.2 草莓二斑葉螨對聯苯肼酯的抗藥性

不同地區草莓二斑葉螨對43%聯苯肼酯懸浮劑的抗藥性水平有明顯差異（表3）。8 個田間種群對43%聯苯肼酯懸浮劑處于敏感至高水平抗性（RR = 2.801～62.605）。 其中， 南京溧水、 鎮江白兔、徐州碾莊3 個地區種群均處于敏感水平；泰州泰興種群處于敏感度下降階段；常州嘉澤和南京棲霞種群已有低水平抗性；南京高淳種群達到中水平抗性；南京江寧種群達到高水平抗性。

表3 草莓二斑葉螨田間種群對43%聯苯肼酯懸浮劑的抗性水平

2.3 草莓二斑葉螨對腈吡螨酯的抗藥性

不同地區草莓二斑葉螨對30%腈吡螨酯懸浮劑的抗藥性水平有明顯差異（表4）。8 個田間種群對30%腈吡螨酯懸浮劑處于敏感至中水平抗性（RR = 1.331～17.285）。其中，南京溧水、鎮江白兔、泰州泰興、徐州碾莊等4 個地區種群均處于敏感水平；南京棲霞和常州嘉澤種群處于敏感度下降階段；南京高淳種群已有低水平抗性；南京江寧種群達到中水平抗性。

表4 草莓二斑葉螨田間種群對30%腈吡螨酯懸浮劑的抗性水平

2.4 草莓二斑葉螨對丁氟螨酯的抗藥性

不同地區草莓二斑葉螨對20%丁氟螨酯懸浮劑的抗藥性水平有明顯差異（表5）。8 個田間種群對20%丁氟螨酯懸浮劑處于敏感至中水平抗性（RR = 2.233～20.518）。其中，南京溧水、鎮江白兔、泰州泰興3 個地區種群均處于敏感水平；南京棲霞、常州嘉澤、徐州碾莊3 個地區種群處于敏感度下降階段；南京高淳和南京江寧種群已有中水平抗性。

表5 草莓二斑葉螨田間種群對20%丁氟螨酯懸浮劑的抗性水平

2.5 草莓二斑葉螨對阿維菌素的抗藥性

不同地區草莓二斑葉螨對3%阿維菌素微乳劑的抗藥性水平也有明顯差異（表6）。8 個田間種群對3%阿維菌素微乳劑處于低水平抗性至極高水平抗性（RR = 6.599～340.995）。其中，南京溧水種群處于低水平抗性；鎮江白兔種群已有中水平抗性；南京棲霞、南京高淳、泰州泰興3 個地區種群處于高水平抗性；南京江寧、常州嘉澤、徐州碾莊3 個地區種群已有極高水平抗性。

表6 草莓二斑葉螨田間種群對3%阿維菌素微乳劑的抗性水平

3 結論與討論

隨著人們生活水平的提高，農產品質量安全越來越受重視，綠色生態草莓園也成為市民休閑娛樂好去處（許佳君和王盼盼，2022）。近年來，江蘇地區草莓市場需求量在不斷增加，種植面積越來越大（常向陽和葛悅，2021)，而草莓二斑葉螨發生也日益嚴重，給果農帶來了較大的經濟損失。目前，二斑葉螨已對多種殺螨劑產生了抗藥性（van Leeuwen et al.，2010；韓旸 等，2023）。宮亞軍等（2014）報道了北京地區的二斑葉螨對阿維菌素的敏感性在逐漸減低。Xu 等（2018）報道了二斑葉螨對乙唑螨腈、腈吡螨酯、聯苯肼酯等也產生了抗性。不同地區的二斑葉螨，由于用藥背景的不同，對殺螨劑的敏感性有差異（宮亞軍 等，2014）。本研究中，江蘇8 個地區的草莓二斑葉螨田間種群對5 種常用殺螨劑（30%乙唑螨腈懸浮劑、43%聯苯肼酯懸浮劑、30%腈吡螨酯懸浮劑、20%丁氟螨酯懸浮劑、3%阿維菌素微乳劑）的抗性水平亦存在地區間差異。

地區間用藥背景會影響二斑葉螨對殺螨劑敏感性水平（宮亞軍 等，2014）。南京溧水和鎮江白兔草莓二斑葉螨均采自有機草莓種植大棚，生產上平時很少使用化學殺螨劑，更多的依靠捕食螨防治。因此，該地的二斑葉螨對測試的5 種殺螨劑均具有較高的敏感性。南京棲霞草莓二斑葉螨采自種植大戶，平時注重科學用藥和輪換用藥。該地的二斑葉螨對乙唑螨腈、腈吡螨酯、聯苯肼酯和丁氟螨酯具有較高的敏感性，但對阿維菌素敏感性較低。南京高淳草莓二斑葉螨采自當地的農戶，管理水平一般，該地二斑葉螨對乙唑螨腈、腈吡螨酯、聯苯肼酯和丁氟螨酯敏感性水平一般，但對阿維菌素敏感性較低。南京江寧草莓二斑葉螨采自種植戶的草莓秧苗田，為了保護草莓幼苗不受葉螨為害，用藥種類和用藥頻率均較高，該地二斑葉螨對測試的5 種殺螨劑敏感性均較低。泰州泰興、常州嘉澤、徐州碾莊的草莓二斑葉螨均采自草莓種植基地，種植管理水平高，也注重輪換用藥和生物防治，但因多年的重復種植，也存在一定的抗性。

本研究監測結果顯示，江蘇8 個地區草莓二斑葉螨對乙唑螨腈、聯苯肼酯、腈吡螨酯、丁氟螨酯等4 種殺螨劑，大部分處于敏感水平，部分處于低至中等水平抗性，僅江寧種群對聯苯肼酯屬于高水平抗性。但各田間種群對阿維菌素均具有抗性，抗性倍數在6.599～340.995 之間，處于低至極高水平抗性。在生產上，對于存在高水平抗性的藥劑，應暫停或減少使用，并注重藥劑的輪換使用（Bi et al.，2016）。鑒于乙唑螨腈、聯苯肼酯、腈吡螨酯、丁氟螨酯等對二斑葉螨的作用機制不同（Zhu et al.，2010；Hayashi et al.，2013；楊國璋，2014；Chen et al.，2019），可根據當地的用藥背景，作為防治草莓二斑葉螨的輪換藥劑。因此，在二斑葉螨的防治中，應密切注意抗性發展動態，盡量與作用機制不同的有效藥劑交替使用，以延緩抗性的產生（Chen et al.，2019）。另外，結合當地的用藥背景和藥劑特點，合理選擇藥劑和藥劑用量；根據作物生長期調整噴霧用水量，充分結合農業管理、生物防治（Vacacela et al.，2010；郝建強 等，2015）、施肥（Abdelwines & Ahmed，2020）等綜合措施，實現對二斑葉螨的可持續防控，確保草莓產品安全。