FKN、MIP-1α、MCP-1在糖尿病視網膜病變患者中的表達及其與眼底圖像特征、臨床分期的相關性研究*

王 康 孔曉路 河南省鄭州市第二人民醫院眼科 450000

隨著分子生物學研究的不斷深入,已發現血清因子Fractalkine(FKN)、巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α)、人巨噬細胞趨化蛋白-1(MCP-1)在糖尿病的進展中起主要作用[1]。血清FKN是20世紀末發現的,參與白細胞吞噬和淋巴細胞遷移,具有趨化黏附作用。研究表明,其與心血管疾病的發展有一定的關系[2]。MIP-1α是一種趨化因子,可通過影響下游巨噬和單核細胞的富集,參與組織細胞的炎癥損傷。MIP-1α的表達也可增加中性粒細胞的浸潤,促進白細胞介素(IL)-6或IL-8的釋放,并通過炎癥因子增加上皮細胞的凋亡[3]。MCP-1屬趨化因子家族β家族成員,MCP-1分子結構在細胞中表達時的糖基化程度及其產生的分子量不同。MCP-1具有明顯的趨化單核細胞作用,可作用于淋巴細胞和嗜堿性粒細胞[4]。本研究通過檢測DR患者FKN、MIP-1α、MCP-1水平,同時分析該三項血清因子與眼底圖像特征、臨床分期的相關性,旨在探討該三項血清因子在DR患者病情進展中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年1月—2022年1月在我院接受治療的110例DR患者作為研究組,其中男61例,女49例,年齡50～75歲,平均年齡(57.19±5.18)歲。納入標準:(1)年齡≥18歲;(2)符合2型糖尿病的診斷標準[5];(3)無其他嚴重并發癥;(4)均知情同意參與本研究。排除標準:(1)合并急性并發癥、免疫、血液系統疾病;(2)不了解本研究方法和過程;(3)合并心腦血管疾病等器質性病變;(4)近期出現全身炎癥。選取同期的健康體檢者60例作為對照組,其中男32例,女28例,年齡48～76歲,平均年齡(58.24±5.22)歲。兩組一般資料比較無統計學差異(P>0.05),具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法:所有研究對象均禁食8h,晨起抽取空腹靜脈血,采樣量5ml,血樣于離心機上離心10min,轉速3 000r/min,取上清液,在-30℃條件下保存待檢,采用免疫發光法檢測MIP-1水平,采用ELISA法檢測MCP-1α、FKN水平,按試劑盒說明書操作。

1.2.2 眼底圖像檢查:對所有患者進行視力、裂隙燈、眼壓和散瞳檢查,然后使用上海涵飛醫療器械有限公司提供的歐姆龍(佳能)CR-2 PLUS AFT兔散瞳數字眼底照相機進行檢查,并按美國早期治療DR研究組推薦的散瞳30度7方位法:1方位:以視盤為中心;2方位:以黃斑為中心;3方位:黃斑顳側;4～7方位:通過視盤中心的垂線和視盤上方和下方的水平線相切的方式進行拍照和拼圖。

1.3 DR的臨床分期 按1987年中華醫學會眼科學會通過的1985年第三屆全國眼底病學組討論建議的6級分期[6]。

1.4 觀察指標 (1)觀察兩組及不同臨床分期患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平差異,采用Pearson相關分析法分析DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平與臨床分期的相關性。(2)觀察DRIV期患者的眼底圖像特征,主要觀察視網膜后極部及周邊微血管的變化及病變類型、范圍、形態。

1.5 統計學方法 采用SPSS22.0統計學軟件進行數據分析。計數資料用例表示,計量資料用均數±標準差表示。兩組血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平的比較采用獨立樣本t檢驗,不同臨床分期患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平的比較采用單因素方差分析,采用Pearson相關分析法分析DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平與臨床分期的相關性。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較 研究組血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平均高于對照組(P<0.05),見表1。

表1 兩組血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較

2.2 不同臨床分期患者的血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較 根據臨床分期標準,Ⅰ期40例,Ⅱ期24例,Ⅲ期34例,Ⅳ期12例,不同臨床分期患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較存在統計學差異(P<0.05),見表2。

表2 不同臨床分期患者的血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較

2.3 DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平與臨床分期的相關性 Pearson相關分析結果顯示,DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平與臨床分期均存在相關性(r=0.882、0.846、0.663,P均<0.001)。

2.4 Ⅳ期糖尿病視網膜病變患者的眼底圖像特征 按美國早期治療糖尿病視網膜病變研究組推薦的7方位法拍攝拼圖。彩色照相診斷為Ⅳ期患者眼底改變為毛細血管擴張迂曲、珊瑚狀新生血管及斑片狀出血。

3 討論

有研究認為,MIP-1α可促進膠原纖維蛋白的合成,加重上皮組織的增殖和纖維化[7]。另有研究人員認為MIP-1α在DR患者中的表達與DR的程度有關[8]。本研究對DR患者血清學指標的分析結果顯示,研究組MIP-1α的表達顯著高于對照組,且不同臨床分期MIP-1α的表達存在統計學差異(P<0.05),隨著臨床分期的增加,其表達水平也隨之升高,提示MIP-1α的高表達能影響DR的病情進展,可能是MIP-1α的表達可促進糖尿病患者微血管病變、炎癥和氧化應激的發展[9]。通過參考不同的相關文獻,認為其可能與MIP-1α水平的增加可增加巨噬細胞對視網膜基底細胞的吞噬作用,致視網膜基底細胞凋亡有關[10]。進一步相關性分析結果顯示,MIP-1α與臨床分期呈正相關,提示MIP-1α水平與DR的病情有關。MCP-1不僅作為趨化因子,還具有促凝劑的功能,由巨噬細胞通過自分泌方式分泌,然后誘導相同的細胞產生組織因子活性。MCP-1的表達表明,這些組織因子在調節DR中此類細胞的功能方面具有更大的作用。本研究為MCP-1與DR的研究,通過對比兩組及不同臨床分期患者的MCP-1的表達水平,得出結果:研究組血清MCP-1水平明顯高于對照組(P<0.05),且與病情進展呈正相關。FKN也稱為分形趨化因子。其表達可增加吞噬作用和淋巴細胞的活性,并使細胞相互黏附。因此,此物質可獨立于整合素相互黏附,因此其作用時間短,經常致炎癥反應,并對血管和組織造成損害。本文結果顯示,研究組FKN水平明顯高于對照組,且隨病情的加重FKN水平也隨之升高,與臨床分期呈正相關(P<0.05)。分析其原因:相比健康人群,DR患者中低密度脂蛋白膽固醇的糖基化過程更快,產生的人氧化低密度脂蛋白可介導血清FKN的產生。

眼底彩色照相的水平軸設置為穿過視乳頭下緣的雙水平線,垂直軸設置為通過視乳頭中心的垂直線;在水平軸上分別以黃斑和視乳頭為中心拍攝一張照片;第三張照片是從水平軸顳側延長線的鼻側緣到黃斑中心拍攝的;由相互垂直的兩軸形成的4～7圓形區域,即上下顳象限和上下鼻象限。所有圓的半徑是從視乳頭中心到黃斑中心的直線長度。臨床使用眼底彩色照相作為DR的分期依據不僅簡單,且可以節省成本,減輕患者的經濟壓力,具有良好的社會效益。在本研究中,采用了目前準確率較高的7方位彩色眼底照相法。在臨床實踐中,醫生的年齡、學歷、職稱和經驗存在較大差異。同一張圖片的不同讀片者也可能有不同的結果。同一名讀片者在第一次讀片和培訓后讀片的結果也不同。7方位眼底照相是診斷DR的重要方法,在判斷疾病狀況方面具有較高的可靠性。根據目前國內DR分類進行DR分期的可行性很高,尤其是在條件較差的基層醫院和社區衛生機構。如果臨床醫生能正確掌握眼底照相的分級方法,并據此制定合理的治療方案,將很大程度節省治療成本,減少不必要的侵入性檢查,為DR患者的全視網膜光凝治療可提供可靠的依據[11-12]。

綜上所述,DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1與DR的臨床分期密切相關,該三項指標在DR的損傷機制中具有協同作用,對DR患者的免疫機制和治療具有一定的指導意義。同時7方位彩色眼底照相法可對糖尿病患者進行DR分期,臨床可根據DR患者血清學指標和7方位彩色眼底圖像特征判斷其病情嚴重程度。