mRNA技術及其在動物疫病研究中的應用進展

王明偉,夏應菊,陳紫昱,李佳昕,劉業兵*

(1.中國獸醫藥品監察所國家豬瘟參考實驗室,北京 100081;2.山東農業大學動物科技學院,山東泰安 271000)

mRNA又稱信使RNA(message RNA, mRNA),由DNA為模板轉錄而來,負責指導胞內蛋白質的合成[1］。mRNA技術是一種將人工合成的mRNA分子引入細胞內,并利用細胞自身的翻譯機制將其轉錄成蛋白質的技術,已有幾十年的研究歷史。新冠疫情暴發后,Moderna利用該技術僅用了42天即完成了新冠mRNA候選疫苗mRNA-1273的構建和篩選,并于2020年3月獲得FDA批準正式開始評估安全性和免疫原性的I期臨床試驗,試驗結果顯示該候選株的免疫保護性可達94.1%[2］。2020年12月輝瑞和Moderna分別研制的mRNA疫苗均獲得美國食品安全局的緊急使用授權(EUA),成為疫苗史上最快研制上市的疫苗[3］,標志著mRNA技術正式應用到COVID-19臨床預防。隨著mRNA技術的發展以及在新冠疫情防控中的應用,該技術成為生物醫學領域的研究熱點,得到了極大的關注,并獲得了2023年諾貝爾生理學或醫學獎。同時該技術也在動物疫病中進行了應用研究,現就mRNA技術的發展歷程,mRNA疫苗的設計、遞送及特點,以及其在動物疫病研究中的進展予以綜述。

1 mRNA技術的發展歷程

mRNA主要分布在細胞質中,由編碼區、上游的5′非編碼區和下游的3′非編碼區組成,真核生物mRNA分子兩端還有5′帽子和3′尾部結構,原核細胞的mRNA一般沒有尾部結構[4］。1961年,Brenner及Gross等發現在蛋白質合成過程中,有一種物質與核糖體結合,由此發現了mRNA[5］。到了1975年,有文獻報道發現了mRNA的帽子結構(5′端高度甲基化修飾)[6］。1978年,Dimitriadis GJ將脂質體包裹的mRNA遞送至小鼠淋巴細胞[7］,有了這些前期的基礎,Malone在1989年首次提出mRNA疫苗的概念[8］。然而,受mRNA不穩定,易被機體模式識別受體(PRRs)識別并降解等因素的限制,當時的研究更傾向于比較穩定的DNA疫苗,而mRNA的應用研究更偏向于免疫佐劑方向[9］。直到1990年,Wolff等人首次報道使用人工合成的裸mRNA注射到小鼠骨骼肌可促進編碼蛋白的表達[10］,證明體外合成mRNA作為信息載體指導體細胞蛋白合成的可行性。2005年,Weissman等人發現使用修飾的外源mRNA可以降低在體內誘導免疫反應并避免快速降解[11］。近年來,隨著5′端加帽技術的發展,體外合成mRNA的穩定性、翻譯效率得到提高,而機體對RNA的先天免疫反應,RNA的降解速度也相對降低。此外,假尿苷修飾技術、種屬密碼子的選擇和優化、最優化的UTR(非編碼區)和多聚A等技術的發展進一步增加了mRNA穩定性[12］。2020年新冠mRNA疫苗獲得了EUA認證[13］,證明mRNA疫苗可能成為未來快速應對新發傳染病的新手段,也加速了mRNA技術的發展。2023年諾貝爾生理學或醫學獎公布,授予匈牙利生物化學家 Katalin Karikó和美國醫學家Drew Weissman,以表彰他們在核苷堿基修飾方面的發現,從而開發出了有效的mRNA疫苗。

圖1 mRNA的發展歷程圖

2 mRNA疫苗的設計、遞送及特點

2.1 mRNA疫苗的設計 mRNA技術是一種將人工合成的mRNA分子引入細胞內,并利用細胞自身的翻譯機制來將其轉錄成蛋白質的技術。這其中最難的便是人工合成mRNA分子,合成過程大概分為三步:第一步根據目的基因序列設計mRNA序列,優化其序列并制備重組質粒;第二步對重組質粒進行線性化及加尾;第三步對線性化質粒DNA進行體外轉錄、加帽及純化,得到mRNA分子后,再對其進行體外細胞轉染和檢測。現階段mRNA技術最成功的應用是mRNA疫苗,其結構和mRNA一樣,包括5′端帽子結構—5′UTR(非編碼區)—ORF編碼區(目的基因序列)—3′UTR(非編碼區)—3′端poly(A)尾巴[22］。5′末端添加cap帽子結構可以增強mRNA分子的穩定性。5′端添加cap帽子方法很多,可以通過加帽試劑盒添加,也可以在體外轉錄的同時添加,即cap結構,DNA模板,T7RNA聚合酶以及核苷酸和修飾的核苷在體外合成mRNA分子,然后將其純化后便得到mRNA原液,在眾多添加cap結構的方法中,這種方法比較快捷方便。位于5′端和3′端的UTR一般選擇高表達基因,如人β珠蛋白[23］,因為含有這些UTR的mRNA通常具有高水平的翻譯和穩定性。通過高通量篩選合適的UTR序列添加到mRNA質粒上,可以提高mRNA的表達,合理組合5′UTR和3′UTR可以使翻譯效率最大化。編碼抗原的ORF(開放閱讀框)是mRNA中最關鍵的組成部分,因為它包含了翻譯成蛋白質的編碼序列。盡管開放閱讀框的可塑性不及非編碼區,但它可以通過將人體內很少使用的密碼子替換為經常出現的密碼子來進行優化,當然編碼蛋白的氨基酸序列不能改變,這樣優化可增加蛋白質翻譯。目前有多種poly尾的添加方法,最簡單的方法是在PCR擴增目的基因進行質粒線性化的時候在下游引物上增加互補堿基,使得到的目的基因上帶有poly尾。mRNA疫苗由這五部分組成的結構不僅增強了mRNA的穩定性,同時提高了mRNA翻譯的準確性和效率。之后再將體外轉錄獲得的mRNA原液直接引入目標細胞中,在細胞內完成翻譯形成蛋白質[24］。該蛋白質更接近天然構象的蛋白,因為避免了傳統蛋白質制備方法中所面臨的問題,例如復雜的蛋白質折疊和后續純化等步驟。

2.2 mRNA疫苗的遞送系統 除了mRNA本身外,遞送系統也是mRNA疫苗中不可或缺的一部分,因為mRNA必須穿過細胞膜才能到達細胞質內進行抗原蛋白表達。但由于mRNA帶有負電荷且分子量較大,容易被核酸酶降解[25］,很難到體內發揮作用,所以就需要一種有效的遞送方式來解決這個難題。mRNA遞送系統的研發最早可追溯到1989年[8］,主要包括物理和化學兩種方式,前者通過電穿孔的方式,使靶組織生物膜表面瞬時形成微孔,讓mRNA通過,這種方式操作簡單,但由于電擊操作的可變因素較多,電脈沖也會對細胞造成一定損害,該方法的應用受到了限制。化學方式中最常用的是脂質納米顆粒(LNP)遞送技術。LNP由4種成分組成,包括可電離的氨基脂質、惰性親水性聚乙二醇(PEG)—脂質、穩定劑膽固醇和輔助磷脂。這些成分的精確比例可以增強LNP的穩定性,從而促進mRNA復合物的吸收,使得mRNA在準確遞送至細胞內的同時也得到準確高效的翻譯,從而將抗原遞送給抗原遞呈細胞刺激機體的體液免疫和細胞免疫應答[26］。在使用LNP時,可電離的氨基脂質可以在低pH下與核酸縮合,促進自組裝成病毒大小的顆粒,并將mRNA從內體釋放到細胞質,惰性親水性聚乙二醇(PEG)—脂質可以增加制劑的半衰期,并限制蛋白質和細胞的相互作用,同時穩定劑膽固醇可以填補LNP分子之間的間隙,提高穩定性,并幫助LNP與內體膜融合,輔助磷脂可以支持脂質雙層結構。此外,LNP還可以保護mRNA分子不過早被TLR識別,避免先天免疫反應過度激活[12］。由于其簡易、模塊化和生物兼容性等優勢,LNP成為目前最有前途、研究最廣泛、進展最快的mRNA遞送技術之一。

2.3 mRNA疫苗的獨特優勢 mRNA疫苗相較于亞單位、滅活病毒和減毒活病毒以及DNA的疫苗等傳統疫苗具有高效性、安全性、適應性、無需單獨佐劑等優點。

2.3.1 高效性 mRNA疫苗研制速度遠快于傳統疫苗,是因為其生產過程不需要使用活病毒或細菌,也不需要培養細胞,只需要合成mRNA序列即可[25］。此外,mRNA疫苗可以在短時間內產生特異性免疫反應,是因為它不僅可以激活體液免疫,還可以激活細胞免疫,例如輝瑞和BioNTech共同研發的新冠mRNA疫苗BNT162b2,一次注射就足以引發人體高滴度的中和抗體反應以及CD4輔助T細胞和CD8細胞毒性T細胞反應[27］。這也是mRNA疫苗的關鍵優勢。

2.3.2 安全性 相比傳統的疫苗技術,mRNA疫苗不包含活病毒或細菌,因此不會引起感染;無需進入細胞核,直接在細胞質翻譯,不存在基因組整合風險。此外,mRNA疫苗在人體內的半衰期較短,僅10 min左右[28］,不會在體內長期停留,降低了不良反應的風險。

2.3.3 適應性 mRNA疫苗可以根據病原體的變異來快速更新,以保持其對新型病毒株的有效性。這種靈活性使得mRNA疫苗可以更好地應對新興病毒和傳染病的爆發。

2.3.4 無需單獨佐劑 傳統疫苗需要添加佐劑以增強免疫反應,但是mRNA疫苗的LNP組分具有佐劑活性,這種LNP驅動的佐劑活性能夠激活免疫系統[29］,因此不需要其他單獨佐劑。

3 mRNA技術在動物疫病研究中的應用

mRNA技術在動物傳染病研究中的應用相對滯后,尚無可臨床應用的產品被批準。目前國內外動物傳染病mRNA疫苗的研究主要聚焦人獸共患病及幾種少數重要動物疫病的病原微生物,主要動物疫病mRNA疫苗的研究進展見表1。

表1 幾種主要動物疫病mRNA疫苗的研究進展一覽表

3.1 在狂犬病研究中的應用 狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus, RV)引起人和所有溫血動物的一種接觸性傳染病,潛伏期較長,病死率可到達100%,犬、貓、人、牛、羊、豬等均易感[30］。RV的G蛋白是中和抗體識別的主要抗原。G蛋白為糖蛋白全長,其中G△TM蛋白為G糖蛋白的膜外部分;Gtrimer蛋白為G糖蛋白的三聚體(模擬病毒表面G蛋白天然構象);除此之外,M蛋白是RV的膜蛋白,M蛋白可以調控病毒RNA復制及病毒的組裝,在病毒裝配和出芽過程中起關鍵作用[31］。目前主要通過疫苗免疫預防和控制該病。現有Rabies疫苗包括滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位蛋白疫苗、DNA疫苗、病毒載體疫苗等。我國現在使用的VERO細胞或地鼠腎細胞源的Rabies疫苗,均為滅活疫苗,盡管安全、有效,但是需多次接種才能產生足夠免疫、生產周期較長且費用高等因素限制了該類疫苗的使用。因此,多個研究團隊開展了以mRNA技術為載體的新型狂犬疫苗的研發。Saxena S等研究人員制造了一種表大RV G蛋白的mRNA疫苗。微小劑量的疫苗能夠使小鼠產生類似DNA疫苗引發的細胞免疫和體液免疫反應,小鼠產生了較高水平的中和抗體和足夠的免疫保護[32］。張夢玲等分別針對RV的G蛋白,G△TM蛋白、Gtrimer蛋白、M蛋白、Gtrimer蛋白和M蛋白的抗原組合設計了mRNA疫苗,發現這五種疫苗候選物均能夠誘導小鼠產生高水平的中和抗體,顯示出很好的免疫原性[33］。此外,劉雋等將RV CTN-1毒株的G蛋白的mRNA序列進行優化合成和純化,之后將純化后的mRNA序列與適宜載體進行組裝和包裝,形成mRNA疫苗顆粒,得到最終的mRNA疫苗制劑對小鼠通過靜脈注射、皮下注射或肌肉注射等方式進行給藥,能夠誘導小鼠產生RV G蛋白特異性的免疫反應[34］。Margit Schnee使用mRNA技術開發了一種編碼RV G蛋白的mRNA,并將其注射到小鼠和家豬體內。結果顯示,這種mRNA能夠誘導小鼠和家豬產生高水平的中和抗體,保護小鼠和家豬不被RV感染[35］。Stitz L等根據RV G蛋白設計的mRNA疫苗可有效保護小鼠感染RV,進行人體Ⅰ期臨床試驗結果顯示,71%測試者皮下注射80或160 μg疫苗,46%測試者無針注射裝置肌肉注射200或400 μg疫苗,可誘導產生有充足保護效力的中和抗體[36］。這些研究數據顯示,基于不同蛋白設計的狂犬mRNA候選物均能使實驗動物產生高水平的中和抗體,部分免疫攻毒實驗數據顯示,候選物對免疫動物提供了有效保護,使狂犬有望成為繼新冠后的下一個研制成功的mRNA疫苗。

3.2 在口蹄疫研究中的應用 口蹄疫(Foot-and-mouth-disease, FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth-disease virus, FMDV)引起的偶蹄獸的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,豬、牛、羊最易感,人也偶爾感染發病,是世界上現有家畜傳染病中最復雜、最受重視的疾病之一,傳播速度極快,往往會造成大范圍流行,傳染性極強。

Pulido MR等將O血清型FMDV的基因組轉錄產生的mRNA注入小鼠體內。小鼠分為四組,其中一組為對照組注射生理鹽水,另外三組分別注入10 μg、50 μg以及100 μg體外轉錄的mRNA,其中接種mRNA的小鼠中,58%的小鼠都產生了高滴度的FMDV中和抗體,隨后對這些小鼠進行攻毒實驗,發現免疫的小鼠中,有38%的小鼠得到了有效的保護。該結果表明,使用FMDV基因組轉錄產生的mRNA可以在小鼠體內產生高水平的抗體[37］,但如何產生足夠有效的免疫保護還需進一步探討。

3.3 在豬繁殖與呼吸綜合征研究中的應用 豬繁殖與呼吸綜合征病(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由豬繁殖和呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)引起豬的一種接觸性傳染病,主要導致仔豬呼吸道疾病和母豬繁殖障礙,給養豬業造成巨大的經濟損失[38］。賀筍等利用PRRSV含有中和抗原表位的結構蛋白GP3、GP4、GP5、M和N蛋白,通過不同組合方式,將挑選的含有抗原表位的基因通過linker連接起來,進行后期融合表達。這5種蛋白根據不同的排列組合構建了三種mRNA疫苗,將這三種疫苗免疫小鼠,發現這些疫苗均能夠模擬天然感染的過程,在機體細胞內被翻譯、修飾,可以被MHCⅠ類分子和MHCⅡ類分子呈遞,激活機體產生特異性的CD8+和CD4+T細胞,從而產生高水平的細胞免疫和體液免疫應答[39］。

3.4 在流感研究中的應用 流感(Influenza)是由流感病毒(Influenza virus)引起的人獸共患傳染病,通常只感染禽類,但個別亞型也會感染豬或人。本病廣泛分布于世界各地,甲型和乙型流感病毒呈季節性流行,每年有近300萬～500萬例病例,造成全世界29萬～65萬人死亡[40］。禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)屬于甲型流感病毒,根據病毒表面蛋白囊膜的血凝素(HA,)及神經氨酸酶(NA)的抗原性不同分為18種血凝素亞型和11種神經氨酸酶亞型[41］。目前針對不同亞型的AIV疫苗具有良好的免疫保護效果,但由于AIV頻繁的基因突變和重組,需要及時更新疫苗以應對疫苗與流行株之間存在的抗原差異。目前,廣泛使用的AIV滅活疫苗和減毒活疫苗等傳統疫苗生產周期長,無法及時研發出候選疫苗應對AIV的頻繁變異,而mRNA疫苗由于生產周期較短,工藝與傳統疫苗相比也更簡單,有望成為未來代替傳統疫苗的新型AIV候選疫苗。一項早期研究表明,用編碼HA抗原的自擴增性mRNA(self‐amplifying mRNA,SAM)疫苗進行免疫,可使小鼠產生特異性抗體和部分保護力,免受致病的同源病毒攻擊[42］。另一項研究針對H9N2亞型AIV設計出mRNA疫苗候選物,并對其安全性和免疫效力進行了評估,發現候選物對雞安全,并可使SPF雞產生高水平的體液免疫以及細胞免疫。與AIV全病毒滅活疫苗比較,對SPF雛雞免疫25 μg mRNA疫苗的抗體與全病毒滅活疫苗水平相當,之后對兩種疫苗免疫的SPF雛雞進行攻毒實驗,熒光定量PCR檢測咽拭子以及肺臟、氣管、十二指腸和腺胃發現,25 μg免疫劑量免疫的mRNA疫苗組與全病毒滅活疫苗組,除氣管之外各個組織的病毒載量極顯著低于未免疫的對照組(P<0.01),氣管中全病毒滅活疫苗組顯著低于對照組(P<0.05),25 μg免疫的mRNA疫苗組極顯著低于對照組(P<0.01)[43］。這項結果表明mRNA疫苗在免疫保護上與滅活疫苗水平相當,但是mRNA疫苗生產周期比滅活疫苗的生產周期要短很多,這也大大彰顯了mRNA疫苗的獨特優勢。Chahal J S等構建了包括H1N1 HA抗原、剛地弓形蟲抗原和埃博拉病毒多種抗原表達的mRNA疫苗,可以對H1N1 AIV、剛地弓形蟲和埃博拉病毒等多種致病性病原體免疫保護,產生特異性CD8+T細胞和抗體反應,攻毒試驗結果表明,免疫一次即可使小鼠得到對H1N1 AIV的有效保護[44］。Vogel等用表達幾種不同血清型的HA抗原的SAM疫苗對小鼠進行免疫,能夠有效預防H1N1流感病毒[45］。Arevalo等開發了一種編碼了所有已知的20種甲型和乙型流感病毒亞型的HA抗原的mRNA(20-HAmRNA-LNP)疫苗,研究證明該疫苗可以同時誘導小鼠和雪貂產生對多種抗原的免疫反應[46］。

3.5 在猴痘研究中的應用 猴痘(Monkeypox,Mpox)是一種由猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)感染所致的病毒性人畜共患病,人類中出現的癥狀與過去在天花患者身上所看到的癥狀相似,但是自1980年世界上消滅天花以后,MPX成為現存最為嚴重的且由正痘病毒引起的疾病[47］。Yang等構建了3種表達MPX A35R蛋白和M1R蛋白的mRNA疫苗,其中VGPox1和VGPox2是編碼由A35R的胞外結構域和全長的M1R組成的融合蛋白,兩者的區別在于VGPox2去除了A35R的莖區。而VGPox3含有兩個單獨的mRNA-LNP的混合物,分別編碼A35R和M1R。免疫小鼠結果顯示VGPox1和VGPox2比VGPox3具有更好的抗病毒能力[48］。

3.6 在弓形蟲病研究中的應用 弓形蟲是一種單細胞寄生蟲,其學名為Toxoplasmagondii,是一種廣泛分布于世界各地的寄生蟲。弓形蟲能夠感染人類和其他哺乳動物。弓形蟲感染每年會導致超過100萬人死亡。Chahal J S等人在他們的研究中利用樹突狀納米粒子封裝mRNA復制體,開發了一種六價mRNA疫苗。該疫苗的抗原是弓形蟲的多個生命周期階段中高度保守的蛋白質,包括GRA6、ROP2A、ROP18、SAG1、SAG2A和AMA1。他們對小鼠進行了接種,每個小鼠接種單劑40 μg的疫苗(每個復制子6.67 μg),結果發現該疫苗可以保護小鼠在致命劑量的弓形蟲感染中存活超過6個月[44］。這項研究表明,利用樹突狀納米粒子封裝mRNA復制體制備的六價mRNA疫苗具有很高的保護效力,可以為弓形蟲感染提供新的預防和控制手段。Luo F等構建了表達弓形蟲核苷三磷酸水解酶-Ⅱ(NT-Pase-Ⅱ)蛋白的LNPs-saRNA 疫苗,該疫苗可誘導小鼠產生中和抗體;攻毒保護試驗顯示,免疫小鼠存活時間延長且腦內弓形蟲量減少至對照組的46.4%[49］。

3.7 在細菌性疾病研究中的應用 mRNA技術在病毒上有較多的研究,只有極少數細菌抗原被嘗試用于mRNA疫苗的構建。2017年,Maruggi G等人設計了兩種預防性SAM疫苗,分別與編碼A組鏈球菌溶血素-O(SLOdm)和B組鏈球菌(GBS)鏈球菌的毛發2a骨架蛋白(BP-2a)混合,接種小鼠進行動物試驗,結果小鼠成功產生大量全功能抗體[50］。

在單一病原菌致病種中,細菌病原菌結核分枝桿菌致死率長期居全球首位。盡管如此,只有一種疫苗獲準針對人類結核:卡介苗(BCG),這是一種減毒全細胞疫苗,但臨床上存在局限性,一是卡介苗免疫效力在不同個體中差異較大中,免疫力較弱的人群即使免疫了卡介苗依然可能感染結核;二是BCG由許多遺傳上不同的亞菌株組成。這些遺傳差異是否以及如何影響BCG的效力仍然未知[51］。MVA85A是一種表達單抗原Ag85A的結核亞單位疫苗,在IIb期試驗中沒有顯著改善保護作用[52］。失敗案例說明與病毒感染相比,細菌感染往往具有更復雜的階段,具有多種分子表達特征,僅表達單個抗原無法滿足免疫保護要求。未來mRNA疫苗想進一步應用于細菌感染的預防和治療領域,應考慮更多的優化,包括各種抗原或表位的選擇和重組,不同靶抗原的周期性給藥,甚至直接添加佐劑等被動免疫組合物[53］。

4 存在問題及展望

在過去的十年里,mRNA技術已經從實驗室走向臨床應用,取得了良好效果。這種生物技術領域的突破性進展在冠狀病毒病(COVID-19)全球大流行期間表現得尤為明顯,也標志著mRNA技術正在逐步走向成熟。到目前為止,許多實驗證明了mRNA疫苗無論從mRNA本身的特性,還有引發的免疫反應情況等方面來看,都優于亞單位疫苗、滅活疫苗等傳統疫苗[54］。

雖然mRNA技術發展迅速,但是它也存在一些問題和挑戰,主要表現在以下幾個方面。一是mRNA技術用于設計疫苗,首先需找到對該疫病可產生免疫保護力的關鍵蛋白以及最適UTR和質粒載體,而不像滅活病毒疫苗那樣直接全病毒滅活,如何尋找最適蛋白及UTR和載體是至關重要的問題。此外,在設計mRNA序列時需要考慮到對細胞的毒性和免疫反應等因素[55］,這也增加了技術的復雜性。二是mRNA分子的穩定性較差,容易被降解,導致注射進體內沒有效果,所以如何保存mRNA疫苗不被降解也是一個難題。三是目前mRNA制備所涉及的幾項關鍵原材料,由于受專利保護、技術壁壘、制備流程等因素限制,成本較高,若構建動物疫病mRNA疫苗,如何降低成本,也是需要解決的難點問題。

針對這些問題,要在病原端及基于LNP的mRNA疫苗凍干工藝端加快步伐。首先需要充分了解某種病原,收集病原UTR等序列庫以供篩選,并建立自有的質粒載體,滿足線性化酶切這一特殊需求;同時,也應該建立平臺性的mRNA設計和篩選流程、以及平臺性的工藝路線,即可適用于幾乎所有的mRNA序列。研究表明基于LNP的mRNA疫苗凍干化處理后可以在室溫下長期儲存[56］,這為mRNA疫苗的儲存和運輸提供了一個潛在的解決方案。同時,對于目前尚存在的專利保護及技術壁壘等問題,希望能夠隨著全球合作的進一步深化以及mRNA技術的進一步成熟來解決。

總體來說,mRNA技術是一項具有廣闊前景的生物技術,它可以為許多疾病的治療提供新的思路和方法,比如腫瘤疾病,遺傳學疾病及各種自身免疫疾病,相信mRNA技術會成為這些疫苗開發的新突破;同時也會推動更多的動物mRNA疫苗的研發和應用,比如一些重要的動物傳染病,如非洲豬瘟、豬圓環病毒病、犬貓細小病毒病等,可以根據這些病毒的靶抗原或者多種組合抗原的形式設計mRNA候選疫苗,隨著mRNA技術的進一步發展以及對這些疾病的進一步探索,開發這些疾病的mRNA候選疫苗是非常有前途的策略。