腦脊液Tau 蛋白、血脂在MCI 和AD 中的表達及其診斷價值

朱彤 閆世勇 白雪

輕度認知障礙（Mild cognitive impairment，MCI）常見于老年群體，是一種認知障礙癥候群，與同年齡健康老人相比，MCI 患者多表現為認知功能衰退，但其日常生活未有顯著影響［1］。MCI 被認為是阿爾茨海默病（Alzheimer's disease，AD）的前驅階段，可以說MCI 是介于正常衰老與AD 之間的一種臨床過渡狀態。相關數據顯示，每年約有15%的MCI 患者進展為AD，53%的MCI 患者在患病3 年后可能進展為AD［2-3］。因此，將MCI 作為AD 的早期防治突破口是臨床研究熱點之一。Tau 蛋白是目前已知含量最高的微管相關蛋白，能夠維持微管穩定性，降低微管蛋白分子解離。已有大量研究證明，AD 患者腦中Tau 蛋白總量較健康群體明顯增多，其與AD 病理發生有緊密聯系［4］。有學者［5］認為，外周血血脂代謝紊亂能夠致使腦內β-淀粉樣蛋白異常沉積，從而導致機體出現AD 病理樣改變，但該結論尚存在較大爭議。本研究以上述理論為基礎，從Tau 蛋白、外周血血脂水平單獨與聯合應用角度出發，綜合性分析其與機體認知水平的關系以及在MCI、AD 中的評估價值，以期為臨床MCI、AD 預防提供一定支撐，現將研究結果匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從ADNI 數據庫中隨機選出42 例MCI 患者（MCI 組），選取2021 年1 月至2022 年6 月于周至縣人民醫院體檢的40 名健康者（對照組），根據MCI 患者年齡、性別匹配同時段于本院治療的AD 患者42例為AD 組。其中，對照組女性30 名，男性10 名；年齡平均（74.38±6.17）歲；受教育年限平均（10.43±2.15）年。MCI 組女性31 例，男性11 例；年齡平均（73.88±6.16）歲；受教育年限平均（10.29±2.19）年。AD 組女性30 例，男性12 例；年齡平均（74.93±5.60）歲；受教育年限平均（10.26±2.14）年。三組患者性別、年齡、受教育年限比較差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究已通過院醫學倫理委員會批準。

1.2 診斷標準

以《阿爾茨海默病源性輕度認知障礙診療中國專家共識2021》［6］為導向擬定AD、MCI 入組標準。MCI 入組標準：①主癥為記憶障礙，且家屬或其他照護人可證實；②年齡在60 周歲以上；③病情超過6 個月；④癡呆評定量表（Clinical Dementia Rating，CDR）在0.5 分以內（含0.5 分）；⑤日常生活正常，排除癡呆。AD 入組標準：①年齡在60 周歲以上；②簡易精神狀態量表（Mini-Mental State Examination，MMSE）［7］得分小于26 分；③Hachin-ski缺血指數量表（Hachinsk ilnchemic Score，HIS）［8］得分在4 分以內；④存在至少兩個認知域損害：學習、記憶，言語、聽寫，推理、判斷，執行、視空間，可伴隨人格或行為轉變；⑤日常生活、工作受到影響；⑥患者家屬對研究知情同意，知曉相關利弊，已簽署同意書。排除標準：①合并家族性精神疾病史；②合并惡性腫瘤，腦梗死、腦出血等其他心腦血管疾病導致的認知障礙；③合并甲狀腺素減少引發的癡呆，合并麻痹性癡呆等其他原因導致的癡呆；④合并自身免疫系統異常引發的相關疾病，入組前未接受相關免疫抑制治療；⑤配合度差，無法完成相應研究；⑥中途退出研究。

1.3 方法

采用MMSE、Addenbrooke 改良認知評估量表（Addenbrooke cognitive examination，ACE-R）評估所有受試者認知水平。于入組后24 h 內對MCI 組、AD 組患者和對照組個體Tau 蛋白表達水平進行檢測，同時檢測血脂指標［總膽固醇（Total Cholesterol，TC）、甘油三脂（Triglyceride，TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL-C）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）］水平。所有入選者在入組后分別行腰椎穿刺術抽取腦脊液2 mL 分別裝置-70℃冰箱凍存待測。采用雙抗夾心酶聯免疫吸附試驗試劑盒tau 蛋白，試劑盒購自比利時innogenetics NV 公司。抽取晨起安靜狀態下靜脈血3 mL，離心10 min，轉速為2 500 r/min（離心半徑為10 cm），分離血清標本，放置于-20℃下保存待測。TG 采用氧化酶法測定，TC 采用CHOD-PAP 法測定，HDL 和LDL 采用一步酶法測定，試劑盒購自上海科艾博生物技術有限公司。

1.4 觀察指標

①MMSE 評分，量表包括定向、記憶力、注意力、計算以及回憶與語言5 個維度，共30 項，總分為0～30 分，分數越高認知水平越高［8］；②ACE-R 評分，量表包含5 方面認知：定向力、記憶、表達、語言、視覺空間認知，總分為100 分，分數越高認知功能越好。

1.5 統計學處理

采用統計軟件SPSS 22.0 進行數據處理，計數資料使用n（%）表示，行χ2檢驗；計量資料采用（）表示，多組比較用單因素ANOVA 方差分析，兩兩比較用LSD-t 檢驗；相關性分析采用Pearson 相關分析。建立受試者工作曲線（ROC）評估診斷、鑒別價值。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組Tau 蛋白表達水平比較

對照組Tau 蛋白表達水平為（146.16±100.45）pg/mL，MCI 組為（357.98±156.37）pg/mL，AD 組為（432.49±178.42）pg/mL，三組Tau 蛋白表達水平：AD 組＞MCI 組＞對照組，差異有統計學意義（F=40.262，P＜0.05）。見圖1。

圖1 三組Tau 蛋白表達水平比較Fig. 1 Comparison of Tau protein expression levels among the three groups

2.2 三組血脂水平比較

三組TG、LDL-C 水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；三組TC 水平：AD 組＞MCI 組＞對照組，三組HDL-C 水平：AD 組＜MCI 組＜對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 三組血脂水平比較（）Table 1 Comparison of blood lipid levels among the three groups（）

表1 三組血脂水平比較（）Table 1 Comparison of blood lipid levels among the three groups（）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與MCI 組比較，bP＜0.05。

2.3 三組認知水平比較

三組MMSE、ACE-R 評分：AD 組＜MCI 組＜對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組認知水平比較［（），分］Table 2 Comparison of cognitive levels among the three groups［（），scores］

表2 三組認知水平比較［（），分］Table 2 Comparison of cognitive levels among the three groups［（），scores］

注：與對照組比較，aP＜0.05；與MCI 組比較，bP＜0.05。

2.4 Tau 蛋白、血脂水平與認知功能的相關性分析

MMSE、ACE-R 評分與TG、LDL-C 水平無顯著相關性，與Tau 蛋白、TC 呈負相關性，與HDL-C呈正相關性（P＜0.05）。見表3。

表3 Tau 蛋白、血脂水平與認知功能的相關性分析Table 3 Correlation analysis of Tau protein，lipid levels and cognitive function

2.5 Tau 蛋白、血脂水平單獨、聯合診斷MCI 的ROC 曲線分析

Tau 蛋白、TC、HDL-C 水平聯合診斷高于單-診斷P＜0.05。見表4、圖2。

表4 Tau 蛋白、血脂水平單獨、聯合診斷MCITable 4 Separate and combined diagnosis of MCI by Tau protein and blood lipid levels

圖2 Tau 蛋白、血脂水平單獨、聯合診斷MCI 的ROC 曲線Fig. 2 ROC Curve of Tau Protein，Lipid Levels for Single or Combined Diagnosis of MCI

2.6 Tau 蛋白、血脂水平單獨、聯合鑒別AD 的ROC 曲線分析

Tau 蛋白、TC、HDL-C 水平聯合診斷高于單-診斷（P＜0.05）。見表5、圖3。

表5 Tau 蛋白、血脂水平單獨、聯合鑒別ADTable 5 Tau protein and blood lipid levels alone and jointly identify AD

圖3 Tau 蛋白、血脂水平單獨、聯合鑒別AD 的ROC 曲線Fig. 3 ROC Curve of Tau Protein，Lipid Levels for Single，Combined identification AD

3 討論

AD 是一種好發于老年、老年前期群體以認知功能障礙為典型表現的中樞性神經系統退行性疾病［9］。AD 患者早期可能僅存在記憶受損表現，隨著病情加重其學習、保存知識的能力衰退，甚至可能逐漸喪失言語能力，無法完成日常簡單事項，嚴重影響生活質量［10］。MCI 是AD 發病的臨床前階段，是一種處于健康與AD 患病之間的認知損害狀態。作為AD 發病前的預警信號，MCI 一直是臨床研究的熱點。通過對正常群體、MCI 群體以及AD群體進行鑒別與分析，能夠為AD 高危患者爭取到適當干預時間。

Tau 蛋白屬于含磷酸基蛋白，MCI、AD 患者腦內Tau 蛋白會出現異常過度磷酸化，導致其喪失正常生物功能，出現相應神經元退行性病變與認知障礙［11］。本研究結果與許欣茹等人研究結果一致［12］。說明MCI、AD 患者Tau 蛋白水平較健康群體異常高表達。通過相關性分析可知，腦脊液Tau 蛋白表達水平與MMSE、ACE-R 評分呈負相關性，說明Tau 蛋白水平與機體認知功能有相同變化趨勢，進一步證實了Tau 蛋白參與了認知功能障礙的發生與發展。

邱聰龍等［13］在對AD 患者血脂進行研究時發現，AD 患者認知功能與其血脂表達水平有正相關性。黃小彥等［14］發現血脂升高是老年人出現輕度認知障礙的危險因素。同時，經相關性分析可知，MMSE、ACE-R 評分與TC 呈負相關性，與HDL-C呈正相關性，說明血脂表達與機體認知功能存在一定聯系。Gibbons 等［15］認為，血脂表達與機體認知功能的關系在于，神經元細胞膜中存在大量脂肪，當載脂蛋白異常時可引發血脂水平升高，致使Tau 蛋白磷酸化，誘發全腦沉積，產生認知障礙，進而發展為AD。

此外，本研究進一步結果說明Tau蛋白與血脂水平在診斷、鑒別MCI、與AD方面有一定臨床價值。

綜上所述，MCI、AD 患者腦脊液TAU 蛋白及血脂水平存在異常表達，且其異常表達程度可隨認知水平降低而加重，腦脊液TAU 蛋白與相關血脂指標單獨、聯合對診斷、鑒別MCI 與AD 有一定臨床應用價值。