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殼聚糖-姜黃素光動力協同作用對圣女果食源性致病菌的滅活效果

2023-12-11 06:58:22藍彩娟陳潔怡何雨薇麻春陽NimaAZARAKHSHTanushreeGUPTA吳希陽
食品科學 2023年21期
關鍵詞:效果

藍彩娟,陳潔怡,何雨薇,麻春陽,黃 蕊,Nima AZARAKHSH,Tanushree GUPTA,吳希陽,*

(1.暨南大學理工學院,廣東 廣州 510632;2.梅西大學Hopkirk研究所,新西蘭 北帕默斯頓 4474)

食源性致病菌是導致食品污染和危害食品安全的主要原因之一。2018年中國疾控信息系統報告,食物中毒事件中63.1%的病例是由攝入食源性致病菌引起的[1]。其中金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌O157:H7(Escherichia coliO157:H7)、沙門氏菌(Salmonella Typhimurium)和單核細胞增生李斯特菌是世界衛生組織公示的四大食源性致病菌[2]。此外,產芽孢菌如蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)因具有高度抗逆性而被認為是食品滅菌中的一大挑戰。

目前食品工業的主要殺菌方式分為熱殺菌和非熱殺菌。高溫熱處理容易導致熱敏性食品如果蔬和生鮮肉品等感官特性和營養成分的變化。近年來,一項多應用于醫學領域的殺菌技術——光動力處理(photodynamic treatment,PDT),因具有經濟、便捷、無毒殘留、無耐藥性等優點,已經被開發應用于食品領域。PDT技術的關鍵要素是光敏劑、特定波長光源和氧氣,3 個要素同時存在時可激發產生活性氧,進而攻擊滅活細菌[3]。選擇無毒無害的光敏劑和光源是PDT進入食品行業的關鍵。姜黃素(curcumin,Cur)是一種天然光敏劑、著色劑和調味品,提取于姜黃根莖,本身具有光敏、抗菌、抗炎、抗氧化等活性,可被400~500 nm光激發產活性氧[4]。

PDT在滅活細菌、真菌及其孢子等方面已被廣泛報道,相比革蘭氏陽性(G+)菌,革蘭氏陰性(G-)菌對PDT的敏感性較差[5]。該技術缺陷可以通過添加靶向分子或修飾光敏劑來解決。目前有研究報道,添加靶向分子如多黏菌素B、ε-聚賴氨酸、乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)等可協同增效PDT[6-9]。此外,也有學者將L-聚賴氨酸、多黏菌素B和殼聚糖(chitosan,Chi)與光敏劑共價偶聯,通過修飾光敏劑以提高PDT滅菌效果[10-12]。然而,修飾光敏劑可能引發食品安全問題,因此,本實驗的研究思路是在PDT技術中添加安全有效的靶向分子Chi。

Chi是一種生物可降解、無毒且具有廣泛抗菌活性的陽離子聚合物[6],已作為食品添加劑廣泛用于制作可食涂膜并應用于果蔬保鮮。Chi涂層可以降低果蔬呼吸頻率、保持水分、防止褐變和微生物污染,從而延長貨架期[13]。圣女果是全球高消費率的即食水果之一,富含維生素和番茄紅素等營養物質,但圣女果在種植過程中需施用糞肥和堆肥,且種植環境中存在的野生動物和爬行動物會提高致病菌如Salmonella的污染率[14]。另外,圣女果不耐貯藏,這給流通銷售帶來了巨大壓力,因此圣女果的抗菌保藏問題亟待解決。

目前關于Chi-PDT的報道主要集中在Chi納米復合材料的制備及其在癌癥、皮膚病、牙科生物膜等醫學領域的應用[15-17]。鮮有研究將PDT滅菌技術和Chi-Cur涂膜聯合應用于水果抗菌和保藏。此外,果蔬攜帶的細菌種類豐富,但目前對致病菌的滅活研究主要集中在單一菌,鮮有對混合菌滅活的研究。因此,本研究探究Chi-Cur協同PDT對S. aureus、B. cereus、E. coli和Salmonella單一菌和混合菌的滅活效果,以及Chi與PDT的協同機理及對圣女果抗菌效果和品質的影響,以期為食品安全生產提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

S. aureus(ATCC 6538)、B. cereus(CMCC 63303)、E. coli(ATCC 31350)、Salmonella(Salmonella Typhimurium,ATCC 14028)均保存于暨南大學理工學院食品科學與工程系。

‘千禧’圣女果購自廣州某水果超市。

Cur(食品級,純度>95%) 陜西慈緣生物技術有限公司;Chi(75%~85%脫乙酰化) 美國Sigma-Aldrich公司;營養瓊脂(nutrient agar,NA)、LB瓊脂(LB agar,LA)、平板計數瓊脂(plate count agar,PCA)、亞硫酸鉍瓊脂(bismuth sulfite agar,BS)廣東環凱微生物科技有限公司;瓊脂粉 德國Biofroxx公司;無水乙醇(分析純) 天津市永大化學試劑有限公司;乙酸(分析純) 天津市大茂化學試劑廠。

1.2 儀器與設備

發光二極管(light emitting diode,LED)光照設備(420 nm,69.97 mW/cm2)由暨南大學理工學院光電工程系和食品科學與工程系自主研發;DHP 120恒溫培養箱 上海實驗儀器廠有限公司;HNYC-2102智能恒溫培養振蕩器 天津歐諾儀器股份有限公司;X3FR高速冷凍離心機 美國賽默飛世爾科技有限公司;Infinite M200 PRO光柵型多功能微孔板檢測儀 瑞士Tecan公司;LS-400均質器 上海比朗儀器制造有限公司;CS-820N色差儀 彩譜科技(浙江)有限公司;質構儀 美國博勒飛公司。

1.3 方法

1.3.1 細菌培養

將凍存于-80 ℃冰箱的菌株取出,S. aureus、B. cereus和Salmonella劃線于NA平板,E. coli劃線于LA平板,于37 ℃倒置培養約12 h。挑取單菌落分別接種至相應液體培養基中,于恒溫(37 ℃)培養箱振蕩(120 r/min)培養至對數生長期。

1.3.2 Chi-Cur配制

用體積分數1%乙酸配制0.05%(質量分數,下同)Chi溶液。稱取Cur溶于無水乙醇,配制成20 mmol/L Cur母液,0.22 μm無菌濾膜過濾,4 ℃避光保存,后續實驗以無菌磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline,PBS)或0.05% Chi作為溶劑,配制所需濃度的Cur或Chi-Cur溶液。

1.3.3 不同質量分數Chi對致病菌的影響

取1 mL菌液分別與1 mL 0.05%、0.1%、0.5% Chi溶液混勻,孵育20 min,梯度稀釋,吸取100 μL稀釋液,向S. aureus、B. cereus和Salmonella菌液中倒入NA,向E. coli菌液中倒入LA并進行平板菌落計數,計數規則和菌落總數的計算方法參照GB 4789.2—2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》。

1.3.4 PDT滅活致病菌

為比較PDT和Chi-PDT的滅活效果,取1 mL菌液分別與1 mL 100 μmol/L Cur或0.05% Chi-100 μmol/L Cur混合于6 孔板,暗孵育20 min,用LED藍光照射20 min(距離燈源10 cm)。為探究不同濃度Cur對Chi-PDT滅活效果的影響,取1 mL菌液分別與1 mL 0、5、15、25、50、100 μmol/L Cur(以0.05% Chi作為溶劑)混合,暗孵育20 min,用LED藍光照射20 min。取1 mL菌液與0.05% Chi-15 μmol/L Cur混合,暗孵育20 min,用LED藍光照射0、5、10、15、20 min,以探究不同光照時間對Chi-PDT滅活效果的影響。空白對照以等體積PBS代替,不做光照處理。處理結束后參照1.3.3節方法進行平板菌落計數。

1.3.5 PDT滅活混合致病菌

等體積混合S. aureus、B. cereus、E. coli和Salmonella菌懸液,取1 mL上述混合菌液與1 mL 15 μmol/L Cur或0.05% Chi-15 μmol/L Cur混合,暗孵育20 min后光照20 min。空白對照組以等體積PBS代替,不做光照處理。處理結束后,用PCA平板參照1.3.3節方法進行平板菌落計數。

1.3.6 致病菌對Cur的吸收

參照Liang Zuxin等[8]的方法測定細菌對Cur的吸收量。用2%十二烷基硫酸鈉(sodium dodecyl sulfate,SDS)稀釋Cur,繪制標準曲線(Cur濃度為0~50 μmol/L)。將對數生長期的菌懸液和50 μmol/L Cur或0.05%Chi-50 μmol/L Cur等體積混合,暗孵育20 min,PBS洗滌兩次,2% SDS溶液重懸,并于37 ℃避光孵育20 h。隨后,5 500×g離心5 min,取上清液,用酶標儀測定其在425 nm激發波長、530 nm發射波長下的熒光強度。空白對照組以PBS替代Cur進行相同操作。

1.3.7 PDT應用于圣女果抗菌保鮮

圣女果用自來水清洗并去蒂,體積分數70%乙醇溶液消毒以除去其自帶細菌,晾干。將無菌圣女果分成3 組,每組設置3 個平行,每個平行60 個果實,保藏期間用聚對苯二甲酸乙二醇酯(polyethylene terephthalate,PET)盒子盛裝并保存于25 ℃生化培養箱。將培養過夜的Salmonella用PBS稀釋至1×107CFU/mL,將圣女果浸泡于菌懸液1 min后撈出晾干1 h。隨后,將染菌果浸泡于100 μmol/L Cur或0.05% Chi-100 μmol/L Cur 1 min,撈出,于超凈工作臺干燥1 h,LED藍光照射20 min。空白對照組用PBS替代并進行同樣操作[18]。

1.3.7.1 微生物分析

從每個盒子隨機選取2 顆圣女果置于無菌均質袋中,加入10 mL PBS,捏碎后用均質器拍打2 min。吸取均質液進行梯度稀釋,吸取100 μL稀釋液倒入BS瓊脂,37 ℃倒置培養約24 h,對果實表面存活的Salmonella計數[18]。

1.3.7.2 色澤測定

從每個盒子隨機選取3 顆圣女果,用色差儀監測其保藏期間的色澤變化。光源和角度為D65/10°,測量孔徑為6 mm。測定果實中間部位,每個果實測定3 個不同的表面,記錄明亮度(L*值)、紅綠度(a*值)和黃藍度(b*值)[18-19]。

1.3.7.3 質量損失率

每個監測日對圣女果稱質量,質量損失率以當日果實質量相比初始質量減少的比例表示。

1.3.7.4 硬度測定

用質構儀測定圣女果硬度,選用直徑為4 mm的探針,以1 mm/s的速率穿刺圣女果,刺入穿刺深度為10 mm[18],每個果實穿刺兩個不同的表面,結果用平均值表示。

1.4 數據統計與分析

數據結果以平均值±標準差表示,采用GraphPad Prism 9.0軟件進行數據處理和作圖,對實驗數據進行單因素或雙因素方差分析,采用Tukey多重比較檢驗進行顯著性分析,以P<0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 Chi的抑菌效果

據報道,Chi是具有抗菌性能的聚合物[6]。本研究結果顯示Chi對4 種食源性致病菌均有不同程度的抑菌效果,并具有濃度依賴性。如圖1所示,0.5% Chi分別使S. aureus和B. cereus的菌落總數減少了3.68(lg(CFU/mL))和6.37(lg(CFU/mL)),而使E. coli和Salmonella的菌落總數僅分別減少了1.25(lg(CFU/mL))和1.23(lg(CFU/mL)),即Chi對G+菌的滅活效果明顯優于G-菌,這一現象與Goy等[20]所報道的一致。富含陽離子的Chi在靜電相互作用下可吸附到菌體表面,破壞其細胞結構和胞內大分子,從而導致細菌死亡。此外,Chi由乙酸配制而成,在酸性環境下,Chi會被廣泛質子化,這會增強其與細菌表面陰離子基團中羧基和磷酸基的結合[21]。關于Chi對G+菌和G-菌滅活效果的差異,Duan Chao等[22]報道,由于G-菌有外膜,Chi需要先通過取代外膜的Ca2+和Mg2+才能直接以靜電相互作用吸附于細菌表面,導致細菌膜裂解,從而達到殺菌效果;而對于無外膜的G+菌,Chi的多陽離子長鏈分子結構使其可以直接高效、大面積地吸附于細菌表面,因此滅活效果更佳。本研究探究Chi對PDT協同作用效果的實驗中選用Chi的最低抑菌劑量(0.05%)。

圖1 不同質量分數Chi對4 種致病菌的抑菌效果Fig. 1 Antibacterial efficacy of Chi at different concentrations against four pathogens

2.2 Chi-PDT對致病菌的滅活效果

2.2.1 PDT和Chi-PDT滅活效果比較

如圖2所示,低劑量的Chi(0.05%)可分別使S. aureus和B. cereus的菌落總數減少3.05(lg(CFU/mL))和5.62(lg(CFU/mL)),而對E. coli和Salmonella無明顯滅活作用。100 μmol/L Cur介導的PDT可分別使S. aureus、B. cereus、E. coli和Salmonella的菌落總數減少2.96、5.79、0.51、2.35(lg(CFU/mL))。然而,當Chi和PDT共同作用時,菌落總數均可減少約8.00(lg(CFU/mL)),Chi-PDT對S. aureus、B. cereus、E. coli和Salmonella的滅活菌落數相比于PDT單獨作用分別提升了5.66、1.84、8.18、6.30(lg(CFU/mL)),表明Chi對PDT具有顯著的協同增效作用。原因可能是Chi增強了Cur的水溶性,進而促進Cur滲透進入細菌,增強PDT的滅活效果,這與Li Tianmin等[23]報道的一致。此外,Chi溶液本身具有黏性和陽離子特性[22],因此推測Chi可以延長Cur在細菌表面的接觸時間,從而加劇PDT對菌體的損傷。

圖2 PDT和Chi-PDT對4 種致病菌的滅活效果Fig. 2 Bactericidal efficacy of PDT and Chi-PDT against four pathogens

2.2.2 Cur濃度對Chi-PDT抑菌效果的影響

如圖3所示,隨著Cur濃度的增加,Chi-PDT的抑菌效果逐漸增強。Cur濃度的增加會使活性氧水平增加,從而增強滅菌效果。0.05% Chi-15 μmol/L Cur可分別使S. aureus和B. cereus的菌落總數減少7.90(lg(CFU/mL))和7.60(lg(CFU/mL)),而滅活相同數量的E. coli和Salmonella則分別需要100 μmol/L和25 μmol/L Cur,說明相比于G+菌,即使在Chi與PDT協同作用時,也仍然需要更高濃度的光敏劑來殺滅G-菌。Li Tianmin等[23]將0.5% Chi-25 μmol/L Cur和S. aureus共孵育10 min后光照10 min,可使其菌落總數減少5.00(lg(CFU/mL)),其所使用的Chi和Cur劑量較本研究更高,但滅活效果較本研究稍差。G-菌表面具有一層復雜外膜,該外膜是阻礙光敏劑滲透至菌體內的物理屏障[24],推測這是G-菌對Chi-PDT敏感性較低的關鍵原因。

圖3 Cur濃度對Chi-PDT滅活效果的影響Fig. 3 Influence of Cur concentration on the bactericidal effect of Chi-PDT

2.2.3 光照時間對Chi-PDT滅活效果的影響

如圖4所示,Chi-PDT對4 種致病菌的滅活效果隨光照時間的延長而增加,最佳滅活效果均出現在光照20 min時,分別使S. aureus、B. cereus、E. coli和Salmonella的菌落總數減少了8.00、7.32、4.93、6.06(lg(CFU/mL))。結果表明,Chi-PDT對4 種致病菌的滅活效果均具有光照時間依賴性。光照時間和光功率密度決定光照劑量,有研究表明光照時間對PDT滅活效果的影響大于光功率密度[25],所以實際食品工業應用過程中可以通過恒定光功率密度、延長光照時間來改善殺菌效果。

圖4 光照時間對Chi-PDT滅活效果的影響Fig. 4 Influence of illumination time on the bactericidal effect of Chi-PDT

2.3 Chi-PDT對混合致病菌的滅活效果

如圖5所示,15 μmol/L Cur介導的PDT僅可使4 種致病菌混合物的菌落總數減少0.91(lg(CFU/mL))。當0.05% Chi和15 μmol/L Cur協同PDT處理混合菌時,其菌落總數減少6.00(lg(CFU/mL)),即Chi-PDT比PDT單獨作用時的抑菌量高5.09(lg(CFU/mL)),且對混合菌的滅活效果與單一菌滅活效果相當。表明Chi-PDT無論是對于單一菌還是混合菌,都比PDT具有更好的滅菌效果。

圖5 PDT和Chi-PDT對混合菌的滅菌效果Fig. 5 Bactericidal efficacy of PDT and Chi-PDT on bacterial mixture

目前,大多數對于非熱殺菌技術的研究多專注于探究其對單一菌的滅活效果,如Li Tianmin等[23]探究Chi-PDT對S. aureus及其生物膜的滅活效果;Cap等[26]探究高靜水壓對Salmonella的滅活效果;Gan Zhilin等[27]探究等離子體活化水對E. coli和S. aureus的滅活效果;Kim等[28]采用紫外線-TiO2光催化和高靜水壓聯合處理滅活B. cereus。目前鮮有采用非熱殺菌技術滅活G+菌和G-菌混合物的報道,其中,Kuliesiene等[29]發現采用TiO2光催化滅活Salmonella和E. coli混合物時,其滅活效果不如滅活單一菌;El Kadri等[30]探究大氣壓冷等離子體對E. coli和單核細胞增生李斯特菌混合生物膜的滅活效果,也發現混合生物膜敏感性較差。本研究結果與上述研究不同,這可能是菌株種類、混合菌株數量和殺菌方式的差異導致的。

2.4 致病菌對Cur的吸收

如圖6所示,在Chi存在時,4 種致病菌的熒光強度均顯著高于無Chi組。S. aureus、B. cereus、E. coli和Salmonella中Chi-Cur組的熒光強度分別比Cur組高122.92、80.67、137.75和104.14。2.2節結果顯示Chi可以顯著促進PDT的滅菌效果,因此可推測Chi增強了細菌和光敏劑的相互作用,促進了細菌對Cur的吸收。Buchovec等[6]采用Chi與葉綠素PDT協同滅活Salmonella,在掃描電子顯微鏡視野下發現細菌完全被葉綠素-Chi復合物覆蓋,并且發生了明顯的膜崩解現象。Liang Zuxin等[8]發現帶正電的高分子聚合物ε-聚賴氨酸可促進細菌對Cur的攝取,從而增強Cur的光敏作用。本研究結果也證明Chi可以促進Cur吸附滲透進入細菌內,從而改善PDT的滅活效果。

圖6 4 種致病菌對Cur的吸收Fig. 6 Uptake of Cur by four pathogens

2.5 Chi-PDT處理后圣女果在保藏期間活菌數和品質變化

2.5.1Salmonella菌落總數的變化

如圖7所示,經檢測,未經人工染菌前的圣女果表面不攜帶Salmonella,染菌后圣女果表面Salmonella的吸附量為6.69(lg(CFU/果))。在保藏前(第0天),100 μmol/L Cur介導的PDT處理對圣女果殺菌效果不顯著,然而Chi-PDT可以使Salmonella菌落總數顯著降低1.62(lg(CFU/果))。保藏18 d后,對照組圣女果的活菌數量較第0天增加了1.07(lg(CFU/果)),PDT處理組活菌數量增加了0.87(lg(CFU/果)),而Chi-PDT處理組活菌數量沒有增加。這說明Chi-PDT能有效地殺滅圣女果表面的Salmonella,并且0.05% Chi-100 μmol/L Cur涂膜協同PDT處理可以較好地抑制Salmonella的生長。Chai Zhengyuan等[4]采用2 μmol/L Cur介導PDT處理鮮切梨10 min,結果使Listeria monocytogenes菌落總數減少3.43(lg(CFU/g)),殺菌效果較本研究更好,推測原因是梨切成平整的薄片后,相比橢球形的圣女果接觸光面積更大,且受光照更均勻。Buchovec等[6]使用0.1%Chi-15 μmol/L葉綠素協同PDT處理草莓,可使Salmonella菌落總數減少2.20(lg(CFU/g)),本研究結果與之相近。Jin等[18]用Chi-異硫氰酸烯丙酯涂膜處理感染Salmonella的圣女果,21 d后活菌數從3.65(lg(CFU/果))降到無法檢測的水平,其與本研究的效果差異可能在于涂膜液的配制方法不同,該研究為0.9% Chi溶于2%乙酸、乳酸和乙酰丙酸混合溶劑。

圖7 圣女果在保藏期間的Salmonella數量Fig. 7 Salmonella counts on cherry tomatoes during storage

2.5.2 色澤變化

對消費者而言,色澤是評價圣女果質量的關鍵因素之一。如表1所示,L*值在保藏過程中顯著降低,但在第18天時Chi-PDT處理組仍顯著高于對照組,即Chi-PDT組仍具有較好的光澤。a*值在保藏期間升高,但每個觀察日內組間無顯著差異,而且18 d后,對照組a*值比PDT處理組增幅更大。b*值在整個保藏過程中無明顯變化。成熟度(a*/b*)在保藏期間持續上升,但在第18天各組間無顯著差異,即Chi-PDT處理不會對圣女果的色澤和成熟度產生明顯影響。美國農業部曾提出圣女果成熟階段的a*/b*范圍應在0.95~1.21之間[19],而本研究貯藏末期圣女果的a*/b*符合這一推薦范圍。因此,PDT處理對圣女果品質無不良影響,并且Chi-Cur涂膜協同PDT處理能使圣女果保持較好的色澤。

表1 圣女果在保藏期間的色澤和硬度變化Table 1 Changes in color and firmness of cherry tomatoes during storage

2.5.3 硬度變化

在整個貯藏期間,圣女果硬度均在1 300 g左右(表1),同一處理組各監測點間和同一監測點不同組間無明顯變化,即PDT和Chi-Cur涂膜協同PDT處理不會對圣女果硬度有負面影響。

2.5.4 質量損失情況

由圖8可知,保藏時間越長,圣女果質量損失率越高。這是因為圣女果在保藏過程中會發生水分流失,所以質量有輕微的下降,但各處理組間沒有顯著差異。

圖8 圣女果在保藏期間的質量損失率Fig. 8 Mass loss of cherry tomatoes during storage

2.5.5 外觀變化

如圖9所示,PDT處理后保藏前(第0天)3 組圣女果在顏色上無明顯差異,經18 d保藏后3 組圣女果顏色也無顯著差異,這與表1結果相印證,表明PDT處理不影響圣女果外觀。經過18 d的保藏后,對照組和PDT組中部分圣女果出現發霉腐爛現象,但Chi-PDT組外觀完好,并且圖7結果顯示對照組和PDT組活菌數量在第18天增長了約1.00(lg(CFU/果)),表明0.05% Chi-100 μmol/L Cur涂膜協同PDT處理能有效抑制Salmonella和霉菌的生長繁殖,延長圣女果的保質期。

圖9 圣女果保藏前后的外觀變化Fig. 9 Changes in visual appearance of cherry tomatoes before and after storage

由此可見,Chi-PDT是一種能有效滅活圣女果表面Salmonella的非熱殺菌方法,并且Chi-Cur涂膜協同PDT處理能有效抑制Salmonella的繁殖,同時不會對圣女果的品質產生不良影響,起到了較好的保鮮效果。

3 結 論

本研究選取Chi作為PDT的協同增效劑,結果表明Chi可通過促進細菌對Cur的吸收從而增強PDT的殺菌效果。Chi-Cur協同PDT處理可有效滅活S. aureus、B. cereus、E. coli和Salmonella,其滅活效果與Cur濃度和光照時間呈正相關。PDT結合Chi-Cur涂膜可應用于圣女果的抗菌和保藏。

本研究解決了PDT對G-菌滅活效果不理想這一難題,結合PDT和Chi-Cur涂膜技術,解決了圣女果的抗菌保藏問題。但是本研究還存在一定的局限性,后續研究可聚焦于以下幾個方面:1)比較PDT和Chi-PDT對細菌芽孢、真菌孢子和病毒的滅活效果,探究Chi是否對于PDT滅活其他微生物亦具有協同增效作用,以拓寬Chi-PDT技術的應用范圍;2)研究PDT和Chi-PDT處理后細菌中吸收Cur受體、細胞膜通透性、氧化應激等相關基因表達的變化情況,從分子層面揭示Chi與PDT的協同增效機理;3)深入探究Chi-PDT對圣女果營養成分(如VC、番茄紅素、黃酮類化合物和酚類等)含量的影響,助力開發安全、高效及食品品質友好的食品加工技術。

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