可注射藻藍(lán)蛋白納米復(fù)合水凝膠的制備及其對(duì)傷口愈合效果研究

龍金華, 廖 影, 滕麗晶, 曾 柱

(1. 貴州醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院 頭頸腫瘤科, 貴州 貴陽(yáng), 550004;2. 貴州醫(yī)科大學(xué) 生物與工程學(xué)院/基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院, 貴州 貴陽(yáng), 550025)

全層皮膚損傷一直是臨床治療中的一個(gè)復(fù)雜問題,水凝膠支架的應(yīng)用可為細(xì)胞的募集和細(xì)胞外基質(zhì)的沉積提供人工基質(zhì),以加速創(chuàng)面愈合。然而,傳統(tǒng)的水凝膠沒有可注射性和自愈性,不能完全覆蓋形狀不規(guī)則的創(chuàng)面。因此,開發(fā)一種可注射的多功能水凝膠敷料對(duì)促進(jìn)創(chuàng)面愈合具有重要意義。為實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),本研究采用納米黏土分散液弱堿性含氧環(huán)境預(yù)聚合多巴胺單體形成聚多巴胺(LP)聚集體,并將其與藻藍(lán)蛋白(CPC)混合,通過氫鍵、離子鍵以及席夫堿等可逆鍵形成可注射納米復(fù)合水凝膠。該水凝膠的形成過程可有效防止多巴胺的過度氧化,同時(shí)通過引入CPC進(jìn)一步改善聚多巴胺/納米黏土聚集體的流變性能,形成生理?xiàng)l件下穩(wěn)定的可注射水凝膠。形成的可注射水凝膠能夠通過較小的針頭注射到損傷部位,有效促進(jìn)傷口愈合。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和儀器

納米黏土(BYK, 德國(guó))、鹽酸多巴胺(阿拉丁生化科技股份有限公司,中國(guó))、C-藻藍(lán)蛋白(麥克林,中國(guó))、新西蘭大白兔抗凝兔血(百奧萊博,中國(guó))、冷凍干燥機(jī)(FD5系列,金西盟國(guó)際集團(tuán)公司), MCR 流變儀(MCR 302, Anton Paar)、激光共聚焦(Ti2, NIKON)和掃描電子顯微鏡(Q25, FEI, 美國(guó))。

1.2 方法

1.2.1 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的制備: 制備LP納米片,稱預(yù)定量(60、90、120、150 mg)的納米黏土加入6 mL去離子水室溫磁力攪拌2 h后,稱3 mg的鹽酸多巴胺加入,室溫避光磁力攪拌5 h后,高速離心分散液(10 000轉(zhuǎn)/min, 5 min), 凍干后獲得LP納米片[1]。稱預(yù)定量(60、90、120、150 mg)的LP納米片加入6 mL去離子水室溫磁力攪拌2 h分散均勻后,稱30 mg CPC加入,繼續(xù)室溫?cái)嚢? h后獲得CPC/LP納米復(fù)合水凝膠。根據(jù)質(zhì)量百分濃度將納米復(fù)合水凝膠命名為CPCx/LPy, x代表CPC的質(zhì)量濃度, y代表LP的質(zhì)量濃度。因此,可將上述配比分別命名為CPC 0.5/LP1, CPC 0.5/LP2和CPC 0.5/LP3。

1.2.2 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的微結(jié)構(gòu)表征: 將制備得到的CPC/LP納米復(fù)合水凝膠注射到蓋玻片上,利用CPC的熒光特性,采用激光共聚焦表征其原位濕態(tài)微結(jié)構(gòu)。用液氮快速淬冷制備好的納米復(fù)合水凝膠,冷凍干燥后噴金,采用掃描(SEM)采集納米復(fù)合水凝膠的截面微結(jié)構(gòu)圖片。

1.2.3 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的流變性能表征: 采用Anton Paar流變儀表征其儲(chǔ)能模量G′和損耗模量G″。G′代表彈性部分,即形變能力中儲(chǔ)存的部分; G″代表黏性部分,即形變能力中損失的部分。G″G′, 黏性占主要部分,為溶膠(sol); G″=G′, 黏性和彈性相等,為溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變點(diǎn)[2]。

應(yīng)變掃描分析: 選用PP50不銹鋼圓板(50 mm直徑)測(cè)試可注射水凝膠,測(cè)試間隙設(shè)置為0.5 mm。應(yīng)變掃描用于獲取超分子凝膠在37 ℃條件下的線性區(qū)。其測(cè)試程序?yàn)檎穹鶓?yīng)變范圍0.1%～1 000.0%, 角頻率為10 rad/s, 測(cè)試溫度為37 ℃, 法向應(yīng)力FN為0 N。

頻率掃描分析: 應(yīng)變掃描用于獲取超分子凝膠在37 ℃條件下的線性區(qū),選取測(cè)試振幅應(yīng)變?yōu)?.1%角頻率的范圍0.1～10.0 rad/s, 測(cè)試溫度為37 ℃, 法向應(yīng)力FN為0 N。

動(dòng)態(tài)應(yīng)變掃描分析: 基于上述可注射水凝膠的應(yīng)變掃描可獲取可注射水凝膠的破壞應(yīng)變。通過設(shè)定交替變化的振幅應(yīng)變(大應(yīng)變破壞凝膠結(jié)構(gòu),小應(yīng)變觀察凝膠結(jié)構(gòu)恢復(fù)情況)來評(píng)估其自修復(fù)的性能。其測(cè)試程序如下: 保持角頻率為10 rad/s, 交替應(yīng)變分別為1%和1 000%, 測(cè)試溫度為37 ℃, 法向應(yīng)力FN為0 N。施加1 000%大應(yīng)變50 s破壞凝膠的結(jié)構(gòu); 通過施加1%的小應(yīng)變150 s來讓凝膠結(jié)構(gòu)恢復(fù)。循環(huán)測(cè)試3次。

剪切變稀分析: 使用所制作的可注射水凝膠進(jìn)行測(cè)量,采用Anton Paar流變儀表征其黏度,選用CP-25-1圓板測(cè)定穩(wěn)定凝膠態(tài)的黏度隨剪切速率的變化定量評(píng)估其剪切變稀可注射性。測(cè)試程序如下: 剪切速率變化范圍為0.01～100.00 rad/s, 測(cè)試溫度維持37 ℃。

1.2.4 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的血液相容性表征: 采用離心新西蘭大白兔抗凝兔血獲取紅細(xì)胞(RBCs), 利用RBCs與不同濃度可注射水凝膠共孵育的方式評(píng)價(jià)可注射水凝膠的血液相容性[3]。取2 mL的檸檬酸鈉抗凝兔血置于15 mL離心管中, 3 000轉(zhuǎn)/min離心15 min, 離心后用磷酸鹽緩沖液(PBS)(pH值7.4)洗滌3次,去除上清液,提取離心管底部沉淀的RBCs備用。稱取不同質(zhì)量的可注射水凝膠(0.5、1.0、2.0、5.0 mg)加入1.5 mL的抗凝管中,取0.8 mL的PBS緩沖液和0.2 mL分離好的RBCs加入; 取0.2 mL的RBCs加入0.8 mL去離子水作為陽(yáng)性對(duì)照組,取0.2 mL的RBCs加入0.8 mL的PBS緩沖液作為陰性對(duì)照組,用槍頭輕輕吹打均勻后置于37 ℃培養(yǎng)箱孵育5 min, 取出后1 000轉(zhuǎn)/min離心10 min, 取0.1 mL的上清液置于96孔板,采用酶標(biāo)儀讀取540 nm處的吸光度值,通過下述公式計(jì)算可注射水凝膠的溶血率:

OD樣品組、OD陰性對(duì)照、OD陽(yáng)性對(duì)照分別代表樣品組、陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組的吸收值。

1.2.5 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的體外細(xì)胞相容性表征: 將小鼠皮膚成纖維細(xì)胞(L929)以2 500個(gè)/cm2接種在24孔板,加入含10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/鏈霉素的完全培養(yǎng)基(DMEM)培養(yǎng)1 d讓細(xì)胞鋪展黏附。隨后,吸走孔板里面的培養(yǎng)基,加入水凝膠浸提液(4、8、10 mg/mL)的完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞,培養(yǎng)24 h后,用CCK8試劑盒測(cè)定450 nm處的吸光度,通過下述公式計(jì)算細(xì)胞活性:

OD樣品組、OD對(duì)照組分別代表樣品組和對(duì)照組的吸收值。

1.2.6 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的組織相容性表征: 通過在SD大鼠皮下注射的方式探究可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的組織相容性[4]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)根據(jù)貴州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物護(hù)理和使用指導(dǎo)方針進(jìn)行,并經(jīng)貴州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。隨機(jī)選取雄性SD大鼠9只,采用戊巴比妥鈉麻醉后剔除皮膚毛發(fā),將配制好的無菌凝膠溶液使用1 mL注射器緩慢注射100 μL到SD大鼠皮下,分別在3 d和7 d后,隨機(jī)選擇3只小鼠麻醉后灌注處死并取出水凝膠周圍肌肉組織,石蠟包埋,通過蘇木精-伊紅染色(HE染色)評(píng)價(jià)其組織相容性。

1.2.7 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠體內(nèi)創(chuàng)面愈合的效果驗(yàn)證: 構(gòu)建SD大鼠背部皮膚傷口缺損模型探究可注射水凝膠對(duì)皮膚組織傷口愈合的效果[5]。將6周齡的SD大鼠隨機(jī)分為2組,一組作為實(shí)驗(yàn)組,一組作為空白對(duì)照組。用戊巴比妥鈉麻醉后剔除皮膚毛發(fā),再用10 mm直徑全層皮膚取樣器制造傷口,通過1 mL注射器將水凝膠樣品注射在傷口區(qū)域,并用醫(yī)用敷貼和膠帶包扎傷口。未處理的傷口作為對(duì)照組。分別在7 d和12 d時(shí)觀察并拍攝傷口愈合圖像,經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)麻醉過程后收集SD大鼠背部皮膚標(biāo)本,浸泡在多聚甲醛(4%)中固定48 h, 石蠟切片后進(jìn)行HE染色和Masson染色以評(píng)估組織修復(fù)效果, Masson染色操作步驟嚴(yán)格按照Masson染色試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有實(shí)驗(yàn)至少平行測(cè)試3次(n≥3), 數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式描述,樣品的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異采用T檢測(cè)分析,P<0.05 表明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的制備

CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的制備包括2個(gè)步驟。首先,多巴胺(DA)被插入到黏土納米片層中,氧化作用被限制在有限的納米片層之間,進(jìn)而形成含有游離鄰苯二酚基團(tuán)的PDA功能化的Laponite(LP)納米片。多巴胺加入納米黏土分散液后,反應(yīng)液顏色逐漸由淺粉色變?yōu)楹稚?表明在Laponite形成的弱堿性微環(huán)境中, DA逐漸聚合形成PDA(圖1A)。在成功制備LP納米片的基礎(chǔ)上,將凍干的LP納米片制備成不同質(zhì)量濃度的分散液,通過在分散液中加入CPC, 攪拌分散均勻后可制備CPC/LP納米復(fù)合水凝膠。維持CPC質(zhì)量濃度為0.5%時(shí),隨著LP質(zhì)量濃度從1.0%增大到3.0%, 凝膠化性能逐漸變好(圖1B)。

2.2 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的微結(jié)構(gòu)

維持CPC質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.5%時(shí),當(dāng)LP納米片質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1.0%時(shí), CPC/LP自組裝納米復(fù)合微結(jié)構(gòu)比較稀疏,隨著LP質(zhì)量百分?jǐn)?shù)從2.0%增大到3.0%, 自組裝微結(jié)構(gòu)逐漸變得密實(shí)。CPC0.5/LP3納米復(fù)合水凝膠具有典型的水凝膠海綿孔結(jié)構(gòu)(圖2)。

2.3 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的流變性能

基于上述對(duì)CPC/LP納米復(fù)合水凝膠凝膠化性能和原位微結(jié)構(gòu)的研究,后續(xù)選擇CPC 0.5/LP3作為研究對(duì)象,對(duì)其流變性能進(jìn)行系統(tǒng)研究。如圖3A所示,當(dāng)測(cè)試間隙設(shè)置為 0.5 mm, 角頻率為 10 rad/s, 測(cè)試溫度為 37 ℃, 法向應(yīng)力設(shè)置為0 N時(shí),當(dāng)應(yīng)變小于4%時(shí), G′大于G″, 表明CPC/LP呈穩(wěn)定的凝膠態(tài)。隨著應(yīng)變繼續(xù)增大, G′逐漸減小, G″逐漸增大,當(dāng)應(yīng)變?yōu)?0%時(shí), G′= G″, 為納米復(fù)合水凝膠網(wǎng)絡(luò)被破壞的臨界點(diǎn)。隨著應(yīng)變逐漸增大, G′G″, 表明在該頻率范圍內(nèi)納米復(fù)合水凝膠呈現(xiàn)穩(wěn)定的凝膠態(tài)。基于上述應(yīng)變掃描和頻率掃描,保持角頻率為10 rad/s, 測(cè)試溫度為37 ℃, 法向應(yīng)力設(shè)置為 0 N, 施加100%大應(yīng)變 50 s破壞CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的結(jié)構(gòu); 通過施加1%的小應(yīng)變150 s來讓CPC/LP恢復(fù)其凝膠態(tài),循環(huán)測(cè)試3次。如圖3C所示,維持1%小應(yīng)變, G′>G″, 表明呈現(xiàn)穩(wěn)定的凝膠態(tài)。當(dāng)應(yīng)變突變到100%時(shí),由于凝膠網(wǎng)絡(luò)被破壞, G′G″, 表明CPC/LP納米復(fù)合水凝膠具有自修復(fù)的性能。如圖3D所示,隨著剪切速率從0.01增大到100.00, CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的黏度逐漸減小,表明其有剪切變稀的性能。如圖3E所示,利用CPC/LP納米復(fù)合水凝膠剪切變稀的性能,制備得到的納米復(fù)合水凝膠可任意塑形為圓形、心形、五角星形和正方形,具有優(yōu)異的剪切變稀性能。

A: LP納米片形成過程圖片; B: LP含量對(duì)CPC/LP納米復(fù)合水凝膠凝膠化性能的影響。圖1 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠照片

A: 原位共聚焦熒光圖片; B: 掃描電子顯微鏡圖片。圖2 CPC/LP納米復(fù)合水凝膠微結(jié)構(gòu)

2.4 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的血液相容性

本研究主要通過將不同質(zhì)量濃度的CPC/LP納米復(fù)合水凝膠與紅細(xì)胞進(jìn)行共孵育的方式評(píng)價(jià)其體外血液相容性。如圖4所示,去離子水作為陽(yáng)性對(duì)照, PBS(pH值7.4)作為陰性對(duì)照。當(dāng)CPC/LP納米復(fù)合水凝膠質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL時(shí),溶血率為(1.7±0.3)%, 隨著濃度增大到2.0 mg/mL, 溶血率為(3.4±0.2)%。溶血比低于5.0%, 符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),表明CPC/LP納米復(fù)合水凝膠具有良好的血液相容性。

2.5 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的細(xì)胞相容性

以小鼠皮膚成纖維細(xì)胞 L929為細(xì)胞模型,通過浸提液與L929細(xì)胞共培養(yǎng)的方式評(píng)價(jià)其細(xì)胞毒性。如圖5所示,通過將不同濃度的水凝膠浸提液與L929細(xì)胞共培養(yǎng)24 h后,測(cè)定培養(yǎng)液在450 nm的吸光度值,得到不同濃度可注射水凝膠的細(xì)胞毒性柱狀圖。從圖中可以看出,即使浸提液的濃度高達(dá)10 mg/mL, 其細(xì)胞活性與空白對(duì)照組相當(dāng),由此可知L929細(xì)胞活性并未受水凝膠浸提液影響,表明構(gòu)建的可注射水凝膠具有良好的細(xì)胞相容性。

A: 應(yīng)變掃描曲線; B: 頻率掃描曲線; C: 動(dòng)態(tài)應(yīng)變掃描曲線; D: 剪切速率-黏度曲線; E: 可任意塑形圖片。圖3 CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的流變性能

2.6 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的組織相容性

從注射3 d后鄰近組織的HE染色可以看出,凝膠部位有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。而注射7 d后,鄰近組織部位的炎癥細(xì)胞明顯減少,且有巨噬細(xì)胞的出現(xiàn)。這是由于植入的可注射凝膠產(chǎn)生的炎癥反應(yīng)會(huì)激活免疫細(xì)胞(巨噬細(xì)胞)分泌炎性因子,進(jìn)而募集更多的免疫細(xì)胞到植入位置開始清除凝膠,表明制備的可注射水凝膠具有良好的組織生物相容性(圖6)。

2.7 可注射CPC/LP納米復(fù)合水凝膠促創(chuàng)面愈合效果評(píng)價(jià)

空白對(duì)照組和CPC/LP水凝膠組在0、7、12 d在創(chuàng)面愈合過程中的代表性圖片見圖6, 術(shù)后7 d, CPC/LP水凝膠組創(chuàng)面閉合明顯。術(shù)后12 d, 各組創(chuàng)面缺損繼續(xù)縮小,而CPC/LP水凝膠組缺損的創(chuàng)面已經(jīng)完全被新生的上皮組織覆蓋,缺損創(chuàng)面幾乎得到完全修復(fù),表明制備的可注射水凝膠能夠有效促進(jìn)SD大鼠的創(chuàng)面閉合(圖7)。

為進(jìn)一步觀察CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的創(chuàng)面愈合效果,取第7、12天的創(chuàng)面組織進(jìn)行HE染色和Masson染色。術(shù)后12 d, 相比空白對(duì)照組, CPC/LP水凝膠處理組的毛囊和附屬結(jié)構(gòu)較多,在Masson染色中,由于膠原纖維被染成藍(lán)色,而肌肉纖維和細(xì)胞質(zhì)被染成紅色, CPC/LP納米復(fù)合水凝膠組呈現(xiàn)有更多的膠原蛋白沉積,表明CPC/LP水凝膠組能夠有效促進(jìn)創(chuàng)面閉合(圖8)。

3 討 論

傷口愈合一直是臨床研究重點(diǎn)探討的問題之一,水凝膠材料的應(yīng)用為細(xì)胞的募集和細(xì)胞外基質(zhì)的沉積提供了人工基質(zhì),以加速創(chuàng)面愈合[6]。然而,傳統(tǒng)的水凝膠沒有可注射性和自愈性,不能完全覆蓋形狀不規(guī)則的創(chuàng)面。可注射水凝膠由于其獨(dú)特的剪切變稀性能以及可任意塑形性已成為生物材料領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)[7-8]。席夫堿和狄爾斯-阿爾德等化學(xué)反應(yīng),以及氫鍵相互作用、靜電相互作用和疏水相互作用等超分子相互作用均可用于可注射水凝膠的制備[9]。

DA水凝膠由于具有組織黏附性、生物相容性、抗氧化活性等生物學(xué)特性和自愈合性能,被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域[10-11]。研究表明, DA 在堿性有氧潮濕的環(huán)境中可以氧化自聚合形成PDA。然而, DA水凝膠的形成通常需要添加氫氧化鈉、高碘酸鈉等強(qiáng)氧化劑誘導(dǎo)DA在水凝膠網(wǎng)絡(luò)中聚合形成PDA, 強(qiáng)氧化劑的加入很容易導(dǎo)致PDA的過度氧化[12]。納米黏土又稱硅酸鎂鋰,其結(jié)構(gòu)式為Na0.7Si8Mg5.5Li0.3O20(OH)4, 是一種表面帶負(fù)電荷、邊緣帶正電荷的具有片層結(jié)構(gòu)的納米材料,其直徑約為25 nm, 厚度約為1 nm。本研究利用納米黏土的層狀結(jié)構(gòu)容易被DA小分子插層,同時(shí)納米黏土分散液弱堿性含氧環(huán)境可直接將DA聚合形成PDA, 反應(yīng)過程中不需要引入任何其他強(qiáng)氧化劑[1, 13]。

CPC是藍(lán)藻的活性色素之一,通常從絲狀藍(lán)藻螺旋藻中分離得到,根據(jù)光譜特性的不同,可將CPC分為R-藻蛋白(R-PC)、別藻藍(lán)蛋白(A-PC)和含有氰基的藻藍(lán)蛋白(C-PC)三類[14]。C-PC是由α、β亞基組成的寡聚蛋白, C-PC的α亞基上含有1個(gè)藻青素發(fā)色團(tuán), β亞基上含有2個(gè)藻青素發(fā)色團(tuán), α亞基、β亞基的分子量分別為18 kDa和20 kDa[15]。研究[16]表明, C-PC具有促進(jìn)創(chuàng)面愈合、抗氧化以及抗腫瘤等生物活性。因此,本研究將CPC引入LP納米片體系中, LP納米片表面部分殘留的兒茶酚基團(tuán)可與CPC形成物理交聯(lián)的納米復(fù)合水凝膠。研究表明,LP納米片的質(zhì)量濃度會(huì)影響納米復(fù)合水凝膠的凝膠化性能,當(dāng)LP含量為3%, CPC含量為0.5%時(shí),凝膠化性能逐漸變好,即能夠形成穩(wěn)定的凝膠; 基于對(duì)CPC/LP可注射納米復(fù)合水凝膠凝膠化性能的研究,繼續(xù)對(duì)其流變性能進(jìn)行研究,應(yīng)變掃描和頻率掃描結(jié)果表明CPC/LP納米復(fù)合水凝膠具有自修復(fù)性能; 隨著剪切速率的增大, CPC/LP納米復(fù)合水凝膠的黏度逐漸減小,表明其具有剪切變稀性能,因此制備的納米復(fù)合水凝膠可任意塑形,很容易從注射器針頭擠出; 通過將不同質(zhì)量濃度的CPC/LP納米復(fù)合水凝膠與紅細(xì)胞進(jìn)行共孵育的方式評(píng)價(jià)其體外血液相容性,證實(shí)了CPC/LP納米復(fù)合水凝膠具有良好的血液相容性,采用浸提液與L929細(xì)胞共培養(yǎng)的方式證明納米復(fù)合水凝膠具有良好的細(xì)胞相容性,且能夠有效促進(jìn)創(chuàng)面的閉合。

綜上所述,本研究采用納米黏土分散液弱堿性含氧環(huán)境預(yù)聚合多巴胺單體形成LP聚集體,并將其與多功能CPC混合,通過氫鍵、離子鍵以及席夫堿等可逆鍵形成可注射納米復(fù)合水凝膠。形成的納米復(fù)合水凝膠具有良好的可注射性能、自愈合性能以及生物相容性。此外,可注射水凝膠能夠通過較小的針頭注射到損傷部位,可有效促進(jìn)創(chuàng)面的閉合。