淡水魚小瓜蟲、黏孢子蟲病流行規(guī)律及防控措施(上)

習(xí)丙文

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，江蘇 無(wú)錫 214081)

一、多子小瓜蟲的基礎(chǔ)生物學(xué)特征

多子小瓜蟲(Ichthyophthirius multifiliis)隸屬于原生動(dòng)物纖毛門、寡膜綱、膜口目、凹口科和小瓜蟲屬(Ichthyophthirius),可感染世界范圍內(nèi)幾乎所有淡水硬骨魚。嚴(yán)重感染時(shí)魚體皮膚、鰓覆蓋一層小白點(diǎn)，故稱“白點(diǎn)病”。病魚呼吸、滲透壓調(diào)節(jié)等功能受到嚴(yán)重影響；同時(shí)，由成蟲鉆出魚體所產(chǎn)生的傷口會(huì)進(jìn)一步誘發(fā)細(xì)菌性繼發(fā)感染。由于沒(méi)有嚴(yán)格宿主特異性，小瓜蟲病(“白點(diǎn)病”)嚴(yán)重感染時(shí)可造成苗種培育池、養(yǎng)殖池塘、河流水庫(kù)養(yǎng)殖網(wǎng)箱、室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)以及水族箱中養(yǎng)殖魚和觀賞魚大量死亡。據(jù)倪達(dá)書等(1960)考證，北宋文學(xué)家蘇軾在《物類相感志》中曾有“魚瘦而生白點(diǎn)者名虱，用楓樹皮投水中則愈”，為我國(guó)對(duì)魚的小瓜蟲病最早期的記載。

多子小瓜蟲的生活史相對(duì)較為簡(jiǎn)單。魚體寄生階段主要為滋養(yǎng)體；發(fā)育成熟的成蟲(大小300～800微米)鉆出表皮，沉入水底或附著于懸浮物上，蟲體表面纖毛消失，分泌凝膠狀物質(zhì)形成包囊；在適宜水溫下(15～25℃)包囊內(nèi)蟲體經(jīng)多次分裂生殖產(chǎn)生數(shù)百至上千個(gè)掠食體幼蟲；從包囊釋放出來(lái)的掠食體(大小20～50 微米)自由游動(dòng)在水體中，找到魚體后再次鉆入鰓、皮膚或鰭條的上皮層下發(fā)育成滋養(yǎng)體。在適宜的溫度和水環(huán)境下，小瓜蟲的繁殖和生長(zhǎng)速度很快，1～2 周內(nèi)可由零星幾個(gè)不易察覺的蟲體形成大量白點(diǎn)，覆蓋魚的鰓、皮膚、鰭條。

多子小瓜蟲的掠食體蟲與水體中的浮游纖毛蟲相似。其在包囊內(nèi)未成熟時(shí)呈圓形，隨著發(fā)育成熟，身體逐漸變長(zhǎng)，具有鉆孔器的前端比后端更尖。離開包囊的掠食體幼蟲呈扁鞋底形，兩側(cè)較寬，中間向內(nèi)凹陷。蟲體前部有1個(gè)大型伸縮泡，圓形的大核位于后部，小核位置不定，尾部有1 條約20 微米的尾毛。從包囊中剛剛孵出的掠食體游動(dòng)最為活躍，感染活力最強(qiáng)。根據(jù)外部環(huán)境條件，其在水體中可存活10～96小時(shí)。

掠食體侵入魚體后轉(zhuǎn)變?yōu)樽甜B(yǎng)體，在20℃條件下經(jīng)7天左右滋養(yǎng)體可以發(fā)育成熟。蟲體表有短而密集的纖毛快速擺動(dòng)，胞口位于腹面，胞咽呈袋狀。其最明顯的特征是具有1個(gè)馬蹄形或香腸形的大核。多子小瓜蟲滋養(yǎng)體成熟或受到刺激時(shí)，就會(huì)從宿主增生組織的“白點(diǎn)”中鉆出。數(shù)分鐘后形成包囊，一般是圓形或橢圓形。在適宜條件下進(jìn)行無(wú)性分裂繁殖，釋放大量的掠食體。

根據(jù)其生活史的特點(diǎn)，在魚體寄生階段的滋養(yǎng)體由宿主表皮和包囊覆蓋，治療小瓜蟲病的藥物往往需要很高濃度透過(guò)表皮后才能殺死蟲體。這導(dǎo)致很多藥物由于安全濃度問(wèn)題無(wú)法使用。目前常用的防治藥物主要針對(duì)小瓜蟲在水體中易被殺滅的掠食體階段；然而，由于魚體寄生滋養(yǎng)體發(fā)育不同步，會(huì)不斷釋放新的成蟲和掠食體而再次感染，導(dǎo)致許多治療藥物需要長(zhǎng)時(shí)間重復(fù)用藥，對(duì)魚體健康、養(yǎng)殖環(huán)境和質(zhì)量安全造成嚴(yán)重影響，如福爾馬林、硫酸銅、過(guò)氧化氫等。在養(yǎng)殖中孔雀石綠、硝酸亞汞等由于環(huán)境毒性、致畸致癌性在我國(guó)和多數(shù)國(guó)家被嚴(yán)格禁止使用，近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究人員一直致力于從免疫疫苗、植物提取物和菌體產(chǎn)物等方面探索有效防治藥物。

二、環(huán)境因素對(duì)小瓜蟲發(fā)生的影響

多子小瓜蟲的繁殖和病害發(fā)生與水溫密切相關(guān)。Forwood 等(2015)研究發(fā)現(xiàn)在5℃下，包囊孵化率只有71%，孵化時(shí)間約180小時(shí)，平均每個(gè)包囊孵化出200個(gè)掠食體；當(dāng)水溫升至21℃時(shí)，包囊孵化率達(dá)到100%，孵化耗時(shí)降低至18小時(shí)，平均產(chǎn)生420個(gè)掠食體；溫度25℃時(shí)，孵化時(shí)間進(jìn)一步縮短(14小時(shí))，孵化率有所降低(88%)；溫度較高(30℃)時(shí)，盡管孵化時(shí)間僅需12小時(shí)，但掠食體產(chǎn)量(288個(gè))大幅降低。掠食體在5℃環(huán)境下可存活長(zhǎng)達(dá)9天，25～30℃時(shí)可存活18小時(shí)。在低于5℃時(shí)，魚體上感染的滋養(yǎng)體一般不會(huì)離開魚體。

水體鹽度可以影響小瓜蟲病發(fā)生。陳達(dá)麗(2004)研究表明在水溫13.5℃時(shí)，鹽度20 對(duì)多子小瓜蟲滋養(yǎng)體、掠食體和包囊的殺滅時(shí)間依次是1、9和20分鐘。Mifsud和Rowland(2008)使用2～3 鹽度處理可有效控制多子小瓜蟲感染澳洲銀鱸。Forwood 等(2015)發(fā) 現(xiàn) 在12℃和17℃下，5～7.5鹽度暴露可顯著抑制包囊發(fā)育。

多子小瓜蟲存活和完成生活史要求溶氧1.0毫克/升以上和pH 5.5～10。Tange 等(2020)的研究發(fā)現(xiàn)，pH 為2.0～4.0時(shí)，所有的包囊在6小時(shí)內(nèi)死亡；pH 為5.0時(shí)，1/3的包囊存活并孵化出掠食體；pH 為6.0～8.0時(shí)，所有包囊都可以正常存活孵化；pH 為8.0時(shí)，25小時(shí)存活的掠食體數(shù)量最多；pH為9.0時(shí)，包囊在7小時(shí)內(nèi)能存活，近半包囊孵化出掠食體；pH 為10.0 以上，只有少量包囊可以釋放掠食體。

三、多子小瓜蟲病防治方法

1.物理措施 維持水體溫度≥30℃約1 周時(shí)間，對(duì)小瓜蟲病有較好的預(yù)防控制作用。需要注意該措施下養(yǎng)殖魚對(duì)溫度的耐受性，升溫速度過(guò)快會(huì)對(duì)魚造成應(yīng)激以及高溫會(huì)對(duì)水族箱水草造成危害。Bodensteiner等(2000)報(bào)道20.3厘米/分鐘的水流速度可以降低斑點(diǎn)叉尾鮰幼魚患小瓜蟲病的死亡率；增加流速至36.5厘米/分鐘時(shí)，可以清除水體中的多子小瓜蟲。Gratzek等(1983)的研究表明，在循環(huán)水管路中設(shè)置91 900 微瓦·秒/厘米2的紫外燈能有效控制多子小瓜蟲。

2.化學(xué)藥物及中草藥 在早期養(yǎng)殖病害防治中，孔雀石綠和汞制劑(氯化亞汞、硝酸亞汞、醋酸汞等)曾被發(fā)現(xiàn)對(duì)小瓜蟲病具有良好的治療效果，但由于其環(huán)境污染和食品安全問(wèn)題，已被國(guó)際上廣泛禁止使用。有報(bào)道稱硫酸銅對(duì)多子小瓜蟲病有一定的療效，但達(dá)治療濃度會(huì)對(duì)魚鰓損傷較嚴(yán)重。福爾馬林也曾被用于防治小瓜蟲病，但高劑量和多次用藥對(duì)魚體損傷較大。多子小瓜蟲的滋養(yǎng)體寄生在魚上皮組織中，很多藥物較難以滲透表皮有效殺滅蟲體。目前化學(xué)藥物主要針對(duì)多子小瓜蟲自由生活的掠食體階段，溴硝丙二醇(Shinn 等，2001)、過(guò) 碳 酸 鈉(Buchmann 等，2003)、磷酸氯喹(彭碧琳，2007)、高鐵酸鉀(Ling 等，2010)、二氧化氯(Melo 等，2015)等藥物表現(xiàn)出了一定的殺滅作用。

生姜、辣椒合劑是養(yǎng)殖一線最常使用的治療藥物，由于其強(qiáng)烈的刺激作用，故可使多子小瓜蟲滋養(yǎng)體離開魚體。有報(bào)道稱貫眾、檳榔組合物(馬澤寧，2019)、烏梅(鉏超等，2010)、黃花蒿(Wu 等，2017)等中草藥對(duì)小瓜蟲掠食體活性有抑制作用。近年來(lái)，植物提取劑中發(fā)現(xiàn)了多種對(duì)多子小瓜蟲有殺滅作用的成分，如丁香酚(姚嘉赟等，2016)、肉桂醛(梁靖涵等，2014)、10-姜酚(Fu等，2019)、小檗堿(Huang等，2022)、白屈菜紅堿(Shan 等，2014)、茵芋堿(Shan 等，2014)、厚樸酚(宋晨光，2018)、青蒿琥酯(彭碧琳，2007)等，在離體試驗(yàn)中都呈現(xiàn)出對(duì)小瓜蟲掠食體有較好的殺滅效果。

3.免疫預(yù)防 在養(yǎng)殖中經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)患過(guò)小瓜蟲病的魚，再次感染小瓜蟲的強(qiáng)度和死亡率都要低很多，呈現(xiàn)一定免疫保護(hù)作用。Burkart 等(1990)使用福爾馬林滅活的滋養(yǎng)體對(duì)斑點(diǎn)叉尾鮰進(jìn)行腹腔注射，成功誘導(dǎo)了對(duì)多子小瓜蟲感染的保護(hù)性免疫。閆春梅等(2014)使用人工合成抑動(dòng)蛋白基因片段的核酸疫苗對(duì)鯉進(jìn)行肌肉注射，疫苗提供的保護(hù)率達(dá)90%以上。劉芳玲(2022)設(shè)計(jì)合成的β-微管蛋白核酸疫苗取得了70%的保護(hù)率。然而，當(dāng)前小瓜蟲病疫苗還不成熟，缺乏商業(yè)化產(chǎn)品。

4.生物防治 近期研究發(fā)現(xiàn)水體浮游動(dòng)物橈足類(劍水蚤)可以捕食多子小瓜蟲的掠食體，模擬感染干預(yù)試驗(yàn)也證實(shí)大型浮游動(dòng)物的存在可以顯著降低金魚感染多子小瓜蟲的強(qiáng)度。該研究結(jié)果為進(jìn)一步開發(fā)多子小瓜蟲病的生物防治技術(shù)奠定了基礎(chǔ)。在養(yǎng)殖生產(chǎn)中一直存在這樣的現(xiàn)象：水肥(浮游生物豐富)的養(yǎng)殖環(huán)境不容易暴發(fā)小瓜蟲病，但在水質(zhì)清瘦(浮游生物少)的室內(nèi)循環(huán)水、山泉水或河流網(wǎng)箱等環(huán)境下容易暴發(fā)小瓜蟲病。因此，適度肥水以維持一定量的浮游動(dòng)物有利于控制小瓜蟲病的發(fā)生。

(待 續(xù))