黃芪甲苷對斷奶應激犢牛生長性能及血液生理生化指標的影響

摘要：本試驗旨在探討黃芪甲苷（ASIV）對斷奶應激犢牛生長性能、血液生理生化指標的影響。試驗選取體重（100 kg±5kg）相近、體況良好的早期斷奶荷斯坦犢牛40頭，隨機分為4組，每組10頭，單獨飼養。預試期7 d，正試期60 d。試驗1組（對照組）不添加ASIV，試驗2組每頭添加5 mg ASIV，試驗3組每頭添加10 mg ASIV，試驗4組每頭添加15 mg ASIV。結果表明：1）添加ASIV可以使斷奶應激犢牛試驗3組、試驗4組的平均日增重顯著高于試驗1組（p＜0.05）。2）血液中TP含量在斷奶第1天、7天時試驗3組顯著高于試驗1組（p＜0.05）；在斷奶第14天時試驗3組、試驗4組極顯著高于試驗1組（p＜0.01），在斷奶第21天、28天時試驗3組、試驗4組極顯著高于試驗1組與試驗2組（p＜0.01）。試驗2組血液中TP含量在斷奶后第21天、28天均顯著低于斷奶前（p＜0.05），試驗3組血液中TP含量在斷奶后第28天顯著高于斷奶前、斷奶后第1 天與第7天（p＜0.05）。3）血液中BUN含量在斷奶第14、21、28天時試驗2組、試驗3組、試驗4組顯著低于試驗1組（p＜0.05）。綜上可知，在本試驗條件下，ASIV有助于提高斷奶應激犢牛平均日增重，改善斷奶應激犢牛生長速度；提高斷奶應激犢牛血液中總蛋白濃度，降低血清尿素氮濃度，有利于提高機體免疫力和代謝水平，且以添加10 mg的ASIV效果較好。

關鍵詞：斷奶應激犢牛；黃芪甲苷；生長性能；血液生理生化指標

雖然犢牛早期斷奶可以降低犢牛生產成本，加快其瘤胃發育，為后期的生產性能奠定基礎，但犢牛早期免疫機能發育尚未完全，主要依賴母源抗體。犢牛早期斷奶及飼料類型等外界環境的改變，容易損傷其小腸上皮細胞，影響營養物質的吸收，產生應激，從而引起犢牛食欲不振、腹瀉等現象[1]。黃芪甲苷（astragaloside IV，ASIV）是黃芪的主要活性成分之一，常作為黃芪藥材的優劣性的標志，具有黃芪中其他成分不可比擬的生物活性[2-3]。研究發現，ASIV可以減緩高糖環境所引發的足細胞氧化應激損傷，為糖尿病、腎病的預防和治療提供依據[4]。ASIV可以抑制細胞中人腺病毒3型的復制，降低細胞凋亡率，從而抑制病毒，改善細胞功能，提高機體抗病毒能力[5]。ASIV也可以通過影響細胞信號通路抑制組織細胞的氧化應激反應，起到抗炎性反應及抗病毒等生物學作用，用于多種疾病的防治[6]。目前ASIV的研究多集中對細胞的抗氧化應激作用及小動物疾病防治方面，但ASIV對犢牛斷奶應激的研究較少，本文以早期斷奶荷斯坦犢牛為研究的對象，通過對犢牛飲水中添加不同水平的ASIV，探究ASIV對斷奶應激犢牛生長性能及血液生理生化指標的影響，為ASIV斷奶應激犢牛的影響提供數據支持。

1 "材料與方法

1.1 "試驗設計及飼養管理

試驗于2022年3月在寧夏農墾賀蘭奶業有限公司平吉堡奶牛場選取2月齡左右、體重相近（100 kg±5 kg）、體況良好的早期斷奶荷斯坦犢牛40頭，平均分為4組，每組10頭，并單獨飼養。試驗1組（對照組）不添加ASIV（ASIV的購買廠家為成都德思特生物技術有限公司，純度為100%），試驗2組每頭添加5 mg ASIV，試驗3組每頭添加10 mg ASIV，試驗4組每頭添加15 mg ASIV（犢牛斷奶前7 d將ASIV溶解在牛乳中；斷奶后用500 mL水溶解ASIV，待犢牛飲完后方可在桶中正常蓄水，保證其自由飲水），每天7：00和17：00各飼喂一次。基礎飼糧為犢牛顆粒料和燕麥草，犢牛顆粒料購自正大飼料廠，組成及營養成分見表1。試驗預飼期7 d，正飼期60 d。

1.2 "樣品采集與指標測定

1）生長性能測定。試驗開始后第1天與第60天早晨對犢牛空腹稱重，記錄每天飼料投喂量及剩料量，針對犢牛常見疾病如腹瀉、食欲下降等情況詳細記錄，計算公式如下：

平均日增重=（末體重-初體重）/試驗天數

日干物質采食量=（投喂量-剩料量）/試驗天數

料重比=日干物質采食量/平均日增重

發病率=試驗期發病牛數/試驗犢牛頭數×100%

2）血液生理生化指標測定。在斷奶前10天及斷奶后第0、7、14、21、28天晨飼前頸靜脈采血30 mL（3份），一份置于EDTA K2采血管中，于2 h內在獸醫實驗室用血細胞分析儀檢測血細胞理化指標[即：測定白細胞（WBC）、淋巴細胞（Lym）、單核細胞（Mon）、中性粒細胞（Neu）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白濃度（HGB）、血細胞比容（HCT）等指標]；其余兩份分別置于普通采血管中，靜置2 h后用3 000 r/min離心機離心15 min，吸取上清液分裝于1.5 mL離心管內，于-80 ℃超低溫冰箱保存，測定血液生化指標[即：測定葡萄糖（Glu）、總蛋白（TP）、總膽固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、血清尿素氮（BUN）等指標]。

1.3 數據統計分析

采用SAS 8.0統計軟件對試驗數據進行單因素方差分析（one-way ANOVA），并采用Duncan's法進行多重比較，結果以“平均值±標準差”表示，p＞0.05表示差異不顯著，p＜0.05表示差異顯著，p＜0.01表示差異極顯著性。

2 "試驗結果與分析

2.1 ASIV對斷奶應激犢牛生長性能的影響

如表2所示，各試驗組犢牛初始體重、末體重均無顯著差異（p＞0.05）；試驗3組、試驗4組平均日增重均顯著高于試驗1組（p＜0.05），與試驗2組差異不顯著（p＞0.05）；犢牛平均干物質采食量、料重比各試驗組無顯著差異（p＞0.05）。結合應激反應統計結果（食欲下降、腹瀉、死亡、發病率）可知，早期斷奶對犢牛的應激癥狀主要表現為食欲下降，其次是腹瀉。從料重比和干物質采食量數據可知，平均干物質采食量隨ASIV添加量的增加有升高趨勢。ASIV的添加具有提高犢牛食欲、增加飼料采食量的作用，但對提高飼料轉化率（料重比）效果不顯著（p＜0.05）。

2.2 ASIV對斷奶應激下犢牛血液生理指標的影響

由表3可以看出，各試驗組同一時期血液WBC、Lym、Mon、Neu、RBC、HGB、HCT在各組間無顯著差異（p＞0.05）。血液中Neu含量試驗1組斷奶前顯著高于斷奶后第21天（p＜0.05）；RBC含量試驗1組斷奶前顯著高于斷奶后第14、21、28天（p＜0.05）；HGB值試驗1組斷奶前顯著高于斷奶后第21、28天（p＜0.05），試驗2組斷奶前顯著高于斷奶后第28天（p＜0.05）。總體而言，除試驗1組Neu值在第21、28天略低于正常參考范圍，其他各組不同階段各指標均處于正常范圍；試驗1組WBC、Lym、Mon在斷奶前后無顯著差異（p＞0.05），但其含量呈現為在斷奶初期稍增加而后下降的趨勢。

2.3 "ASIV對斷奶應激犢牛血液生化指標的影響

由表4可知，不同試驗組間：血液中Glu、TCH、TG指標在不同試驗期間各試驗組含量無顯著差異（p＞0.05）。血液中TP含量在斷奶前、斷奶第1、7天時試驗3組顯著高于試驗1組，與試驗2組、試驗4組無顯著差異（p＞0.05）；TP含量在斷奶第14 天時試驗3組、試驗4組極顯著高于試驗1組（p＜0.01），與試驗2組差異顯著（p＜0.05）；TP含量在斷奶第21、28天時試驗3組與試驗4組極顯著高于試驗1組與試驗2組（p＜0.01）；血液中BUN含量在斷奶第14、21、28天時試驗1組均顯著高于試驗2組、試驗3組、試驗4組（p＜0.05）。不同試驗時期：試驗1組TP含量在斷奶后第14、21、28天均顯著低于斷奶前（p＜0.05），且斷奶后第21、28天 TP含量均顯著低于斷奶后14天（p＜0.05）；試驗2組斷奶后第21、28天 TP含量均顯著低于斷奶后（p＜0.05），且斷奶后第28天 TP含量顯著低于斷奶后第1、7天（p＜0.05）；試驗3組斷奶后28天 TP含量顯著高于斷奶前、斷奶后第1與第7天（p＜0.05）；試驗4組斷奶后第28天 TP含量顯著高于斷奶后第1與7天（p＜0.05）。試驗1組BUN含量斷奶前顯著低于斷奶后第1、7、14、21、28天（p＜0.05）；斷奶后第7天顯著低于斷奶后28天，與斷奶后第1、14、21天差異不顯著（p＞0.05）。由此可知，斷奶應激可影響犢牛TP、BUN含量。

3 "討論

3.1 "ASIV對斷奶應激犢牛生長性能的影響

體重是生長性能的重要指標[7]。研究顯示，黃芪及其提取物對畜禽的生長發育具有促進作用：在斷奶犢牛飼糧中添加黃芪提取物能顯著提高其的平均日增重，顯著降低料重比，提高飼料轉化率[8]，仔豬飼糧中添加黃芪多糖可以增加仔豬日增重，但對飼料轉化率并沒有改善作用[9]，在幼兔基礎日糧中添加黃芪多糖，可以顯著提高幼兔生長性能，降低腹瀉率和死亡率，并提高機體免疫力[10]。王亞芳[11]在犢牛飼糧中添加ASIV，對犢牛干物質的采食量以及飼料的轉化率并沒有產生顯著影響，但ASIV可以顯著增加犢牛的平均日增重，并顯著影響犢牛最終體重。本試驗結果中，ASIV的添加對斷奶應激犢牛平均干物質采食量沒有影響，但可以顯著影響斷奶應激犢牛的平均日增重。犢牛小腸的發育并未完全，其分泌的消化酶濃度未達到很好消化淀粉的水平，犢牛斷奶時飼糧結構等的改變容易引起營養物質的消化不良，導致犢牛出現腹瀉等現象，影響生長性能[12]。本試驗中，隨著ASIV添加量的增加，斷奶犢牛的食欲不振和腹瀉情況均有好轉，這與王亞芳[11]的研究結果相似，可能與ASIV可以改善斷奶應激犢牛的腸道環境，促進營養物質的吸收密切相關。

3.2 "ASIV對斷奶應激犢牛血液生理指標的影響

犢牛斷奶后血液中Lym數、Neu數以及RBC數和血小板數會發生顯著變化[13]。范超等[14]研究顯示斷奶應激對犢牛Neu數、血HGB均有顯著降低作用，尤其在斷奶21d時較為顯著。本試驗中也出現相似現象，試驗1組斷奶犢牛Neu數、HGB在斷奶第21天時顯著低于斷奶前。有研究顯示，黃芪多糖對繁育獼猴的WBC、Lym百分數、Lym數均有顯著作用，其WBC數在試驗后1月及3月均顯著高于試驗前[15]；在小鼠體內試驗中，ASIV可以使小鼠體內產生相關抗體，并能使小鼠體內T、B Lym數顯著增多[16]。本試驗中，試驗1組Neu含量在斷奶前顯著高于斷奶后期，與WBC數在斷奶后期含量下降一致，可能是斷奶應激會促使機體內各種細胞含量發生改變來適應外界刺激。WBC、Mon在斷奶初期含量增加隨后降低，可能與WBC、Mon吞噬異物導致自身細胞自身死亡有關，進一步說明斷奶降低了犢牛的免疫能力和抵抗力。斷奶使犢牛產生厭食、消化不良、腹瀉等癥狀，容易造成犢牛體內鐵含量降低，降低血紅蛋白合成，進而降低紅細胞的合成，使犢牛出現貧血現象[14]。本試驗中，試驗1組RBC、HCT在斷奶前后均呈下降趨勢，且HGB在斷奶后期與斷奶前呈顯著差異；試驗2組添加5 mg ASIV對斷奶后犢牛HGB降低有所改善，且雖ASIV添加量的增加血液中HGB降低趨勢明顯減緩，這也與生產性能試驗中采食量變化趨勢相似。故日糧中至少添加10 mg的ASIV對緩解犢牛斷奶應激效果較為顯著。

3.3 "ASIV對斷奶應激犢牛血液生化指標的影響

血液TP含量不僅可以體現機體蛋白質代謝水平，也與機體免疫力息息相關，提高TP含量有利于提高機體免疫力和代謝水平[17-18]。反芻動物機體BUN的代謝主要在肝臟代謝[19]，其濃度是衡量動物機體氮代謝、氨基酸平衡和能量氮平衡的重要指標[20]，正常情況下BUN濃度較低，表明動物機體氨基酸代謝正常，機體蛋白質合成率較高[21]。犢牛肝臟還未完全適應能量供應由乳糖轉變為瘤胃揮發性脂肪酸的方式[22]。陳志輝等[23]研究顯示斷奶應激犢牛血清尿素氮含量在斷奶后21天顯著高于斷奶前1天，導致犢牛體蛋白大量分解。TG和TCH是反映機體的脂質代謝的重要指標，GLU是反應能量代謝的重要指標[24]。斷奶應激可以導致犢牛血液中TG濃度顯著降低，且在3周后仍低于斷奶前[23]。ASIV可以促進斷奶犢牛蛋白質的吸收，減少蛋白質代謝，而對犢牛脂質代謝、能量代謝無影響。王亞芳[11]研究顯示，斷奶犢牛飼料中添加ASIV，可以使TP含量在60 天時顯著升高，對TG、TCH、GLU均無顯著影響，可能是由瘤胃和消化道發育有關。本試驗中，試驗1組TP含量隨飼喂時間的延長具有降低的趨勢，試驗2組中添加ASIV后，TP含量降低減緩，試驗3組、試驗4組TP含量逐漸升高，可能與ASIV可以促進蛋白質的代謝，影響犢牛體重有關。另外，ASIV降低了斷奶犢牛血液中BUN含量，可能是ASIV促進了N的利用率。另外，當ASIV添加量達到15mg時，體重及血液生化指標并未表現出優于試驗3組的現象，其原因有待進一步研究。

4 結論

綜上可知，在本試驗條件下，ASIV有助于提高斷奶應激犢牛平均日增重，改善斷奶應激犢牛生長速度；提高斷奶應激犢牛血液中總蛋白濃度，降低血清尿素氮濃度，有利于提高機體免疫力和代謝水平，且以添加10 mg的ASIV效果較好。

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