鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑在慢性牙周炎中的應用效果及對牙周微生態的影響

【摘要】 目的：鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑在慢性牙周炎中的應用效果及對炎癥水平的影響。方法：選取2020年6月—2022年6月錦州醫科大學附屬第二醫院收治的100例慢性牙周炎患者，使用隨機數字表法分為觀察組（甲硝唑聯合鹽酸米諾環素軟膏）和對照組（甲硝唑），各50例，對比兩組的治療總有效率、牙周指標、齦溝液炎癥因子指標、Th17、Treg細胞水平及牙周微生態指標。結果：觀察組的治療總有效率（96.00%）高于對照組（84.00%），差異有統計學意義（Plt;0.05）。治療前，兩組的牙齦指數（GI）、附著喪失水平（AL）、菌斑指數（PLI）及探診深度（PD）相較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；治療1個月后，兩組上述四項指標水平均降低，觀察組均低于對照組，差異均有統計學意義（Plt;0.05）。治療前，兩組的齦溝液單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）、基質金屬蛋白酶-8（MMP-8）、白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-1β（IL-1β）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平比較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；治療1個月后，兩組上述五項指標水平均降低，觀察組均低于對照組，差異均有統計學意義（Plt;0.05）。治療前，兩組的Th17及Treg細胞水平相較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；治療1個月后，兩組上述兩項指標水平均降低，觀察組均低于對照組，差異均有統計學意義（Plt;0.05）。治療前，兩組的產黑色素厭氧桿菌、具核梭桿菌、消化鏈球菌、兼性需氧鏈球菌菌落數相較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；治療1個月后，兩組的產黑色素厭氧桿菌、具核梭桿菌、消化鏈球菌菌落數均降低，觀察組均低于對照組，兼性需氧鏈球菌菌落數均升高，觀察組高于對照組，差異均有統計學意義（Plt;0.05）。結論：鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑可有效改善慢性牙周炎患者的牙周指標，減輕炎癥反應，下調Th17及Treg細胞水平，保護牙周微生態，效果優異。

【關鍵詞】 慢性牙周炎 甲硝唑 鹽酸米諾環素軟膏 炎癥因子 牙周微生態

Application Effect of Minocycline Hydrochloride Ointment Combined with Metronidazole in Chronic Periodontitis and Its Influence on Periodontal Microecology/MA Nan. //Medical Innovation of China， 2023， 20（20）： 0-031

[Abstract] Objective： The effect of Minocycline Hydrochloride Ointment combined with Metronidazole in chronic periodontitis and its influence on inflammation level. Method： One hundred patients with chronic periodontitis admitted to the Second Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University from June 2020 to June 2022 were selected， randomized number table method was used to divide the observation group （Metronidazole combined with Minocycline Hydrochloride Ointment） and the control group （Metronidazole）， with 50 cases each. The total effective rate， periodontal index， gingival crevicular fluid inflammatory factor index， Th17， Treg cell level and peridental microecological index were compared between the two groups. Result： The total effective rate of treatment in the observation group （96.00%） was higher than that in the control group （84.00%）， the difference was statistically significant （Plt;0.05）. Before treatment， there were no statistically significant differences between the two groups in terms of gingival index （GI）， attachment loss level （AL）， plaque index （PLI） and probing depth （PD） （Pgt;0.05）; after 1 month of treatment， the levels of the above four indexes decreased in both groups， and those of the observation group were lower than those of the control group， the differences were statistically significant （Plt;0.05）. Before treatment， there were no statistically significant differences in the levels of monocyte chemotactic protein-1 （MCP-1）， matrix metalloproteinase-8 （MMP-8）， interleukin-6 （IL-6）， interleukin-1β （IL-1β） and tumour necrosis factor-α （TNF-α） in the gingival sulcus between the two groups （Pgt;0.05）; after 1 month of treatment， the levels of the above five indexes decreased in both groups， and those of the observation group were lower than those of the control group， the differences were statistically significant （Plt;0.05）. Before treatment， there were no statistically significant differences in the levels of Th17 and Treg cells between the two groups （Pgt;0.05）; after 1 month of treatment， the levels of both indicators decreased in both groups， and those of the observation group were lower than those of the control group， the differences were statistically significant （Plt;0.05）. Before treatment， the differences in the number of colonies of melanin-producing anaerobic bacteria， Clostridium perfringens， Streptococcus digestiveis and Streptococcus aerogenes in the two groups were not statistically significant （Pgt;0.05）; after 1 month of treatment， the number of colonies of melanin-producing anaerobic bacteria， Clostridium perfringens and Streptococcus digestiveis in the two groups decreased， and those of the observation group were lower than those of the control group， and the number of colonies of Streptococcus aerogenes increased， and that of the observation group was higher than that in the control group， the differences were statistically significant （Plt;0.05）. Conclusion： Minocycline Hydrochloride Ointment combined with Metronidazole can effectively improve periodontal indexes， reduce inflammatory response， downregulate Th17 and Treg cell levels and protect periodontal microecology in patients with chronic periodontitis， with excellent results.

[Key words] Chronic periodontitis Metronidazole Minocycline Hydrochloride Ointment Inflammatory factor Periodontal microecology

First-author's address： The Second Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University， Jinzhou 121001， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.20.006

慢性牙周炎具有較高發病率，也是口腔科常見疾病，發病率占牙周疾病的95%以上，多由厭氧菌等牙周致病菌引發，患者表現出牙槽骨吸收、牙齒松動，嚴重可導致牙齒脫落，給患者口腔健康帶來嚴重威脅[1-2]。慢性牙周炎臨床主要采用基礎治療及輔助藥物治療，甲硝唑是治療牙周炎一線藥物，是一種抗厭氧菌藥物，可抑制牙周致病菌從而改善慢性牙周炎的臨床癥狀，但長期使用易引起細菌耐藥，導致預后不佳[3]。鹽酸米諾環素作為抗生素藥物，在殺滅牙周致病菌的同時還可促進骨形成、抑制骨吸收，整體效果優異[4]。本研究將探討單獨使用甲硝唑與鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑兩種用藥方案在慢性牙周炎中的應用效果，并著重探究對牙周微生態的影響。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在錦州醫科大學附屬第二醫院醫學倫理委員會審核批準下，選取2020年6月—2022年6月收治的100例慢性牙周炎患者。納入標準：（1）符合慢性牙周炎的診斷標準；（2）口內余牙數量gt;20顆，牙周袋深度≥4 mm；（3）研究開始前3個月內無牙周治療史，且未服用過抗菌藥物；（4）無咬合創傷及不良修復體。排除標準：（1）嚴重心肝腎功能異常；（2）牙周組織外傷；（3）合并呼吸系統或消化系統感染；（4）認知障礙。使用隨機數字表法將患者分為觀察組（n=50）和對照組（n=50）。患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

兩組患者均接受牙周基礎治療，包括齦上潔治、齦下刮治、菌斑控制等。

對照組患者接受甲硝唑治療。甲硝唑片（生產廠家：亞寶藥業集團股份有限公司，批準文號：國藥準字H14020964，規格：0.2 g）口服，0.4 g/次，2次/d。

觀察組患者接受鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑治療。甲硝唑的使用方法與對照組相同。常規基礎治療后，向牙周袋內注入鹽酸米諾環素軟膏（生產廠家：日本新時代株式會社Sunstar INC，批準文號：注冊證號H20150106，規格：0.5 g），至軟膏溢出后停止，1次/周。

兩組患者均連續治療1個月。

1.3 觀察指標與評價標準

1.3.1 治療總有效率 治療1個月后，綜合評定兩組患者的治療效果。若治療后牙齦腫脹顯著減輕、牙周袋無溢膿、牙周袋深度減少gt;2 mm，牙齒松動度顯著改善，則為顯效；若治療后牙齦腫脹有所減輕、牙周袋無溢膿、牙周袋深度減少gt;1 mm，牙齒松動度有輕微改善，則為有效；若治療后牙周情況未達到上述標準，則為無效。總有效率=（顯效例數+有效例數）/總例數×100%。

1.3.2 牙周指標 于治療前及治療1個月后，觀察兩組患者的牙齦指數（GI）、附著喪失水平（AL）、菌斑指數（PLI）及探診深度（PD）。GI：結合患者的牙齦顏色、出血情況、質地改變情況，0～3分，分數越高，牙齦炎癥越嚴重。PD：為齦緣至牙周袋底的深度，使用牙周探針進行測量。AL：為探診深度減去釉牙骨質界至齦緣的距離。PLI：估測牙菌斑厚度，評分范圍0～3分，分數越高，表示菌斑越嚴重。

1.3.3 齦溝液炎癥因子指標 于治療前及治療1個月后，采集兩組患者齦溝液標本，使用酶聯免疫吸附法檢測單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）、基質金屬蛋白酶-8（MMP-8）、白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-1β（IL-1β）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平。

1.3.4 Th17及Treg細胞水平 于治療前及治療1個月后，采集兩組患者清晨空腹靜脈血2 mL，應用美國BD公司生產FACSCalibur型流式細胞儀測定Th17、Treg細胞水平。

1.3.5 牙周微生態指標 于治療前及治療1個月后，指導患者使用漱口水漱口，隨后使用消毒棉球蘸干，局部隔濕后于牙周袋、冠周盲袋處插入消毒紙尖，30 s后將紙尖放置在1 mL厭氧轉送液中進行檢測。記錄治療前后產黑色素厭氧桿菌、具核梭桿菌、消化鏈球菌、兼性需氧鏈球菌的菌落數。

1.4 統計學處理

研究所得數據錄入SPSS 22.0進行分析，計數資料以率（%）表示，使用字2檢驗；計量資料以（x±s）表示，組間比較使用獨立樣本t檢驗，組內比較采用配對t檢驗。當Plt;0.05時，差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料

觀察組中男29例，女21例；年齡23～78歲，

平均（47.65±3.29）歲；病程1.5～8年，平均（4.32±1.24）年。對照組中男30例，女20例；年齡22～78歲，平均（47.62±3.19）歲；病程1.5～8年，平均（4.28±1.21）年。兩組的一般資料相較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05），具有可比性。

2.2 治療總有效率

觀察組的治療總有效率為96.00%，高于對照組的84.00%，差異有統計學意義（字2=4.000，P=0.046），見表1。

2.3 牙周指標

治療前，兩組的GI、AL、PLI及PD相較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；治療1個月后，兩組上述四項指標水平均降低，觀察組均低于對照組，差異均有統計學意義（Plt;0.05）。見表2。

2.4 齦溝液炎癥因子指標

治療前，兩組的齦溝液MCP-1、MMP-8、IL-6、IL-1β及TNF-α水平相較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；治療1個月后，兩組上述五項指標水平均降低，觀察組均低于對照組，差異均有統計學意義（Plt;0.05）。見表3。

2.5 Th17及Treg細胞水平

治療前，兩組的Th17及Treg細胞水平相較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；治療1個月后，兩組上述兩項指標水平均降低，觀察組均低于對照組，差異均有統計學意義（Plt;0.05）。見表4。

2.6 牙周微生態指標

治療前，兩組的產黑色素厭氧桿菌、具核梭桿菌、消化鏈球菌、兼性需氧鏈球菌菌落數相較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；治療1個月后，兩組的產黑色素厭氧桿菌、具核梭桿菌、消化鏈球菌菌落數均降低，觀察組均低于對照組，兼性需氧鏈球菌菌落數均升高，觀察組高于對照組，差異均有統計學意義（Plt;0.05）。見表5。

3 討論

食物嵌塞、不良修復體、菌斑等局部刺激因素導致牙齦出現炎癥，若不能及時清除，則會導致炎癥向深部擴展，破壞膠原組織，致使上皮向根方生長，形成牙周袋，促進牙槽骨吸收，誘發慢性牙周炎[5-6]。甲硝唑是一種治療牙周炎常用藥物，可抗厭氧菌、抗原蟲，屬于硝基咪唑類藥物，但短期治療效果欠佳，多數患者需長期服藥，可致使患者產生耐藥性，治療效果不盡如人意。鹽酸米諾環素軟膏是一種由氨基烷基異丁烯酸共聚物、濃甘油等物質組成，可顯著抑制細菌蛋白質的合成，抗菌譜較廣，對消化鏈球菌、厭氧菌、優桿菌、梭桿菌等均可發揮良好的抗菌效果，局部緩釋抗菌效果較強，且藥物起效較快、藥效時間長，整體效果優異[7-8]。

GI、AL、PLI及PD是評估慢性牙周炎療效的臨床直觀指標[9]。鹽酸米諾環素軟膏不但能夠起到抗菌效果，且可抑制骨吸收，利于牙周組織的再生，并可促使牙周膜成纖維細胞增殖，有效穩固牙齦，利于牙周組織的恢復[10]。本研究結果顯示，觀察組GI、AL、PLI及PD水平均低于對照組，提示鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑有利于改善慢性牙周炎患者的牙周指標，促進牙周組織的恢復。

炎癥反應參與慢性牙周炎的發生、進展。MCP-1及IL-6是可對牙周炎癥予以反映的炎癥因子，其水平升高表示炎癥進一步發展，牙周炎加重[11-12]。MMP-8是一種基質金屬蛋白酶，其高表達量可加重牙周炎癥。宿主的防御系統被病原菌激活后，會釋放IL-1β、TNF-α等大量的炎癥介質細胞因子，是判斷牙周炎發病的關鍵因子[13]。鹽酸米諾環素軟膏抗菌效果較好，可有效消除病原菌對牙周組織的刺激，對炎癥因子的釋放產生抑制，從而顯著減輕機體的炎癥反應[14-15]。Th17是一種CD4+T細胞亞型，其可合成IL-17，使其釋放炎癥因子，并與其產生協同作用，誘發級聯炎癥反應，加劇對牙周組織的破壞。Treg細胞則可分泌抗炎因子，抑制T細胞的增殖與分化，同時調控機體的免疫應答，從而產生抗炎效果[16-17]。本研究結果顯示，觀察組MCP-1、MMP-8、IL-6、IL-1β、TNF-α、Th17及Treg細胞水平均低于對照組，提示鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑可降低慢性牙周炎患者炎癥水平，進而改善病情。

多重厭氧菌混合感染是導致慢性牙周炎發生發展的主要原因，產黑色素厭氧桿菌、具核梭桿菌、消化鏈球菌、兼性需氧鏈球菌幾種厭氧菌為主要的可以致病菌[18-19]。牙周微生態中厭氧菌菌落過多，不利于正常菌群的恢復，最終致使牙周炎病情加重。鹽酸米諾環素軟膏具有良好抗菌效果，可有效殺滅厭氧菌，維持牙周微生態平衡[20]。本研究結果顯示，觀察組患者的產黑色素厭氧桿菌、具核梭桿菌、消化鏈球菌菌落數均降低，兼性需氧鏈球菌菌落數均升高，優于接受單一甲硝唑治療的患者，提示鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑有利于保護慢性牙周炎患者的牙周微生態，效果優異。本研究結果顯示，接受鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑治療的患者的治療總有效率高于接受單一甲硝唑治療的患者，提示鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑治療慢性牙周炎效果顯著。

綜上所述，鹽酸米諾環素軟膏聯合甲硝唑可有效改善慢性牙周炎患者的牙周指標，減輕炎癥反應，下調Th17及Treg細胞水平，保護牙周微生態，效果優異。

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（收稿日期：2023-05-29） （本文編輯：張爽）