ST段抬高型心肌梗死患者服用替格瑞洛后血小板高反應(yīng)性與白細(xì)胞介素-6相關(guān)關(guān)系研究

童方念, 程茗慧, 劉 丹, 宋海旭, 田孝祥, 張效林

北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院 寒地心血管病全國重點實驗室,遼寧 沈陽 110016

經(jīng)皮冠狀動脈介入手術(shù)阿司匹林聯(lián)合P2Y12受體拮抗劑替格瑞洛雙聯(lián)抗血小板治療是急性冠狀動脈綜合癥的基礎(chǔ)治療方法,已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床治療,雙聯(lián)抗血小板治療能顯著降低急性冠狀動脈綜合癥患者嚴(yán)重心血管不良事件的發(fā)生[1-3]。替格瑞洛作為一種新型的P2Y12受體抑制劑,能夠選擇性抑制二磷酸腺苷與血小板P2Y12受體可逆性結(jié)合,進(jìn)而進(jìn)一步影響血小板的活化和聚集反應(yīng),從而抑制冠狀動脈介入治療術(shù)后支架內(nèi)血栓的形成,使得急性冠狀動脈綜合癥患者的長期預(yù)后得到改善[4-5]。替格瑞洛能夠與血小板表面的二磷酸腺苷P2Y12受體結(jié)合,這種結(jié)合是一種可逆性的結(jié)合,停用替格瑞洛后,血小板聚集和活化功能也隨之恢復(fù)[6]。部分急性冠狀動脈綜合癥患者服用替格瑞洛后出現(xiàn)血小板高反應(yīng)的現(xiàn)象,降低了臨床上常規(guī)抗血小板藥物治療效果,增加部分經(jīng)皮冠狀動脈介入手術(shù)急性冠狀動脈綜合癥患者血栓事件的發(fā)生[7]。本研究旨在探討ST段抬高型心肌梗死(ST-elevation myocardial infarction,STEMI)患者服用替格瑞洛后,炎性因子白細(xì)胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的表達(dá)水平是否與格瑞洛治療后血小板殘余活化存在潛在相關(guān)關(guān)系?，F(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取自2016年4月至2018年3月北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院心血管內(nèi)科胸痛中心收治的60例STEMI患者為研究對象。入選標(biāo)準(zhǔn):年齡35～75歲,行經(jīng)皮冠狀動脈介入治療。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)胸痛持續(xù)時間>30 min,發(fā)病時間<12 h;(2)心肌酶譜升高且呈動態(tài)變化;(3)心電圖示至少2個導(dǎo)聯(lián)ST段呈弓背抬高>0.1 mV;(4)冠狀動脈造影顯示冠狀動脈主支的狹窄程度≥50%。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)對替格瑞洛和阿司匹林藥物過敏;(2)全身免疫系統(tǒng)疾病;(3)血液系統(tǒng)疾病;(4)先天性心臟病等;(5)內(nèi)臟出血性疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

1.2.1 臨床STEMI樣本的收集 本研究入選60例STEMI患者均在急診收住院治療,入院后服用180 mg替格瑞洛,采集患者的靜脈血。

1.2.2 光比濁法測定血小板聚集率 采用經(jīng)典的光比濁法測定血小板聚集率,進(jìn)而檢測血小板活化功能。血小板聚集率的測定在STEMI患者服用替格瑞洛2 h后完成,當(dāng)血小板聚集率≥59%定義為服用替格瑞洛后高反應(yīng)組(HRP組,n=30),當(dāng)血小板聚集率<59%定義為服用替格瑞洛后正常反應(yīng)組(NRP組,n=30)。

1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中IL-6的表達(dá)含量 采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)(AB178013)檢測HRP組和NRP組患者服用替格瑞洛后24 h血漿中IL-6的表達(dá)水平。將待檢測的血漿樣品和ELISA試劑盒放置室溫下,制備檢測IL-6測定的標(biāo)準(zhǔn)品,按照倍比稀釋的原則將標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度進(jìn)行稀釋,稀釋倍數(shù)分別為以下7個濃度梯度:500.0、250.0、125.0、62.5、31.3、7.8、0 pg/ml,依據(jù)濃度梯度加入100 μl待檢測液進(jìn)入ELISA板的測定孔內(nèi),室溫1 h,洗滌后加入100 μl HRP偶聯(lián)檢測抗體室溫1 h,清洗3次后,TECAN酶標(biāo)儀檢測STEMI患者HRP組和NRP組血漿樣品的光密度值,計算血漿樣品IL-6的濃度。

2 結(jié)果

2.1 兩組STEMI患者的臨床基線資料比較 HRP組和NRP組STEMI患者的年齡、吸煙比例、體質(zhì)量、血糖水平,以及實驗室常規(guī)血液和生化檢測指標(biāo)比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組STEMI患者的臨床基線資料比較

2.2 STEMI患者服用替格瑞洛后HRP組及NRP組血小板聚集率比較 NRP組STEMI患者在服用雙聯(lián)抗血小板藥物2 h后測定血漿中血小板聚集率為(30.77%±16.71%),低于HRP組的(74.69%±9.57%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見圖1。

圖1 STEMI患者NRP組和HRP組血小板聚集率比較

2.3 STEMI患者服用替格瑞洛后NRP組及HRP組血清中IL-6表達(dá)水平比較 NRP組、HRP組血漿中IL-6的表達(dá)含量分別為(31.04±4.43) pg/ml、(34.67±10.57) pg/ml,兩組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.11)。見圖2。

圖2 STEMI患者NRP組和HRP組血漿中IL-6水平比較

3 討論

替格瑞洛是環(huán)戊基三唑嘧啶類化合物,抑制二磷酸腺苷與血小板上的嘌呤2受體亞型P2Y12可逆性結(jié)合,從而抑制血小板的活化與聚集,停藥后血小板功能隨之快速恢復(fù)[8-9]。替格瑞洛半衰期為7～12 h,生物利用度為36%,口服后吸收迅速,無需經(jīng)肝代謝激活即可直接起效[10-12]。

近年來,大量研究表明,急性冠狀動脈綜合癥患者經(jīng)替格瑞洛抗血小板治療后,發(fā)生血栓事件,出現(xiàn)殘余血小板的聚集和活化[5,13]。RAPID研究結(jié)果表明,STEMI患者服用替格瑞洛180 mg后,部分患者不能很快達(dá)到抗血小板效果,出現(xiàn)殘余血小板高反應(yīng),RAPID研究將負(fù)荷劑量的替格瑞洛增加到360 mg,仍出現(xiàn)殘余血小板反應(yīng)[12]。服用抗血小板藥物后出現(xiàn)血小板高反應(yīng)現(xiàn)象的原因受很多因素影響,本課題組的前期研究證明,藥物代謝酶類基因多態(tài)性的不同不是影響替格瑞洛抗血小板治療效果的原因,腸道內(nèi)菌群的改變影響了替格瑞洛對STEMI患者治療后血小板反應(yīng)性[14]。本研究進(jìn)一步通過ELISA方法檢測兩組研究對象的血清中IL-6的表達(dá)水平是否存在差異,是否由于IL-6表達(dá)的不同引起兩組研究對象血小板反應(yīng)性的不一致,結(jié)果發(fā)現(xiàn),NRP組和HRP組血漿中IL-6的表達(dá)含量比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),進(jìn)一步說明在STEMI患者服用替格瑞洛后,血漿IL-6炎性因子的水平不是引起STEMI患者替格瑞洛出現(xiàn)抵抗的原因,可能是STEMI患者的心肌組織缺氧的時間不同,引起心肌組織局部氧化應(yīng)激反應(yīng)的不同,氧化應(yīng)激產(chǎn)物吸收入血后,通過干預(yù)腸道菌群的代謝,間接影響腸道對替格瑞洛化學(xué)藥物的吸收。

本研究的局限性:本研究患者例數(shù)較少,且僅比較了兩組患者IL-6的表達(dá)水平,未進(jìn)行其他炎性因子的比較,可以在以后的研究中增加其他炎性因子的檢測。本研究為單中心的結(jié)果,未來可以增加多中心的研究,通過復(fù)制實驗驗證本研究的結(jié)果。

綜上所述,經(jīng)皮冠狀動脈介入手術(shù)治療的STEMI患者在服用替格瑞洛后出現(xiàn)血小板抑制效應(yīng)與其血漿中炎性因子IL-6的表達(dá)水平無相關(guān)關(guān)系。