Th22、Th17、Treg淋巴細胞在白癜風患者中的表達及其與血清5-HT、MT水平的關系

郭冰心,田卓,翟翊然

(南陽市中心醫院 皮膚科,河南 南陽 473000)

白癜風是一種常見的后天性限局性或泛發性皮膚色素脫失病,多數由皮膚黑素細胞功能異常引起[1]。目前,臨床上普遍認為白癜風與患者自身免疫、微量元素缺乏、精神及神經化學等有關,好發于指、背、顏面、腕、生殖器周圍等,影響患者形象[2-3]。輔助性T淋巴細胞22(T helper lymphocyte 22,Th22)由朗格漢斯細胞分化而來,直接參與白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分化[4-5]。輔助性T淋巴細胞17(T helper lymphocyte 17,Th17)是CD4+Th淋巴細胞亞群,具有獨立的分化、發育機制,能特異性產生IL-17,且在白癜風中的作用已經有報答,能參與機體免疫調節[6]。調節性T淋巴細胞(Treg)在維持機體免疫自穩、免疫耐受中發揮了重要的作用[7]。5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的代謝產物直接影響色素脫失,5-HT在白癜風發病過程中存在相關的癥狀有非常重要的作用,人類皮膚的顏色主要與表皮中黑素細胞合成黑素以及黑素傳遞至周圍角質形成細胞有關。酪氨酸酶是黑素合成的關鍵酶,是黑素細胞分化成熟的一個特征性標志,其活性與黑素合成含量呈正相關,因而增加黑素細胞數量、激活酪氨酸酶和加速黑素合成的治療手段對白癜風的復色有治療效果。但是,臨床上對于Th22、Th17及Treg淋巴細胞在白癜風患者中的表達及與血清5-HT、褪黑素(melatonin,MT)水平相關性研究較少[8-9]。本文采旨在探討Th22、Th17、調節性T淋巴細胞Treg在白癜風患者中的表達及與5-HT、MT水平的相關性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2020年5月至2022年6月醫院收治的78例白癜風患者作為研究對象,作為觀察組,分為活動期白癜風(48例)和靜止期白癜風(30例),根據分型分為尋常型白癜風(36例)和節段型白癜風(42例)。觀察組男29例,女49例,年齡(24～63)歲,平均(43.98±5.71)歲;病程(12～68)個月,平均(35.71±3.49)個月。選擇同期健康體檢者37例,設為對照組,男21例,女16例;年齡(25～64)歲,平均(44.11±5.79)歲。觀察組和對照組的一般資料差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經醫院醫學倫理委員會審批。

1.2 納入及排除標準

(1)納入標準:符合白癜風相關診斷標準[10];活動期患者近3個月白斑擴大、增多,且具有新發皮損、邊界模糊。(2)排除標準:合并其他皮膚疾病;合并腦血管疾病;合并精神異常;有自身免疫系統疾病;凝血功能異常;近期使用其他方法治療影響預后評估。

1.3 方法

1.3.1儀器與設備

酶標儀(南京華東電子醫療設備有限責任公司)、臺式自動高速低溫離心機TG16-W(德國Eppendorf公司)、酶聯免疫吸附試驗試劑盒(天根生化科技有限公司)、超低溫冰箱(美國Termo Forma公司)。

1.3.2標本采集及檢測

觀察組次日早晨復診空腹狀態下取靜脈血3 mL,對照組健康體檢當天取空腹靜脈血3 mL,15 min離心,離心力1 184 g,血清分離后放置在-30 ℃冰箱中備用。采用酶聯免疫吸附試驗測定5-HT、MT水平[11]。采集外周靜脈血,分離外周血單個核細胞,通過流式細胞技術定量分析Th22、Th17等。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平

觀察組患者Th22、Th17水平高于對照組(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于對照組(P<0.05),見表1。

表1 觀察組與對照組Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平比較

2.2 觀察組患者疾病活動期和靜止期Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平

觀察組患者活動期Th22、Th17水平高于靜止期(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于靜止期(P<0.05),見表2。

表2 觀察組患者疾病活動期和靜止期Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平比較

2.3 觀察組疾病尋常型和節段型患者IL-22、IL-17、Foxp3、5-HT、MT水平

觀察組尋常型Th22、Th17水平高于節段型(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于節段型(P<0.05),見表3。

表3 觀察組疾病尋常型和節段型患者IL-22、IL-17、Foxp3、5-HT、MT水平比較

2.4 白癜風患者Th22、Th17、Treg水平與5-HT、MT水平相關性

Pearson相關性分析結果顯示患者Th22、Th17與5-HT、MT水平呈負相關(P<0.05),Treg水平與5-HT、MT水平呈正相關(P<0.05),見表4。

表4 白癜風患者Th22、Th17、Treg與5-HT、MT水平相關性分析

3 討論

白癜風是臨床上常見的皮膚病,以皮膚黑素細胞破壞為特征,導致皮損部位黑素細胞明顯減少或缺失[12]。目前,臨床上對于白癜風發病機制尚不完全知曉,普遍認為與自身免疫、黑色細胞毒性、神經體液調節及遺傳因素有關[13]。白癜風的發生是一個多因素過程,常伴有多種免疫細胞與細胞因子參與,而細胞毒T細胞能通過細胞凋亡形式破壞黑素細胞,導致黑素細胞分化抗原特異性細胞毒T細胞免疫破壞[14],但是其具體機制尚未明確。Th22淋巴細胞是近年來新發現的CD4+T和淋巴亞群,獨立于Th1、Th2及Th14淋巴細胞水平[15]。Th22在諸多自身免疫性皮膚病如銀屑病、系統性紅斑狼瘡等發揮了重要的作用[16]。Th22是一類以IL-22、IL-26、IL-22為主的淋巴細胞,其在表皮免疫及重構中發揮重要作用,與皮膚疾病的發生、發展及皮膚功能平衡有著密切聯系,在T細胞介導的皮膚中發揮了重要的作用。同時,Th22亦可發揮促進抗微生肽生存、抵抗細菌或病毒感染作用,能促進角質細胞的增殖。白癜風患者Th22水平相對較高,且活動期水平高于靜止期時。尋常型白癜風高于節段型[17]。Th17淋巴細胞是近年來發現的一種CD4+T淋巴細胞。Th17淋巴細胞在腫瘤、自身免疫性疾病及炎癥等疾病中發揮了重要的作用[18]。白癜風免疫機制相對復雜,Th17淋巴細胞能產生并接到IL-17,從而能介導前炎癥反應[19]。本次研究結果顯示白癜風患者Th17水平高于正常人群,且活動期高于靜止期,尋常型高于節段型。Treg淋巴細胞是一種對機體免疫具有負性調節作用的T淋巴細胞亞群,在免疫平衡中能發揮免疫調節與監控作用。Treg淋巴細胞能誘發皮膚黑素細胞分泌IL-6,從而能引起自身免疫反應、炎癥及氧化應激機制,能參與白癜風的發生、發展[20-21]。本研究結果顯示觀察組白癜風患者Th22、Th17水平高于對照組,Treg、5-HT、MT水平低于對照組。觀察組活動期Th22、Th17水平高于靜止期,Treg、5-HT、MT水平低于靜止期。觀察組尋常型Th22、Th17水平高于節段型,Treg、5-HT、MT水平低于節段型。

5-HT是一種重要的神經遞質,主要在腦神經細胞內合成酶的作用下合成,其合成減少會引起機體免疫及微環境發生異常,且在白癜風中多呈低表達[22]。MT是5-HT的衍生物,能發揮免疫調節、抗氧化、保持與平衡內分泌等多種生理作用。本研究結果顯示5-HT、MT在白癜風患者中均呈低表達,直接參與白癜風的發生、發展。Pearson相關性分析結果顯示白癜風患者Th22、Th17與5-HT、MT水平呈負相關,Treg水平與5-HT、MT水平呈正相關,說明白癜風患者伴有免疫功能紊亂,且與5-HT、MT水平存在緊密的聯系,加強患者5-HT、MT水平及免疫測定能反映患者疾病嚴重程度,對于確診者應及時制定有效的措施干預,且治療期間可加強5-HT、MT水平評估預后及指導臨床治療[23-24]。

4 結論

白癜風患者中Th22、Th17呈高表達,而Treg淋巴細胞呈低低表達,且與5-HT、MT水平呈相關性,能相互促進、相互影響,疾病的進展可能與Th22、Th17、5-HT及MT的表達相關。