直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用分析

高郁平

細(xì)菌感染性疾病具有比較高的發(fā)病率, 若患者未及時(shí)得到針對(duì)性治療對(duì)自身病癥進(jìn)行控制, 在長(zhǎng)時(shí)間作用下細(xì)菌感染性疾病可能會(huì)繼續(xù)發(fā)展為嚴(yán)重的菌血癥或敗血癥, 這會(huì)對(duì)患者的身體健康造成嚴(yán)重的危害［1］。結(jié)合臨床近幾年實(shí)際接診情況可以發(fā)現(xiàn), 在多方面因素的影響下, 細(xì)菌感染性疾病的臨床發(fā)生率存在明顯增加的趨勢(shì), 在各個(gè)年齡階段均存在發(fā)生率, 對(duì)患者健康以及日常生活所造成的負(fù)面影響較大。為促使患者盡快得到恢復(fù), 更需要及時(shí)采取科學(xué)的用藥方案進(jìn)行治療。抗生素在臨床治療過程中一直保持較高的使用率, 抗生素具有較好的抗感染效果, 可以殺滅侵入人體內(nèi)的致病菌, 或者是抑制致病菌繁殖。據(jù)相關(guān)臨床研究資料表示, 若使用抗生素后, 未對(duì)患者體內(nèi)病菌進(jìn)行有效抑制, 而在持續(xù)治療過程中增加抗生素用藥劑量, 容易導(dǎo)致患者抗生素敏感性與細(xì)菌耐藥性增加, 致使臨床對(duì)疾病的治療難度提升, 無法保障抑菌效果。因而臨床需要合理開展細(xì)菌檢驗(yàn), 以細(xì)菌檢驗(yàn)結(jié)果為抗生素治療方案的制度提供參考依據(jù)。本次研究中對(duì)臨床血液標(biāo)本分別采取直接細(xì)菌鑒定、藥敏試驗(yàn)檢驗(yàn),檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2021 年10 月～2022 年10 月住院部及門診200 例患者的血液標(biāo)本, 其中男120 例,女80 例；年齡20～65 歲, 平均年齡(40.83±12.58)歲。本次研究取得本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審批, 且患者對(duì)研究?jī)?nèi)容知情同意。本次納入患者均為無血液系統(tǒng)疾病。

1.2 方法 對(duì)所有患者的血液標(biāo)本均開展直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法檢驗(yàn)。直接細(xì)菌鑒定法：將患者血液樣本直接放置在巧克力平板或者血平板、麥康凱平板進(jìn)行接種, 在特定環(huán)境下進(jìn)行培育(一般將溫度控制在35℃, 二氧化碳濃度控制在6%), 培育時(shí)間為18～24 h,在孵育后進(jìn)行染色處理, 再進(jìn)行直接細(xì)菌鑒定。

藥敏試驗(yàn)法：醫(yī)護(hù)人員在無菌試管中放入患者的血液標(biāo)本, 運(yùn)用離心機(jī)對(duì)血液標(biāo)本開展離心處理, 將離心機(jī)速度設(shè)置為1500 r/min, 離心5 min。醫(yī)護(hù)人員將離心后的上清液轉(zhuǎn)移到另外的無菌試管中, 隨后進(jìn)行離心, 離心速度為3500 r/min, 需進(jìn)行15 min 的離心, 然后移除離心后的上清液, 運(yùn)用磷酸緩沖鹽溶液對(duì)試管中的沉淀進(jìn)行洗滌, 需對(duì)沉淀進(jìn)行2 次洗滌, 沉淀2 次后重懸。對(duì)懸液開展常規(guī)染色并以顯微鏡對(duì)細(xì)菌形態(tài)進(jìn)行初步觀察。若觀察到革蘭陽性菌(G+菌)存在有鏈狀時(shí)則開展平板除初檢, 并結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果開展酶試驗(yàn),將菌液濃度控制在6.0×105cfu/L, 再進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。若為常規(guī)菌, 則可以直接在MH 平板上進(jìn)行接種懸液, 進(jìn)行耐藥性試驗(yàn)。本次研究中設(shè)備系統(tǒng)為D2mini。

本次試驗(yàn)過程中的各方面操作均由本院具備有5 年以上檢驗(yàn)醫(yī)師進(jìn)行, 確保各方面操作的準(zhǔn)確性, 排除偶然誤差, 培養(yǎng)結(jié)果由2 名5 年以上檢驗(yàn)醫(yī)師共同進(jìn)行評(píng)估, 確保各方面數(shù)據(jù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.3 觀察指標(biāo) 分析直接細(xì)菌鑒定對(duì)各項(xiàng)病原菌(克雷伯桿菌、埃希氏菌、假單胞桿菌、腸球菌、不動(dòng)桿菌、葡萄球菌、甲型副傷寒菌、其他)檢驗(yàn)的符合率、藥敏試驗(yàn)法對(duì)藥物敏感符合率, 并比較兩種檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 直接細(xì)菌鑒定對(duì)各項(xiàng)病原菌檢驗(yàn)的符合率分析

直接細(xì)菌鑒定對(duì)克雷伯桿菌、埃希氏菌、假單胞桿菌、腸球菌、不動(dòng)桿菌、葡萄球菌、甲型副傷寒菌以及其他病原菌檢驗(yàn)的符合率均為100.00%。見表1。

表1 直接細(xì)菌鑒定對(duì)各項(xiàng)病原菌檢驗(yàn)的符合率分析(n, %)

2.2 兩種檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)時(shí)間比較 直接細(xì)菌鑒定檢驗(yàn)時(shí)間(32.19±6.49)min 短于藥敏試驗(yàn)法的(57.93±8.61)min, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩種檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)時(shí)間比較(n=200, ±s)

表2 兩種檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)時(shí)間比較(n=200, ±s)

注：與藥敏試驗(yàn)法比較, aP<0.05

方法 檢驗(yàn)時(shí)間(min)直接細(xì)菌鑒定 32.19±6.49a藥敏試驗(yàn)法 57.93±8.61 t 33.762 P 0.000

2.3 藥敏試驗(yàn)法對(duì)藥物敏感度的符合率分析 藥敏試驗(yàn)法檢驗(yàn)中G+球菌對(duì)藥物耐藥、中度敏感、敏感的符合率分別為90.00%、90.91%、85.33%, G-桿菌對(duì)藥物耐藥、中度敏感、敏感的符合率分別為89.33%、91.11%、93.75%。見表3。

表3 藥敏試驗(yàn)法對(duì)藥物敏感度的符合率分析(n, %)

3 討論

敗血癥和菌血癥在臨床中都屬于血液感染性疾病, 這兩種疾病的發(fā)病原因主要是細(xì)菌侵襲血液系統(tǒng)。近些年臨床敗血癥與菌血癥的發(fā)病率在逐漸升高, 誘發(fā)因素較為復(fù)雜, 細(xì)菌能夠通過內(nèi)置器、靜脈注射、插管、外部創(chuàng)傷等途徑進(jìn)入患者體內(nèi), 對(duì)患者健康造成影響［2,3］。此外, 近些年臨床在對(duì)感染類疾病開展治療過程中主要使用抗生素進(jìn)行治療, 結(jié)合觀察可以發(fā)現(xiàn)臨床可使用的抗生素類型較多, 具有較高的可選擇性。在具體用藥治療的過程中, 若未對(duì)抗生素類型進(jìn)行合理選擇, 則無法保障抑菌效果, 同時(shí)長(zhǎng)時(shí)間使用抗生素過程中容易導(dǎo)致患者產(chǎn)生耐藥性, 進(jìn)一步增加治療難度, 所以臨床在對(duì)血液感染類疾病進(jìn)行治療時(shí)進(jìn)行病原菌菌種鑒定與藥敏試驗(yàn)存在重要價(jià)值。本次研究對(duì)血液標(biāo)本開展直接細(xì)菌鑒定、藥敏試驗(yàn)法檢驗(yàn),深入探究?jī)煞N檢驗(yàn)方法的鑒定價(jià)值。

血液是機(jī)體體液的重要組成部分, 如果各器官發(fā)生病理變化, 往往會(huì)引起血液成分的變化, 所以常通過檢驗(yàn)血液診斷機(jī)體的健康狀況［4］。通過血液檢驗(yàn), 可以更準(zhǔn)確的了解機(jī)體各個(gè)系統(tǒng)、器官及不同細(xì)胞的生理生化狀態(tài), 有助于臨床醫(yī)生做出正確的判斷［5］。在臨床醫(yī)療研究持續(xù)發(fā)展的情況下, 可供選擇的抗生素類型以及數(shù)量均明顯增加, 在實(shí)際治療的過程中為確保抗生素的綜合治療效果, 更應(yīng)當(dāng)結(jié)合患者病癥實(shí)際情況, 選擇最佳的藥物進(jìn)行治療, 避免在盲目使用抗生素(或者大劑量用藥)過程中導(dǎo)致患者出現(xiàn)耐藥, 影響患者恢復(fù)。藥敏試驗(yàn)法是臨床較為常用的檢驗(yàn)方式,可以準(zhǔn)確檢測(cè)出病原體對(duì)抗生素敏感性, 對(duì)于指導(dǎo)臨床用藥存在有極為重要的作用。在檢驗(yàn)過程中, 通常在對(duì)應(yīng)病原體生長(zhǎng)的培養(yǎng)皿上貼上一些沾有相應(yīng)抗生素的圓片, 觀察沾有抗生素的圓片周圍是否有細(xì)菌生長(zhǎng)［6］。如果抑菌圈較小, 則可以說明藥物對(duì)于這種病原體的抑菌作用較差, 如果抑菌圈較大, 則說明這種藥物對(duì)于這個(gè)病原體有非常好的抑菌、抗菌效果, 即細(xì)菌對(duì)藥物敏感。臨床在選擇抗生素時(shí)要根據(jù)藥物敏感試驗(yàn), 選擇對(duì)細(xì)菌敏感的藥物使用, 才能達(dá)到好的抑菌、殺菌效果［7］。直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法都是臨床常用檢驗(yàn)方法。藥敏試驗(yàn)法是臨床運(yùn)用較多的定性試驗(yàn), 藥敏試驗(yàn)法經(jīng)常被臨床用來開展藥物敏感性測(cè)定。通常情況下藥敏試驗(yàn)法會(huì)結(jié)合抗生素的抑菌水平科學(xué)合理的設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案, 在藥敏試驗(yàn)過程中測(cè)量抑菌環(huán)的直徑［8］。藥敏試驗(yàn)法可以檢出耐藥性, 可以使抗生素在臨床使用過程中更加具備科學(xué)性, 有助于臨床醫(yī)生為患者制定個(gè)性化治療方案, 促使患者盡快恢復(fù)。但需要注意的是, 藥敏試驗(yàn)法的結(jié)果比較容易受到設(shè)備精度、環(huán)境等因素的影響, 致使藥敏試驗(yàn)法在臨床運(yùn)用中具有比較大的局限性［9］。同時(shí)藥敏試驗(yàn)法需要經(jīng)歷較長(zhǎng)的流程, 在流程順暢的情況下, 從試驗(yàn)開始到結(jié)束需要2 d, 若過程中無其他問題需解決, 則需要3 d［10］。在患者藥敏結(jié)果沒有出來前, 臨床醫(yī)生只是結(jié)合患者臨床表現(xiàn)以及自身工作經(jīng)驗(yàn)對(duì)其制定治療方案［11-13］。在對(duì)患者使用抗生素進(jìn)行治療的過程中需綜合評(píng)估患者的各方面情況, 對(duì)抗生素類型進(jìn)行科學(xué)的選擇, 嚴(yán)謹(jǐn)用藥, 不得隨意增加抗生素的使用劑量,以免導(dǎo)致患者出現(xiàn)耐藥, 增加治療難度。運(yùn)用直接細(xì)菌鑒定的方式對(duì)細(xì)菌類型進(jìn)行鑒定, 同樣可以為臨床用藥提供指導(dǎo), 且該檢查具備有較高的時(shí)效性, 檢測(cè)時(shí)間相對(duì)較短, 能夠在較短時(shí)間內(nèi)得到結(jié)果。

直接細(xì)菌鑒定會(huì)運(yùn)用儀器直接接種血液標(biāo)本, 孵育后就能夠開展試驗(yàn), 該方法能夠省略先分離再培養(yǎng)的環(huán)節(jié), 有效縮短檢驗(yàn)時(shí)間［14,15］。同時(shí)直接細(xì)菌鑒定還能夠?qū)Νh(huán)境內(nèi)二氧化碳的變化進(jìn)行檢驗(yàn), 根據(jù)二氧化碳的結(jié)構(gòu)合理分析氧氣和菌種之間存在的關(guān)系, 以此明確最合適的增殖方式。本次研究結(jié)果數(shù)據(jù)顯示,直接細(xì)菌鑒定對(duì)病原菌的檢驗(yàn)符合率較高, 可以充分說明直接細(xì)菌鑒定在臨床血液檢驗(yàn)當(dāng)中具有較高的應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)結(jié)果數(shù)據(jù)表示, 直接細(xì)菌鑒定的檢驗(yàn)時(shí)間短于藥敏試驗(yàn)法, 由此可以說明直接細(xì)菌鑒定的操作時(shí)間短, 臨床可以用更短的時(shí)間取得良好的細(xì)菌鑒定結(jié)果, 從而能夠?yàn)榛颊叩呐R床用藥提供有效參考, 確保可以針對(duì)性用藥, 讓患者在患病早期即可得到最佳治療。藥敏試驗(yàn)法對(duì)藥物敏感度的符合率較高, 這可以說明藥敏試驗(yàn)法能夠有效測(cè)定藥物的敏感情況, 可以為患者臨床用藥提供一定指導(dǎo), 可以有效降低患者在使用抗生素治療過程中產(chǎn)生的耐藥性。同時(shí), 兩種檢測(cè)方式操作相對(duì)較為簡(jiǎn)單, 所需費(fèi)用較低, 在臨床診斷以及治療的過程中具備有較高的推廣性, 對(duì)于保障臨床用藥的科學(xué)性存在有重要作用。在實(shí)際檢驗(yàn)的過程中, 為充分保障臨床血液檢驗(yàn)過程中直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法的檢測(cè)準(zhǔn)確性, 需要對(duì)以下幾個(gè)層面問題加以重視。①科學(xué)處理血液樣本：在對(duì)患者血液樣本進(jìn)行采集后, 應(yīng)當(dāng)立即進(jìn)行送檢, 并在最短時(shí)間內(nèi)完成各方面檢驗(yàn)操作, 降低血液樣本污染率或者其他非人為因素的影響, 提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。對(duì)無法立即進(jìn)行檢測(cè)的血液樣本則需要嚴(yán)格按照檢測(cè)規(guī)定做好樣本的臨時(shí)存放工作, 充分保障樣本在檢測(cè)前的質(zhì)量；②規(guī)范各方面操作：直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法均屬于較為緊密的實(shí)驗(yàn)操作, 任何一個(gè)操作步驟出現(xiàn)問題均有可能影響到檢測(cè)結(jié)果, 導(dǎo)致出現(xiàn)檢測(cè)偏差等情況,尤其在進(jìn)行直接細(xì)菌鑒定前需要準(zhǔn)確評(píng)估待檢測(cè)樣本是否受到污染等, 確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性；③合理設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)：在進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的過程中可確保試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性, 可以合理進(jìn)行對(duì)照組試驗(yàn), 確保可以在最短時(shí)間內(nèi)對(duì)患者耐藥性進(jìn)行分析, 為臨床用藥提供科學(xué)指導(dǎo)；④提升檢測(cè)醫(yī)師對(duì)該方面檢測(cè)工作的重視程度：在進(jìn)行直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法的過程中, 要求檢測(cè)醫(yī)師保持較高的責(zé)任意識(shí), 各方面操作均需要嚴(yán)格按照規(guī)定進(jìn)行, 避免出現(xiàn)操作不規(guī)范或者不合理的行為, 影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述, 臨床血液檢驗(yàn)?zāi)軌蜻\(yùn)用直接細(xì)菌鑒定、藥敏試驗(yàn)法進(jìn)行檢驗(yàn), 直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法均可以獲得良好的效果, 可以在臨床治療中實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確用藥, 進(jìn)一步提高治療效果, 減少患者的治療費(fèi)用, 從而實(shí)現(xiàn)醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量得到進(jìn)一步提高, 但直接細(xì)菌鑒定檢驗(yàn)時(shí)間較短, 可以更進(jìn)一步縮短患者的治療等待時(shí)間, 故臨床可以優(yōu)先推廣直接細(xì)菌鑒定的運(yùn)用。