PTEN和PAX-2在子宮內膜上皮內瘤變和非腫瘤性子宮內膜增生鑒別診斷中的應用價值分析

郜慶祖，王鑫宇，曲 雪，朱建雯

（揚州洪泉醫院病理科，江蘇 揚州 225200）

子宮內膜增生性病變包括單純性增生（伴或不伴非典型性）、復雜性增生（伴或不伴非典型性）、子宮內膜上皮內瘤變（Endometrial Intraepithelial Carcinoma，EIN）、子宮內膜癌等一系列病變[1-2]。不伴有非典型性的單純性增生和復雜性增生為非腫瘤性子宮內膜增生（Non Tumor Endometrial Hyperplasia，NTEH）。伴有非典型性的子宮內膜增生一部分為反應性的，一部分則為腫瘤性的，屬于EIN。子宮內膜增生不伴非典型性為非腫瘤性病變，不易發展為子宮內膜癌，而EIN 是腫瘤性病變，發展成癌的比例高，因此二者的鑒別有重要意見[3-4]。磷酸酶和張力蛋白質脫酰酶（PTEN）、編碼膀胱和上尿路皮上細胞中表達的轉錄因子（PAX-2）在子宮內膜病變和腫瘤發生、發展中的作用較為顯著[5-6]。為了分析二者在子宮內膜病變組織和正常組織中的表達形式及臨床病理特征等問題，本研究特將2020 年8 月至2023 年7 月我院病理科存檔的子宮內膜標本作為研究對象，分析PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 鑒別診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2020 年8 月至2023 年7 月我院病理科存檔的手術切除子宮標本和診刮子宮內膜標本，其中NTEH50 例，年齡28 ～63 歲，平均（42.53±5.13）歲。EIN62 例，年齡27 ～63 歲，平均（42.83±5.28）歲。全部患者對研究知情，并簽署同意書，研究通過醫院倫理委員會批準。

1.2 納入與排除標準

納入標準：（1）符合異常子宮出血臨床診斷者；（2）均在本院接受檢查且疑似子宮內膜病變者；（3）病歷資料完整無誤者；（4）陰道不規則出血及貧血者。排除標準：（1）合并嚴重心腎功能障礙者；（2）患有精神疾病，無法正常溝通、交流者；（3）合并婦科腫瘤疾病者；（4）短期內接受激素治療者；（5）使用宮內節育環者；（6）合并血液系統疾病者。

1.3 方法

所有樣本均進行PTEN 和PAX-2 免疫組化檢查及常規病理檢查，所有標本均在40 g/L 甲醛溶液中固定，石蠟包埋、切片后進行檢查，病理切片由兩位具有高級職稱的病理專家閱片做出診斷。試劑均購于福州邁新生物技術開發有限公司，PTEN 和PAX-2 為兔抗人多克隆體抗體。免疫組化檢查：對病理組織進行石蠟包埋、切片（4 μm），粘在防脫載玻片上，恒溫箱60 ℃烘烤30 min 后放置在二甲苯溶液Ⅰ、Ⅱ中浸泡30 min，梯度酒精脫水各5 min。用磷酸鹽緩沖溶液洗滌3 次，5 min/次。3%過氧化氫滅活內源性過氧化物酶，用磷酸鹽緩沖溶液再次洗滌3 次，5 min/次。使用枸櫞酸鹽高壓鍋加熱至沸騰的抗原修復步驟，持續10 min，在室溫下冷卻，隨后采用磷酸鹽緩沖溶液洗滌，共洗滌3 次，5 min/次。滴加第一抗體，室溫孵育60 min，然后采用磷酸鹽緩沖溶液洗滌（0.01 mol/L磷酸鹽緩沖粉+1000 mL 純凈水，pH 值為7.2 ～7.4之間），洗滌3 次，5 min/ 次。滴加第二抗體，室溫孵育20min，再次采用磷酸鹽緩沖溶液洗滌，洗滌3次。使用顯色劑（DAB）底物進行顯色，置于室溫下觀察顯色情況，顯色反應持續5 ～10 min。隨后，終止顯色反應，并進行蘇木素染色5 min。蒸餾水沖洗后，進行鹽酸乙醇分化，再次置于蒸餾水中沖洗。隨后在氨水中返藍，進行梯度乙醇脫水，接著進行梯度二甲苯透明，最后使用中性樹膠進行封片。

1.4 觀察指標

（1）觀 察PAX-2、PTEN 在EIN 和NTEH 中 的不同表現形式。（2）比較PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 中的表達情況，以病理診斷結果為金標準，分析PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 診斷中的應用情況，進而分析兩者診斷結果與病理診斷結果之間的接近程度。（3）觀察PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 診斷中的應用價值，包括靈敏度、特異度、準確率。

1.5 統計學方法

用SPSS 25.0 軟件處理數據，計數資料用% 表示，行χ2 檢驗；計量資料符合正態分布，用均數± 標準差（±s）表示，行t檢驗，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 PAX-2、PTEN 在EIN 和NTEH 中的不同表現形式

PAX-2、PTEN 在EIN 和NTEH 中的不同表現形式見圖1。

圖1 PAX-2、PTEN 在EIN 和NTEH 中的不同表現形式

2.2 PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 中的表達情況

PAX-2 在子宮內膜病變中的陰性率高于PTEN，且陰性率更接近病理診斷結果。PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 中的表達情況見表1。

表1 PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 中的表達情況（例）

2.3 PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 診斷中的應用價值

PAX-2 在子宮內膜病變診斷中的靈敏度、特異度、準確率均高于PTEN。詳見表2。

表2 PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 診斷中的應用價值（%）

3 討論

近些年流行病學相關研究發現，子宮內膜癌的發病率呈逐漸增高的趨勢，發病年齡也越來越年輕化[7]。子宮內膜癌發病的分子生物學特性研究可以在疾病的早期診斷、治療中提供參考，對早期預防和治療疾病具有積極意義。NTEH 和EIN 是兩種不同性質的子宮內膜病變，子宮內膜增生是一種非腫瘤性病變，其特征為子宮內膜增生超過正常界限，導致子宮內膜厚度增加，當增生過程中未出現細胞學上的非典型性改變時，稱為子宮內膜增生不伴非典型性[8-9]。NTEH 患者在臨床上無明顯癥狀，可能會出現異常子宮出血、月經不規律等癥狀，癌變的發生率相對較低，通常被認為是良性病變，荷爾蒙療法（如口服避孕藥或黃體酮替代治療）、手術干預（如刮宮）可能在本病的治療中發揮作用[10]。EIN 是一種癌前病變，與子宮內膜癌的關系密切。EIN 被定義為局限性子宮內膜上皮異常增生，其特征包括腺體密集，腺體與間質比例增加，結構的不規則性、不均勻性和細胞異質性[11-12]。EIN與子宮內膜增生癥狀相似，會伴隨異常子宮出血、月經不規律等癥狀，是一種癌前病變，可增加子宮內膜癌的發病風險，且15% ～30% 的患者最終病情會發展為子宮內膜癌。

本研究通過對NTEH 和EIN 中PAX-2、PTEN的表達形式進行觀察與分析發現，PAX-2 和PTEN 在大多數EIN 中表達缺失，PAX-2 的正常腺體核強陽性與EIN 腺體對比明顯。PTEN 在多數EIN 中表達缺失（完全不著色），間質細胞強陽性，正常腺體微弱陽性，非腫瘤性病變與EIN 差異小，不易觀察[13]。另外，本研究結果顯示，PAX-2 在NTEH 和EIN 鑒別中的陰性率高于PTEN，且陰性率檢測結果與金標準的檢測結果較為接近，可見該檢測方式在子宮內膜病變的診斷中具有較高的應用價值。PAX-2 與PTEN表達的缺失與NTEH 和EIN 之間具有較大的關聯，其中PTEN 作為抑癌基因，具有細胞增生負調節的作用。PAX-2 的缺失與NTEH 和EIN 之間也具備一定的關系[14]。因為PAX-2 是一種轉錄因子，對胚胎發育和細胞命運具有一定的決定性作用，因此PAX-2 異常極易引起細胞的增殖和分化。PTEN 作為一種腫瘤抑制基因，主要負責細胞生長、分化與凋亡的調控，該指標的缺失極易引發子宮內膜癌等疾病的發生。因此，PTEN 的缺失與子宮內膜增生、瘤變具有一定的關聯性。但二者相比之下，PAX-2 與NTEH 和EIN 之間的關聯性更為顯著，在子宮內膜病變的診斷中具有更佳的指導作用。盡管如此，要想將PAX-2 檢測在NTEH 和EIN 鑒別中廣泛應用，還需要在未來的研究中納入更多樣本量展開分析，探討該檢測方式在子宮內膜病變診斷、治療中的應用價值，并探究該檢測方式是否可作為治療效果評估的生物標志物。

綜上所述，在NTEH 和EIN 的鑒別診斷中，PAX-2 的準確率、靈敏度和特異度均高于PTEN，可以在子宮內膜病變的早期診斷中作為指導和輔助診斷方式，為臨床醫生提供有效參考。