外周血miR-4465和miR-6089在亞臨床糖尿病性心肌病診斷中的價值

曹麗慧, 孟憲杰, 李會

唐山市人民醫院,河北唐山063000

糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)發生于無癥狀的糖尿病人群中為DCM,其發病率占DCM 50%～70%[1]。迄今為止,DCM仍然沒有特異性的診斷方法,其診斷主要依靠超聲心動圖和靈敏度、特異度不足的血清生物學標志物[2]。研究表明,糖化血紅蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)升高是糖尿病患者一系列并發癥的主要風險因素,但其特異度不足[3-7]。因此,尋找靈敏度及特異度較強的生物學標志物,以輔助DCM診斷有重要意義。微小RNA(microRNA,miRNA)是一類內源性非編碼單鏈RNA分子,與許多疾病病理生理過程有關[8]。miR-4465和miR-6089可預防DCM誘導的心室舒張功能障礙[9]。本研究評估外周血miR-4465和miR-6089在DCM中的診斷價值,旨在為臨床診療提供參考。

1 資料和方法

1.1 病例選擇

本研究共選擇2021年6月—2022年1月在本院內分泌科門診就診的266例亞臨床Ⅱ型糖尿病受試者。納入標準:①年齡>18歲;②確診為亞臨床糖尿病[10];③自愿參與本研究并出具了知情同意書。排除標準:①患者存在冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、心臟瓣膜疾病、心房顫動、高血壓或任何其他心臟疾病或相關心衰;②患者存在糖尿病性大血管或微血管并發癥,包括視網膜病變、糖尿病性腎病、糖尿病性周圍神經病變、糖尿病性周圍血管疾病和腦卒中等;③妊娠期哺乳期女性;④其他重要的合并癥,包括腫瘤、甲狀腺功能障礙、肝腎功能障礙、免疫和風濕性疾病,或嚴重的精神疾病。所有受試者均簽署書面知情同意書。本研究得到了本院醫學倫理委員會的審查和批準。

1.2 病例資料收集及分組

糖尿病患者在入組時均采集了完整的病史,從中收集基本信息,如性別、年齡、體質指數和糖尿病病程等。所有患者均接受了全面的體格檢查和輔助檢查,包括心電圖、超聲心動圖和門控心肌灌注成像等。入組第2天清晨禁食至少8 h后采集外周靜脈血。患者有左心室舒張功能障礙的證據但射血分數保持不變,并且沒有明顯的隱匿性冠狀動脈疾病確診為DCM[11]。266例患者中確診DCM患者49例(DCM組),余下的隨機選取49例非DMC患者為對照組。

1.3 外周血miR-4465和miR-6089水平檢測

采用mirVana PARIS提取試劑盒(Ambion,Austin,TX,美國)從200 μL血漿中提取總RNA。采用50 pmol/L Caenorhabditis elegans miR-39 (cel-miR-39)作為參照校正血漿miRNA水平。使用ABI 7900HT實時PCR檢測系統(Applied Biosystems,CA,美國)檢測miR-4465和miR-6089水平。

1.4 統計學分析

采用IBM SPSS 17.0統計學軟件進行分析。計量資料采用組間t檢驗分析;計數資料采用χ2檢驗;以多因素Logistic回歸分析DCM的危險因素;ROC判斷miR-4465和miR-6089對DCM的診斷價值;采用Pearson相關性分析miR-4465、miR-6089的相關性。P<0.05認為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組一般資料和實驗室檢查結果的比較

DCM組的糖尿病病程和HbA1c高于對照組(P<0.05),外周血miR-4465和miR-6089水平低于對照組(P<0.05;表1)。

表1 兩組患者一般資料和實驗室檢查結果的比較

2.2 多因素Logistic回歸分析影響DCM發生的危險因素

以發生DCM為因變量(發生=1,未發生=0),以上指標中將有差異的因素為自變量(糖尿病病程、HbA1c、miR-4465及miR-6089)納入Logistic回歸分析,結果顯示糖尿病病程、HbA1c、miR-4465和miR-6089為DCM發生的獨立危險因素(P<0.05;表2)。

表2 影響DCM發生的多因素Logistic回歸分析

2.3 外周血miR-4465和miR-6089對DCM的診斷價值分析

外周血miR-4465和miR-6089診斷DCM具有良好的價值(圖1和表3)。

圖1 外周血miR-4465和miR-6089診斷DCM的ROC曲線圖

表3 外周血miR-4465和miR-6089診斷DCM的價值

2.4 外周血miR-4465和miR-6089與糖尿病病程、HbA1c的相關性分析

糖尿病病程和HbA1c均與外周血miR-4465和miR-6089呈負相關[對照組:糖尿病病程(r=-0.283,-0.345,P<0.05);HbA1c(r=-0.230,-0.271,P<0.05);DCM組:糖尿病病程(r=-0.428,-0.355,P<0.05);HbA1c(r=-0.275,-0.463,P<0.05)]。

3 討 論

DCM目前尚無診斷的金標準,其分子機制也尚未完全闡明,且并無特異度的臨床癥狀[12]。目前臨床上普遍采用超聲心動圖來評估糖尿病患者可能存在的心臟功能障礙嚴重程度[13]。超聲心動圖檢查和特定的血漿生物學標志物檢測相結合是目前診斷早期DCM的最佳策略。與正常健康人群相比較,糖尿病患者人群的外周血miR-4465和miR-6089水平顯著下調[14]。外周血miR-4465和miR-6089水平也被確定為糖尿病的預測因子[15]。本研究結果顯示,DCM患者的外周血miR-4465和miR-6089水平低于對照組患者,且糖尿病病程、HbA1c、miR-4465和miR-6089為糖尿病患者發生DCM的獨立危險因素。本研究中所有血液樣本都是從無癥狀的DCM患者和相應對照組人群中收集,在評估外周血miR-4465和miR-6089水平在DCM早期診斷中的價值結果顯示,外周血miR-4465和miR-6089的AUC分別為0.882和0.909,具有較好的診斷學價值。

糖尿病患者的左心室舒張功能障礙、主動脈硬化、心肌纖維化和心力衰竭的發生發展與高血糖水平相關[16-17]。因此,HbA1c被確定為糖尿病患者發生心血管疾病的重要風險預測因子。此外,除了血糖的水平和控制情況,糖尿病的持續時間也是糖尿病患者發生心血管疾病以及心衰的重要預測因素[18]。本研究結果顯示,糖尿病病程和HbA1c均與外周血miR-4465和miR-6089呈負相關,提示外周血miR-4465和miR-6089可能參與糖尿病的進展,且與單獨的參數相比,HbA1c、糖尿病病程和外周血miR-4465、miR-6089水平的組合在早期DCM診斷中可能具有更高的診斷價值。

綜上所述,本研究結果顯示,外周血miR-4465和miR-6089對于糖尿病患者DCM具有較好的診斷價值。