SLIT治療BA的效果及對IL-17、IL-27水平和Th17/Treg平衡的影響

趙明明, 杭燕萍, 楊良鳳, 葛林陽, 鄭海霞, 陳文靜

南京市高淳人民醫院呼吸與危重癥醫學科,江蘇南京211300

支氣管哮喘(bronchial asthma,BA)是一種具有家族聚集傾向的氣道慢性炎癥性疾病,以喘息、氣促、咳嗽為主要癥狀。據調查,全球約有3億人口患有BA,發病率為1%～18%,且呈持續上升趨勢。其病程長、易反復,對患者的身心健康造成嚴重危害[1-2]。BA發病機制復雜,臨床研究發現輔助性T細胞17(T helper cell 17,Th17)/調節性T細胞(regulatory T cell,Treg)失衡及相關細胞因子白細胞介素-17(interleukin,IL)-17、IL-27與BA的發生存在一定的相關性,Th17/Treg平衡作用日益受到人們重視[3]。Th17細胞是T細胞的特殊譜系,該細胞在變應性疾病中的含量較多。Treg細胞可控制機體的免疫反應性,誘導免疫耐受。IL-17由Th17細胞特異性分泌,在固有免疫反應、病原體的防御等方面起到了不可忽視的作用。IL-27主要由樹突狀細胞分泌,其作為多功能的免疫細胞因子,在免疫性疾病中至關重要[4]。目前,采取科學的手段對BA患者進行治療已成為臨床研究的熱點。舌下脫敏治療(sublingual immunotherapy,SLIT)是針對免疫系統進行變應原脫敏,具有便于使用、無痛安全等優點[5-6]。然而,BA患者在進行SLIT治療前后血清中IL-17、IL-27水平的變化以及是否可對Th17/Treg免疫平衡起到調控作用的研究較少。為了提高BA的診療水平,本文旨在分析SLIT治療BA的療效,及其對IL-17、IL-27水平和Th17/Treg平衡的影響。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

收集2016年1月—2017年8月于本院診治的124名BA患者的臨床資料。納入標準:①符合BA診斷標準[7],均為非急性發作期的中重度BA患者;②對塵螨過敏,皮膚點刺試驗結果顯示螨變應原陽性。排除標準:①伴其他呼吸疾病;②合并免疫功能疾病;③近1個月內服用全身糖皮質激素或抗生素;④妊娠或哺乳期婦女。將患者隨機分為觀察組(n=62)和對照組(n=62)。治療后通過電話對兩組進行隨訪,對照組退出者4例,觀察組退出者6例。兩組的性別、年齡、體質指數、病程、病情程度、肺功能等臨床資料均衡可比(P>0.05;表1)。本研究已通過本醫院倫理委員會的審核。SLIT的適用人群:①常規抗過敏藥治療無效或造成無法耐受的不良反應;②不接受皮下免疫治療;③無法堅持長期藥物治療。

表1 兩組臨床資料比較

1.2 治療方法

兩組入院后均接受補液、吸氧、糾正酸堿失衡、祛痰止咳等常規治療。對照組接受布地奈德福莫特羅粉吸入劑(瑞典AstraZeneca AB公司,160 μg/4.5 μg/吸),1吸/次,2次/天。觀察組在對照組基礎上接受粉塵螨滴劑1～4號(浙江我武生物科技股份有限公司),舌下含服,1次/天。于1～3周使用1～3號滴劑(質量濃度分別為1、10、100 mg/L),1～7天分別為1、2、3、4、6、8、10滴,舌下含服2 min后口服。第4周至結束使用4號滴劑(質量濃度為333 mg/L),3滴/天。兩組均連續治療2年。

1.3 哮喘控制情況的評估

治療結束后,采用哮喘控制問卷[8]判斷兩組過去4周內哮喘控制情況,共5個問題,每個問題5分,總分25分,25分為完全控制,20～24分為良好控制,<20分為未控制。總控制率=完全控制率+良好控制率。

1.4 日間、夜間的臨床癥狀評分

日間癥狀評分標準[9]:無癥狀為0分;輕微癥狀,持續時間短暫為1分;≥2次的輕微癥狀,持續時間短暫為2分;較多次的輕微癥狀,對日常生活影響較小為3分;較多次的嚴重癥狀,對日常生活產生影響為4分;癥狀嚴重,無法正常生活為5分。夜間癥狀評分標準[9]:無癥狀為0分;1次醒來為1分;≥2次醒來為2分;多次醒來為3分;夜間無法入睡為4分。

1.5 IL-17、IL-27、Th17和Treg的檢測

治療前后抽取兩組空腹靜脈血5 mL,離心,分離血清,-80 ℃保存。保留2 mL于4 ℃保存。使用酶聯免疫吸附法檢測IL-17和IL-27,IL-17、IL-27試劑盒分別由上海譜振生物科技有限公司和上海滬震實業有限公司提供,操作均遵循說明書。使用流式細胞儀檢測Th17和Treg細胞,無菌環境下向測樣管中加入Th17細胞(CD4+IL-17+)和Treg細胞(CD4+CD25+Foxp3+)的特異性標記抗體孵育,計算外周血Th17/CD4+及Treg/CD4+比例,操作均遵循說明書。

1.6 統計學方法

應用SPSS 22.0軟件處理,計量資料比較采用t檢驗,計數資料比較采用χ2檢驗,采用Pearson相關性分析外周血IL-27、IL-27與Th17和Treg細胞比例的相關性。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組疾病控制情況比較

觀察組完全控制率和總控制率高于對照組,差異具有顯著性(P<0.05;表2)。

表2 兩組疾病控制情況比較 例(%)

2.2 兩組臨床癥狀評分比較

治療后,兩組臨床癥狀評分均低于治療前,且觀察組均低于對照組(P<0.05;表3)。

表3 兩組臨床癥狀評分比較

2.3 兩組外周血IL-17、IL-27水平比較

治療后,觀察組IL-17水平低于治療前,兩組IL-27水平均高于治療前,且觀察組IL-17水平低于對照組,IL-27水平高于對照組(P<0.05;表4)。

表4 兩組外周血IL-17、IL-27水平比較 ng/L

2.4 兩組外周血Th17和Treg細胞比例比較

治療后,兩組Th17/CD4+、Th17/Treg均低于治療前,Treg/CD4+均高于治療前(P<0.05),且觀察組Th17/CD4+、Th17/Treg均低于對照組,Treg/CD4+高于對照組(P<0.05;表5)。

表5 兩組外周血Th17和Treg細胞比例比較 %

2.5 外周血IL-17、IL-27與Th17和Treg細胞比例的相關性

IL-17與Th17/CD4+呈正相關(r=0.623,P<0.001),與Treg/CD4+呈負相關(r=-0.664,P<0.001);IL-27與Th17/CD4+呈負相關(r=-0.742,P<0.001),與Treg/CD4+呈正相關(r=0.666,P<0.001;圖1)。

圖1 外周血IL-17、IL-27與Th17和Treg細胞比例的相關性

3 討 論

近年來,中國BA發病人數日益增多,BA具有頑固性、易復發性,嚴重影響患者的身心健康。當前,臨床上BA的主要治療手段為抗炎、解痙等,具有一定的臨床效果,但其無法徹底根治,仍未取得理想作用[10]。因此,臨床上有必要尋找有效的方法對BA患者進行治療,以改善患者生活質量。

SLIT是一種新型給藥方式,能快速改善BA癥狀,在治療期間及停止治療后的多年內仍可維持癥狀穩定,具有給藥方便、患者接受度高等特點。目前SLIT已被納入哮喘治療方案中,在過敏性哮喘、變應性鼻炎等疾病治療中發揮著關鍵作用[11]。本研究發現,BA患者應用SLIT后,患者的總控制率較高,臨床癥狀評分較低。結果表明,SLIT治療BA具有良好的效果,可控制哮喘情況,緩解哮喘癥狀。BA患者的血清、鼻腔和支氣管分泌物中通常有大量的嗜酸性粒細胞,其活化后能釋放白三烯類物質,導致氣道黏膜水腫,從而發生一系列病理生理反應[12]。SLIT可減少白三烯類物質的產生,抑制免疫球蛋白E介導的超敏反應及肥大細胞脫顆粒,降低支氣管平滑肌對組胺的反應性,減少炎癥因子的釋放,緩解氣道炎癥反應,進而獲得良好的治療效果[13]。SLIT不僅能拮抗Th17細胞增殖,還能上調Treg相關細胞因子的表達,進而調節Th17/Treg平衡,這對抑制呼吸道炎癥反應、舒張氣道平滑肌具有有利作用[14-15]。

Th17與Treg細胞兩者相互拮抗保持免疫系統正常運轉,臨床普遍認為BA的發生與Th17/Treg細胞失衡存在相關性[16]。Th17細胞以分泌IL-17為主要特征,對炎癥反應和免疫反應有著關鍵影響。Treg細胞具有免疫調節功能,可誘導免疫耐受。IL-27不僅能促進免疫,還能抑制免疫,其參與T細胞活化狀況的調節,影響自身免疫性疾病的發生發展。IL-27可抑制Th17細胞的分化,減少IL-17的分泌,并能上調Foxp3的轉錄及表達,增強Treg細胞的免疫抑制功能。SLIT可增加IL-27含量,且其水平與抑制Th17反應息息有關[17]。本研究結果提示:SLIT可糾正BA所致的Th17/Treg免疫失衡,并且IL-17和IL-27可能參與Th17/Treg免疫調節,在BA的發生機制中具有重要作用。

SLIT治療BA具有良好的效果,可降低外周血IL-17水平,增加外周血IL-27水平,且糾正Th17/Treg免疫失衡。本研究的納入病例數較少,今后仍需進一步擴大樣本量予以證實。