酮咯酸氨丁三醇口崩片處方優化及體外溶出度研究

曾 媛，張 瑩，2，徐亞君，劉 輝△，張國偉

（1.中國人民解放軍中部戰區總醫院，湖北 武漢 430070；2.湖北省麻城市人民醫院，湖北 黃岡 438300）

酮咯酸氨丁三醇為非選擇性環氧合酶抑制劑，通過抑制環氧合酶和前列腺素合成活性，以發揮中度抗炎、強效鎮痛作用［1］，普遍用于緩解急性腎絞痛、創傷痛、癌癥中晚期疼痛、牙痛、三叉神經痛等較劇烈的疼痛癥狀，也可單用或復合嗎啡、羅哌卡因等其他鎮痛藥物應用于臨床的術后鎮痛［2-8］。口崩片崩解速度快，達峰時間早，有助于藥物溶出、吸收，快速緩解病癥帶來的不適感［9-10］。將酮咯酸氨丁三醇制備成口崩片，不需含水在口腔中，直接將其含在嘴里，藥物便能崩解完全，可提高疼痛患者的用藥依從性［11-12］。本研究中使用模糊綜合評價法聯合L9（34）正交試驗優化酮咯酸氨丁三醇口崩片處方［13-14］，并進行溶出度考察。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

PP-120 型單沖壓片機（湖南省衡陽市藥械設備廠）；BT25S型超微量電子分析天平（北京賽多利斯儀器有限公司，精度為千分之一）；RCZ-8 型藥物溶出度儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）；ZB-1E 型智能崩解儀（天津市天大天發科技有限公司）；YDP-200C 型片劑硬度測定儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）；LC-20AT型高效液相色譜儀（日本Shimadzu 公司），配有SPD-M20A型檢測器。

1.2 試藥

酮咯酸氨丁三醇對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為101532-202001，含量為99.8%）；酮咯酸氨丁三醇（海南卓科制藥有限公司，批號為Y-20200902）；酮咯酸氨丁三醇口崩片（自制制劑，批號分別為20211208，20211209，20211210，20211213，20211214，20211215）；阿司帕坦（湖南九典制藥有限公司，批號為TF23190601）；藍莓粉末香精（金富高生物技術有限公司，批號為20191226）；甘露醇（ROQUETTE Inc.，批號為E699G）；微晶纖維素UF-711（MCC，批號為7981），交聯羧甲基纖維素鈉ND-2HS（CCMC-Na，批號為X81373），均購自AsahiKASEI Inc.；硬脂酸鎂（安徽山河藥用輔料有限公司，批號為180346）；甲醇（批號為20191031），冰醋酸（批號為20190121），均購自國藥集團化學試劑有限公司；水為雙蒸餾水。

2 方法與結果

2.1 L9（34）正交試驗優選提取工藝

2.1.1 因素與水平

根據單因素試驗結果，選取MCC 用量（因素A）、甘露醇用量（因素B）、CCMC-Na 用量（因素C）、硬脂酸鎂用量（因素D）4 個因素，每個因素選擇3 個水平進行L9（34）正交設計試驗［15-16］，以主觀指標（口感、外觀）和客觀指標（硬度、崩解）作為考察因素，進行模糊綜合評分［17］。因素與水平見表1。

表1 L9（34）正交試驗因素與水平（mg）Tab.1 Factors and levels of the L9（34）orthogonal test（mg）

2.1.2 權重確定

選6名專業人員，同時對口崩片的主觀指標（口感、外觀）和客觀指標（硬度、崩解）進行評價。采用強制決定法確定口崩片各評價因素的權重，結果外觀、口感、硬度、崩解的權重分別為0.167，0.278，0.222，0.333。

2.1.3 評價結果

分別對9 組處方樣品的考察指標進行評價，以優（5 分）、較優（4 分）、適中（3 分）、較差（2 分）、差（1 分）為評價等級進行評分。各考察因素評分標準見表2。

表2 酮咯酸氨丁三醇口崩片評分標準Tab.2 Scoring criteria for Ketorolac Tromethamine Orally Disintegrating Tablets

2.1.4 評價數據處理

根據模糊綜合評分法建立原則：因素集U=｛外觀（u1），口感（u2），硬度（u3），崩解時間（u4）｝；評價集V=｛優（5 分），較優（4 分），適中（3 分），較差（2 分），差（1 分）｝；S 為U 到V 的模糊映射；權重向量A=｛外觀（u1），口感（u2），硬度（u3），崩解時間（u4）｝；R 為綜合評價結果集，計算公式為R=A×S。首先，根據外觀（u1）、口感（u2）評價結果建立模糊關系矩陣，得出R 值，分別與評價集中各對應分值相乘，然后分別將硬度（u3），崩解時間（u4）評價結果得出的R 與評價集中對應分值相乘。現以樣品1 建立的模糊關系矩陣S1為例進行數據處理。

將上述計算結果分別與評價集中各對應分值相乘，然后將硬度（u3）、崩解時間（u4）評價結果得出的R與評價集中對應分值相乘，計算總評分（YF）。樣品1 的總評分YF1=0×5+0.056×4+0.389×3+0×2+0×1+0.222×5+0.333×2=3.167。9組樣品的模糊綜合評分見表3。

表3 L9（34）正交試驗設計與結果Tab.3 Design and results of the L9（34）orthogonal test

2.1.5 方差分析結果

由表3和表4可知，因素影響順序為MCC>CCMC-Na>甘露醇>硬脂酸鎂，且MCC、CCMC-Na、甘露醇用量均對口崩片質量有顯著影響。最優水平為A2B2C2D1，即MCC 150 mg，甘露醇90 mg，CCMC-Na 10 mg，硬脂酸鎂1.5 mg。

表4 方差分析結果Tab.4 Results of the analysis of variance

2.1.6 驗證試驗

按最優處方，采用直接壓片法制備3 批樣品，以口感、外觀、硬度、崩解為考察指標進行工藝驗證。結果見表5，表明優化的酮咯酸氨丁三醇口崩片制備工藝重復性良好。

表5 最優處方工藝驗證試驗結果（n=6）Tab.5 Results of the validation test of optimal prescription process（n=6）

2.2 溶出度測定

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：甲醇-水-冰醋酸（65∶34∶1，V/V/V）；流速：0.9 mL/ min；檢測波長：322 nm；柱溫：40 ℃；進樣量：20μL。

2.2.2 溶液制備

取酮咯酸氨丁三醇對照品25 mg，精密稱定，置50 mL容量瓶中，加水溶解并定容，即得對照品貯備液；精密量取2 mL，置50 mL 容量瓶中，加水稀釋并定容，搖勻，即得質量濃度為20μg/mL的對照品溶液。

取自制酮咯酸氨丁三醇口崩片，參照《美國藥典（43版）》（USP43）中酮咯酸氨丁三醇片溶出度的測定方法［18］，溶出介質為600 mL 水，轉速為50 r/min，依法操作，待溶出規定的時間后，取溶出溶液4 mL，0.45μm濾膜濾過，取續濾液，即得供試品溶液。

按制劑處方比例制備不含酮咯酸氨丁三醇的空白片，照供試品溶液制備方法進行溶出度試驗，待溶出規定的時間后，取溶出溶液4 mL，0.45μm濾膜濾過，取續濾液，作為陰性對照品溶液。

2.2.3 方法學考察

系統適用性試驗：取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液各20μL，按2.2.1 項下色譜條件進樣測定，記錄色譜圖。結果溶劑峰不干擾酮咯酸氨丁三醇主成分峰，酮咯酸氨丁三醇口崩片的空白輔料對其樣品峰無影響，供試品溶液、對照品溶液的色譜峰一致，表明方法專屬性良好。色譜圖見圖1。

1.酮咯酸氨丁三醇A.對照品溶液 B.供試品溶液 C.陰性對照品溶液圖1 高效液相色譜圖1.Ketorolac tromethamineA.Reference solution B.Test solution C.Negative reference solutionFig.1 HPLC chromatograms

線性關系考察：取2.2.2項下酮咯酸氨丁三醇對照品貯備液，稀釋成質量濃度分別為1，25，50，75，100μg/mL的梯度溶液，按2.2.1 項下色譜條件進樣測定峰面積，以對照品質量濃度（C，μg/mL）為橫坐標、峰面積（A）為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程A=60 276C-222.25（r=0.999 9，n=5），表明酮咯酸氨丁三醇質量濃度在1～100μg/mL范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗：取2.2.2項下酮咯酸氨丁三醇對照品溶液適量，按2.2.1 項下色譜條件連續進樣測定6 次，記錄峰面積。結果酮咯酸氨丁三醇峰面積的RSD為0.11%（n=6），表明儀器精密度良好。

穩定性試驗：取2.2.2項下對照品溶液和供試品溶液各適量，分別于室溫下放置0，4，8，12，24 h 時按2.2.1 項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。結果對照品溶液和供試品溶液峰面積的RSD分別為0.37%和0.09%（n=5），表明對照品溶液和供試品溶液在24 h內穩定性良好。

重復性試驗：取樣品（批號為20211208）適量，按2.2.2 項下方法制備供試品溶液6 份，按2.2.1 項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積，并計算含量。結果含量的RSD為0.89%（n=6），表明方法重復性良好。

回收試驗：取酮咯酸氨丁三醇對照品3份，置100 mL容量瓶中，分別加入處方量輔料，用水溶解并定容，振蕩，充分溶解，精密量取溶解完全后的各濃度藥物2 mL，置10 mL 容量瓶中，加水定容，搖勻，取20 μL 進樣測定；另取2.2.2項下對照品溶液，同法測定。按外標法分別計算含量。結果平均回收率為98.76%，RSD為0.75%（n=9），表明方法準確性良好。

2.2.4 溶出度測定

分別吸取2.2.2 項下供試品溶液和對照品溶液各適量，按2.2.1項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積，以外標法計算每片的溶出量。結果溶出量應符合規定，限度為標示量的75%。

2.2.5 溶出度影響因素考察

溶出度測定方法：參考USP43 版和2020 年版《中國藥典》中酮咯酸氨丁三醇片溶出度的測定方法，以水為溶出介質，介質體積600 mL，轉速50 r/min，分別采用槳法和籃法進行溶出度試驗，分別于5，10，20，30，45，60，90 min 時取樣，按2.2.1 項下色譜條件進樣測定。由圖2 A 可知，溶出方法對藥物溶出度影響不大。故選擇槳法作為溶出度測定方法。

A.溶出度測定方法 B.溶出介質 C.轉速圖2 不同溶出條件下的溶出度A.Dissolution determination method B.Dissolution medium C.Rotation speedFig.2 Dissolution rates under different dissolution conditions

圖3 6批自制口崩片的溶出曲線Fig.3 Dissolution curves of six batches of self-made orally disintegrating tablets

溶出介質：保持其他體外溶出條件不變，以pH 1.2、pH 3.0、pH 6.8、純化水分別為溶出介質進行溶出度測定試驗，分別于5，10，20，30，45，60，90 min 時取樣，按2.2.1項下色譜條件進樣測定。由圖2 B 可知，酮咯酸氨丁三醇口崩片在pH 1.2 溶出介質中溶出度低于75%，pH 3.0、pH 6.8 溶出介質中溶出度低于純化水中的溶出度。參考USP43 酮咯酸氨丁三醇片溶出介質的選擇。故選擇純化水作為溶出介質。

轉速：保持其他體外溶出條件不變，轉速分別采用50，75，100 r/min，分別于5，10，20，30，45，60，90 min時取樣，按2.2.1 項下色譜條件進樣測定。由圖2 C 可知，各轉速間溶出度無顯著差異。藥物在人體消化道的溶出速度與胃腸道蠕動強度有關。故選擇與中老年人體胃腸蠕動強度等同的50 r/min作為轉速。

2.2.6 溶出曲線建立

取樣品（批號分別為20211208，20211209，20211210，20211213，20211214，20211215）以水為溶出介質，轉速50 r/min，采用槳法，介質體積600 mL，分別于5，10，20，30，45，60，90 min 時取樣，按2.2.2 項下方法制備供試品溶液，按2.2.1 項下色譜條件進樣測定，溶出度測定結果見表6。

表6 溶出度測定結果（%）Tab.6 Results of the dissolution determination（%）

3 討論

由表3 和表4 可知，酮咯酸氨丁三醇口崩片最佳處方為MCC 150 mg、甘露醇90 mg、CCMC-Na 10 mg、硬脂酸鎂1.5 mg。由圖2 可知，溶出度測定條件確定為槳法，以純化水600 mL為溶出介質，轉速為50 r/min。

口崩片質量要求嚴格，包括外觀整潔、口感良好、片面光潔、崩解完全等。崩解時間和口感是制備口崩片的關鍵問題，口崩片遇水后，水分通過顆粒間及顆粒內部空隙進入片芯內部，吸水后崩解完全。本研究中以MCC UF-711 和甘露醇為填充劑，制成的口崩片不僅保持了MCC UF-711 高流動性，又具有高成形性的特點，而且還具有甘露醇口感甘甜的特點，克服了單用MCC 時的砂礫帶澀味的口感缺點。MCC 同時兼具填充劑和崩解劑的作用，本研究中選擇MCC 用量為150 mg，避免MCC 用量過大，導致砂礫感澀味較強、口感較差等問題［19］。隨著片劑硬度的增加，顆粒間及顆粒內部空隙被壓縮，整體孔隙率降低，吸水速率減慢，崩解時間延長，口崩片崩解速度受自身硬度的影響，又由于制劑包裝、運輸過程中片芯的完整性也受硬度的影響。因此，在生產時對口崩片硬度和崩解時間進行評價。USP43收錄的酮咯酸氨丁三醇片的溶出度取樣時限為45 min，溶出度為標示量的75%。本研究中為充分考察酮咯酸氨丁三醇口崩片的體外溶出行為，取樣點設置為90 min，結果10 min內樣品可溶出完全，溶出度超過90%。