對氯間甲酚及復方對氯間甲酚對雞柔嫩艾美耳球蟲卵囊的抑殺效果

何學柏 遲依明 梁圣杰 李澍 杜孟澤 李秋明

摘 要 為驗證苯酚類消毒劑對雞球蟲卵囊的抑殺作用，采用不同濃度的單體和復方對氯間甲酚消毒劑與未孢子化的柔嫩艾美耳球蟲卵囊共孵育，檢測其對卵囊孢子化率的影響；與孢子囊共同孵育，通過子孢子脫囊率評價其對子孢子釋放的干擾。孢子化卵囊經過不同濃度消毒劑直接浸泡、糞便干擾下浸泡或噴霧處理后經口接種雛雞，通過OPG和盲腸病變記分探究消毒劑處理對卵囊的繁殖力和雞的致病性的影響。結果顯示， 2種消毒劑均可使孢子化率和子孢子脫囊率顯著下降，且3種濃度的復方對氯間甲酚與3%氨水對照組（PC）的消毒效果無顯著差異。直接浸泡處理試驗結果顯示，2%和3%復方對氯間甲酚 （HTS2和HTS3）具有更為顯著的抑殺效果，與PC無顯著差異；糞便干擾試驗結果顯示，糞便作用下這兩種消毒劑對球蟲卵囊仍有理想的抑殺效果；噴霧處理試驗結果顯示，3%對氯間甲酚（HT3）對球蟲卵囊抑殺效果最好，顯著優于PC組（P＜0.05），而2%對氯間甲酚（HT2）、HTS2和HTS3組的抑殺效果與PC組無顯著差異。研究結果表明，不同濃度下這2種消毒劑對孢子化和未孢子化的柔嫩艾美耳球蟲卵囊都有一定的抑殺作用，綜合比較，復方對氯間甲酚消毒劑具有更強的抑殺球蟲卵囊效果，具有代替氨水成為雞球蟲消毒劑的潛能。

關鍵詞 對氯間甲酚；柔嫩艾美耳球蟲；OPG；卵囊孢子化率；子孢子脫囊率

球蟲病是目前養禽業常見的、危害嚴重的傳染性寄生蟲病，可以造成巨大的經濟損失［1］。據估計，2016年全球因雞球蟲病造成的經濟損失超過了10.4億英鎊，其主要包括治療、死亡和控制成本［2］。一直以來，控制該疾病的策略包括疫苗接種和藥物預防，雖然疫苗和藥物在控制球蟲病方面發揮了巨大作用，然而，持續使用不同的抗球蟲藥已導致球蟲產生抗藥性［3］，且中國已禁止在飼料中添加抗生素類藥物；另外，由于傳統疫苗的局限性，至今仍未在中國小日齡出欄肉雞中廣泛使用，這為防治球蟲病帶來了很大困難［4］。若能篩選或開發一種有效的球蟲卵囊消毒劑，對禽舍進行有效的環境消毒，將是一種防控球蟲病的有效舉措。然而，目前關于球蟲卵囊消毒劑的研究資料十分有限，尚未見有一種臨床上可直接用于雞球蟲卵囊消毒的消毒劑［5］。為了尋找廉價、高效和刺激性小的雞球蟲卵囊消毒藥，本試驗對候選的酚類消毒劑進行體內體外測試，探究以對氯間甲酚為主要成分的消毒劑對柔嫩艾美耳球蟲卵囊的孢子化率、孢子化卵囊的脫囊率，以及在雞體內的繁殖力和致病力的影響，以期為防控球蟲病積累相關的數據經驗。

1 材料與方法

1.1 試驗耗材

對氯間甲酚消毒劑（含對氯間甲酚100 g/L，CAS編號59-50-7）、復方對氯間甲酚消毒劑（含對氯間甲酚100 g/L，CAS編號59-50-7；含芐氯酚50 g/L ，CAS編號59-50-7）均購自比利時浩衛制藥股份有限公司；氨水、甲醛、重鉻酸鉀和氯化鈉均采自國藥集團化學試劑有限公司；生理鹽水購于北京索萊寶科技有限公司。

1.2 球蟲卵囊與實驗動物

柔嫩艾美耳球蟲親本株由北京農學院球蟲實驗室從河南某雞場分離、純化和保存。經14日齡海蘭公雛雞傳代、復壯后，收集盲腸組織未孢子化的卵囊，一部分用于研究消毒劑對柔嫩艾美耳球蟲卵囊孢子化的影響；一部分置于2.5%重鉻酸鉀中，于28 ℃恒溫搖床震蕩培養48 h，至孢子化率達到80%以上，保存于4 ℃冰箱。1日齡海蘭公雛雞購自北京市華都峪口禽業有限責任公司，于無球蟲環境飼養至14日齡。

1.3 試驗設計

每個試驗均分為8個處理組，即0.9%生理鹽水對照組（NC）、1%對氯間甲酚組（HT1）、2%對氯間甲酚組（HT2）、3%對氯間甲酚組（HT3）、1%復方對氯間甲酚組（HTS1）、2%復方對氯間甲酚組（HTS2）、3%復方對氯間甲酚組（HTS3）、3%氨水對照組（PC）。

1.4 消毒劑對柔嫩艾美耳球蟲卵囊孢子化的影響

將1×105個新鮮未孢子化的球蟲卵囊分別與10 mL處理液在15 mL離心管中混懸處理18 h，每組3個重復。處理后用蒸餾水離心沖洗以除去殘余處理液。而后將離心沉淀的卵囊加入 ?2.5%重鉻酸鉀溶液中，于28 ℃恒溫搖床內孢子化48 h。顯微鏡下觀察100個以上的卵囊，計算出孢子化率，用于評價不同消毒劑對新鮮卵囊孢子化的抑制效果。

孢子化率=孢子化卵囊數/（孢子化卵囊數+未孢子化卵囊數）×100%

1.5 消毒劑對柔嫩艾美耳球蟲子孢子脫囊逸出的影響

將1×105個已孢子化的球蟲卵囊分別與各處理液混合，處理方式同“1.4”。將離心沉淀后的卵囊加入200 μL PBS緩沖液重懸，再加入50個直徑1 mm的玻璃珠，使用渦旋振蕩器震蕩，顯微鏡下觀察并計算卵囊的破壁率，至卵囊破壁率達到70%以上停止震蕩。將破壁后的球蟲卵囊加入膽酸鹽消化液中（將0.75% 胰蛋白酶和10% 雞膽汁加入配置好的 PBS中，混勻），37 ℃孵育40 min。孵育完成后在顯微鏡下計算子孢子的脫囊數量，同時也記錄視野中的孢子囊數量，最后計算子孢子的脫囊率［6］。

子孢子脫囊率=子孢子數/（子孢子數+孢子囊數×2）×100%

1.6 消毒劑對柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊的抑殺效果

將已孢子化的球蟲卵囊分別與各處理液混合，處理方式同“1.4”。將處理好后的卵囊經口接種14日齡的雛雞，每組6只，每只接種1×104個卵囊。感染后觀察血便狀態。接種第6 天清理糞便，收集第7、8 天的糞便，按照麥克馬斯特計數法［7］（McMasters method）計算OPG值，每一組取糞便樣品5份，每份計數2次后求平均值。第8 天剖殺所有試驗雞，進行盲腸病變記分并拍照［8］。通過OPG值和盲腸病變記分評價不同消毒劑對孢子化卵囊的感染活性抑殺效果。

1.7 消毒劑在雞糞便的影響下對柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊的抑殺效果

將1×105個已孢子化的球蟲卵囊與3 g研磨成粉的雞糞便混勻，分別加入10 mL各處理液攪拌均勻處理18 h，用蒸餾水離心沖洗除去殘余處理液，經口接種14日齡的雛雞，每組6只，每只雞接種1×104個卵囊。檢測指標同“1.6”。

1.8 消毒劑對附著在固體表面上球蟲的抑殺效果

使用消毒劑噴霧對附著在平皿表面的球蟲卵囊進行消毒效果評價，以模擬雞舍消毒場景。室溫條件下，每組取1×105個已孢子化的球蟲卵囊平鋪于塑料培養皿（直徑=8.5 cm）中，自然風干后，分別用各處理液噴霧6次，一共噴灑液體約0.85 g，且每次噴出的液體質量為 （0.14±0.02）g。處理液作用1 h后用蒸餾水沖洗平皿，收集其中的卵囊，經過離心沉淀后將卵囊最終加入2 mL清水混勻，經口接種14日齡雛雞，每組5只，每只雞接種1×104個卵囊。檢測指標同“1.6”。

1.9 數據處理與分析

采用Excel 2019軟件繪圖以及使用SPSS 21軟件進行統計學分析處理。對于符合正態分布的兩組數據，方差不齊時使用帶有Welchs校正的非配對t檢驗進行分析，方差等齊時使用非配對t檢驗。當兩組數據不服從正態分布時，使用Mann-Whitney秩和檢驗。當需要多組比較時，如果數據符合正態分布則使用ANOVA檢驗，不符合正態分布時使用Kruskal-Wallis檢驗。當 ?P＜0.05時認為數據“平均數±標準差”具有統計學差異。

2 結果與分析

2.1 不同消毒劑對柔嫩艾美耳球蟲卵囊孢子化的影響

與NC組相比，不同濃度下2種消毒劑對柔嫩艾美耳球蟲卵囊孢子化都有較強的抑制作用（P＜0.001）。其中HTS3組孢子化率最低，接近氨水對照組，并且兩者無顯著差異（P＞0.05，圖1）。表明3%復方對氯間甲酚對球蟲卵囊孢子化的抑制效果最好。

與NC組相比，***表示具有極其顯著的統計學差異（P＜0.001）；與PC組相比，ns表示無顯著差異（P＞0.05）。下同

2.2 不同消毒劑對球蟲卵囊子孢子逸出的影響

為檢測不同濃度下2種消毒劑對孢子化卵囊的感染是否也有抑殺效果，使用不同濃度的消毒劑與孢子囊孵育，觀察其對子孢子釋放的干擾。結果顯示（圖2），與NC對照組相比，HT2、HT3、HTS1、HTS2和HTS3組在一定程度上抑制雞柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊的脫囊（P＜0.001），其中HTS1、HTS2、HTS3這3個處理組子孢子脫囊率與氨水對照組相比無顯著差異。表明同等濃度下，復方對氯間甲酚對孢子化卵囊的體外消毒效果要優于對氯間甲酚，且與氨水效果一致（圖3）。

2.3 不同消毒劑直接浸泡處理下對球蟲卵囊的抑殺效果

雛雞感染模型試驗進一步評價了這2種消毒劑對孢子化卵囊的消毒效果，將不同濃度消毒劑與孢子化的球蟲卵囊處理18 h后，經口接種雛雞。結果顯示，與NC組相比，2種消毒劑處理組的OPG值極顯著下降（P＜0.001）；與單方相比，HTS2和HTS3組具有更為顯著的抑殺效果；與PC組無顯著差異。盲腸評分結果與OPG結果相符（表1）。表明直接浸泡處理下2%和3%的復方對氯間甲酚對孢子化球蟲卵囊的抑殺效果 ?顯著。

2.4 不同消毒劑在雞糞便干擾下浸泡處理對球蟲卵囊的抑殺效果

糞便干擾試驗結果顯示，與NC組相比（表2），被消毒劑處理后的所有組OPG值均顯著下降，其中HTS2、HTS3組具有較為良好的抑殺效果，與PC組無顯著差異（P＞0.05），HTS2、HTS3組盲腸評分較低。試驗結果與無雞糞干擾試驗結果趨勢一致，表明糞便作用下2%和3%的復方對氯間甲酚對球蟲卵囊依然有理想的抑殺 ?效果。

2.5 不同消毒劑在噴霧處理下對球蟲卵囊的抑殺效果

使用消毒劑對附著在平皿表面的球蟲卵囊進

行噴霧處理后，與NC組相比（表3），不同濃度下2種消毒劑處理后OPG值均極顯著降低（P＜ ?0.001），其中HTS2組和HTS3組的OPG值與PC組相當，無顯著差異（P＞0.05），而HT3組顯著低于PC組（P＜0.05）。盲腸病變記分顯示HT3、HTS2和HTS3組評分較低，與PC組無顯著差異。表明噴霧處理下2種消毒劑都具有較為良好的抑殺效果，其中HTS2組和HTS3組對球蟲的抑殺效果與PC組相當，而HT3組抑殺效果優于PC組。

3 討? 論

雞感染球蟲是由于經口吞食了孢子化的球蟲卵囊，在體外抑制球蟲卵囊的孢子化進程或殺滅孢子化卵囊，可從源頭上控制球蟲病。本研究檢測對氯間甲酚和復方對氯間甲酚2種消毒劑對球蟲卵囊的抑殺效果，結果表明，不同濃度下2種消毒劑對孢子化的和未孢子化的柔嫩艾美耳球蟲卵囊都有一定的抑殺作用，其中復方對氯間甲酚消毒劑具有較強的抑殺效果，且呈劑量依賴。

雞球蟲的卵囊壁是一個堅固的化學結構，并且能夠耐受機械性損傷，卵囊對于化學制品、消化酶、洗滌液以及低滲溶液的破壞具有相當的抵抗力，常規的消毒劑很難破壞球蟲的卵囊壁結構［9］。陳漢忠等［10］經試驗證實百毒消、七消液和2%的燒堿均對卵囊無效；安健等［11］的試驗也說明卵囊對許多消毒劑，如福爾馬林、84消毒液、來蘇兒等具有較強的抵抗力；近期，郝桂英等［12］發現過氧化氫、碘酊、獸用百毒殺對球蟲卵囊孢子化無明顯影響； Gadelhaq等［13］發現艾美耳球蟲卵囊在使用Dettol、TH4、苯酚、Virkon○[KG-*3/4][HT6”SS]R[HT]后，能夠進行正常的孢子化過程以及顯示出完整的卵囊壁；韓利方等［5］研究顯示，250 mg/L妥曲珠利、3%甲醛、4%苯酚、0.5%過氧乙酸、5%NaOH+10%NaCl和5%NaOH對球蟲卵囊活性具有一定的抑制作用，孢子化抑制率超過10%，但是對孢子化卵囊幾乎無抑殺作用。目前，經過多人反復研究證實合適濃度的氨水對球蟲卵囊具有高效的抑殺作用［5，14-15］，韓利方等［5］研究發現1%～8%的氨水與未孢子化卵囊作用1 h以上，均可100%抑殺球蟲卵囊活性；周作勇等［14］發現，7%氨水處理組球蟲卵囊的孢子化率僅為2.18%。本試驗中3%氨水組作為陽性對照，孢子化率為0.33%，極顯著降低卵囊產量和病變記分，這都證實氨水對球蟲卵囊發育具有極強的抑殺作用。然而，氨水強烈的刺激性氣味使其在密集的養殖方式下使用顯然是不適合的［16］。因此，在生產實踐中缺少控制球蟲的消毒劑。各種酚類消毒劑在日常生活中常被使用，但關于它們抑殺艾美耳球蟲卵囊效力的信息十分有限［17］。因此，本研究選用對氯間甲酚和復方對氯間甲酚兩種酚類消毒劑對雞球蟲卵囊進行抑殺試驗。

有研究報告提出一些針對球蟲的消毒策略，這些策略對獸醫和人類健康都具有重要意義［18-19］。盡管球蟲在禽的流行病學中具有重要意義，但關于使用化學消毒劑降低環境中，特別是在被污染表面上的艾美耳卵囊的活力或傳染性的報道有限［20］。球蟲卵囊極小， 容易與灰塵一起漂浮在空氣中，散布到鄰近雞舍和區域，亦可造成感染［21］。因此，本試驗用不同濃度消毒劑對物體表面噴灑消毒模擬現場試驗，結果表明不同濃度下2種消毒劑對雞柔嫩艾美耳球蟲卵囊都具有一定的抑殺效果，其中HT3組抑殺效果最好，優于氨水對照組。本試驗中氨水組采用噴灑方式作用雞球蟲卵囊，與直接浸泡處理相比，糞便卵囊排出量要更高，原因可能是氨水易揮發，不易起到確實的消毒效果。

本試驗結果顯示，3%復方對氯間甲酚消毒劑既能很好地抑制卵囊孢子化又能抑制子孢子出囊率，表明該消毒劑可控制環境中球蟲卵囊孢子化和抑制子孢子脫囊，用該消毒劑對球蟲進行物體表面噴灑消毒效果模擬現場試驗時，能夠減輕腸道病變，減少糞便中卵囊的排出量，表明通過噴霧可削弱球蟲的感染能力，進一步說明復方對氯間甲酚消毒劑可作為球蟲消毒劑。球蟲消毒劑還能與各種抗球蟲藥聯合應用，將環境撲殺與抗球蟲藥物控制雞體內球蟲卵囊排出的作用結合，減少抗藥性的產生，共同防治雞球蟲病。而且球蟲消毒劑是外用消毒藥，它能減輕球蟲藥所引起的毒副作用和藥物殘留，提高經濟效益，保證人們的生命健康［22］。這提示復方對氯間甲酚消毒劑在預防和控制雞球蟲病方面有廣闊的應用前景。

本研究結果表明，不同濃度下對氯間甲酚和復方對氯間甲酚這2種消毒劑對孢子化的和未孢子化的柔嫩艾美耳球蟲卵囊都有一定的抑殺作用，其中復方對氯間甲酚消毒劑具有更強的抑殺效果。

參考文獻 Reference：

［1］ FATOBA A J，ADELEKE M A.Diagnosis and control of chicken coccidiosis：a recent update［J］.Journal of Parasitic Diseases，2018，42（4）：483-493.

［2］ BLAKE D P，KNOX J，DEHAECK B，et al.Re-calculating the cost of coccidiosis in chickens［J］.Veterinary Research，2020，51（1）：115.

［3］ 郝振凱，畢菲菲，韓貞艷，等.雞球蟲耐藥性研究進展［J］. ?中國獸醫雜志，2019，55（6）：64-68.

HAO ZH K，BI F F，HAN ZH Y，et al.Research progress on resistance of coccidiosis in chicken ［J］.Chinese Journal of Veterinary Medicine，2019，55（6）：64-68.

［4］ 湯新明，索 勛，劉賢勇.集約化養殖模式下雞球蟲病的防控［J］.寄生蟲與醫學昆蟲學報，2018，25（4）：279-286.

TANG X M，SUO X，LIU X Y.Control of chicken coccidiosis in the modern poultry industry in China ［J］.Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica，2018，25（4）：279-286.

［5］ 韓利方，閆文朝，李亞云，等.球蟲消毒劑的篩選及氨水對艾美耳球蟲卵囊抑殺條件的優化［J］.中國畜牧獸醫，2018， ?45（12）：3601-3607.

HAN L F，YAN W CH，LI Y Y，et al.Screening of disinfectants against coccidian and optimization of inhibitory conditions of ammonia hydroxide against oocysts of Eimeria tenella ［J］.China Animal Husbandry & Veterinary Medicine，2018，45（12）：3601-3607.

［6］ 吳惠賢，魏文康，謝宏料，等.判斷消毒劑對雞球蟲孢子化卵囊抑殺效果的新方法脫囊抑制試驗［J］.中國獸醫學報，1998，18（6）：619-620.

WU H X，WEI W K，XIE H L，et al.Excyst inhibition? ?test- a new method for judging disinfectants inhibition effect on coccidia oocyst［J］.Chinese Journal of Veterinary Science，1998，18（6）：619-620.

［7］ LARSEN S，HAUG A，WILLIAMS R B.Counting coccidial oocysts in chicken faeces：a comparative study of a standard McMaster technique and a new rapid method［J］.Veterinary Parasitology，2006，136（3/4）：233-242.

［8］ 王偉偉，王新莊，張寶龍，等.中藥復方口服液對雞柔嫩艾美爾球蟲病的療效［J］.西北農業學報，2009，18（6）：56-58.

WANG W W，WANG X ZH，ZHANG B L，et al.Pharmacodynamics of chinese herbal medicine prescription on Eimeria tenella in chickens［J］.Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica，2009，18（6）：56-58.

［9］ 邢 濤，周光勝，郁星星，等.亞硝基谷胱甘肽對雞球蟲脫囊的影響［J］.湖北農業科學，2015，54（9）：2173-2175.

XING T，ZHOU G SH，YU X X，et al.Effects of s-nitroso-glutathione on excystation of Eimeria tenella in chicken ［J］.Hubei Agricultural Sciences，2015，54（9）：2173-2175.

［10］陳漢忠，王忠田，蘇 勇，等.消毒劑抑殺雞球蟲卵囊的初步試驗［J］.中國獸藥雜志，2005，39（10）：37-39.

CHEN H ZH，WANG ZH T，SU Y，et al.Primary studies on the effect of several disinfectants restraining oocyst sporulation ［J］.Chinese Journal of Veterinary Drug，2005，39（10）：37-39.

［11］ 安 健，王黎霞，汪 明，等.離體條件下球蟲卵囊子孢子囊的釋放［J］.北京農學院學報，2006，21（1）：18-20.

AN J，WANG L X，WANG M，et al.The release conditions of coccidia sporozoites oocyst in vitro ［J］.Journal of Beijing University of Agriculture，2006，21（1）：18-20.

［12］ 郝桂英，何學謙，陳永霞.8種消毒藥對兔球蟲卵囊孢子化的影響［J］.黑龍江畜牧獸醫，2018（2）：171-173.

HAO G Y，HE X Q，CHEN Y X.The effect of 8 disinfectants on sporulation of rabbit coccidian［J］.Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine，2018（2）：171-173.

［13］ GADELHAQ S M，ARAFA W M，ABOLHADID S M.In vitro activity of natural and chemical products on sporulation of? Eimeria species oocysts of chickens［J］.Veterinary Parasitology，2018，15（251）：12-16.

［14］ 周作勇，王芝英，胡世君，等.6種殺蟲劑對雞柔嫩艾美耳球蟲卵囊孢子化率及致病力的影響［J］.中國獸醫雜志，2015，51（3）：91-94.

ZHOU Z Y，WANG ZH Y，HU SH J，et al.Effect of 6 insecticides on the sporulation rate and pathogenicity of Eimeria tenella［J］.Chinese Journal of Veterinary Medicine，2015，51（3）：91-94.

［15］ 索 勛，李國清.雞球蟲病學［M］.北京：中國農業大學出版社，1998.

SUO X，LI G Q.Avian Coccidian and Coccidiosis［M］.Beijing：China Agricultural University Press，1998.

［16］ 季 輝，張軍忍，江善祥.球蟲消殺劑（Oo-stat）的配方優化研究［J］.中國家禽，2009，31（2）：23-25.

JI H，ZHANG J R，JIANG SH X.Study on optimized trial of Oo-stat formula ［J］.China Poultry，2009，31（2）：23-25.

［17］ WILLIAMS R B.Laboratory tests of phenolic disinfectants as oocysticides against the chicken coccidium Eimeria tenella［J］.The Veterinary Record，1997，141（17）：447-448.

［18］ KING B J，MONIS P T.Critical processes affecting cryptosporidium oocyst survival in the environment［J］.Parasitology，2007，134（3）：309-323.

［19］ DUMETRE A，MOULIN L，DUBEY J P，et al.Effects of ozone and ultraviolet radiation treatments on the infectivity of Toxoplasma gondii oocysts［J］.Veterinary Parasitology，2008，153（3/4）：209-213.

［20］ DAUGSCHIES A，BANGOURA B，LENDNER M.Inactivation of exogenous endoparasite stages by chemical disinfectants：current state and perspectives［J］.Parasitology Research，2013，112（3）：917-932.

［21］ 張宏偉，韓曉輝，侯繼勇，等.雞球蟲病暴發的流行病學因素［J］.中國獸醫科技，2004，34（5）：75-77.

ZHANG H W，HAN X H，HOU J Y，et al.Epidemiology factors of coccidiosis outbreaks among chicken［J］.Chinese Journal of Veterinary Science and Technology，2004， ?34（5）：75-77.

［22］ 易永萍，李美娣，武 力.一種球蟲消毒劑預防雞球蟲病的效果試驗［J］.福建畜牧獸醫，2018，40（1）：21-24.

YI Y P，LI M D，WU L.Study on effect of oocide to prevent chicken coccidiosis ［J］.Fujian Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，2018，40（1）：21-24.

Inhibitory and Killing Effect? of p-chloro-meta-cresol and p-chloro-meta-cresol Compound on Eimeria tenella Oocysts

Abstract To investigate the inhibitory effect of phenolic disinfectants on chicken coccidial oocysts，different concentrations of monomer or compound formulated p-chloro-m-cresol disinfectants were incubated with un-sporulated Eimeria tenella oocysts in vitro，and their effects on the sporulation rate of oocysts were detected. Besides，the sporozoite oocysts were incubated，and the interference of different disinfectants on the release of sporozoites was evaluated by sporozoite decapsulation rate. And then the sporulated oocysts were treated with three different ways：1） immersion with different concentrations of disinfectants; 2） immersion with feces; 3） spray，and then infect chicks by oral administration. The fecundity and pathogenicity of sporulated oocysts treated with disinfectants were measured by two indicators：oocysts per gram of feces （OPG） and cecal lesion score. The results showed that application of each disinfectant significantly reduced the rate of sporulation as well as release of sporozoites of Eimeria tenella，which had comparable effect with chlorom-cresol and 3% ammonia solution （P＞0.05）. Under the other two different treatments，the fecundity and pathogenicity of Eimeria tenella on chicken? significantly decreased. There was no significant difference between HTS2，HTS3，and the PC group （P＞0.05）.? The spraying treatment showed that 3% para-chloro-m-cresol （HT3） inhibited the killing activity of coccidial oocyst，which was even better than PC （P＜0.05），while 2% para-chloro-m-cresol （HT2），HTS2，and HTS3 had similar inhibitory effect compared with PC，and there was no significant difference （P＞0.05）. This study revealed that these two disinfectants （at different concentrations） have notable inhibitory effects on both sporulated and unsporulated Eimeria tenella oocysts. Generally，the compound formula has better effect than the monomer formular，suggesting that it has potential of compound p-chloro-m-cresol disinfectant on coccidial oocyststo to replace ammonia solution.

Key words p-chloro-meta-cresol；Eimeria tenella；OPG;? Sporulation rates of oocysts；Excystation rate of sporozoites