水產疫苗在漁業(yè)健康養(yǎng)殖中的應用

李項岳，高兆明，劉帥

（濱州市海洋發(fā)展研究院，濱州市水產苗種繁育與健康養(yǎng)殖重點實驗室，山東 濱州 256600）

疫苗是以病原微生物及其成分為材料，通過人工方法制成，使接種對象產生自動免疫、預防傳染性疾病的一類生物制劑。近年來，隨著水產養(yǎng)殖設施化、集約化水平的不斷提高，養(yǎng)殖病害問題日益突出。開發(fā)和使用水產疫苗防控重大水生動物疾病，顯得尤為重要[1]。相比傳統(tǒng)的抗生素類藥物防治方法，接種疫苗在增強水生動物機體免疫保護力和抗應激能力、提高養(yǎng)殖成功率的同時，可有效降低因不規(guī)范使用化學藥物而產生的環(huán)境污染和水產品質量風險，符合水產養(yǎng)殖綠色、健康、可持續(xù)發(fā)展的要求。現(xiàn)介紹水產疫苗的接種方法、常用疫苗以及接種注意事項，供養(yǎng)殖戶參考。

1 接種方法

目前，水生動物常用的免疫接種方法有注射法、浸洗法、口服法和噴霧法，以注射法最為常見，免疫接種效果最佳[2]。在一定劑量范圍內，免疫的效果與接種的劑量成正比[3]。

1.1 注射法

注射法是將疫苗直接注射到水生動物肌肉、腹腔的免疫接種方法。此法用藥量準確、吸收快、效果好，但操作麻煩，容易損傷魚體。適用于體質量在50 g以上或體長10 cm 以上的水生動物。接種時，使用普通醫(yī)用或漁用連續(xù)注射器，將疫苗直接注射其肌肉或腹腔內。

注射法根據(jù)注射部位不同，分為肌內注射和腹腔注射。肌內注射一般在背脊部與魚體成30~40°角進針；腹腔注射，則是將注射器針頭沿腹內側斜向插入或于胸內側基部插入腹部。注射法接種進針深度一般為0.2~0.5 cm，以不傷內臟或脊椎骨（脊髓）為宜。注射劑量根據(jù)水生物體質量大小而定。通常體質量250 g 以下，注射0.2~0.3 mL/尾，500 g 以上，則注射0.3~0.5 mL/尾。

相比肌內注射，腹腔注射藥液不易泄漏，效果更好，但不適用于個體較小的魚類。為提高接種效率，注射前可使用魚用麻醉劑將水生物麻醉，并在注射針頭上套用適當長度的塑料膠圈以控制進針深度。

1.2 浸浴法

浸浴法是將水生物浸泡于疫苗溶液中，達到免疫接種目的接種方法。浸浴法適用于不同規(guī)格的水生物苗種，尤其是小規(guī)格苗種。該方法操作簡單，適宜于生產過程中大批量魚種的免疫，對受免疫水生物的應急性刺激較注射法小。浸泡前常采用理化方法促使疫苗進人機體。常用的有高滲法，即浸泡疫苗前，先將水生物放入3%~5%的氯化鈉溶液中浸泡3~5 min，再將其移至疫苗溶液中浸泡，利用滲透壓的改變，促使疫苗中的抗原進入機體。

浸浴法免疫接種時間，以每年秋末至次年初春，水溫穩(wěn)定在10~15 ℃時最為適宜。經免疫后的魚種，在12~18 ℃水溫中連續(xù)飼養(yǎng)20 d 以上，可有效提高接種率。浸浴法疫苗用量較注射法少，但受浸泡進入機體的疫苗量有限的影響，免疫效果相對不穩(wěn)定。

1.3 口服法

口服法為將疫苗通過投喂的方法接種到水生物機體的免疫方法[4]。該法操作簡單，且不受接種對象規(guī)格大小、口服疫苗種類、接種時間和次數(shù)等限制，因此適用于大規(guī)模養(yǎng)殖或分散養(yǎng)殖水產動物的免疫。口服疫苗不僅有效避免了由注射引起的機體的應激反應和損傷，而且可以減少人力物力，提高免疫效率，降低養(yǎng)殖成本，在養(yǎng)殖生產中易于推廣和應用。缺點是口服疫苗易受胃腸道消化液對疫苗的消化分解的影響，從而破壞其免疫原性，導致免疫效果不穩(wěn)定，且疫苗用量較大。

1.4 噴霧法

噴霧法將疫苗以高壓噴射到接種水生物體表進行免疫的方法。此法操作簡單，但需要一定的接種設施，免疫效果差。

2 常用疫苗

據(jù)不完全統(tǒng)計，目前全球商品化水產疫苗的數(shù)量總計150 余種，多數(shù)在歐美等發(fā)達地區(qū)生產和使用，主要應用于鮭科、鱸和大西洋鱈等。我國水產疫苗的產業(yè)化仍處于初級階段。截至目前，有9 種魚類疫苗產品獲得了國家獸藥注冊證書，其中5 種獲得了獸藥生產文號[5]。

2.1 草魚出血病疫苗

接種疫苗是預防草魚出血病的有效方法之一，應用較多的主要有草魚出血病滅活疫苗和草魚出血病弱毒活疫苗，疫苗注冊證書編號分別為：草魚出血病弱病毒活疫苗（GCHV 892 株）[（2010）新獸藥證字51 號]、草魚出血病滅活疫苗（ZV 8909 株）[（93）新獸藥證字14 號]。適用于預防1~2 齡草魚呼腸孤病毒（GCRV）引起的出血病，免疫原性強，免疫效果好[6]。免疫保護期可長達15 個月，易于保存，凍干產品在-10 ℃環(huán)境下，保存有效期可長達18 個月。

對于2 齡草魚可采取注射法，1 齡草魚采用浸泡法。疫苗效應期為5 d。第10 天時，免疫的草魚血清中和抗體即達到較高水平，第20 天左右處于峰值，以后保持在第10 天的水平上波動。該類疫苗的免疫臨界溫度為10 ℃。免疫后的草魚，至少應在免疫后5 d 內，養(yǎng)殖在10 ℃以上的水溫里，才能獲得較好的免疫效果[7]。

2.2 嗜水氣單胞菌敗血癥滅活疫苗

可預防大多數(shù)淡水魚、部分海水魚或其他水生物的敗血病，疫苗注冊證書編號：（2001）新獸藥證字06 號。可通過注射法、浸浴法與噴霧法等多種方式免疫接種，宜于在水溫20 ℃以上應用。全菌苗的免疫效應期為40 d，免疫持續(xù)期可達6 個月以上[8]。

根據(jù)應用實踐，淡水魚類細菌性敗血癥全菌苗免疫保護力可達60%~100%，亞單位疫苗對鯽免疫保護力>80%，嗜水氣單胞菌溶血素-ISCOM 疫苗對鰻鱺保護力>85%。由于嗜水氣單胞菌存在多種血清型，選擇的疫苗菌株的免疫原性，對免疫保護作用的影響較大。

2.3 弧菌疫苗

用于預防鮭、鱒、鰻、鯉、羅非魚等養(yǎng)殖魚類因弧菌引起的弧菌病，商品疫苗常用注射法、浸浴法、噴霧法與口服法進行接種。弧菌疫苗是目前最成功的魚用疫苗之一，已在美國、加拿大、日本、歐洲及我國商品性生產，國內疫苗注冊證書編號：（2006）新獸藥證字66 號、（2019）新獸藥證字15 號。商品弧菌苗均為多價疫苗，近年來使用較為普遍。效應期為10~15 d，免疫期在6 個月以上，口服免疫疫苗，免疫保護力達50%以上[9]。

2.4 遲緩愛德華氏菌苗

2.5 傳染性胰壞死病毒疫苗

用于預防鮭鱒魚類因傳染性胰壞死病病毒所引起的疾病。該疫苗已在歐洲獲得生產許可，免疫最佳溫度為10~20 ℃，可采用注射法、浸浴法進行接種，但浸浴法效果較差。該滅活疫苗有較好的抗攻擊保護力，但多肽疫苗與減毒疫苗的免疫原性較差。在10 ℃時，免疫后21~30 d 的鮭鱒魚類，可測得較高的中和抗體。

3 注意事項

（1）免疫接種的對象是攝食正常、體質健康的養(yǎng)殖動物。

（2）注射疫苗前10 d，要徹底消毒殺菌，以殺死機體及養(yǎng)殖水體中的病原菌。使免疫過的苗種在新的環(huán)境中不再受新病原的感染。

（3）免疫時間最好選擇在晴天清晨、氣溫10~15 ℃。需嚴格按照疫苗產品使用說明書的要求。操作過程要輕、快、穩(wěn)，盡量減少對魚體的損傷，免疫后需加強綜合管理。

（4）疫苗稀釋時應現(xiàn)配現(xiàn)用，稀釋好的疫苗要1 次用完。

（5）水生物苗種在浸泡免疫前最好停食1 d，并拉網(wǎng)鍛煉1 次，整個浸泡過程宜在陰涼通風的環(huán)境中。

（6）使用前，應將疫苗恢復至室溫，并充分搖勻。

（7）用過的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等，應進行無害化處理

（8）選擇高質量疫苗。核查疫苗的名稱、批準文號、生產廠家、生產批號、出廠日期、保存期、使用方法、保管容器，詢問運輸方法等。疫苗制品多為蛋白質類物質，性質不穩(wěn)定，一般都怕熱、怕光，需低溫保存，多需貯存于2~10 ℃干燥暗處。要逐瓶檢查瓶子有無破損、瓶蓋是否松動、瓶內容物的性狀是否有異常，瓶內容物顏色與標簽上的說明是否一致等。

（9）檢查是否按藥物規(guī)定列出主要成分、性狀、作用與用途、用法與用量、注意事項、規(guī)格、有效期和休藥期等內容和詳細說明，以便正確使用。若不符合上述要求，均不能使用。

4 結語

采用水產疫苗進行水生物疾病的預防和治療，是漁藥發(fā)展的一個重要方面。水產疫苗的推廣，可以減少養(yǎng)殖生產中藥物的使用量，減少藥物造成的環(huán)境污染及對水產品品質的影響，避免養(yǎng)殖動物體內的藥物殘留引起食品安全問題[11]。目前，我國水產疫苗發(fā)展緩慢，這與疫苗研究基礎薄弱和給藥方式的限制有重要關系。因此，應該加強水產疫苗的研究和生產，提高水產疫苗的質量和數(shù)量，同時加強相關技術的推廣與示范工作，為水產疫苗的產業(yè)化和市場化奠定基礎。