基于主成分分析綜合評價6個雜交授粉組合的馬家柚果實品質

徐宸宇 唐啟正 劉慧宇 吳巨勛 伊華林

DOI：10.13925/j.cnki.gsxb.20230462

摘? ? 要：【目的】探究不同雜交授粉組合馬家柚果實營養成分特征性狀，綜合評價雜交果實品質，為選擇適宜的馬家柚授粉父本提供數據支撐。【方法】通過品質指標變異系數分析、相關性分析和主成分分析對2020年廣豐地區6個雜交組合馬家柚果實樣品共18項品質性狀指標進行綜合評價。【結果】單果質量、果皮厚度、蔗糖含量、檸檬酸含量等在內的共18項品質性狀指標間差異顯著，變異系數為6.35%～114.45%。通過主成分分析提取到5個主成分，累積貢獻率可達85.001%，分別反映了果實糖酸、色澤、營養、外觀、香氣及苦味品質指標。其中，果實可溶性糖和有機酸各組分含量以及甜度值為評價雜交授粉馬家柚果實品質的重要因子。【結論】主成分因子得分及排序表明雞尾葡萄柚為馬家柚的最佳授粉父本。

關鍵詞：柑橘；馬家柚；雜交授粉；主成分分析；品質提升

中圖分類號：S666.3 文獻標志碼：A 文章編號：1009-9980（2024）02-0282-12

Comprehensive evaluation on fruit quality of six hybrid pollination combinations of Majiayou based on the principal component analysis

XU Chenyu， TANG Qizheng， LIU Huiyu， WU Juxun， YI Hualin*

（College of Horticulture & Forestry Sciences of Huazhong Agricultural University/National Key Laboratory for Germplasm Innovation & Utilization of Horticultural Crops， Wuhan 430070， Hubei， China）

Abstract： 【Objective】 Different hybrid pollination combinations show significant differences in fruit quality of Majiayou. However， research on cross pollination of Majiayou mainly focuses on the evaluation and analysis of conventional quality. There are few studies that comprehensively evaluate the secondary metabolites such as important flesh color indicators like lycopene， flavor indicators like naringin， and aroma substances based on variety characteristics. In order to provide valuable information and evaluation tools for breeders， a total of 18 pomelo fruit quality traits were used for comprehensive evaluation to select suitable male parents for pollination and provide data support for production. 【Methods】 The fruit setting rate， important secondary metabolites like lycopene and naringin， and major volatile substances of six hybrid pollination combinations of Majiayou were examined， and then the early data on 18 quality traits including single fruit weight， peel thickness， number of seeds， soluble solids， titratable acid， sucrose， glucose， fructose， citric acid， malic acid and sweetness value were used for coefficient of variation （CV） analysis， correlation analysis， principal component analysis （PCA）， and comprehensive score ranking to evaluate the fruit quality traits of different hybrid pollination combinations in Majiayou. 【Results】 There were significant differences in the 18 quality traits of fruit among different hybrid pollinated combinations of pomelo， with a coefficient of variation ranging from 6.35% to 114.45%. Among them， the highest fruit setting rate hybrid combination was Majiayou × Tuyou No. 4 （T4） of 55.3%， while Majiayou × Cocktail grapefruit （JW） had the lowest fruit setting rate of 22.9%. The contents of lycopene， naringin， and volatile substances in the juice cells of different hybrid pollination combinations of pomelo were measured. The results showed that different male parents had a significant impact on the secondary metabolites in the juice cells of Majiayou. Among them， the contents of lycopene in Majiayou × Tuyou No. 1 （T1）， Majiayou × Tuyou No. 2 （T2） and T4 treatments were significantly higher than those in natural pollination （control）， while there was no significant difference between Majiayou × Tuyou No.3 （T3）， Majiayou × HB pummelo （HB）， and JW treatments and control. In terms of naringin content， HB treatment significantly reduced the naringin content in the fruit， being only 4.05 mg·g^-1， and there was no significant difference between other treatments and control. The composition and proportion of volatile substances in fruits of different hybrid pollination combinations were as follows： the volatile substances in the juice cells of naturally pollinated Majiayou were mainly sesquiterpenoids， accounting for 44%; next were monoterpenoids， accounting for 24%; Aromatic hydrocarbons accounted for 13%; Other volatile substances （aldehydes， acids， esters and aldehydes） accounted for a total of 20%. Compared to control， there were significant differences in the proportion of main volatile substances of different hybrid pollination combinations， specifically manifested as an increase in the proportion of sesquiterpenoids and a decrease in the proportion of monoterpenes. The proportion of sesquiterpenoids of T1 increased to 60%， which was 16% higher than that of control; Monoterpenoids only accounted for 4%， a decrease of 20% compared to control. Except for T3， the proportion of volatile substances of the hybrid combinations was significantly different， while the proportion of various substances of other four male parents （T2， T4， JW and HB） was similar to that of T1. With T3 combination， the proportion of sesquiterpenoids and monoterpenes decreased to 34% and 9%， respectively， compared to control; Aromatic hydrocarbon substances increased to 16%. The proportion of other volatile substances increased to a certain extent， with aldehydes， acids， esters and aldehydes increasing by 11%， 5%， 5% and 1%， respectively. Analyzing the specific main volatile substances， T3 treatment with the highest content of gemacrene D. significantly reduced the content of gemacrene D in fruits， being only 11.71 μg·g^-1compared to control， the decrease was 64.1%， and there was no significant difference in the fruits of the other five hybrid pollination combinations. The correlation between different indexes was analyzed. The quality traits of different hybrid pollination combinations were different， and the coefficient of variation ranged from 6.35% to 114.45%. Correlation analysis results showed there were extremely significant or significant correlations among them. The correlation analysis results indicated that there was a highly significant or significant correlation between similar indicators like sugar and acid components. In terms of appearance quality， there was a significant negative correlation between the number of seeds and the thickness of the fruit peel. In terms of nutritional color and flavor， ascorbic acid was significantly and positively correlated with fructose， glucose and malic acid， while naringin was significantly and positively correlated with ascorbic acid. The correlation results reflected consistency and also reflected differences in some indicators like fruit appearance and internal quality due to different parental choices. Principal component analysis was conducted on 18 standardized trait indicators， and a total of 5 principal components were extracted from the 18 quality indicators. The cumulative contribution rate of these 5 principal components reached 85.001%， indicating that the first 5 principal components had already covered most of the fruit quality trait information. The contribution rate of the first principal component was 30.416%， including soluble sugar， organic acid and sweetness value components： fructose （0.930）， sucrose （0.832）， glucose （0.938）， citric acid （0.753）， malic acid （0.722） and quinic acid （0.674） and those indicators had higher positive eigenvalues in PC1， indicating that as the contribution rate of the first principal component increased， the contents of sugar and acid related indicators increased. Finally we ranked the scores of the 5 top principal components based on their variance contribution rates. Among them， JW had the highest comprehensive quality score of 1.39， T1 had a comprehensive quality score of 1.18， ranking second. The hybrid pollination treatments T3， T4， T2 and HB ranked 3-6 in sequence， and control ranked last， in which the comprehensive quality of the fruit was the worst. 【Conclusion】 The principal component factor score and ranking indicated that Cocktail grapefruit was the best male pollinator for Majiayou， followed by local resource Tuyou No. 1.

Key words： Citrus; Majiayou; Cross pollination; Principal component analysis; Quality improvement

雜交授粉是目前植物生產中解決部分品種自花不結實或坐果率低問題、改善現有品種性狀、提質增產的有效栽培措施^[1]。蕓香科柑橘屬中柚類品種多數自交不親和，同時部分柚品種因缺乏單性結實能力導致坐果率較低^[2]。標準化建園的單一無性系馬家柚成年結果園中果實全部無籽，而混栽其他柚類品種或本地實生土柚的馬家柚園區中果實則部分有籽。雖然無籽果實因食用便利廣受消費者青睞，但研究發現無籽馬家柚普遍存在果皮偏厚、果實粒化和裂瓣率較高以及果實風味不足等一系列不利于馬家柚產業健康發展的問題^[3-6]。雜交授粉可有效提升果實品質，受異源花粉影響，馬家柚經雜交授粉后在單果質量、果皮厚度、固酸比和抗壞血酸含量等綜合品質方面相較于無籽果實均有一定程度的改善，同時坐果率也得到了顯著提升^[7]。這種因外源花粉進入母本而影響雜交果實及種子的現象被稱為花粉直感^[8-10]，即父本可直接決定后代果實品質優劣^[11]。在實際生產中，種植人員往往通過栽種授粉樹或人工輔助方式使單一無性系的無籽馬家柚產生一定數量的種子，進而實現果實產量和品質的提升。

前人陸續開展了針對不同雜交組合的馬家柚果實品質差異研究。其中，以枳殼為父本時馬家柚坐果率僅為2.0%，同時果肉中的可溶性固形物含量也顯著低于自然傳粉馬家柚；以沙田柚為父本時馬家柚縱橫徑增大、果肉質量和種子數均顯著增加；江壩柚授粉顯著提升了馬家柚的可滴定酸、可溶性固形物、抗壞血酸含量等內在品質，有效改善了果實風味^[12]。但目前關于馬家柚適宜授粉材料的篩選與研究較少，在父本選擇上也多為盲目性與隨機性，授粉材料大都選自目前主栽柑橘品種，未充分發掘馬家柚原產地周邊的柚類資源。這不僅不利于當地柚資源的收集與保存，還可能導致地方優良種質資源的流失。此外，目前主栽柑橘品種對于柚品種特征次生代謝物的改良與提升仍十分有限。因此，針對性地改良馬家柚果實關鍵次生代謝物質（番茄紅素、柚皮苷和香氣成分等），提升風味和營養品質并充分利用地方性柚類資源，對探究馬家柚不同雜交授粉組合是極具現實意義的。

主成分分析法（PCA）被廣泛用于園藝植物品質分析評價，基于數據降維方法，PCA可使繁多的原始變量濃縮至幾個綜合變量，這些主要變量涵蓋了原始變量中的大部分信息，最后通過計算主成分得分，對客觀性狀指標進行科學評價與歸納。王思威等^[13]利用相關性分析和主成分分析的方法對28份白糖罌荔枝樣品的共20個品質指標進行綜合評價，得到了4個貢獻率高的主成分，表明了可滴定酸含量、抗壞血酸含量和甜度等指標是評價白糖罌荔枝果實品質的重要因子，分析結果可為荔枝育種和果品評級提供參考。王小龍等^[14]對父本美樂和抗寒性母本華葡1號的12株雜交后代株系的百粒質量及糖酸、總酚、黃烷醇和總黃酮含量等15項綜合品質指標進行主成分分析，以篩選高豐產性和抗寒性的釀酒葡萄雜交株系。15個品質指標共劃分為4個主成分，累積貢獻率可達84.59%，分別反映了雜交株系的籽酚類、皮酚類物質含量以及果實大小和可溶性固形物含量指標，綜合得分表明株系XC8綜合表現最佳，適宜在東北及西北地區進行推廣。

筆者以4個廣豐地區本地土柚、HB柚和雞尾葡萄柚為父本與馬家柚進行雜交授粉試驗，測定雜交授粉馬家柚特征次生代謝物質含量，并結合相關性分析和主成分分析的方法綜合評價雜交果實品質，旨在篩選適宜馬家柚的授粉父本，同時挖掘廣豐周邊地區具有利用潛力的柚類資源，提升果實綜合品質，為消費者提供更優質的果品。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

試驗選取江西省上饒市廣豐縣湖豐鎮沁園山莊園區中樹勢一致且無明顯病蟲害的9年生馬家柚成年結果樹作為母本樹，株行距為4 m×5 m。父本分別位于母本樹周邊地區（湖豐鎮回樹村、大南鎮三排村等）的4株樹勢強旺的本地土柚，均為自然實生樹，平均樹高6 m，部分風味和果形較優，依次命名為土柚1號、土柚2號、土柚3號和土柚4號（處理編號為T1、T2、T3、T4），以及華中農業大學柑橘種質資源圃中的HB柚（處理編號為HB）與雞尾葡萄柚（處理編號為JW），對照組（Control）為自然傳粉馬家柚。單株為1個生物學重復，3次重復。

1.2 試驗方法

1.2.1? ? 花粉的收集與制備? ? 于2020年4月20日采集父本單株上尚未完全開放的花朵，分別收集裝入自封袋內帶回實驗室。剝離花瓣并只留下花藥置于干凈濾紙上，放入26～28 ℃烘箱內干燥約48 h，待花藥完全干燥后分別裝入2 mL離心管中，于-20 ℃冰箱中保存備用。

1.2.2? ? 雜交授粉? ? 于馬家柚盛花期（5月1日）進行雜交授粉試驗。選擇樹冠中下部外圍的健壯結果枝，疏除枝上已經開放、未成熟的花以及畸形花。用鑷子小心將花瓣及花藥剝離，只留下柱頭，再用小號毛筆蘸取離心管內的干燥花粉點在柱頭上，套袋并于授粉枝末端掛牌。

1.2.3? ? 坐果率和果實品質測定? ? 授粉時記錄各雜交組合點授花朵數，并于完成授粉后的3～5 d內摘袋。于第2次生理落果期后統計坐果數，計算不同雜交授粉組合的馬家柚坐果率。

各處理于每單株樹的中下部的不同方位隨機選取3個大小均一的成熟果實，每個處理共采集9個果實進行后續品質指標測定^[15]。

1.2.4? ? 番茄紅素及柚皮苷含量測定? ? 參考姜啟航^[16]的方法提取番茄紅素。流動相的配制：A相，乙腈∶甲醇＝3∶1（每1000 mL加入三乙胺500 μL），含0.01% 2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚（BHT）；B相，100%甲基叔丁基醚（MTBE）（含0.01% BHT），超聲脫氣30 min。色譜檢測系統：Waters 1525，2996二級陣列檢測器，717自動進樣器，YMC C30類胡蘿卜素專用色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流速1 mL·min^-1，進樣量20 μL，柱溫箱30 ℃。所用試劑均為色譜級。

參考丁帆^[17]的方法提取柚皮苷。流動相的配制：A相，0.3%甲酸（超純水配制）；B相，甲醇，超聲脫氣20～30 min。色譜柱：C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm），流速1 mL·min^-1，進樣量20 μL，柱溫箱溫度35 ℃。柚皮苷標準品購自上海源葉生物科技有限公司，所用試劑均為色譜級。

1.2.5? ? 揮發性物質含量測定? ? 參考劉翠華^[18]的方法提取和檢測揮發性物質含量，并做略微調整。取液氮凍存的馬家柚汁胞組織研磨后加入500 μL ddH₂O和含有1 μg·mL^-1壬酸甲酯（純度≥99.8%，Sigma公司，美國）的MTBE（HPLC級，Fisher美國）渦旋混勻，置于超聲波清洗儀（SB-5200D，寧波新芝）中低溫萃取40 min，10 000 r·min^-1離心收集上層有機相，過0.22 μm濾膜后注射至帶有內插管的棕色進樣瓶內，待上機檢測。色譜柱為TRACE TR-5 MS柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm，Thermo Scientific，Bellefonte，PA，USA）。載氣為高純氦氣（99. 999%），分流比30∶1，恒流模式，流速為1 mL·min^-1。進樣口、離子源和傳輸線的溫度分別為250 ℃、260 ℃和280 ℃。

GC的升溫程序如下：40 ℃保持3 min，然后以2 ℃·min^-1的速度升溫至160 ℃并保留l min，然后以5 ℃·min^-1的速度升溫至200 ℃并保留1 min，最后以8 ℃·min^-1的速度升溫至240 ℃并保留3 min。MS的條件如下：EI（電子轟擊）離子源，電子轟擊能量70 eV，正離子掃描模式，質量掃描范圍45～400 m·z^-1，3 min后開始采集質譜數據^[19]。

1.3 數據統計與分析

試驗數據采用Excel 2016軟件進行統計與作圖，采用SPSS 26軟件進行差異顯著性分析、相關性分析和主成分分析。

參考Zhang等^[20]的方法計算甜度值，并略有調整，果糖、蔗糖、葡萄糖甜度分別為175、100和75，本研究中山梨醇不計算在內。甜度值/（g·L^-1）=（蔗糖含量×100+果糖含量×175+葡萄糖含量×75）/1000。

2 結果與分析

2.1 不同授粉組合馬家柚坐果率分析

由表1可以看出，除雞尾葡萄柚處理外，其余雜交授粉組合的坐果率均高于48%，與雞尾葡萄柚處理呈顯著差異，其中T4處理的坐果率最高，為55.3%，其次是T2處理，而雞尾葡萄柚處理的坐果率僅為22.9%。

2.2 6個雜交授粉組合對馬家柚果實番茄紅素和柚皮苷含量的影響

馬家柚是典型的紅肉柚類，果肉中富含的番茄紅素和柚皮苷是評價馬家柚營養價值的重要組分，其中柚皮苷味苦，對果實風味構成起著至關重要的作用^[21]。如圖1所示，不同雜交授粉組合果實番茄紅素含量與自然傳粉相比存在差異，其中，T1、T2、T4處理番茄紅素含量均顯著高于自然傳粉，而T3、HB柚和雞尾葡萄柚處理與自然傳粉均無顯著差異。在柚皮苷含量方面，HB柚處理顯著降低了柚皮苷含量（僅為4.05 mg·g^-1），其他處理與自然傳粉均無顯著差異。

2.3 6個雜交授粉組合對馬家柚果實主要揮發性物質種類及含量的影響

揮發性物質組成了果實特殊的風味，不同雜交授粉組合果實揮發性物質組成及占比情況如圖2所示，自然傳粉馬家柚果實汁胞中的揮發性物質以倍半萜類物質為主，占比44%；其次為單萜類物質，占比24%；芳香烴類物質占比13%；其他揮發性物質（醛、酸、酯、醛）共占比19%。相較于自然傳粉馬家柚，不同雜交授粉組合果實汁胞中的主要揮發性物質占比均產生了明顯差異，具體表現為倍半萜類物質占比提升和單萜類物質占比降低。以馬家柚×土柚1號為例，授粉后果實汁胞中倍半萜類物質占比提升至60%，與自然傳粉相比提升了16個百分點；單萜類物質僅占比4%，相較于自然傳粉降低了20個百分點。除馬家柚×土柚3號雜交果實揮發性物質占比與其余雜交組合存在明顯不同外，其他4個父本（T2、T4、雞尾葡萄柚、HB柚）與馬家柚雜交果實汁胞中各物質組成占比與馬家柚×土柚1號中基本一致。以土柚3號為父本授粉后汁胞中倍半萜和單萜類物質占比相較于自然傳粉果實分別降至34%和9%；芳香烴類物質增加至16%；其他揮發物質占比均有一定提升，醛、酸、酯、醛占比分別增加了11%、5%、5%和1%。

對揮發性物質中占比較高的倍半萜、單萜、芳香烴和醛類物質進行含量測定分析，結果如圖3所示，主要揮發性物質中以倍半萜類物質（吉馬烯）含量最高。土柚3號為父本授粉的果實吉馬烯含量顯著降低，僅為11.71 μg·g^-1，相較于自然傳粉顯著降低64.1%，除土柚4號處理外，其他4個雜交授粉組合的果實吉馬烯含量較自然傳粉果實無顯著差異。自然傳粉果實汁胞中的主要單萜類物質D-檸檬烯含量為18.12 μg·g^-1，與對照相比，6個雜交授粉組合的D-檸檬烯含量均顯著降低。在芳香烴類物質方面，處理果實汁胞中乙苯含量較自然傳粉果實無顯著差異，而對二甲苯含量則均表現為顯著降低。在醛類物質方面，對照和處理汁胞中的3-己烯醛含量無顯著差異，以土柚2號和HB柚為父本時較自然傳粉顯著降低了汁胞中的正己醛含量。

2.4 6個雜交授粉組合馬家柚果實品質變異系數分析

變異系數直接反映了個體受不同父本處理后的品質性狀變異程度。6個雜交授粉組合的果實共18個品質性狀^[21]包含了外觀（單果質量、果皮厚度和種子數）、甜酸（可溶性固形物、可滴定酸、固酸比、蔗糖、檸檬酸含量和甜度值等）、色澤營養（番茄紅素、抗壞血酸、柚皮苷含量）和香氣（D-檸檬烯、吉馬烯含量）。18個性狀指標間變異程度明顯，變異系數介于6.35%～114.45%之間，其中D-檸檬烯變異系數最大，為114.45%；其次為種子數，變異系數為57.21%。以上數據表明雜交授粉后果實揮發性物質和種子數受不同父本影響程度較大。單果質量、果皮厚度、抗壞血酸和可溶性固形物含量指標的變異系數為18個性狀指標的后四名，均低于10%，表明上述4個性狀指標受雜交授粉影響較小（表2）。

2.5 相關性分析

18個品質性狀指標標準化后，建立完整的評價體系。由表3可知，不同指標間存在顯著相關性：外觀品質中，種子數與果皮厚度呈顯著負相關。甜酸方面，可滴定酸含量與固酸比呈極顯著負相關；葡萄糖、果糖與蔗糖含量三者間呈極顯著正相關；檸檬酸與可溶性固形物和可滴定酸含量呈顯著正相關；蘋果酸與果糖含量呈顯著正相關；奎尼酸與蔗糖和葡萄糖含量呈極顯著正相關，與果糖含量呈顯著正相關；甜度值與蔗糖、果糖、葡萄糖和奎尼酸含量呈極顯著正相關。營養色澤及風味方面，抗壞血酸與果糖和蘋果酸含量呈顯著正相關，與葡萄糖含量呈極顯著正相關；柚皮苷與抗壞血酸含量呈顯著正相關；主要揮發性物質D-檸檬烯含量與種子數和3種可溶性糖含量及甜度值呈顯著負相關。由此可以發現，不同雜交授粉組合品質指標間存在諸多相關性，并非完全獨立。此外，表3中顯示種子數與果皮厚度呈顯著負相關；固酸比又分別與果皮厚度呈顯著負相關，與種子數呈顯著正相關，這表明外觀品質與內在品質間也存在著一定的關聯性。

2.6 主成分分析

對18個標準化的性狀指標進行主成分分析，結果如表4所示。以特征值＞1為標準，選取各因子載荷絕對值＞0.650作為解釋變量，18個品質指標共提取出5個主成分，這5個主成分累積貢獻率可達85.001%，表明前5個主成分已經涵蓋了大部分的果實品質性狀信息，可代表原本的18個品質指標進行評價。

第1主成分貢獻率為30.416%，其中果糖含量（0.930）、蔗糖含量（0.832）、葡萄糖含量（0.938）、檸檬酸含量（0.753）、蘋果酸含量（0.722）、奎尼酸含量（0.674）為PC1中正向特征值較高的指標，主要是可溶性糖、有機酸和甜度值各組分，表明當第1主成分貢獻率升高時，糖酸相關指標含量隨之增加。馬家柚為高糖高酸型柚類，較高的單糖含量構成了其主要的糖酸風味，第1主成分可概括為果實糖酸風味指標。第2主成分貢獻率為20.122%，主要正向特征指標為固酸比（0.792）、可溶性固形物含量（0.661）、抗壞血酸含量（0.735），負向指標為可滴定酸含量（-0.654）和D-檸檬烯含量（-0.897）。PC2主要反映了雜交授粉果實甜酸及營養品質，該指標是表征馬家柚綜合品質的關鍵指標。第3主成分貢獻率為17.575%，主要涵蓋了單果質量（-0.669）、果皮厚度（0.737）、種子數（-0.815）等果實外觀品質以及番茄紅素含量（0.767）在內的色澤品質指標，可概括為果實外觀及色澤指標。第4主成分貢獻率為8.888%，吉馬烯含量（-0.877）有較大的負向特征值，對PC4產生負向影響，可概括為果實香氣指標。第5主成分貢獻率為8.000%，柚皮苷含量（-0.936）對PC5產生主要的負向影響，可概括為苦味指標。

2.7 6個雜交授粉組合果實品質綜合得分及排序

以各主成分方差貢獻率為權重，對前5個主成分進行得分以及相應權重線性加權求和并代入計算公式F=W_i×Y_i/W_i總，得到果實品質綜合得分F=（0.304 16 PC1+0.201 22 PC2+0.175 75 PC3+0.088 88 PC4+0.080 00 PC5）/0.850 01。由表5可知，依據自然傳粉果實及6個雜交授粉組合果實品質各主成分的得分系數，綜合前5個主成分得分后計算出各處理的綜合得分F值。其中，馬家柚×雞尾葡萄柚果實綜合品質得分最高為1.39，該雜交組合分別在第1主成分（糖酸風味指標）、第3主成分（果實外觀及色澤指標）和第5主成分（果實苦味指標）中得分最高。馬家柚×土柚1號綜合品質得分為1.18，排名第二，該雜交組合在第2主成分——甜酸及營養指標中得分最高。雜交授粉處理T3、T4、T2、HB依次排名3～6名，自然傳粉排名最后，果實綜合品質最差。

雜交授粉組合馬家柚×雞尾葡萄柚的果實綜合品質排名最高，其次為馬家柚×土柚1號。作為對照的自然傳粉果實品質評分最低，符合預期結果。上述結果證實了利用主成分分析方法能真實評估不同雜交授粉組合對馬家柚果實品質的影響，同時也表明了雜交授粉可有效改善馬家柚果實的綜合品質。

3 討 論

主成分分析可將原始數據個數較多、數據間交叉冗余且彼此間具有較高相關性的果實品質性狀指標降維成為幾個涵蓋絕大部分數據信息的成分^[13]，筆者通過PCA將18個品質性狀指標轉化為5個互相獨立的綜合指標，其累積貢獻率達到85.001%，已涵蓋大部分的品質信息。5個主成分分別反映了雜交授粉馬家柚的糖酸、外觀、風味營養、香氣及苦味品質，其中，前3個主成分將生產中重點關注的關鍵性品質指標集中體現。例如第1主成分為果實的可溶性糖含量、有機酸含量和甜度值指標，符合馬家柚典型的“高糖高酸”品種特性。固酸比作為第2主成分的主要正向特征指標，雞尾葡萄柚處理的因子得分為-0.96（表5），以雞尾葡萄柚為父本相較于其他雜交處理組合均顯著提高了馬家柚果實的檸檬酸含量，但授粉后可溶性糖各組分含量與T1處理差異不顯著，該因素直接導致雞尾葡萄柚處理果實固酸比提升不顯著^[22]。此外，馬家柚所特有的高番茄紅素與高抗壞血酸含量以及特殊的香氣被集中反映在第2和第3主成分內。筆者利用主成分分析有效避免了因人為因素導致的品質性狀概括不全、造成主觀判斷不客觀等情況，分析所得出的馬家柚×雞尾葡萄柚和馬家柚×土柚1號2個雜交組合可有效滿足馬家柚品質差異化育種需求，為育種者提供更多有針對性的品質改良方法，有效優化了品種雜交配置和選擇的方案。

雜交授粉后的果實坐果率因授粉親本間親緣關系的遠近產生明顯差異。例如，以臍紅獼猴桃為母本、中華獼猴桃的不同品種（HX-2和JX-X與母本間親緣關系間存在差異）為父本授粉后坐果率相差28%；以不同品種的軟棗獼猴桃（R-X）、黑蕊獼猴桃（HR-X）和滿天星獼猴桃（M-X）雄株授粉后的坐果率同樣差異較大。即父母本間親緣關系較近，授粉后坐果率高；親緣關系較遠，坐果率隨之降低^[23]。這一結論于本研究中得到了很好的驗證，以雞尾葡萄柚為父本時的馬家柚坐果率為22.9%；本地土柚和HB柚為父本時，坐果率則普遍介于48%～56%之間。其中，馬家柚與廣豐及周邊地區部分土柚親緣關系極近，與HB柚（相似系數0.827）親緣關系較近，而雞尾葡萄柚（相似系數0.617）與馬家柚親緣關系則較遠^[24]。

不同授粉組合的馬家柚種子數同樣受親本遺傳關系影響。以馬家柚近緣系的土柚與HB柚為父本授粉后果實種子數200粒左右；而遠緣系的雞尾葡萄柚授粉后果實種子數僅為60余粒，該結果與楊海健^[7]探究馬家柚不同雜交授粉組合對后代影響的研究結果相一致。通常因無籽馬家柚增加至百余粒種子后會降低食用便利性，易受到消費者詬病。但筆者研究發現，雜交授粉后馬家柚可食率與自然傳粉果實相比并無明顯差異。與柑、橘類種子散亂分布于果實內部不同，柚類種子均緊密分布于中心柱周圍，更易于直接剝離。此外，種子數增加的同時顯著提升了單果質量并降低了果皮厚度，有效彌補了馬家柚的品質缺陷。在實際生產中，馬家柚果實內的種子會因與授粉樹距離的遠近而表現出數量和形態的差異，即兩者間距離越遠，種子數相應減少并出現癟籽等現象。因此，對于馬家柚授粉樹的不同配置方式如何影響雜交果實種子還有待進一步深入研究。同時后續還需要進一步擴大父本株系選擇范圍，期望找到產生較少種子數，并能有效提升馬家柚綜合品質的最優雜交組合。

相關研究表明，雜交授粉后的果實品質表現出明顯的花粉直感現象，即雜交果實品質性狀普遍介于父母本之間^[25]。例如，番茄紅素、柚皮苷和揮發性物質作為構成馬家柚色澤和風味品質的重要次生代謝物^[16]，其在果實中的含量直接決定了馬家柚營養成分含量的高低。本研究中多數本地土柚授粉后的馬家柚果肉中的番茄紅素含量顯著高于自然傳粉馬家柚，而以雞尾葡萄柚為父本時則無顯著變化。筆者推測這可能是由于與馬家柚親緣關系較近的土柚在長期的自然繁育過程中保持了紅肉性狀，即雜交父本果肉中的番茄紅素含量始終維持在較高水平；而作為非紅肉類型的雞尾葡萄柚，則會使授粉后的馬家柚番茄紅素含量維持與母本相同水平。此外，作為柚類主要的苦味來源，柚皮苷含量過高會直接導致柚口感苦澀而無法食用。本研究的6個雜交授粉組合中也僅有馬家柚×HB柚的果實柚皮苷含量顯著低于自然傳粉。但因消費者日益多樣化的果品需求與柚皮苷獨有的抗炎保健功效，柚皮苷含量的減少在一定程度上也導致了馬家柚營養品質的降低^[26]。因此，后續還可進一步通過感官風味評價衡量馬家柚苦味閾值，用以輔助馬家柚品質改良。綜合本研究通過主成分分析篩選出的2個品質性狀互有區分的雜交授粉組合，可供育種人員針對于不斷變化的市場需求與品質親好性有目的性地實現馬家柚授粉組合的差異化配置。

4 結 論

通過對6個雜交授粉組合馬家柚果實色澤和風味關鍵次生代謝物進行測定，結合品質性狀進行相關性分析和主成分分析，對馬家柚雜交果實品質進行綜合評價。通過主成分分析提取到5個主成分，累積貢獻率可達85.001%，分別反映了果實糖酸、色澤、營養、外觀、香氣及苦味品質指標。雜交授粉組合馬家柚×雞尾葡萄柚的果實綜合品質排名最高，其次為馬家柚×土柚1號。研究結果為馬家柚雜交授粉后果實內在營養物質代謝規律提供依據，也為生產中馬家柚雜交親本的選擇提供參考。

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收稿日期：2023-11-09 接受日期：2023-12-17

基金項目：國家現代農業（柑橘）產業技術體系專項（CARS-26）；撫州市揭榜掛帥項目 （XMBH00091）

作者簡介：徐宸宇，男，在讀博士研究生，研究方向為柑橘常規雜交育種與品質調控。E-mail：798636860@qq.com

*通信作者 Author for correspondence. Tel：027-87284008，E-mail：yihualin@mail.hzau.edu.cn