冠狀動(dòng)脈慢血流患者血清Salusin-α、Salusin-β表達(dá)水平及預(yù)測(cè)價(jià)值

王宇,趙平,賈正培,陳華

冠狀動(dòng)脈慢血流 (coronary slow flow, CSF)是冠狀動(dòng)脈未見明顯狹窄,但血流灌注緩慢,血流灌注不足以滿足心肌氧需求的非阻塞性疾病,表現(xiàn)為胸痛、焦慮等,可發(fā)生急性冠脈綜合征及猝死等[1-2]。尋找能夠早期評(píng)估CSF的血清標(biāo)志物,對(duì)臨床診治具有重要意義。Salusin-α是由人類扭轉(zhuǎn)應(yīng)力障礙基因TOR2A編碼產(chǎn)生的選擇性剪切產(chǎn)物,具有降低血壓、減慢心率及調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用[3]。研究表明,Salusin-α能夠改善頸動(dòng)脈血管內(nèi)皮功能障礙,抑制動(dòng)脈粥樣硬化的形成,是潛在的CSF的血清標(biāo)志物[4]。Salusin-β與Salusin-α具有相同的前體,由血管內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)等產(chǎn)生,能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞炎性反應(yīng)、加重氧化應(yīng)激、增加炎性細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附能力,促進(jìn)冠心病等心血管疾病的發(fā)生[5-6]。現(xiàn)分析CSF患者血清Salusin-α、 Salusin-β表達(dá)水平及兩者對(duì)CSF的預(yù)測(cè)價(jià)值,報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019年6月—2022年6月內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院心內(nèi)科行冠狀動(dòng)脈造影(coronary angiography,CAG)檢查的患者108例。根據(jù)心肌梗死溶栓試驗(yàn)(thrombolysis in myocardial infarction, TIMI)血流分級(jí)[7]分為CSF組66例(至少1支血管TIMI血流≤2級(jí)),非CSF組42例(TIMI 3級(jí))。CSF組吸煙史比例、血尿酸高于非CSF組,血白蛋白低于非CSF組(P均<0.05),其他資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05),見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)通過(guò)(20190413),患者或家屬知情同意并簽署知情同意書。

表1 非CSF組和CSF組患者臨床資料比較

1.2 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn):①年齡>18～80歲;②就診前患者有反復(fù)胸悶、胸痛等心肌缺血癥狀;

③均接受CAG檢查證實(shí)冠狀動(dòng)脈無(wú)明顯狹窄或狹窄程度≤40%;④能夠配合相關(guān)檢查和治療。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):①冠狀動(dòng)脈栓子、冠狀動(dòng)脈痙攣、冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張及溶栓治療術(shù)后或冠狀動(dòng)脈支架植入術(shù)后;②合并心臟瓣膜病、先天性心臟病、心肌病、心力衰竭;③存在嚴(yán)重的肝腎功能不全、感染、自身免疫性疾病及惡性腫瘤;④存在持續(xù)性心房顫動(dòng)、植入永久性起搏器患者;⑤對(duì)造影劑過(guò)敏或應(yīng)用外源性血管收縮藥物。

1.3 觀測(cè)指標(biāo)與方法

1.3.1 臨床資料收集:性別、年齡、身高、體質(zhì)量指數(shù),既往有無(wú)吸煙史、高血壓史、糖尿病史,血壓等;實(shí)驗(yàn)室檢查:血白蛋白、血尿酸、血尿素氮、血肌酐、三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)。

1.3.2 血清Salusin-α、Salusin-β檢測(cè):留取患者住院后次日晨起空腹8 h以上的肘靜脈血5 ml,室溫靜置1 h后,離心留取血清進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。以酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清Salusin-α、Salusin-β水平。Salusin-α ELISA試劑盒購(gòu)自上海一研生物科技公司,貨號(hào)EY-01H1494。Salusin-β ELISA試劑盒購(gòu)自上海瑞番生物科技公司,貨號(hào)RF1041。操作過(guò)程按照說(shuō)明書要求進(jìn)行。

1.3.3 CAG檢查及血流速度評(píng)估:CAG采用標(biāo)準(zhǔn)Judkins技術(shù),由2位心內(nèi)科醫(yī)生利用大C臂血管數(shù)字減影造影機(jī)(購(gòu)自荷蘭飛利浦公司,型號(hào)Philips Integris allura 12 monoplane)進(jìn)行操作:經(jīng)橈動(dòng)脈或股動(dòng)脈途徑,以碘化醇為造影劑,15幀/s速度繪制圖像;應(yīng)用TIMI血流幀數(shù)評(píng)估冠狀動(dòng)脈血流速度,記錄造影劑從充盈近端靶冠狀動(dòng)脈的全部直徑到冠狀動(dòng)脈末梢特定解剖位置的幀數(shù),左前降支(LAD)、左回旋支(LCX)、右冠狀動(dòng)脈(RCA)的特定解剖位置分別為心尖分叉處、分支的最遠(yuǎn)分叉處及左心室后支的第一個(gè)分支處。計(jì)算3支靶冠狀動(dòng)脈的平均TIMI幀數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 26.0軟件處理數(shù)據(jù)。正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)或率(%)表示,組間比較采用卡方檢驗(yàn);Pearson相關(guān)分析血清Salusin-α、Salusin-β與臨床參數(shù)的相關(guān)性;多因素Logistic回歸分析CSF發(fā)生的影響因素;受試者工作特征曲線(ROC)分析血清Salusin-α、Salusin-β及聯(lián)合對(duì)CSF的預(yù)測(cè)價(jià)值。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組血清Salusin-α、Salusin-β比較 CSF組血清Salusin-α水平低于非CSF組,而血清Salusin-β水平高于非CSF組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表2。

表2 非CSF組和CSF組患者血清Salusin-α、Salusin-β比較

2.2 2組CAG及血流速度比較 CSF組LAD幀數(shù)、LCX幀數(shù)、RCA幀數(shù)、平均幀數(shù)均明顯高于非CSF組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01),見表3。

表3 非CSF組和CSF組患者CAG及血流速度比較

2.3 血清Salusin-α、Salusin-β與臨床參數(shù)的相關(guān)性 Pearson相關(guān)分析顯示,血清Salusin-α與血尿酸、LAD幀數(shù)、LCX幀數(shù)、RCA幀數(shù)、平均幀數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān),與血白蛋白呈正相關(guān)(P均<0.01);血清Salusin-β與血尿酸、LAD幀數(shù)、LCX幀數(shù)、RCA幀數(shù)、平均幀數(shù)呈顯著正相關(guān),與血白蛋白呈顯著負(fù)相關(guān)(P均<0.01),見表4。

表4 CSF組患者血清Salusin-α、Salusin-β與臨床參數(shù)的相關(guān)性

2.4 影響CSF發(fā)生的多因素Logistic回歸分析 以是否發(fā)生CSF為因變量(是=1,否=0),以上述結(jié)果中P<0.05項(xiàng)目為自變量,進(jìn)行多因素Logistic回歸分析,結(jié)果顯示吸煙史、Salusin-β高是影響CSF發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,血白蛋白高、Salusin-α高是獨(dú)立保護(hù)因素(P<0.01),見表5。

表5 影響CSF發(fā)生的多因素Logistic回歸分析

2.5 血清Salusin-α、Salusin-β及二者聯(lián)合預(yù)測(cè)對(duì)CSF的價(jià)值 繪制血清Salusin-α、Salusin-β及二者聯(lián)合預(yù)測(cè)CSF的ROC曲線,并計(jì)算曲線下面積(AUC),結(jié)果顯示:血清Salusin-α、Salusin-β及二者聯(lián)合預(yù)測(cè)CSF的AUC分別為0.840、0.782、0.896,二者聯(lián)合優(yōu)于各自單獨(dú)預(yù)測(cè)效能(Z=4.561、4.103,P=0.005、<0.001),見表6、圖1。

表6 血清Salusin-α、Salusin-β及二者聯(lián)合預(yù)測(cè)CSF的價(jià)值

3 討 論

CSF可引起室性心律失常、急性心肌梗死及心源性猝死,其CAG特征是無(wú)冠狀動(dòng)脈嚴(yán)重狹窄的情況下,冠狀動(dòng)脈內(nèi)造影劑停滯、遠(yuǎn)端灌注延遲。CSF的發(fā)病與微血管和內(nèi)皮功能障礙、炎性反應(yīng)、彌漫性動(dòng)脈粥樣硬化及血小板聚集性增加等因素有關(guān)[8]。TIMI分級(jí)是臨床行CAG中廣泛使用的定性指標(biāo),但可能受到操作者主觀因素及血管位置不同等因素的影響,臨床上尚存在一定的不足[9]。深入研究CSF發(fā)病機(jī)制及影響CSF發(fā)生的危險(xiǎn)因素,有利于CSF的篩查及臨床早期干預(yù)。

Salusins是一類新的生物活性肽,包括28個(gè)氨基酸的Salusin-α和20個(gè)氨基酸的Salusin-β 2種形式,是由人類扭轉(zhuǎn)應(yīng)力障礙基因TOR2A表達(dá)后形成的選擇性剪接產(chǎn)物,廣泛表達(dá)于人體內(nèi)分泌腺、骨髓及腦組織中,以自分泌或旁分泌的方式,廣泛參與細(xì)胞有絲分裂、細(xì)胞內(nèi)鈣信號(hào)傳導(dǎo),具有促進(jìn)下丘腦分泌血管加壓素等生物學(xué)效應(yīng)[10]。研究表明,Salusin-α參與脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié),抑制巨噬細(xì)胞中膽固醇酯的積累,在動(dòng)脈粥樣硬化和心血管疾病中發(fā)揮重要保護(hù)作用[11]。本研究中,CSF患者血清Salusin-α降低,并與冠狀動(dòng)脈血流速度有關(guān),提示Salusin-α的降低參與CSF的發(fā)生發(fā)展。這與既往學(xué)者在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中觀察結(jié)果一致[11],該研究表明,過(guò)表達(dá)Salusin-α能夠抑制冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖,減輕內(nèi)膜增厚程度,同時(shí)能夠升高載脂蛋白C和載脂蛋白B的水平,改善冠狀動(dòng)脈血流灌注情況。分析其機(jī)制,Salusin-α可能通過(guò)減輕CSF患者動(dòng)脈內(nèi)膜厚度及斑塊大小,抑制CSF疾病的發(fā)生發(fā)展。有學(xué)者報(bào)道,Salusin-α能夠抑制巨噬細(xì)胞中酰基輔酶A的轉(zhuǎn)錄表達(dá)及生物活性,抑制巨噬細(xì)胞吞噬低密度脂蛋白,減少泡沫細(xì)胞形成,同時(shí)抑制血管內(nèi)膜細(xì)胞的增殖和泡沫化,降低動(dòng)脈內(nèi)膜厚度[12]。尚有研究表明,Salusin-α能夠通過(guò)抑制AKT/人哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路的磷酸化激活,減少腫瘤壞死因子等促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生,減輕冠狀動(dòng)脈的炎性反應(yīng),抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移,減少動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的面積[13]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),Salusin-α是影響CSF發(fā)生的獨(dú)立保護(hù)因素,表明Salusin-α是新的評(píng)估CSF的血清標(biāo)志物。其原因可能是Salusin-α能夠抑制冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的炎性反應(yīng),減少CSF的發(fā)生。研究表明,Salusin-α能夠抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞核因子κB通路的激活,抑制白介素6、白介素8等促炎細(xì)胞因子的表達(dá)及促炎反應(yīng),當(dāng)Salusin-α水平降低時(shí)冠狀動(dòng)脈炎性反應(yīng)加重,血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及凋亡增加,內(nèi)皮下膠原沉積,形成冠狀動(dòng)脈微循環(huán)栓塞,導(dǎo)致CSF的發(fā)生[14]。

Salusin-β也是具有心血管和神經(jīng)內(nèi)分泌活性的多肽,但功能與Salusin-α相反,其能以旁分泌的方式刺激精氨酸加壓素和催產(chǎn)素的釋放升高血壓,加快心率,促進(jìn)心肌肥厚及心力衰竭的發(fā)生[15]。本研究中,CSF組患者血清Salusin-β升高,與3支冠狀動(dòng)脈血流幀數(shù)及平均幀數(shù)呈正相關(guān),這與Akyüz等[16]學(xué)者觀察結(jié)果一致,該研究發(fā)現(xiàn)血清Salusin-β升高能夠增加心肌梗死患者溶栓后CSF的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),但該研究納入樣本量較小,CSF組患者僅39例,結(jié)果可能存在一定的偏倚。本研究結(jié)果進(jìn)一步提示Salusin-β參與CSF疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。分析其原因,Salusin-β以濃度依賴的方式增加血管平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度,激活增殖相關(guān)信號(hào)通路的傳導(dǎo),誘導(dǎo)G1向S期轉(zhuǎn)變,促進(jìn)平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的增殖,引起CSF的發(fā)生[17]。另外,Salusin-β作為一種肽類激素,能促進(jìn)白介素6、單核細(xì)胞趨化蛋白1及細(xì)胞間黏附分子1等炎性因子的釋放,加重內(nèi)皮細(xì)胞炎性反應(yīng),促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞與單核巨噬細(xì)胞的黏附,導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙及泡沫細(xì)胞形成[18]。本研究中,Salusin-β是影響CSF發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,表明檢測(cè)血清Salusin-β水平有助于評(píng)估CSF的發(fā)生。研究表明,Salusin-β激活可直接在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中酰基CoA膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶-1表達(dá),其能夠促進(jìn)游離膽固醇和長(zhǎng)鏈脂酰CoA轉(zhuǎn)化為膽固醇酯,促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成,加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生[19]。另外,在高密度脂蛋白膽固醇受體缺陷的小鼠中,靜脈輸注Salusin-β能激活冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中核因子κB通路,增加動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的低密度脂蛋白膽固醇水平和脂質(zhì)負(fù)荷,加重動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的嚴(yán)重程度[20]。本研究中,血清Salusin-α、Salusin-β聯(lián)合對(duì)CSF具有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值,敏感度和特異度分別為0.853、0.786,表明血清Salusin-α、Salusin-β聯(lián)合對(duì)CSF具有較高的預(yù)測(cè)效能,有助于臨床早期診治。

血白蛋白是炎性反應(yīng)時(shí)負(fù)性急性期反應(yīng)蛋白,具有抗氧化、抗動(dòng)脈粥樣硬化等多種生物學(xué)作用,在心血管系統(tǒng)中發(fā)揮保護(hù)效應(yīng)。本研究顯示,血白蛋白是影響CSF發(fā)生的獨(dú)立保護(hù)因素。分析其原因,白蛋白能夠清除游離的活性氧自由基和氮自由基,并作為脂肪酸的重要載體,發(fā)揮抗氧化和抗血栓的作用,能夠減輕冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮功能障礙、炎性反應(yīng)及動(dòng)脈粥樣硬化,減少CSF的發(fā)生。本研究中,既往合并吸煙史是影響CSF發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。分析其機(jī)制,煙草煙霧中的尼古丁、一氧化氮及一氧化碳等物質(zhì)能夠引起血管內(nèi)皮氧化應(yīng)激及炎性反應(yīng)損傷,血管內(nèi)皮功能障礙,機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂及血小板功能失調(diào)均會(huì)促進(jìn)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程,導(dǎo)致CSF的發(fā)生[21]。

綜上所述, CSF患者血清Salusin-α降低,Salusin-β升高,血清Salusin-α、Salusin-β與3支冠狀動(dòng)脈血流幀數(shù)及平均幀數(shù)有關(guān),有助于反映CSF病程嚴(yán)重程度。吸煙史、Salusin-β高是影響CSF發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,血白蛋白高、Salusin-α高是影響CSF發(fā)生的獨(dú)立保護(hù)因素。血清Salusin-α、Salusin-β聯(lián)合檢測(cè)對(duì)CSF的發(fā)生具有較高的診斷效能。本研究也存在局限,未能對(duì)治療過(guò)程中血清Salusin-α、Salusin-β的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行監(jiān)測(cè),兩者的動(dòng)態(tài)變化能否有效反映CSF患者冠狀動(dòng)脈血流灌注的變化情況,均有待今后進(jìn)行深入的基礎(chǔ)和臨床研究。

利益沖突：所有作者聲明無(wú)利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明

王宇:設(shè)計(jì)研究方案,實(shí)施研究過(guò)程,論文撰寫;趙平:提出研究思路,論文審核;賈正培:實(shí)施研究過(guò)程,資料搜集整理,論文修改;陳華:進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析