中藥庫拉索蘆薈化學(xué)成分的液質(zhì)定性分析

摘 要：為闡明中藥庫拉索蘆薈（Aloe barbadensis）葉的汁液濃縮干燥物的化學(xué)成分，該研究采用HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSⁿ技術(shù)，結(jié)合對照品對比和文獻(xiàn)檢索，對其進(jìn)行系統(tǒng)的定性分析。以水（A）-乙腈（B）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，流速為1.0 mL·min^-1，質(zhì)譜使用ESI離子源，采用負(fù)離子模式分析液質(zhì)數(shù)據(jù)。結(jié)果表明：（1）首次闡明中藥庫拉索蘆薈中蒽醌類（蘆薈大黃素、大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷）、蒽酮類（蘆薈素A、蘆薈糖苷A）、色酮類（蘆薈新苷D、7-O-甲基蘆薈新苷A、altechromone A、蘆薈苦素、蘆薈新苷G、蘆薈新苷C）、α-吡喃酮類（蘆薈寧A、蘆薈寧B）四類成分的主要化合物的裂解途徑。蒽醌類化合物的裂解途徑以失去CO₂和CO為主，蒽酮類化合物的裂解途徑以己糖苷的裂解和失去CO為主，色酮類化合物的裂解途徑以己糖苷的裂解和酯基的水解為主，α-吡喃酮類的裂解途徑主要包括己糖苷的裂解、CO₂和H₂O的丟失等。（2）共檢測到168種化學(xué)成分，參考相關(guān)文獻(xiàn)、數(shù)據(jù)庫和對照品數(shù)據(jù)共鑒定/指認(rèn)了其中的78種化學(xué)成分，包括3種蒽醌類成分、29種蒽酮類成分、35種色酮類成分、7種α-吡喃酮類成分、4種其他類成分；78種化學(xué)成分中有23種為新發(fā)現(xiàn)的庫拉索蘆薈葉的化學(xué)成分，其中aloinoside D、isoeleutherin、ethylidene-aloenin等14種成分具有抗菌、抗炎或清除自由基等藥理活性。該研究結(jié)果進(jìn)一步豐富了中藥庫拉索蘆薈的化學(xué)成分信息，為蘆薈的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究及質(zhì)量控制奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：蘆薈，HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSⁿ，蒽醌，蒽酮，色酮，化學(xué)成分，裂解途徑

中圖分類號：Q946 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1000-3142（2024）02-0313-14

基金項(xiàng)目：新藥創(chuàng)制國家科技重大專項(xiàng) （2019ZX09201004）。

第一作者：張靜（1998-），碩士研究生，主要從事中藥分析和體內(nèi)代謝研究，（E-mail）2011210080@stu.pku.edu.cn。

^*通信作者：徐風(fēng)，副教授，主要從事中藥質(zhì)量和藥效物質(zhì)研究，（E-mail）xufeng76@hsc.pku.edu.cn。

Qualitative analysis of chemical constituents of Aloe made from Aloe barbadensis by liquid chromatography-mass spectrometry

ZHANG Jing¹， HAO Beiquan¹， LI Yinqing²， PI Guopei²， XU Feng^1*，

LIU Guangxue¹， SHANG Mingying¹， CAI Shaoqing¹

（ 1. Division of Pharmacognosy， School of Pharmaceutical Sciences， Peking University， Beijing 100191， China;

2. Hebei Yuzhilin Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shijiazhuang 050035， China ）

Abstract： To clarify the chemical constituents of the traditional Chinese medicine Aloe made from Aloe barbadensis， i.e.， the concentrated dry matter of the juice of the leaves of A. barbadensis， a systematic qualitative analysis of them was conducted using the technique of HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSⁿ in conjunction with the comparison of reference compounds and literature search. The gradient elution was performed with water （A）-acetonitrile （B） as mobile phase at a flow rate of 1.0 mL·min^-1. The liquid chromatography-mass spectrometry data were acquired under alternate negative ion and positive ion detection mode using an ESI ion source. The structure elucidation of the chemical constituents was mainly based on negative ion mass spectrometry data. The results were as follows： （1） For the first time， the fragmentation pathways of anthraquinones （aloe-emodin， physcion， and emodin-8-O-β-D-glucoside）， anthrones （aloin A， aloinoside A）， chromones （aloeresin D， 7-O-methylaloeresin A， altechromone A， aloesin， aloeresin G， and aloeresin C）， and α-pyranones （aloenin A， aloenin B） in Aloe made from A. barbadensis were clarified. The fragmentation pathway of anthraquinones was dominated by loss of CO₂ and CO， and that of anthrones was dominated by cleavage of hexosides and loss of CO. The fragmentation pathways of chromones was dominated by cleavage of hexosides and hydrolysis of the ester group， and that of α-pyranones was dominated by cleavage of hexosides and loss of CO₂ and H₂O. （2） A total of 168 chemical constituents of Aloe made from A. barbadensis were detected， and 78 of them were identified on the basis of reference compound comparison， literature retrieval， and chemical database （such as SciFinder） searching. The 78 compounds included 3 anthraquinones， 29 anthrones， 35 chromones， 7 α-pyranones and 4 other constituents. Twenty-three of 78 compounds were discovered in the leaves of A. barbadensis for the first time. Fourteen of 23 were newly discovered compounds， including aloinoside D， isoeleutherin， and ethylidene-aloenin， possessed antibacterial， anti-inflammatory， or free radical scavenging activities. The results of this study further enrich the information on the chemical constituents of the traditional Chinese medicine Aloe made from A. barbadensis， and lay a foundation for the study of the therapeutic material basis and quality control methods of Aloe.

Key words： Aloe， HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSⁿ， anthraquinone， anthrone， chromone， chemical constituents， fragmentation pathways

據(jù)《中華人民共和國藥典》（一部，2020年版，以下簡稱《中國藥典》）記載，中藥蘆薈為百合科植物庫拉索蘆薈（Aloe barbadensis）、好望角蘆薈（A. ferox）或其他同屬近緣植物葉的汁液濃縮干燥物。其具有瀉下通便、清肝瀉火、殺蟲療疳的功效，可用于治療熱結(jié)便秘、驚癇抽搐等。蘆薈具有抗炎、抗菌、抗過敏、免疫調(diào)節(jié)等多種藥理活性（樊嬌嬌，2018）。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，蘆薈提取物對三硝基苯磺酸（TNBS）誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎有治療作用（Naini et al.， 2021），蘆薈植物中的有效成分具有促進(jìn)傷口愈合的作用（Sahu， 2013）。目前，在庫拉索蘆薈植物中，已報(bào)道有化學(xué)成分110種（KahramanoDgˇlu et al.， 2019），這110種化學(xué)成分均在A. barbadensis（A. vera）中被發(fā)現(xiàn)，其中77種成分是從葉子（或葉汁或葉提取物）中發(fā)現(xiàn)的，1種成分的提取部位未見詳細(xì)報(bào)道，32種是從其他部位（花、根、葉皮等）發(fā)現(xiàn)的，即在中藥庫拉索蘆薈中已報(bào)道了77種化學(xué)成分。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，中藥蘆薈中的化學(xué)成分主要包括蒽醌、蒽酮、多糖、黃酮、色酮、有機(jī)酸和甾體等（Palermo et al.， 2013；Zhong et al.， 2013）。蒽醌類化合物為蘆薈的主要活性成分（陳彤彤等，2022）。如蘆薈大黃素具有較強(qiáng)的抗腫瘤、心血管保護(hù)、抗病毒等活性（李牧和杜智敏，2015）；蘆薈苷具有抑菌和抗炎的作用（王曄等，2018）等。如上所述，對中藥庫拉索蘆薈及其主要活性成分的藥理活性研究較為深入，其已知的化學(xué)成分已有77種（KahramanoDgˇlu et al.， 2019），但這些化學(xué)成分是對中藥庫拉索蘆薈眾多的天然藥物化學(xué)研究結(jié)果的匯總，而對一份中藥庫拉索蘆薈樣品究竟可以檢測到多少種化學(xué)成分及其主要化學(xué)成分的液質(zhì)裂解規(guī)律尚未見有系統(tǒng)的研究。在以往研究中（吳小芳等，2014；Nazeam et al.， 2017；Bendjedid et al.， 2021；陳彤彤等，2022），在一次分析中同時(shí)可鑒定出的蘆薈化學(xué)成分不超過40種。此外，液相色譜-二極管陣列檢測器-電噴霧離子化-離子阱-飛行時(shí)間-多級質(zhì)譜（HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSⁿ）技術(shù)具有高靈敏度、高分辨率、高質(zhì)量精度和寬質(zhì)量范圍的特點(diǎn)，其被認(rèn)為是一種理想的結(jié)構(gòu)鑒定工具（王炳然等，2023）。因此，本研究采用該技術(shù)快速檢測和鑒定/指認(rèn)中藥庫拉索蘆薈的化學(xué)成分，擬探討以下問題：（1）闡明一份具體的中藥庫拉索蘆薈樣品中究竟可以檢測到多少種化學(xué)成分；（2）發(fā)現(xiàn)更多的化學(xué)成分并為其藥效物質(zhì)及質(zhì)量控制研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器和材料

Shimadzu LC-MS-IT-TOF系統(tǒng)（Shimadzu，日本），包括LC-20AD輸液泵（2個(gè)）、SIL-20AC自動(dòng)進(jìn)樣器、CTO-20AC柱溫箱、SPD-M20A二極管陣列檢測器、CBM-20A控制器。萬分之一電子天平（Sartorius，美國）；Milli-Q超純水制備儀（Millipore，美國）；3-30K低溫離心機(jī)（Sigma，美國）；KQ-500DE超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，中國）；MD200-2氮吹儀（杭州奧盛儀器有限公司，中國）；Buchi R-20 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（Buchi，瑞士）；乙腈、甲醇、甲酸、乙醇（Fisher，美國，色譜純）。

中藥蘆薈（批號F20060102，2021年3月12日由河北御芝林公司提供；該蘆薈于2020年6月購自陜西嘉禾藥業(yè)有限公司，批號CLH-C-A00617B），根據(jù)《中國藥典》蘆薈【性狀】、【鑒別】和【含量測定】項(xiàng)下的描述，經(jīng)北京大學(xué)藥學(xué)院徐風(fēng)副教授鑒定為百合科植物庫拉索蘆薈（Aloe barbadensis）葉的汁液濃縮干燥物，即中藥庫拉索蘆薈，其質(zhì)量符合《中國藥典》規(guī)定。蘆薈新苷D（PS0801-0025， 25 mg）、蘆薈素A（PS0136-0025， 25 mg）、蘆薈大黃素（PS1255-0025， 25 mg）、7-O-甲基蘆薈新苷A（PS0799-0010， 10 mg）、大黃素甲醚（PS010626， 20 mg）、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（PS011865， 20 mg）均購自成都普思生物科技股份有限公司；蘆薈苦素（B23136-20， 20 mg）購自上海源葉生物科技有限公司；altechromone A（M095312， 5 mg）和蘆薈寧A（M044622， 5 mg）均購自北京邁瑞達(dá)科技有限公司。所有對照品的純度均大于98.0%（HPLC， 254 nm）。

1.2 方法

1.2.1 供試品溶液的制備 取中藥庫拉索蘆薈，粉碎過五號篩，精密稱定0.20 g，加入20 mL甲醇，稱定質(zhì)量，20℃超聲提取30 min，放冷至室溫，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，4℃、7 104 g離心15 min，取2 mL上清液，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾，氮吹至干，再加100 μL甲醇溶解，即得中藥庫拉索蘆薈提取物供試品溶液，儲存于-20℃冰箱中備用。

1.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取對照品10.00 mg，溶解于10 mL甲醇中，配制成1 mg·mL^-1的溶液，精確吸取每種對照品溶液100 μL，混勻后配制成含有9種對照品的混合對照品溶液，待液質(zhì)分析。

1.2.3 液質(zhì)分析條件 Phenomenex Gemini C₁₈色譜柱（250 mm×4.6 mm， 5.0 μm），Phenomenex Security Guard （4 mm×3.0 mm， 5.0 μm）保護(hù)柱（Phenomenex， Torrance， CA， USA）。柱溫為35℃，進(jìn)樣體積為10 μL，流動(dòng)相為A（純水）、B（乙腈），流速為1.000 mL·min^-1。流動(dòng)相梯度如下：0～45 min，10%～20%B；45～80 min，20%～25%B；80～120 min，25%～30%B；120～140 min，30%～35%B；140～150 min，35%～50%B；150～160 min，50%～70%B；160～170 min，70%～100%B；170～175 min，100%B。DAD記錄波長為190～400 nm。質(zhì)譜條件如下：電噴霧離子源（ESI），正負(fù)離子交替檢測模式；質(zhì)量掃描范圍m/z 50～1 000（MS），m/z 50～1 000（MS²和MS³）；相對碰撞誘導(dǎo)解離能量為50%；加熱塊溫度為200℃；曲形脫溶劑管溫度為200℃；檢測電壓為1.70 kV；接口電壓為（+）4.5、（-）-3.5 kV；霧化氣（氮?dú)猓┝魉贋?.5 L·min^-1。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理和成分分析 采用LCMSsolution V.3.60軟件分析所得原始質(zhì)譜數(shù)據(jù)，有對照品比對的化合物，將供試品溶液中各成分的保留時(shí)間、準(zhǔn)分子離子、碎片離子信息等與對照品進(jìn)行比對確認(rèn)。無對照品比對的化合物，根據(jù)其保留時(shí)間、準(zhǔn)分子離子、碎片離子，并參考文獻(xiàn)中報(bào)道的質(zhì)譜碎片信息以及檢索SciFinder數(shù)據(jù)庫，推測其化學(xué)結(jié)構(gòu)。

2 結(jié)果與分析

本研究中，質(zhì)譜中常見的中性丟失有30.01 Da（CH₂O）、14.01 Da（CH₂）、43.99 Da（CO₂）、44.03 Da（C₂H₄O）、27.99 Da（CO）、42.01 Da（C₂H₂O）、18.01 Da（H₂O）、60.02 Da（C₂H₄O₂）等，分別表明分子中含有甲醛基或甲醇基、甲基、羧基或內(nèi)酯、乙醛基、羰基、乙酰基、羥基（以H₂O形式失去）、乙酸基等。

2.1 蘆薈化學(xué)成分對照品的質(zhì)譜特征

9種化學(xué)成分對照品的質(zhì)譜信息詳見表1。限于篇幅，僅將蘆薈新苷D的裂解途徑畫出，詳見圖1。

2.2 HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSⁿ分析的中藥庫拉索蘆薈化學(xué)成分

按1.2項(xiàng)下條件分析檢測蘆薈供試品溶液，得到負(fù)離子模式下的基峰色譜圖（BPC）見圖2，共檢測到168種中藥庫拉索蘆薈的化學(xué)成分，其中已鑒定/指認(rèn)78種化學(xué)成分，其具體信息見表2，未鑒定的90種化學(xué)成分見表3。

2.3 主要化學(xué)成分的裂解規(guī)律和結(jié)構(gòu)解析

2.3.1 蒽醌類成分的鑒定 蒽醌類成分是具有多種活性的酚類化合物，是中藥蘆薈的主要活性成分，如蘆薈大黃素。化合物C56在負(fù)離子一級質(zhì)譜中可見 ［M-H］^-為m/z 269.045 1，預(yù)測其分子式為C₁₅H₁₀O₅，在二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子失去27.99 Da（CO）產(chǎn)生的碎片離子m/z 241.049 6（C₁₄H₉O₄），對比參考文獻(xiàn)（Zhang et al.， 2017）及對照品碎片信息鑒定化合物C56為蘆薈大黃素同分異構(gòu)體。

2.3.2 蒽酮類成分的鑒定 蒽酮類成分有蘆薈糖苷A、蘆薈糖苷B和aloinoside D等。化合物C36-C40互為同分異構(gòu)體，在負(fù)離子一級質(zhì)譜中觀察到其準(zhǔn)分子離子峰 ［M-H］^-（m/z 563.18）或 ［M+HCOOH-H］^-（m/z 609.18），預(yù)測其分子式為C₂₇H₃₂O₁₃。以化合物C40為例，探索化合物C36-C40的裂解途徑。在化合物C40的二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子連續(xù)失去120.04 Da（C₄H₈O₄）和42.01 Da（H₂O）產(chǎn)生的碎片離子m/z 443.131 4和m/z 401.124 5，其可能的質(zhì)譜裂解途徑如圖3所示。對比參考文獻(xiàn)（Aldayel et al.， 2020；陳彤彤等，2022）鑒定化合物C40為aloinoside A or aloinoside B or isomer。化合物C36-C39為C40的同分異構(gòu)體，因此也被鑒定為aloinoside A or aloinoside B or isomers。

化合物C76-C78互為同分異構(gòu)體，在負(fù)離子一級質(zhì)譜中其準(zhǔn)分子離子峰 ［M+HCOOH-H］^-為m/z 625.18，預(yù)測其分子式為C₂₇H₃₂O₁₄。以化合物C78為例，探索化合物C76-C78的裂解途徑。在化合物C78的二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子連續(xù)失去120.04 Da（C₄H₈O₄）、182.08 Da" ［146.06 Da（C₆H₁₀O₄）+36.02 Da（2H₂O）］產(chǎn)生的碎片離子m/z 459.125 2和m/z 277.054 1。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，初步鑒定化合物C78為aloinoside D or isomer。化合物C76-C77為化合物C78的同分異構(gòu)體，因此也被初步鑒定為aloinoside D or isomer。

2.3.3 色酮類成分的鑒定 色酮類有蘆薈新苷D、蘆薈新苷G、rabaichromone、7-O-甲基蘆薈新苷A、蘆薈苦素、8-C-glucosylaloesol、蘆薈新苷C等。以蘆薈新苷G、蘆薈苦素、8-C-glucosylaloesol、蘆薈新苷C、蘆薈新苷D和7-O-甲基蘆薈新苷A為例，探索色酮類成分可能的裂解途徑。

在負(fù)離子一級質(zhì)譜中，化合物C1的分子離子峰 ［M-H］^-為m/z 537.174 0，預(yù)測其分子式為C₂₉H₃₀O₁₀。在二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子連續(xù)失去268.09 Da（C₁₃H₁₆O₆）和54.01 Da（C₃H₂O）產(chǎn)生的碎片離子m/z 269.071 8和m/z 215.071 4。此外，還觀察到由離子m/z 269.071 8失去14.02 Da（CH₂）產(chǎn)生的碎片m/z 255.058 1。對比參考文獻(xiàn)（Teka amp; Kassahun， 2020）鑒定化合物C1為蘆薈新苷G。

化合物C3-C5互為同分異構(gòu)體，在負(fù)離子一級質(zhì)譜中，其準(zhǔn)分子離子峰 ［M-H］^-為m/z 393.12，預(yù)測其分子式為C₁₉H₂₂O₉。以化合物C4為例，探索化合物C3-C5的裂解途徑。在化合物C4的二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子連續(xù)失去90.03 Da（C₃H₆O₃）、30.01 Da（CH₂O）、27.99 Da（CO）、14.02 Da（CH₂）、27.99 Da（CO）產(chǎn)生的碎片離子m/z分別為303.082 3、273.074 9、245.078 1、231.043 5、203.071 1。此外，還觀察到由準(zhǔn)分子離子失去42.01 Da（C₂H₂O）產(chǎn)生的碎片離子m/z 351.103 3，對比參考文獻(xiàn)（Aldayel et al.， 2020；陳彤彤等，2022）及對照品碎片信息及保留時(shí)間（t_R=8.67 min），發(fā)現(xiàn)C4（t_R=9.52 min）不是蘆薈苦素，化合物C3經(jīng)和對照品對比，鑒定為蘆薈苦素。化合物C4和化合物C5是化合物C3的同分異構(gòu)體，因此鑒定它們?yōu)樘J薈苦素同分異構(gòu)體。

化合物C6-C12互為同分異構(gòu)體，在負(fù)離子一級質(zhì)譜中其準(zhǔn)分子離子峰 ［M-H］^-為m/z 395.13，預(yù)測其分子式為C₁₉H₂₄O₉。以化合物C7為例，探索化合物C6-C12的裂解途徑。在化合物C7的二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子連續(xù)失去120.04 Da（C₄H₈O₄）、44.03 Da（C₂H₄O）、27.99 Da（CO）、18.01 Da（H₂O）產(chǎn)生的碎片離子m/z分別為275.089 9、231.062 1、203.067 7、185.055 7。對比參考文獻(xiàn)（Abouelela et al.， 2021）鑒定化合物C7為8-C-glucosylaloesol or isomer，化合物C6、C8-C12也被鑒定為8-C-glucosylaloesol or isomer。

C1-C168表示各化學(xué)成分。

在負(fù)離子一級質(zhì)譜中，化合物C33的分子離子峰 ［M-H］^-為m/z 701.207 7，預(yù)測其分子式為C₃₄H₃₈O₁₆。在二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子連續(xù)失去162.05 Da（C₆H₁₀O₅，己糖基）和232.08 Da（C₁₃H₁₂O₄）產(chǎn)生的碎片離子m/z 539.152 1和m/z 307.079 1。此外，還觀察到由碎片離子m/z 539.16失去308.09 Da" ［146.04 Da（C₉H₆O₂，香豆酰基）+162.05 Da（C₆H₁₀O₅，己糖基）］產(chǎn)生的碎片離子m/z 231.069 8。通過查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫和對比文獻(xiàn)（Speranza et al.， 1985）鑒定化合物C33為蘆薈新苷C。

在負(fù)離子一級質(zhì)譜中，化合物C41的分子離子峰 ［M-H］^-為m/z 555.186 2，預(yù)測其分子式為C₂₉H₃₂O₁₁。在二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子失去44.03 Da（C₂H₄O）、268.09 Da（C₁₃H₁₆O₆）產(chǎn)生的碎片離子m/z 511.155 4和m/z 243.061 2。對比參考文獻(xiàn)（Bendjedid et al.， 2021）及對照品碎片信息及保留時(shí)間（t_R=52.08 min）鑒定化合物C41為蘆薈新苷D。

在負(fù)離子一級質(zhì)譜中，化合物C44的分子離子峰 ［M-H］^-為m/z 553.172 6，預(yù)測其分子式為C₂₉H₃₀O₁₁。在二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子連續(xù)失去146.04 Da（C₉H₆O₂，香豆酰基）、180.06 Da" ［162.05 Da（C₆H₁₀O₅，己糖基）+18.01 Da（H₂O）］產(chǎn)生的碎片離子m/z 407.128 3和m/z 227.062 1。對比對照品的液質(zhì)數(shù)據(jù)及保留時(shí)間（t_R=55.89 min），鑒定化合物C44為7-O-甲基蘆薈新苷A。

2.3.4 α-吡喃酮類成分的鑒定 蘆薈中含有的α-吡喃酮類成分有蘆薈寧B等。在負(fù)離子一級質(zhì)譜中，化合物C32的分子離子峰 ［M-H］^-為m/z 717.201 4，預(yù)測其分子式為C₃₄H₃₈O₁₇。在二級質(zhì)譜中觀察到由準(zhǔn)分子離子連續(xù)失去162.05 Da（C₆H₁₀O₅，己糖基）、146.04 Da（C₉H₆O₂，香豆酰基）、102.03 Da（C₄H₆O₃，己糖碎片）、18.01 Da（H₂O）、42.01 Da（C₂H₂O）產(chǎn)生的碎片離子m/z 555.141 8、409.103 4、307.078 6、289.071 8、247.057 6。對比參考文獻(xiàn)（Sun et al.， 2017）及查閱SciFinder數(shù)據(jù)庫，鑒定化合物C32為蘆薈寧B。

3 討論與結(jié)論

通過預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，中藥庫拉索蘆薈的主要化學(xué)成分在質(zhì)譜負(fù)離子檢測模式下的離子強(qiáng)度高于正離子檢測模式下的，二級質(zhì)譜碎片離子多于正離子檢測模式下的。因此，本文采用質(zhì)譜負(fù)離子檢測模式得到的數(shù)據(jù)對中藥庫拉索蘆薈的化學(xué)成分進(jìn)行解析。

吳小芳等（2014）采用高效液相色譜-離子阱-飛行時(shí)間質(zhì)譜法（LCMS-IT-TOF）快速鑒定了庫拉索蘆薈的30種化學(xué)成分；Bendjedid等（2021）采用LC-MS技術(shù)鑒定了庫拉索蘆薈中8種具有生物活性的化學(xué)成分。本研究則首次對中藥庫拉索蘆薈的化學(xué)成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)的定性分析，鑒定/指認(rèn)了其中的78種化學(xué)成分，其中23種化學(xué)成分為庫拉索蘆薈葉中新發(fā)現(xiàn)的成分，這極大地豐富了庫拉索蘆薈的化學(xué)成分信息。這表明采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)可快速發(fā)現(xiàn)中藥的新化學(xué)成分。根據(jù)現(xiàn)代藥理學(xué)研究文獻(xiàn)，本研究中新發(fā)現(xiàn)的中藥庫拉索蘆薈的23種化學(xué)成分中，有14種具有藥理活性。例如，aloinoside D（C76-C78）具有潛在的清除自由基活性（Sun et al.， 2017），而庫拉索蘆薈具有抗氧化功效（馬艷弘等，2016；萬慶家等，2020），推測其抗氧化功效與aloinoside D有關(guān)；ethylidene-aloenin（C17-C19）具有抗菌活性（Abd-Alla et al.， 2009），而蘆薈具有抗菌功效（Agarwal et al.，2000），推測其與ethylidene-aloenin有關(guān)；plicataloside（C24）可抑制酪氨酸酶（Mikayoulou et al.， 2021），還可作為百癬夏塔熱片中蘆薈藥材的活性成分參與多成分調(diào)控多個(gè)靶點(diǎn)協(xié)同抑制銀屑病炎癥（Pang et al.， 2018）；isoeleutherin（C67）具有抗關(guān)節(jié)炎活性（Gomes et al.， 2021）且可作為一種消炎劑（Song et al.， 2009）；epimedkoreside B（C25-C27）具有抗炎活性（Li et al.， 2016），因此蘆薈的抗炎作用（朱必康等，2021）與isoeleutherin和epimedkoreside B有關(guān)；1H-2-benzopyran-1-one（C28-C30）具有防蟲功效（Veitch et al.， 1994）。以上結(jié)果有助于闡釋中藥庫拉索蘆薈藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)和這些活性成分也可能作為蘆薈質(zhì)量控制的指標(biāo)性成分。綜上所述，本研究進(jìn)一步豐富了中藥庫拉索蘆薈的化學(xué)成分信息，為明確蘆薈的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和探索蘆薈質(zhì)量控制的指標(biāo)成分奠定了基礎(chǔ)。

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