血清NSE、NGB水平與新生兒缺氧缺血性腦病嚴重程度的相關性及對預后的預測價值研究

馬會強

開封市婦產(chǎn)醫(yī)院新生兒科，河南 開封 475000

缺氧缺血性腦病（HIE）是新生兒常見疾病，通常因圍產(chǎn)期窒息所致，以昏迷、激惹及嗜睡等為主要臨床表現(xiàn)，部分會出現(xiàn)呼吸節(jié)律不齊及中樞呼吸衰竭，導致新生兒腦損傷、神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥甚至死亡［1-2］。該病根據(jù)患兒病情嚴重程度分為輕度、中度、重度，腦損傷程度及預后情況也存在較大差異，因此探尋一種簡便、高效的嚴重程度及預后評估方式至關重要。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是分布于神經(jīng)內(nèi)分泌細胞及神經(jīng)元細胞軸突胞質中的可溶性胞漿蛋白，可作為神經(jīng)元軸突損傷、再生及再支配的標志物［3］。腦紅蛋白（NGB）是一種向腦組織供氧的攜氧球蛋白，參與神經(jīng)元氧氣的運輸與儲存，有研究［4］發(fā)現(xiàn)，其與腦缺血性疾病有密切關聯(lián)。本研究選取開封市婦產(chǎn)醫(yī)院收治的152 例HIE 患兒作為研究對象，探究血清NSE、NGB 水平與HIE 嚴重程度的相關性以及對預后的預測價值，現(xiàn)將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015 年6 月—2021 年6 月開封市婦產(chǎn)醫(yī)院收治的152 例HIE 患兒作為研究對象，將其設為疾病組。另選取同期于開封市婦產(chǎn)醫(yī)院出生的健康新生兒50例，將其設為正常組。疾病組男85 例，女67 例；胎齡37～41 周，平均胎齡（39.52±1.17）周；出生體質量2.5～4.5 kg，平均體質量（3.24±0.48）kg。正常組男28例，女22例；胎齡37～41周，平均胎齡（39.47±1.13）周；出生體質量2.6～4.4 kg，平均體質量（3.19±0.47）kg。兩組新生兒一般資料具有可比性（P＞0.05）。納入標準：（1）疾病組患兒與中華醫(yī)學會兒科學分會新生兒學組制定的《新生兒缺氧缺血性腦病診斷標準》［5］中診斷標準相符，表現(xiàn)為胎心從快且規(guī)則轉變?yōu)槁也灰?guī)則；羊水為草綠色；娩出時伴有重度窒息；出生后神經(jīng)系統(tǒng)癥狀＞24 h；腦干征與原始反射異常，意識及肌張力發(fā)生改變，經(jīng)顱腦CT 檢查確診。（2）出生時間＜72 h。（3）胎齡≥37 周。排除標準：（1）先天性心肺疾病。（2）遺傳性疾病、代謝性疾病。（3）家族HIE 遺傳史。（4）先天性畸形。（5）合并電解質紊亂。（6）宮內(nèi)感染。（7）合并其他臟器疾病與功能衰竭。（8）免疫抑制劑、增強劑或血制品使用史。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，患兒家屬均簽署研究內(nèi)容知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 嚴重程度分級［6］疾病組患兒根據(jù)病情嚴重程度分為輕度組、中度組、重度組。輕度：意識過度興奮但無驚厥，擁抱反射亢奮，吸吮反射，肌張力、前囟門張力正常，無瞳孔改變、中樞性呼吸衰竭及顱內(nèi)壓增高，且異常癥狀消失時間＜3 d。中度：意識正常，反應遲鈍、嗜睡或驚厥，擁抱反射、吸吮反射、肌張力降低，輕微的瞳孔改變及中樞性呼吸衰竭，前囟門張力正常或稍微膨滿，部分患兒表現(xiàn)為顱內(nèi)壓升高，異常癥狀消失時間＜7 d，且有后遺癥風險。重度：意識昏迷，部分伴有持續(xù)性驚厥或去大腦僵直，瞳孔放大或不對稱，有中樞呼吸衰竭，吸吮反射、擁抱反射及光反射消失，顱內(nèi)壓及前囟張力增高，異常癥狀持續(xù)數(shù)周且有后遺癥。

1.2.2 血清NSE、NGB 水平檢測 抽取患兒空腹靜脈血4 mL，離心后分離血清，冷凍保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清NSE、NGB 水平，由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供試劑盒，具體實驗步驟根據(jù)試劑盒說明書進行。

1.2.3 臨床資料的收集 在新生兒及產(chǎn)婦入院后收集其臨床資料，包括產(chǎn)婦資料（年齡、孕期貧血、妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓、產(chǎn)程異常、宮內(nèi)窘迫、分娩方式）及新生兒資料[性別、出生體質量、1 min Apgar 評分、5 min Apgar 評分、新生兒神經(jīng)行為測定評分（NBNA）、HIE 嚴重程度、發(fā)病至治療時間、住院時間、腦出血、并發(fā)癥、血清NSE、血清NGB]。

1.2.4 預后判斷 隨訪6 個月，判斷患兒預后情況。預后良好：生命體征平穩(wěn)，肌張力、原始反射正常，神經(jīng)系統(tǒng)體征與癥狀消失，瞳孔光反射正常，可正常進食母乳。預后不良：不符合預后良好判斷標準的患兒及死亡患兒。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 20.0 軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。計數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Spearman 相關性分析法分析血清NSE、NGB 與HIE 嚴重程度的相關性；采用logistic 回歸分析HIE 預后不良的危險因素；采用Med Calc 15.1統(tǒng)計學軟件繪制受試者工作特征曲線（ROC），分析血清NSE 聯(lián)合NGB 檢測對HIE 預后不良的預測價值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 疾病組與正常組新生兒血清NSE、NGB水平情況

疾病組患兒血清NSE、NGB 水平高于正常組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 疾病組與正常組新生兒血清NSE、NGB情況（±s）

表1 疾病組與正常組新生兒血清NSE、NGB情況（±s）

組別正常組（n=50）疾病組（n=152）t值P值NSE（ng/mL）8.19±1.24 30.22±4.96 31.041＜0.001 NGB（pg/mL）26.35±4.14 184.02±25.48 43.497＜0.001

2.2 不同嚴重程度HIE患兒的血清NSE、NGB水平情況

中、重度組血清NSE、NGB 水平高于輕度組，重度組血清NSE、NGB 水平高于中度組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。Spearman 相關性分析結果顯示，血清NSE、NGB 水平與HIE 嚴重程度呈正相關（r=0.853、0.830，P＜0.05）。

表2 不同嚴重程度HIE患兒血清NSE、NGB情況（±s）

表2 不同嚴重程度HIE患兒血清NSE、NGB情況（±s）

a表示與輕度組比較，P＜0.05；b表示與中度組比較，P＜0.05。

組別輕度組（n=48）中度組（n=59）重度組（n=45）F值P值NSE（ng/mL）21.15±3.27 30.17±5.19a 39.97±5.08ab 191.507＜0.001 NGB（pg/mL）130.82±29.13 186.29±25.57a 237.78±36.92ab 143.945＜0.001

2.3 HIE預后不良的單因素分析結果

隨訪6 個月，失訪4 例，其余148 例患兒中預后良好115 例（77.70%）， 設 為 良 好 組； 預 后 不 良33 例（22.30%），設為不良組。HIE 預后不良可能與血清NSE 水平、NGB 水平、5 min Apgar 評分、HIE 嚴重程度、發(fā)病至治療時間有關，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 HIE預后不良的單因素分析結果

2.4 HIE預后不良的多因素分析結果

對良好組、不良組可能影響因素進行賦值，以預后（良好=0，不良=1）為因變量行l(wèi)ogistic 回歸分析。結果顯示，5 min Apgar評分≤7分、HIE嚴重程度為重度、發(fā)病至治療時間≥48 h 是HIE 預后不良的危險因素，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表4、表5。

表4 變量與賦值

表5 HIE預后不良影響因素的多因素logistic回歸分析結果

2.5 血清NSE聯(lián)合NGB檢測對HIE預后不良的預測價值

ROC 顯示，血清NSE、NGB 預測HIE 預后不良的最佳截斷點分別為33.05 ng/mL、203.09 pg/mL，單獨及聯(lián)合預測的ROC 下面積（AUC）分別為0.784、0.821、0.890，兩者聯(lián)合檢測的預測價值高于單獨檢測，見表6。

表6 血清NSE聯(lián)合NGB檢測對HIE預后不良的預測價值

3 討論

HIE 的發(fā)生與胎兒缺氧及窒息關系密切，當宮內(nèi)缺氧、缺血時，胎兒腦部神經(jīng)將發(fā)生變化，隨著缺氧、缺血狀況的延長，神經(jīng)元逐漸發(fā)生細胞膜及細胞核溶解，最終發(fā)展至不可逆腦損傷。HIE 病因復雜，且發(fā)病機制互相交錯，目前多認為與腦組織炎癥因子浸潤，凝血障礙，胎盤血流循環(huán)減少，如Toll 樣受體4 及Notch 信號傳導通路異常、一氧化氮與誘導型一氧化氮合成酶增加、神經(jīng)細胞凋亡及神經(jīng)修復、感染對缺氧缺血性損傷的增敏作用、興奮性氨基酸的興奮毒性、自由基損傷作用等的免疫機制密切相關［7-8］。

本研究結果顯示，與正常組比較，疾病組患兒血清NSE、NGB 水平高于正常組，且Spearman 相關性分析結果顯示，兩者均與HIE 嚴重程度呈正相關。NSE 特異性表達于神經(jīng)元及神經(jīng)內(nèi)分泌細胞中，在腦組織中含量豐富，而很少表達于正常體液中，當HIE 腦損傷時，神經(jīng)元正常細胞膜結構被破壞，NSE 會滲入腦脊液及血液中，因此NSE是反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度的有效指標［9-10］。NGB 是與血紅蛋白、肌紅蛋白類似的第3 種攜氧球蛋白，為腦組織供氧，在神經(jīng)系統(tǒng)攝取、運輸及利用氧氣的生理過程中有著廣泛的參與度，在腦組織缺氧、缺血時可在短期內(nèi)特異性增加。NGB 主要生理功能為協(xié)助轉運氧透過血腦屏障并向線粒體彌散，從而提升氧氣利用率；在腦組織損傷時，其釋放儲存的氧氣可在一定程度上緩沖氧分壓變化，延緩或減少細胞死亡，維持神經(jīng)元正常功能；清除過氧化氫、一氧化氮等缺氧時釋放的氧化產(chǎn)物；促進神經(jīng)元細胞膜穩(wěn)定性的增加［11-12］。當發(fā)生HIE 時，機體會產(chǎn)生一氧化氮、活性氧等有毒物質，刺激NGB生成，從而有效清除有毒物質以保護神經(jīng)系統(tǒng)。

本研究結果顯示，血清NSE、NGB水平均是HIE預后不良的危險因素，與付慧等［13］研究結論一致。分析其原因為，血清NSE、NGB水平越高預示著HIE病情越嚴重，預后也越差。本研究結果還顯示，血清NSE、NGB預測HIE預后不良的最佳截斷點分別為33.05 ng/mL、203.09 pg/mL，且兩者聯(lián)合檢測的預測價值高于單獨檢測。檢測血清NSE、NGB 操作方便、成本低，但兩者作為臨時性指標在短期內(nèi)波動較大，容易被抽血時間、應激等多種因素影響，而聯(lián)合檢測可彌補單獨檢測的不足，更加全面地反映HIE 患兒病情，提升整體預測價值［14］。因此，在診療HIE時，需加強對血清NSE、NGB的監(jiān)測，積極控制并發(fā)癥，改善預后。

綜上所述，血清NSE、NGB 水平與新生兒HIE 嚴重程度呈正相關，且兩者聯(lián)合檢測對該病預后具有較高的預測價值。HIE 發(fā)病機制復雜，臨床應結合臨床癥狀及實驗室檢查指標，有助于早期診斷及采取對應治療措施。