





摘" " 要:裸頂脂鯉俗稱五彩天使,為淡水觀賞魚市場中炙手可熱的養殖品種。為填補天津地區五彩天使工廠化繁育的空白,采用流水漂洗法洗卵,隨機采集五彩天使各500粒受精卵于顯微鏡下觀察,每組3個平行;采用單因素方差分析探討五彩天使在不同發育過程中的可量性狀變化。結果顯示:通過流水漂洗法洗卵,凈增受精率在五彩天使中呈現綠天使gt;紅天使gt;黃天使gt;紫天使gt;藍天使的態勢;全長在五彩天使中呈現綠天使gt;藍天使gt;紅天使gt;紫天使gt;黃天使的態勢;體長在五彩天使中呈現綠天使gt;藍天使gt;紅天使gt;紫天使gt;黃天使的態勢;體高在五彩天使中呈現綠天使gt;藍天使gt;紅天使gt;紫天使gt;黃天使的態勢。綜上,流水漂洗法洗卵,能夠提高五彩天使受精率,親魚的成熟度和雌雄配比是影響五彩天使受精率差異的主要原因;單因素方差顯示五彩天使的全長、體長和體高在1、5、10、15、20 d內有極顯著差異,光照和養殖密度是導致五彩天使生長性狀差異的主要原因。
關鍵詞:五彩天使;洗卵;高效繁育;養殖
中圖分類號:S965.8" " " " " 文獻標識碼:A" " " " "DOI 編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2024.03.011
The Factory Efficient Breeding and Cultivation Experiment of Gymnocorymbus ternetzi
LUO Xin1,2, XIE Yadong1,2, MA Lin1,2, YOU Hongzheng1, XU Lintong1,2, JIANG Jufeng1,2
(1.Tianjin Fishery Research Institute, Tianjin 300221, China; 2.Tianjin Ornamental Fish Technology and Engineering Center, Tianjin 300221, China)
Abstract: Gymnocorymbus ternetzi scientifically designated as the colorful angelfish, has emerged as a highly coveted breed within the freshwater ornamental fish market. Addressing the paucity of industrial breeding practices specific to colorful angelfish in Tianjin, the study employed the oocyte-washing technique for the purification of eggs. A meticulous sampling approach was adopted, involving the random collection of 500 fertilized eggs from each variant of the colorful angel, with triplicate experimental units for each variant. To delve deeper into the quantifiable trait changed during different developmental stages, ANOVA was conducted. The results indicated that the fertilization rate was significantly increased by oocyte-washing method, and the relative fertilization rate indicated a trend in greengt;redgt;yellowgt; purplegt;blue. Furthermore, the analysis of morphological characteristics revealed significant differences among the varieties(Plt;0.01). In terms of total length, the green angelfish measuredgt; bluegt; redgt;purplegt;yellow. Similarly, for body length, the green angelfishgt; blue gt; redgt; purplegt; yellow. In terms of body height, the green stood tallest with gt; bluegt; redgt; purplegt; yellow. In conclusion, the study offered a comprehensive analysis of the breeding practices and phenotypic traits of Gymnocorymbus ternetzi in Tianjin. The oocyte-washing method emerged as an effective tool for enhancing fertilization rates, while the ANOVA analysis provided valuable insights into the growth trait variations among different variants.
Key words: Gymnocorymbus ternetzi; oocyte-washing; efficient breeding; cultivation
裸頂脂鯉(Gymnocorymbus ternetzi)俗稱五彩天使,隸屬硬骨魚綱、鯉形目、脂鯉科、裙魚屬,原產于南美洲亞馬遜河流域[1]。五彩天使是由黑裙魚轉入不同顏色的熒光蛋白基因后,褪去身上黑色及三道條紋,呈現紅、黃、藍、綠、紫色,顏色艷麗、背鰭和臀鰭飄逸,具有極高的觀賞價值[2-3](圖1)。五彩天使體高、側扁、近似橢圓形;眼大,吻圓鈍,體被櫛鱗;背鰭位于上中部、高而短,脂鰭較小,臀鰭寬大并延長至尾柄,尾鰭深叉形[2]。
目前國內外對五彩天使的研究處于起步階段,現有文獻僅聚焦于不同熒光蛋白基因在五彩天使體表裝飾及表達機制上,而關于五彩天使工廠化繁育與養殖技術的系統性研究則鮮有報道[1, 4]。本研究以五彩天使為例,基于生長性狀數據,深入探索生活史中的生物學特性,對比和剖析五彩天使的生長差異情況,總結并梳理五彩天使高效繁育和養殖的方法,以期為工廠化繁育五彩天使提供一定理論參考和技術支持。
1 材料與方法
1.1 養殖設施與養殖條件
1.1.1 養殖設施 養殖車間配備有羅茨鼓風機、曝氣增氧盤、水泵房、蓄水池、配電室等供氧、供水、供電系統。采用5個規格為1.7 m×0.8 m×0.3 m的玻璃缸作為親魚培育和孵化池,5個規格為7.2 m×7.2 m×1.2 m的方形水池作為產卵池。此外,車間設置300個玻璃缸用于分苗和苗種培育,4個鹵蟲孵化桶用于孵化鹵蟲無節幼體提供餌料。
1.1.2 養殖條件 五彩天使適應能力強,在工廠化養殖中對水質要求并不苛刻,但應確保養殖用水溫度為26~28 ℃(配對繁育時提高1~2 ℃),硬度4~5,pH值為6.5~6.8,溶氧≥5 mg·L-1,氨氮<0.2 mg·L-1,亞硝酸鹽<0.01 mg·L-1;養殖密度控制為:0.1~0.9 cm的仔魚≤2 000尾·m-2,1.0~2.0 cm的稚魚≤1 500尾·m-2,2.0~4.0 cm的幼魚≤1 000尾·m-2,4 cm以上的成魚≤150尾·m-2。
1.2 親魚暫養與促熟培育
2023年11月,從遼寧省引進五彩天使親魚,其中雌雄各1 000尾,平均體質量為(3.20±0.05) g,暫養于車間方形水池內。暫養期間,每日定時投喂4次,投喂時間分別為7:00、11:00、14:00、17:00,投喂量為魚總體質量的6%~8%。五彩天使在養殖過程中需保持水質清新,每日需將水族缸內的糞便和殘餌吸出;定期換水,換水量為1/3~1/2;定期檢查雌魚性腺發育情況,當雌魚腹部膨大飽滿時,即可進行繁育。
1.3 親魚配對和繁育
挑選體長4 cm以上、魚鰭形態完整、體色艷麗、體質健壯、活力強、規格均勻的個體作為親魚。上午8點將挑選好的親魚,按照雌雄各20尾的比例放入規格為40 cm×40 cm的泡沫繁殖網箱進行配對(圖2-A);將網箱置于方形水池中,在安靜的傍晚和凌晨,可觀察到體小色艷的雄魚反復追逐體大色淡的雌魚,并在此過程中完成排卵和受精。
1.4 采卵與洗卵
受精卵黏附于池底,以流水沖洗池底(圖2-B、圖2-C);用60目網袋在水池排水口處集卵(圖2-D);集卵完畢后,盆內裝滿新水,將受精卵均勻散落盆中,待大多數卵下沉至盆底時,移除中上層水;緩慢注入凈水,靜置片刻;待卵下沉后,去除上層水,此過程反復4~6次;用60目篩網將卵收集起來,迅速轉移至孵化缸(圖2-E)。洗卵過程中,嚴格控制水流速度和水量。
1.5 受精卵孵化
用羽毛輕輕攪勻受精卵,使其分布均勻并平鋪于玻璃缸底部,孵化密度為7 000~10 000?!-2(圖2-F)??刂品趸厮?0 cm,水溫28~29 ℃,溶氧5 mg·L-1以上。玻璃缸放置2個由生化棉過濾器包裹的氣石,氣石出氣時細密柔和(圖2-G、圖2-H)。
1.6 苗種培育
1.6.1 苗種投喂 孵化前5 d,無需投喂;5~10日齡仔魚,每日投喂少量投喂輪蟲4次,投飼量占魚總體質量的6%~8%;12~17日齡仔魚,每日投喂少量輪蟲和經200目網篩過濾后的洄水(主要為枝角類無節幼體);17~27日齡,停止投喂輪蟲,每日投喂鹵蟲無節幼體;27日齡后,每日投喂鹵蟲成蟲。每次投喂量一定要充足,保證魚苗的正常生長。
1.6.2 分苗與倒池 在魚苗培育階段,鑒于個體間的生長差異,每隔5 d進行1次分池操作和規格篩選。將規格相近的魚苗置于同一池中飼養,保證同步生長;生長均勻的魚苗采用虹吸法;大小分化嚴重的苗池采用撈網進行規格分選。密度調控:全長0.1~0.9 cm的仔魚2 000 尾·m-2,1.0~2.0 cm的稚魚150尾·m-2,2.0~4.0 cm的幼魚1 000尾·m-2,4 cm以上的成魚150尾·m-2。
1.6.3 病害防治 魚苗在養殖期間,水溫變化、養殖密度過高和人為干擾等因素,均會造成魚類免疫力下降,引起病害。五彩天使魚卵孵化階段和苗種培育階段是病害易發階段,霉菌病、指環蟲病和腸炎等出現比較頻繁,若觀察魚游動遲緩捕食無力或餌料密度減少慢,立即捕撈魚苗進行鏡檢,對癥用藥。常見疾病和預防措施見表1。
1.7 數據收集與處理
不同養殖階段隨機抽取10尾仔稚魚用游標卡尺(精度0.1 mm)測量可量性狀,采用軟件SPSS 26.0進行單因素方差分析(One-way ANOVA),組間差異顯著則進行多重比較,如果方差同質則進行LSD檢驗,如果方差不同質,則選用Games-Howell檢驗;使用軟件Origin 2021軟件繪制不同養殖時期五彩天使可量性狀變化圖;使用Photoshop CC 2019軟件處理五彩天使魚仔稚魚發育圖。
2 結果與分析
2.1 五彩天使魚生物學特性
天使魚受精卵呈現出黏性特征,初產卵子緊密黏附于池底,卵徑(0.93±0.05) mm。在水溫26~28 ℃、pH值為6.8~7.0的條件下,受精卵歷經20~22 h孵化。初孵仔魚的全長(2.17±0.12) mm,體態透明,卵黃囊占體長的2/3,游泳能力弱,做間歇性垂直游泳(圖3-A);3日齡時,全長(3.84±0.28) mm,口裂初步形成,開始掛壁,水平游泳(圖3-B)。5日齡時,仔魚增至(4.40±0.38) mm,卵黃囊消耗殆盡,體內鰾原基顯現,口裂擴大,開口攝食(圖3-C)。12日齡時,仔魚全長(6.73±0.56) mm,背鰭、臀鰭和尾鰭開始分化,處于仔魚向稚魚過渡期(圖3-D)。17日齡時,稚魚全長(8.93±0.66) mm,背鰭、臀鰭和尾鰭發育完全,達到稚魚期(圖3-E);27~28日齡,幼魚全長(15.02±2.30) mm,鰭棘和鰭條發育成熟,形態上與成魚無異,進入幼魚期(圖3-F)。
2.2 洗卵前后受精率對比情況
采集五色天使魚各500枚受精卵,每組設置3個平行在顯微鏡下觀察。本研究結果顯示,洗卵前平均受精率為24.4%,洗卵后平均受精率42.6%,受精卵平均凈增18.2%,凈增受精率排序為:綠天使(21%)gt;紅天使(19%)gt;黃天使(18%)gt;紫天使(17%)gt;藍天使(16%)(表2)。
2.3 可量性狀對比情況
單因素方差顯示,五彩天使的全長、體長和體高在不同培育時間內有極顯著差異(Plt;0.01)。孵化第1天:綠天使的全長和體長極顯著高于紫、黃天使(Plt;0.01);孵化第5天:綠天使的全長、體長和體高極顯著高于其他四色天使(Plt;0.01);孵化第10天:紅天使和綠天使的全長、體長和體高極顯著高于其他三色天使(Plt;0.01);孵化第15天:藍天使的全長和體高極顯著高于紫、黃天使(Plt;0.01);孵化第真0天:紫、綠、藍、紅天使的全長和體高極顯著高于黃天使,紅天使的體高極顯著高于其他顏色天使(Plt;0.01)(圖4)。
3 討論與結論
3.1討論
3.1.1 五彩天使受精率驅動因子 性腺發育是魚類繁殖的基礎,性腺發育與水溫密切相關,水溫通過影響親魚性腺發育間接影響受精率。張先柄等[5]研究顯示,魚類性腺發育與水溫呈正相關,水溫越高,性腺發育越快。本研究發現,五彩天使魚暫養池中的水溫為28.5 ℃,高于天使魚生長最適水溫(26±0.5) ℃,促使卵成熟時間提前,導致卵巢中卵子發生聚集而堵塞生殖孔,無法及時排出和受精,這與孔令杰等[6]研究結果類似,表明水溫通過影響親魚的性腺發育而間接影響受精率。
不同雌雄配比亦是造成五彩天使受精率低的原因之一[7]。杜勁松等[8]研究結果顯示,雌雄比例為1∶2時的受精率顯著高于雌雄比例為1∶1,原因是雄魚的精巢絕對量較小,且多次參加受精過程,精液不足導致魚類受精率低。本研究結果顯示,五彩天使魚親魚雌雄比為1∶1時,受精率為24.4%,這與杜勁松[8]的研究結果類似,表明受精率低可能是雄親精液量不足導致的結果。筆者建議當雄魚多次參加受精過程后,應增加雄魚占比或降低雌魚占比,不可盲目追求卵數,不按要求操作,以免造成產卵率高,受精率低的不良結果。
魚類在繁殖和孵化過程中,潰卵溶出物中的卵黃蛋白會凝結精子并抑制其活力而影響受精率[9]。王昭明等[10]研究顯示,潰卵數量與魚類受精率呈反比,潰卵高于3%時,受精率為0。為了剔除潰卵和壞卵對魚類孵化的影響,一些研究學者[10-11]對魚類洗卵方法進行多種探索,目前國內外洗卵一般采用食鹽浸浴法,此方法可將受精率提升5%~10%??紤]到NaCL溶液可能會阻礙天使魚的胚胎發育進程,故本研究采用流水漂洗法代替傳統的NaCL溶液洗卵法。本研究結果顯示,洗卵后五彩天使平均受精率高達42.6%,較洗卵前平均提高18.2%,該結果高于王昭明等[10]研究結果,證明流水漂洗法對五彩天使受精卵的洗滌具有顯著效果,不僅能去除多余的精子、糞便等污染物,同時還能維持孵化所需的水質環境。
3.1.2 五色天使生長性狀差異分析 魚類作為變溫動物,所在棲息環境決定其獲得的資源和受到外部環境的侵擾程度,因此棲息環境密切地影響魚類的可量性狀[12]。光照在魚類整個生活史中扮演著至關重要的角色,直接或間接地影響魚類的攝食、遷徙和繁育等行為[13-14]。Takahashi等研究表明,在適當的光照區間內,光照會增加魚類的生長速率、飼料轉化率和存活率,從而促進魚類的生長發育[15-18]。本研究發現,綠天使的生長速度顯著快于其他四色魚,原因可能是綠天使的養殖地點靠窗,光照較其他四色天使魚充足,促進了綠天使的生長速率。
隨著水產養殖集約化的發展,養殖密度被證明是影響魚類生長發育和健康的關鍵因素之一[19-22]。潘曉賦等[23]和Rahman等[24]研究表明,魚類養殖密度存在一個閾值,在閾值內,魚類生長不受密度的影響,超過閾值,魚類的生長速率隨著養殖密度的增加而顯著下降。本研究發現,藍天使的全長、體長和體高在養殖中后期顯著高于紫天使和黃天使,這與邵鄰相等[25]結果類似。由于藍天使的養殖密度低,空間競爭減弱,降低了藍天使個體間相互接觸的機會,將積攢的能量投入到自身的生長發育中,從而表現出較大的個體。
3.2 結論
本文初步探究了五彩天使的繁育和苗種培育過程,對比并解析了五彩天使洗卵前后受精率和生長差異情況,總結并梳理五彩天使高效繁育和養殖的方法。結果表明,親魚的性腺發育和雌雄比例是影響五色天使魚受精率差異的主要原因之一;受精卵通過流水漂洗法可提升16%~21%受精率,表明流水漂洗法洗卵在生產實踐中是可行的;五色天使魚的可量性狀差異,被普遍認為是一系列因素疊加在一起影響的結果,而本研究發現,可量性狀的差異變化主要是光照和養殖密度影響的結果,本研究結果可為工廠化繁育和養殖五彩天使提供理論參考。
參考文獻:
[1] PAN X F, ZHAN H Q, GONG Z Y. Ornamental expression of red fluorescent protein in transgenic founders of white skirt tetra (Gymnocorymbus ternetzi)[J]. Marine Biotechnology, 2008, 10(5): 497-501.
[2] ?覶ELIK ?魵, ?覶ELIK P, CIRIK S, et al. Embryonic and larval development of black skirt tetra (Gymnocorymbus ternetzi, Boulenger, 1895) under laboratory conditions[J]. Aquaculture Research, 2012, 43(9): 1260-1275.
[3] FRANKEL J S. Inheritance of trunk banding in the tetra (Gymnocorymbus ternetzi Characidae)[J]. The Journal of Heredity, 2004, 95(3): 262-264.
[4] UMA B, CHANDRAN M R. Induction of triploidy in Gymnocorymbus ternetzi(Boulenger)[J]. Research Journal of Fisheries and Hydrobiology, 2008, 3(2): 41-47.
[5] 張先炳, 胡亞萍, 楊威, 等. 水溫對淡水溫水性魚類生命活動的影響[J]. 水生態學雜志, 2021, 42(4): 117-122.
[6] 孔令杰. 黃顙魚人工繁殖技術研究[D]. 哈爾濱: 東北農業大學, 2003.
[7] 陳景元. 催產雌雄親魚的比例[J]. 中國水產, 1981(2): 26.
[8] 杜勁松, 李興玫, 楊耀武, 等. 雌雄魚的不同配比對大銀魚受精率的影響[J]. 淡水漁業, 1998, 28(5): 16-17.
[9] 毛叔良. 對蝦育苗防病新法——洗卵[J]. 漁業致富指南, 2002(14): 31.
[10] 王昭明, 王新軍, 陳惠, 等. 食鹽水洗卵法在鮭科魚人工繁殖中的應用試驗[J]. 水產學雜志, 2000, 13(2): 6-8.
[11] 莫品方, 仇恒濱, 何若鋼, 等. 不同洗卵液對豬卵母細胞體外成熟和[J]. 廣西農業科學, 2007, 38(5): 562-564.
[12] MIGAUD H, DAVIE A, TAYLOR J F. Current knowledge on the photoneuroendocrine regulation of reproduction in temperate fish species[J]. Journal of Fish Biology, 2010, 76(1): 27-68.
[13] BOEUF G, LE BAIL P Y. Does light have an influence on fish growth?[J]. Aquaculture, 1999, 177(1/4): 129-152.
[14] 李大鵬, 莊平, 嚴安生, 等. 光照、水流和養殖密度對史氏鱘稚魚攝食、行為和生長的影響[J]. 水產學報, 2004, 28(1): 54-61.
[15] TAKAHASHI A, KASAGI S, MURAKAMI N, et al. Effects of different green light intensities on the growth performance and endocrine properties of barfin flounder Verasper moseri[J]. General and Comparative Endocrinology, 2018, 257: 203-210.
[16] YOSEDA K, YAMAMOTO K, ASAMI K, et al. Influence of light intensity on feeding, growth, and early survival of leopard coral grouper(Plectropomus leopardus) larvae under mass-scale rearing conditions[J]. Aquaculture, 2008, 279(1/4): 55-62.
[17] COPELAND K A, WATANABE W O. Light intensity effects on early life stages of Black Sea bass, Centropristis striata(Linnaeus 1758)[J]. Aquaculture Research, 2006, 37(14): 1458-1463.
[18] WANG T, CHENG Y Z, LIU Z P, et al. Effects of light intensity on growth, immune response, plasma cortisol and fatty acid composition of juvenile Epinephelus coioides reared in artificial seawater[J]. Aquaculture, 2013, 414/415: 135-139.
[19] 殷艷慧, 蔣萬勝, 潘曉賦, 等. 水產養殖魚類生長性狀研究進展[J]. 中國水產科學, 2020, 27(4): 463-484.
[20] 程超. 養殖密度對西伯利亞雜交鱘幼魚生長性能的影響[D]. 南昌: 南昌大學, 2021.
[21] 郝玉江, 張國紅, 賈艷菊, 等. 種群密度對魚類影響的研究概述[J]. 河北師范大學學報(自然科學版), 2003, 27(4): 397-401.
[22] 莊平, 李大鵬, 王明學, 等. 養殖密度對史氏鱘稚魚生長的影響[J]. 應用生態學報, 2002, 13(6): 735-738.
[23] 潘曉賦, 楊君興, 李再云, 等. 池塘養殖環境下滇池金線鲃仔稚魚的食性轉化與生長[J]. 動物學研究, 2009, 30(4): 433-437.
[24] RAHMAN M A, MARIMUTHU K. Effect of different stocking density on growth, survival and production of endangered native fish climbing perch(Anabas testudineus, Bloch)fingerlings in nursery ponds[J]. Advances in Environmental Biology, 2010, 4(2): 178-186.
[25] 邵鄰相, 謝煒, 葉菲菲. 養殖密度對地圖魚幼魚生長發育的影響[J]. 水產科學, 2005, 24(4): 7-9.