大口黑鱸又被稱為加州鱸、黑鱸,其肉質好、無肌間剌,深受消費者喜愛。隨著水產養殖規模的擴大及集約化程度的提高,大口黑鱸的病害問題逐漸凸顯,特別是病毒性疾病(如虹彩病毒LMBV病等)。這些疾病尤其在苗種培育階段會導致高達90%的死亡率,造成巨大經濟損失。因此,病害防控是大口黑鱸產業健康發展的關鍵。
“目前,大多數檢測方法依賴于中心化實驗室,通常需要超過兩天的時間來得出結果,嚴重影響了時效性。”上海海洋大學水產與生命學院胡鵬教授表示,養殖戶往往只能依靠經驗判斷疾病的暴發,缺乏科學依據。“面對這一挑戰,實用化檢測技術需要解決兩個關鍵問題,即準確、實時的結果輸出,以及便攜性和適應資源有限環境的可擴展性,特別是養殖戶的塘口檢測需求。”
為應對上述產業需求,上海海洋大學水產與生命學院胡鵬教授團隊與杭州逸檢科技有限公司的宋金召教授團隊合作,開發了一種新型的手持等溫核酸擴增裝置WeD-1。該設備使用LAMP-PfAgo技術進行病原檢測,并能通過熒光追蹤實現水生病原體的雙重可視檢測。WeD-1裝置的便攜性、可重復使用性、用戶友好設計以及合理的成本使其成為一種理想的塘口現場快速檢測工具。WeD-1的設計允許快速而可靠地診斷水生病原體,其檢測系統的簡化大大減少了對大型設備、專門的實驗室環境和訓練有素的技術人員的需求。
試驗結果表明,該設備在檢測LMBV DNA時顯示出顯著的敏感性和特異性。此外,其獨特的設計可通過使用不同的檢測靶標顯示不同顏色來識別雙重病原感染。比較WeD-1和傳統PCR方法的檢測結果顯示,WeD-1的檢出率與PCR檢測結果一致,而且其檢測精度優于1個拷貝/μL。同時,基于技術優勢,能在40 min以內讀出結果,準確率>96%,并能同時檢測8個樣本,單樣本檢測成本控制在20元/反應以下。
“現在,我們可以在塘口為大口黑鱸高效且精準地做上‘核酸檢測。”胡鵬介紹,WeD-1裝置及其檢測技術提供了一種有效的工具,可用于大口黑鱸主要病原體的現場準確快速檢測,對于加速病害的快速診斷和減少水產行業因病原微生物造成的損失具有重要意義。
相關研究成果發表于Biosensors and Bioelectronics期刊。
(來源:上海海洋大學)