帕金森病患者糞便鈣衛蛋白和乳鐵蛋白水平及其與血清IL-6和TNF-α水平的相關性分析

［摘要］ 目的： 探討帕金森病（Parkinson′s disease，PD）患者糞便中鈣衛蛋白（calprotectin，CPT）和乳鐵蛋白（lactoferrin，LF）的水平，并分析二者與PD臨床癥狀及血清炎性因子的相關性。方法： 選擇2019年1月至2022年1月于江蘇大學第四附屬醫院神經內科初次就診的PD患者55例（PD組），另選擇同期健康受試者48例（對照組）。收集兩組一般資料，檢測兩組糞便CPT和LF水平以及PD組血清腫瘤細胞壞死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）水平，對PD組行帕金森病統一評分量表（Unified Parkinson′s Disease Rating Scale，UPDRS）評分。治療2個月后，再次檢測PD組糞便CPT和LF水平，行UPDRS評分。采用Pearson相關系數法分析PD組治療前后糞便CPT、LF水平和UPDRS評分的相關性。采用受試者工作特征（ROC）曲線評價糞便CPT、LF水平對PD的診斷價值。結果： PD組和對照組一般資料比較差異無統計學意義（P均gt;0.05）。治療前，PD組糞便CPT和LF水平顯著高于對照組（P均lt;0.01）；治療后，PD組糞便CPT和LF水平以及UPDRS評分均較治療前顯著降低（P均lt;0.01）。UPDRS評分與糞便CPT、LF呈正相關（r=0.605，0.619，P均lt;0.01）；ΔUPDRS評分與ΔCPT、ΔLF呈正相關（r=0.735，0.760，P均lt;0.01）。治療前PD組糞便CPT、LF水平分別與血清TNF-α、IL-6呈正相關（CPT：rTNF-α=0.689，rIL-6=0.591；LF：rTNF-α=0.673，rIL-6=0.616；P均lt;0.01）。糞便CPT、LF的ROC曲線下面積分別為0.892，0.874，敏感度分別為89.58%，88.32%，特異度分別為83.29%、74.55%。結論： PD患者糞便中CPT和LF水平升高，其與患者癥狀評分以及血清TNF-α、IL-6呈一定的相關性。

［關鍵詞］ 帕金森病；糞便；鈣衛蛋白；乳鐵蛋白；腫瘤細胞壞死因子-α；白介素-6

［中圖分類號］ R742.5

［文獻標志碼］ A

［文章編號］ 1671-7783（2024）02-0156-05

DOI： 10.13312/j.issn.1671-7783.y230041

［引用格式］趙晶，束瑜，錢進軍. 帕金森病患者糞便鈣衛蛋白和乳鐵蛋白水平及其與血清IL-6和TNF-α水平的相關性分析［J］. 江蘇大學學報（醫學版）， 2024， 34（2）： 156-160.

Level of fecal calprotectin and lactoferrin in patients with Parkinson′s disease and their correlation with serum IL-6 and TNF-α levels

ZHAO Jing， SHU Yu， QIAN Jinjun

（Department of Neurology， the Fourth" Affiliated Hospital of Jiangsu University， Zhenjiang Jiangu 212001， China）

［Abstract］ Objective： To explore the level of fecal calprotectin （CPT） and lactoferrin （LF） in patients with Parkinson′s disease （PD）， and analyze their correlation with clinical symptoms of PD and serum inflammatory factors. Methods： A total of 55 PD patients who first visited the Department of Neurology， the Fourth Affiliated Hospital of Jiangsu University from January 2019 to January 2022 were selected （PD group）， and 48 healthy subjects during the same period （control group） were enrolled in the study. The general data of the two groups were collected and compared， and the fecal CPT and LF levels of the two groups as well as the serum tumor cell necrosis factor-α （TNF-α） and interleukin-6 （IL-6） levels of the PD group were detected. After 2 months of treatment， fecal CPT and LF levels in the PD group were measured again. The PD group was scored on the Unified Parkinson′s Disease Rating Scale （UPDRS） before and after treatment. Pearson correlation was used to analyze the correlation between fecal CPT， LF levels and UPDRS scores in the PD group， as well as the correlation between ΔCPT， ΔLF and ΔUPDRS scores. The receiver operating characteristic （ROC） curve was used to evaluate the diagnostic value of fecal CPT and LF levels for PD. Results： There were no significant differences in clinical characteristics between PD group and control group （all Pgt;0.05）. Before treatment， the fecal levels of CPT and LF in PD group were significantly higher than those in control group （all Plt;0.01）. After treatment， the fecal levels of CPT and LF in PD group， as well as the UPDRS score， were significantly declined compared with those before treatment （all Plt;0.01）. The UPDRS score had a positive correlation with fecal CPT and LF （r=0.605， 0.619， both Plt;0.01）. ΔUPDRS score had a positive correlation with ΔCPT and ΔLF （r=0.735， 0.760， both Plt;0.01）. The fecal CPT and LF levels in PD group before treatment were positively correlated with serum TNF-α and IL-6 respectively （CPT： rTNF-α=0.689， rIL-6=0.591; LF： rTNF-α=0.673， rIL-6=0.616; all Plt;0.01）. The areas under the ROC curves of fecal CPT and LF were 0.892 and 0.874， the sensitivities were 89.58% and 88.32%， and the specificities were 83.29% and 74.55%， respectively. Conclusion： Fecal CPT and LF levels are increased in PD patients， which is correlated with symptom scores and serum TNF-α and IL-6 levels.

［Key words］ Parkinson′s disease; feces; calprotectin; lactoferrin; TNF-α; IL-6

帕金森病（Parkinson′s disease，PD）是第二常見的神經退行性疾病，其臨床癥狀復雜，包括運動癥狀和非運動癥狀，嚴重影響患者的生活質量［1］。腸道功能障礙作為PD最常見非運動癥狀，患病率達77%～81%，因此從腸道角度對PD的發病機制進行剖析得到越來越多的關注［2-3］。糞便鈣衛蛋白（calprotectin，CPT）和乳鐵蛋白（lactoferrin，LF）是用于反映患者腸道炎癥狀態的常見檢測指標，既往多用于炎癥性腸病的診斷和評估［4-5］。隨著腦腸軸研究的不斷開展，CPT和LF在神經系統疾病中的作用也日益顯現［6-7］。目前，研究發現，腸道炎癥在PD發生機制中起重要作用［8-9］。糞便CPT和LF作為反映腸道炎癥的生物學指標，其在PD患者中變化尚不清楚。因此，本研究擬檢測PD患者糞便中CPT和LF表達，并分析二者與PD臨床癥狀及血清炎性因子的相關性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2019年1月至2022年1月于江蘇大學第四附屬醫院神經內科初次就診的PD患者。入組標準：患者診斷符合運動障礙協會提出的PD診斷標準［8］；均為初次診斷，此前未服用過治療PD的藥物。排除標準：由創傷、理化藥物等原因誘發的PD；既往有腦卒中、中樞神經系統感染等其他神經系統疾病；既往有胃潰瘍、急慢性腸炎和腸結合等胃腸道疾病史；近1個月內服用過抗炎藥物；近1個月內服用過質子泵抑制劑。最終入組PD患者55例，行規范化PD藥物治療2個月，門診隨診，根據癥狀調整治療藥物。另選擇同期48例健康受試者作為對照組，均來源于本院職工家屬。本研究通過江蘇大學第四附屬醫院倫理委員會審核（倫理批號：JDSY2019054），所有受試者均充分知情并簽署知情同意書。

1.2 一般資料收集

收集PD組和對照組年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓史、糖尿病史及冠心病史，并觀察治療2個月期間有無新發腸道疾病。

1.3 主要試劑及儀器

糞便CPT和LF的ELISA檢測試劑盒購自武漢菲恩生物科技有限公司；血清IL-6和TNF-α檢測試劑盒購自美國Proteintech公司；高速冷凍離心機購自美國Thermo公司。

1.4 糞便CPT和LF水平檢測

所有受試者在入組后48 h內留取新鮮糞便標本，取樣后6 h內進行液氮速凍，于-80 ℃保存。PD組留取藥物治療前和治療2個月后的糞便標本。分別取樣100 mg于1 mL糞便提取緩沖液中，通過渦流混合器對樣本進行5 min均質化處理；隨后勻漿以10 000×g高速離心15 min；取上清液于-80 ℃保存。采用ELISA法測定上清液中CPT和LF表達。ΔCPT=治療前糞便CPT水平－治療后糞便CPT水平，ΔLF=治療前糞便LF水平－治療后糞便LF水平。

1.5 統一帕金森病評分量表評分

所有PD患者在治療前和治療2個月后均進行統一帕金森病評分量表（Unified Parkinson′s Disease Rating Scale，UPDRS）評分［10］，由兩位高年資神經內科醫師進行評分并記錄。ΔUPDRS評分=治療前UPDRS評分－治療后UPDRS評分。

1.6 血清TNF-α和IL-6水平檢測

采集PD組患者治療前空腹肘正中靜脈全血5 mL，于室溫靜置30 min；行3 000 r/min離心10 min，取上層血清，采用ELISA法檢測血清TNF-α、IL-6水平。

1.7 統計學方法

采用SPSS 21.0和GraphPad Prism 7.0軟件包進行統計學分析。所有數據均行方差齊性和正態性檢驗。分類變量以百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；連續性變量采用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，同組自身治療前后比較采用配對t檢驗。Pearson相關分析用于評估相關性；繪制ROC曲線。采取雙側檢驗，Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較

PD組和對照組年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓史、糖尿病史、冠心病史比較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05），且兩組均無新發腸道疾病。見表1。

2.2 兩組糞便CPT和LF水平比較

治療前PD組糞便CPT和LF水平明顯高于對照組（Plt;0.01），治療2個月后PD組糞便CPT和LF水平較治療前顯著降低（Plt;0.01）。見表2。

2.3 PD組治療前后UPDRS評分變化及其與糞便CPT和LF水平的相關性分析

治療后PD組患者UPDRS評分［（22.42±7.68）分］較治療前［（28.34±5.94）分］顯著降低（t=12.708，Plt;0.01）。相關性分析結果顯示，UPDRS評分與糞便CPT、LF呈正相關（r=0.605，0.619，P均lt;0.01）。ΔUPDRS評分與ΔCPT、ΔLF呈正相關（r=0.735，0.760，P均lt;0.01）。見圖1。

2.4 PD組治療前糞便CPT和LF水平血清TNF-α、IL-6相關性分析

結果顯示，治療前PD組患者糞便CPT水平與血清TNF-α、IL-6呈一定正相關（r=0.689，0.591，P均lt;0.01），治療前糞便LF水平亦與血清TNF-α、IL-6呈一定正相關（r=0.673，0.616，P均lt;0.01）。見圖2。

2.5 糞便CPT和LF的ROC曲線分析

ROC曲線結果顯示，CPT曲線下面積為0.892，敏感度為89.58%，特異度為83.29%，截斷值為57.89 μg/g；LF曲線下面積為0.874，敏感度為88.32%，特異度為74.55%，截斷值為65.37 μg/g。見圖3。

3 討論

近年來，糞便炎性標志物在神經疾病中受到越來越多的關注。Park等［6］研究發現，糞便CPT在腦卒中急性期升高，與腦卒中的疾病程度相關。郭小燕等［7］研究發現，卒中后認知障礙患者糞便CPT表達增高，且與患者認知損傷和外周免疫激活程度相關。此外，研究顯示，PD患者存在腸道功能障礙，并且腸道的炎癥反應、菌群失調等改變可能通過影響腸道微環境進而影響中樞神經系統［8］。本研究結果發現，PD患者糞便CPT和LF水平較對照組顯著升高，且治療后較治療前明顯降低，進一步證實PD患者存在腸道炎癥性改變，且糞便CPT和LF在PD中的變化具有一致性。UPDRS評分是PD臨床研究和療效評估使用最廣泛的評定量表［10］。本研究結果顯示，PD患者糞便CPT和LF水平與UPDRS呈正相關，且以ΔCPT和ΔLF與ΔUPDRS更為顯著。由此提示，糞便CPT和LF水平不僅與臨床癥狀的嚴重程度存在關聯，且其對PD藥物的治療效果可能有一定潛在的評估價值。

此外，本研究結果顯示，糞便CPT和LF兩者較為良好的ROC曲線下面積（0.892和0.874）提示糞便CPT和LF水平未來或可應用于臨床PD患者的輔助診斷，而糞便CPT水平具有更高的曲線下面積、敏感度和特異度，提示單一指標檢測情況下，糞便CPT水平可能是更優的選擇。此外，CPT和LF具有較高的穩定性和對酶降解的抵抗力，在糞便中易測量，在應用于大樣本篩查中可能更具優勢。研究發現，外周炎癥可通過跨血腦屏障引發PD腦內炎癥細胞激活進而促進PD的發生和進展［11-13］。本研究結果顯示，糞便CPT和LF與血清炎癥因子TNF-α和IL-6呈中度正相關，提示腸道的炎癥性變化可能影響PD患者外周血循環中的炎癥，并可能進一步影響中樞神經系統，有待在動物和細胞層面研究中去進一步探索和證實。

綜上所述，本研究結果表明，PD患者糞便CPT和LF水平增高，與PD臨床癥狀和外周炎性具有一定相關性，為PD臨床篩查和輔助診斷提供了一個可能的糞便標志物。同時，本研究存在一些不足之處：入組患者僅限于初診PD患者，未對不同藥物治療下的PD患者的糞便CPT和LF水平進行比較；未具體分析具有不同腸道癥狀PD患者的糞便CPT和LF表達差異，有待后續進一步研究。

［參考文獻］

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［收稿日期］ 2023-02-08" ［編輯］ 劉星星

［基金項目］鎮江市社會發展項目（SH2023070）

［作者簡介］趙晶（1980—），女，碩士，江蘇鎮江人，副主任醫師，主要從事腦血管病研究；錢進軍（通訊作者），主任醫師，E-mail： qian-jinjun@163.com