冠狀動脈支架植入術病人血清MMP-3、Annexin Ⅱ水平及其與術后再狹窄的相關性

摘要 目的：分析冠狀動脈支架植入術病人血清基質金屬蛋白酶-3（MMP-3）、膜聯蛋白A2（AnnexinⅡ）水平及其與術后再狹窄的相關性。方法：選取唐山市中醫醫院2019年10月—2021年10月行冠狀動脈支架植入術的102例病人。術后隨訪1年，依據術后再狹窄發生情況分為無再狹窄組（80例）和再狹窄組（22例）。采用酶聯免疫吸附法檢測血清MMP-3、AnnexinⅡ表達水平，分析術后再狹窄與血清MMP-3、AnnexinⅡ的相關性。采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清MMP-3、AnnexinⅡ對冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的預測價值。結果：隨訪1年，102例病人術后再狹窄發生率為21.57%。再狹窄組血清MMP-3、AnnexinⅡ、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素（IL）-6、IL-8表達水平及Gensini評分、斑塊面積（PLA）、內膜面積（IPA）較無再狹窄組明顯升高，最小管腔面積（MLA）、外彈力膜橫截面積（EEM-CSA）較無再狹窄組明顯減小，差異均有統計學意義（P＜0.05）。Pearson相關性分析結果顯示，MMP-3與IL-6、Gensini評分、IPA呈正相關（P＜0.05），MMP-3與EEM-CSA呈負相關（P＜0.05），Annexin Ⅱ與TNF-α、IL-6、Gensini評分、IPA呈正相關（P＜0.05）。ROC曲線分析結果顯示，MMP-3、AnnexinⅡ聯合預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的效能優于單指標獨立預測（P＜0.05）。結論：冠狀動脈支架植入術病人血清MMP-3、AnnexinⅡ水平異常高表達，與術后再狹窄的發生密切相關。

關鍵詞 冠狀動脈支架植入術；支架內再狹窄；基質金屬蛋白酶-3；膜聯蛋白A2

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.20.024

基金項目 河北省中醫藥管理局資助項目（No.2021391）

作者單位 1.唐山市中醫醫院（河北唐山 063000），E-mail：smed2sm@163.com；2.唐山仁德醫療康復醫院

引用信息 夏文君，盧嘉成.冠狀動脈支架植入術病人血清MMP-3、Annexin Ⅱ水平及其與術后再狹窄的相關性［J］.中西醫結合心腦血管病雜志，2024，22（20）：3776-3780.

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（coronary atherosclerotic heart disease，CHD）是由于冠狀動脈發生病理性改變，動脈粥樣硬化引起動脈血流阻滯，導致心臟血流不足，繼發心肌缺血缺氧從而發生心力衰竭，嚴重影響人們生命健康，尤其是中老年人群^［1］。據統計，CHD是目前發病和致死率最高的疾病之一^［2］。治療CHD的主要措施為經皮冠狀動脈介入術，但術后病人仍有較高的再狹窄率。目前國內藥物洗脫支架應用廣泛，雖然一定程度減少了冠狀動脈急性夾層和閉塞的發生，但由于支架植入不可避免引起血管損傷，病人術后仍存在7%～10%再狹窄風險^［3］。因此，探尋一種評估冠狀動脈支架植入術后再狹窄發生的生物學指標，對病人預后具有重要意義。膜聯蛋白A2（Annexin Ⅱ）是一種鈣依賴性磷脂結合蛋白，研究表明，Annexin Ⅱ參與機體糖脂代謝，介導炎癥反應，與冠狀動脈粥樣硬化的形成有關^［4-6］?；|金屬蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP-3）與CHD病人斑塊不穩定有關，在斑塊破裂過程中發揮重要作用，參與CHD的發生發展過程^［7］。因此，本研究通過觀察我院102例行冠狀動脈支架植入術病人Annexin Ⅱ、MMP-3的表達水平與病人術后再狹窄的相關性，以期為早期診斷和治療術后再狹窄提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取唐山市中醫醫院2019年10月—2021年10月行冠狀動脈支架植入術的病人102例作為研究對象，男59例，女43例；體質指數（BMI）21.58～28.76（25.64±2.28）kg/m²；年齡56～80（68.75±8.68）歲；吸煙史58例，飲酒史40例。術后隨訪1年，根據是否發生再狹窄分為再狹窄組（22例）和無再狹窄組（80例）。再狹窄診斷標準^［8］：支架內或支架附近5 mm范圍冠狀動脈造影顯示靶血管狹窄≥50%。所有病人術后接受常規抗血小板類藥物（阿司匹林、氯吡格雷）、他汀類藥物及β受體阻滯劑等藥物治療。本研究獲得唐山市中醫醫院倫理委員會審查通過，批件號：201904002。

1.2 納入與排除標準

納入標準：1）冠狀動脈造影、臨床癥狀均符合《冠狀動脈粥樣硬化性心臟病診斷標準》^［9］，CHD疾病類型包括非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）、ST段抬高型心肌梗死（STEMI）、不穩定型心絞痛（UAP）；2）冠狀動脈造影（CAG）顯示狹窄率≥75%；3）符合經皮冠狀動脈介入術手術指征，初次接受藥物洗脫支架植入術；4）年齡55～80歲；5）無生命威脅；6）病人自愿簽署知情同意書。排除標準：1）既往冠狀動脈旁路移植手術史；2）合并良、惡性腫瘤；3）合并凝血功能障礙者；4）認知功能障礙，依從性差者；5）合并肝腎功能不全，嚴重心臟衰竭（射血分數＜35%）或其他類型心臟疾??；6）合并免疫功能障礙；7）多次冠狀動脈介入手術史或心臟搭橋史；8）病人臨床資料缺失或失訪。

1.3 方法

1.3.1 血清MMP-3、AnnexinⅡ水平檢測

抽取病人入院第2日清晨空腹外周肘部靜脈血3 mL，2 500 r/min離心15 min，吸取上清液置于凍存管中，于－80 ℃保存待測。使用酶聯免疫吸附實驗檢測MMP-3、AnnexinⅡ表達水平，試驗步驟按照試劑盒要求進行，試劑盒購自上海生工生物工程有限公司。

1.3.2 血脂、炎性因子指標檢測

血液樣本采集方法同1.3.1，使用全自動生化分析儀檢測三酰甘油（triglycerides，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）表達水平。通過酶聯免疫吸附法檢測血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白細胞介素-8（interleukin-8，IL-8）表達水平，實驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行，試劑盒購自上海生工生物工程有限公司。

1.3.3 冠狀動脈影像學指標檢測

采用Judkins法行CAG，并使用冠狀動脈Gensini評分法對每支血管病變程度進行評分，包括病變部位、支數及狹窄程度，采用血管病變程度得分與狹窄程度得分之積進行分級。輕度病變＜13分，中度病變13～42分，重度病變＞42分^［10］。采用冠狀動脈超聲成像導管和血管內超聲（IVUS）系統測量病人支架內及支架周圍血管狹窄情況，包括斑塊面積（PLA）、內膜面積（IPA）、最小管腔面積（MLA）、外彈力膜橫截面積（EEM-CSA）。

1.4 統計學處理

采用SPSS 25.0軟件進行統計分析。符合正態分布的定量資料用均數±標準差（x±s）表示，多組間及進一步兩兩間的定量資料比較使用單因素方差分析和SNK-q檢驗；定性資料以例數、百分比（%）表示，組間比較采用χ²檢驗；Pearson相關性分析法分析血清MMP-3、AnnexinⅡ與冠狀動脈影像學指標及炎性因子的相關性；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清MMP-3、AnnexinⅡ水平單獨及聯合預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的價值，曲線下面積（AUC）比較采用Z檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄發生情況

術后隨訪12個月，102病人中22例發生再狹窄，占21.57%（22/102），80例未發生再狹窄，占78.43%（80/102）。

2.2 兩組臨床資料比較

兩組性別、BMI、年齡、CHD疾病類型、吸煙史、飲酒史、合并糖尿病、合并高血壓、發病至接受動脈支架植入術時間、病變長度、病變內徑、術后用藥類型比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），再狹窄組TG、TC、LDL-C表達水平較無再狹窄組升高，HDL-C表達水平較無再狹窄組降低，差異均有統計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

2.3 兩組影像學指標及炎性因子水平比較

再狹窄組血清MMP-3、AnnexinⅡ、TNF-α、IL-6、IL-8表達水平較無再狹窄組升高，Gensini評分、PLA、IPA較無再狹窄組增大，差異均有統計學意義（P＜0.05）。再狹窄組MLA、EEM-CSA小于無再狹窄組，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

2.4 MMP-3、AnnexinⅡ與影像學指標及炎性因子的相關性

MMP-3與IL-6、Gensini評分、IPA呈正相關（P＜0.05），與EEM-CSA呈負相關（P＜0.05），AnnexinⅡ與TNF-α、IL-6、Gensini評分、IPA呈正相關（P＜0.05）。詳見表3。

2.5 ROC曲線分析MMP-3、AnnexinⅡ預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的價值

血清MMP-3預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的AUC為0.781，敏感度為81.82%，特異度為67.50%，截斷值為34.35 ng/μL（95%CI 0.688～0.857）；AnnexinⅡ預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的AUC為0.712，敏感度為77.27%，特異度為62.50%，截斷值為2.20 pg/mL（95%CI 0.614～0.797）；二者聯合預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的AUC為0.858，敏感度為81.82%，特異度為82.50%，二者聯合預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的效能明顯優于單指標獨立預測（Z＝2.041，P＝0.041；Z＝2.362，P＝0.018）。詳見表4、圖1。

3 討 論

影響冠狀動脈介入術病人遠期預后的危險因素是術后再狹窄，如何有效降低再狹窄發生率是治療冠心病、心肌梗死等冠狀動脈疾病的重要挑戰。隨著支架技術的發展，冠狀動脈支架植入術可明顯降低病人術后再狹窄的發生率，但仍有部分病人會發生再狹窄^［11］。研究認為，冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄發生的主要機制是血管損傷后引起血管內壁過度增生，與炎癥反應、血管內皮損傷及平滑肌細胞遷移增殖等有關^［12-13］。本研究中102例病人術后經12個月血管造影觀察顯示有22例病人發生再狹窄，術后再狹窄發生率為21.57%。因MMP-3、Annexin Ⅱ與血管內皮損傷及心血管疾病存在相關性，故推測MMP-3、AnnexinⅡ與冠心病病人冠狀動脈支架植入術后再狹窄有關。

Annexin Ⅱ是一種鈣依賴性磷脂結合蛋白，與糖脂代謝過程有關，促進巨噬細胞遷移，誘導炎癥反應^［14］，介導TNF-α、IL-6和IL-8等多種細胞炎性因子產生，在動脈粥樣硬化病理過程發揮重要作用。冠心病病人血清AnnexinⅡ呈高表達，且隨著病人病情變化而變化^［15］。相關研究認為，AnnexinⅡ與血管內膜形成有關，通過介導血管平滑肌細胞增殖和遷移，提高斑塊不穩定性^［16］，與健康人群比較，頸動脈斑塊不穩定病人血清AnnexinⅡ表達水平明顯升高^［17］?；|金屬蛋白酶家族在冠心病發展過程中發揮重要作用，能夠促進血小板聚集，形成斑塊，參與動脈血管重塑過程，MMP-3能夠激活基質金屬蛋白酶家族成員，增加斑塊不穩定性，進而形成動脈粥樣硬化^［5］。研究證明，MMP-3水平是冠狀動脈疾病病人結局的獨立預測因子^［18］。基因多態性分析結果顯示，MMP-3基因啟動子可以發生自然變異，啟動子5A/6A與CHD易感性有關，增加CHD患病風險^［19］。本研究結果顯示，術后再狹窄病人血清MMP-3、AnnexinⅡ、TNF-α、IL-6和IL-8表達水平均明顯高于術后無再狹窄組，Pearson相關分析結果顯示，MMP-3、AnnexinⅡ與炎性因子TNF-α、IL-6呈正相關。提示血清MMP-3、AnnexinⅡ表達水平與冠狀動脈疾病發生及冠狀動脈支架植入術后再狹窄發生有關，分析原因可能與支架植入引起的血管內膜損傷有關，內膜損傷誘導局部產生炎癥反應^［20］，AnnexinⅡ促進巨噬細胞遷移，誘導炎性因子產生，同時促進平滑肌細胞遷移，MMP-3促進血小板聚集參與血管重塑過程，持續高水平AnnexinⅡ、MMP-3引起血管內膜增生及不穩定性斑塊形成，介導術后再狹窄發生。本研究ROC曲線分析顯示，血清MMP-3、AnnexinⅡ聯合對冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄具有較高預測效能。提示臨床檢測病人血清MMP-3、AnnexinⅡ水平預測病人術后再狹窄存在可行性。

診斷CHD病人術后再狹窄的金標準為CAG和IVUS，Gensini評分用于評估冠狀動脈血管狹窄程度，積分隨冠狀動脈狹窄程度加重而增加。PLA、IPA、MLA、EEM-CSA是IVUS檢查評估冠狀動脈狹窄的重要指標。冠狀動脈狹窄程度越嚴重，PLA、IPA越大，MLA、EEM-CSA越小^［21］。本研究結果顯示，再狹窄組Gensini評分、PLA、IPA明顯大于非再狹窄組，MLA、EEM-CSA明顯小于非再狹窄組；相關性分析顯示，AnnexinⅡ、MMP-3與Gensini評分、IPA呈正相關，與EEM-CSA呈負相關。提示AnnexinⅡ、MMP-3與術后冠狀動脈再狹窄發生關系密切，AnnexinⅡ、MMP-3可以作為早期預測術后再狹窄的血清標志物。研究還顯示，再狹窄病人血脂指標LDL-C、TG、TC表達水平明顯升高，異常血脂代謝與冠狀動脈支架植入術后病人再狹窄有關，支架植入操作引起血管內皮損傷，LDL-C、TG、TC等脂類物質在血管內皮下沉積，引起動脈粥樣硬化，從而發生再狹窄^［22］。研究表明，伴有高血壓史病人接受冠狀動脈支架植入術術后再狹窄發生率為血壓正常病人的2～5倍^［23］。冠狀動脈支架植入術后病人接受抗血小板聚集藥物、他汀類藥物等治療的同時，應關注血脂變化，相應增加降血脂治療，以更好地改善炎癥指標，抑制血管病變。

綜上所述，冠狀動脈支架植入術病人血清MMP-3、AnnexinⅡ水平異常高表達，與術后再狹窄的發生密切相關，聯合血清MMP-3、AnnexinⅡ對冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄具有較好預測效能。本研究局限性為未對病人血清MMP-3、AnnexinⅡ變化進行動態監測，但對研究結果無顯著影響。

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（收稿日期：2023-03-07）

（本文編輯 王麗）