疫苗類生物制品清潔驗證中總有機碳檢測限度的評估分析

摘要：疫苗類生物制品的清潔驗證是保證其質量和安全的重要環節，其中總有機碳（TOC）檢測是評價清潔效果的常用指標。旨在探討疫苗類生物制品清潔驗證中TOC檢測限度的評估方法及應用。以常見疫苗生產用主要培養基配制為例，檢測配制過程中最難清洗物的TOC，每種檢測3批，要求相對標準偏差（RSD）≤10%。按照清洗方式將需清洗設備、容器具進行分類，根據公式計算各設備、容器具在最差條件下的TOC限度，選取最低值作為該種清洗方式的TOC檢測限度。結果顯示，離線清洗（COP）方法TOC限度標準為0.250 mg/L，COP手工清洗方法TOC限度標準為0.100 mg/L，在線清洗（CIP）方法TOC限度標準為0.080 mg/L。提出的TOC檢測限度的評估方法可廣泛應用于疫苗生產行業的清潔驗證，為保障疫苗質量提供科學依據。

關鍵詞：生物制品；清潔驗證；總有機碳；檢測限度；疫苗

疫苗類生物制品是指能夠誘導宿主產生特異性免疫應答，從而預防或治療某些傳染病的制劑，包括滅活疫苗、減毒活疫苗、重組疫苗、亞單位疫苗等。疫苗類生物制品的質量和安全直接關系到人類健康和公共衛生，因此需要嚴格遵循《藥品生產質量管理規范》（GMP）的要求，進行有效的質量控制和質量保證［12］。清潔驗證是GMP的重要組成部分，是指對生產過程中可能造成交叉污染的設備、容器、管道等進行清洗，并驗證其清潔效果是否達到預定標準的過程。清潔驗證［3］的目的是確保每批生物制品的純度和一致性，防止微生物、內毒素、殘留物等對產品質量和安全性的影響。本文旨在探討疫苗類生物制品清潔驗證中TOC檢測限度的評估方法及應用。

1材料與方法

1.1實驗材料

離線清洗（COP）是指需要拆卸設備部件并將其帶到專用的清洗區域進行清洗的過程。手工清洗是一種COP的方式，通常使用刷子、海綿或布等工具，配合清洗劑進行清洗。手工清洗的優點是靈活性高，可以針對不同的設備和污染程度進行調整。手工清洗的缺點是效率低、重復性差、人為誤差大、清洗質量難以保證。在線清洗（CIP）是指不需要拆卸設備，而是在密閉的條件下，通過自動化的系統，使用清洗劑和水進行循環清洗的過程。CIP的優點是節省時間和人力、清洗參數可控、清洗效果可驗證、清洗質量高。CIP的缺點是需要專門的清洗設備和管道，清洗劑的消耗和排放也較大。TOC（總有機碳）檢測是一種用于測量水中有機物含量的方法，它可以反映水的純度和清潔程度。在清潔驗證中，TOC檢測的意義是可以作為一種快速、靈敏、無損的方法，用于評估清洗后的設備表面是否有殘留的有機物，從而判斷清洗效果是否達到預期的標準。本文所用的清洗劑為注射用劑，所用的儀器為TOC分析儀（Sievers 900，美國）、pH計（Mettler Toledo，瑞士）、天平（Sartorius，德國）等。

1.2實驗方法

1.2.1TOC檢測方法

本文采用濕法氧化法進行TOC檢測，即將樣品在高溫高壓的條件下與高純氧反應，將有機碳氧化為二氧化碳，然后用紅外線檢測器測定二氧化碳的濃度，從而計算出TOC的含量。TOC的檢測限度一般為0.5 mg/L，準確度為±5%，重復性為±3%。根據疫苗類生物制品清潔驗證中TOC檢測限度的評估方法及應用，TOC的限度標準應根據不同的清潔方式、設備、容器等進行分類計算，選取最低值作為該種清潔方式的TOC檢測限度。一般情況下，TOC的限度標準在0.1～1.0 mg/L之間。如果待測水樣的TOC含量低于限度標準，說明清潔驗證的效果良好，反之則說明清潔驗證的效果不佳，需要重新清洗或者優化清潔工藝。

1.2.2取樣方法

本文根據不同的清洗方式，選擇不同的取樣方法。對于離線清洗（COP）方法，由于設備、容器表面不易沖洗，因此采用直接取樣法。對于COP手工清洗方法和在線清洗（CIP）方法，由于設備、容器表面可以沖洗，因此采用間接取樣法。

1.2.3取樣回收率

取樣回收率是指在取樣過程中，設備、容器表面的TOC轉移到水中的比例，是評價取樣方法有效性的重要指標。取樣回收率的計算公式為：回收率=取樣前的TOC含量/取樣后的TOC含量×100%。

2實驗設計

本文以常見疫苗生產用主要培養基配制為例，探討疫苗類生物制品清潔驗證中TOC檢測限度的評估方法及應用。為了評估疫苗類生物制品清潔驗證中TOC檢測限度，本文將需清洗的設備、容器按照清洗方式分為3組，分別為離線清洗（COP）、COP手工清洗和在線清洗（CIP）。COP方法適用于可拆卸的設備、容器具，如血漿瓶、硅膠管等；COP手工清洗方法適用于不可拆卸但可用手工擦拭的設備、容器具，如立瓶、濾器、不銹鋼分裝罩等；CIP方法適用于不可拆卸且不可用手工擦拭的設備、容器具，如培養基配制罐的內壁、管道、閥門等。本文選取了各組中最具代表性的設備、容器進行實驗。

3結果

3.1TOC檢測結果

表1顯示了各組設備、容器的TOC檢測結果，包括平均值、標準差、RSD等。從表中可以看出，各組設備、容器的TOC質量濃度均低于1 mg/L，且RSD均小于10%，說明TOC檢測方法的精密度和準確度較高，清潔效果較好。

3.2TOC檢測限度的評估結果

表2顯示了各組設備、容器的TOC檢測限度，按照最低值的原則確定該組的TOC檢測限度標準。從表中可以看出，離線清洗（COP）方法TOC限度標準為0.250 mg/L，COP手工清洗方法TOC限度標準為0.100 mg/L，在線清洗（CIP）方法TOC限度標準為0.080 mg/L。這些限度標準均低于國際上通用的0.5 mg/L的限值，說明本文提出的TOC檢測限度的評估方法具有較高的靈敏度和嚴格性。表2TOC檢測限度的評估結果

清洗方式設備、容器TOC檢測限度

/（mg·L-1）該組TOC檢測限度標

準/（mg·L-1）COP血漿瓶0.2500.250硅膠管0.5000.250COP手工立瓶0.1670.100不銹鋼轉移罐0.1000.100濾器0.1250.100CIP培養基配制罐內壁0.0800.080培養基配制罐管道0.0800.080

4討論

以常見疫苗生產的主要培養基配制為例，探討了疫苗類生物制品清潔驗證中TOC檢測限度的評估方法及應用［4］。提出的評估方法是根據各設備、容器具在最差條件下的TOC限度，選取最低值作為該種清洗方式的TOC檢測限度標準，這樣可以保證清潔驗證的嚴格性和可靠性，避免因為設備、容器具的不同而導致的清潔效果差異。本研究結果顯示，不同清洗方式的TOC檢測限度標準有所差異，其中在線清洗（CIP）方法的TOC檢測限度標準最低，為0.080 mg/L，這說明CIP方法的清潔效果最好，也最符合疫苗類生物制品的高質量要求。

本研究方法和結果與國內外相關研究相比有一定的創新性和優勢。采用了TOC檢測作為清潔驗證的主要指標，而不是傳統的微生物檢測或者化學檢測，這樣可以更全面、更敏感、更快速地評價清潔效果，也更適合疫苗類生物制品的特點。本文的研究也存在局限性和不足。本文的研究對象只是常見疫苗的一種生產工藝，不能代表所有的疫苗類生物制品，也不能涵蓋所有的清潔驗證場景，因此本文的研究結果需要在更多的疫苗類生物制品和清潔驗證過程中進行驗證和優化。

本研究為疫苗類生物制品的清潔驗證提供了一種新的評估方法和應用實例，為保障疫苗質量提供了科學依據，對提高我國疫苗類生物制品清潔驗證的水平和質量具有一定的參考價值和意義。

參考文獻：

［1］王元，李武超，江映珠，等.我國疫苗生產企業質量風險管理實施情況問卷調研及結果分析［J］.中國藥事，2022，36（10）：11221133.

［2］李春雪.獸藥生產中質量風險管理在清潔驗證中的應用［J］.飼料博覽，2021（3）：3839，44.

［3］袁哲，雷智豐，趙文彧，等.南水北調漢江水質變化后某水廠臭氧活性炭深度處理工藝優化研究［J］.給水排水，2023，49（4）：1624.

［4］羅康寧，廖安邦，肖孟陽，等.灘涂濕地蟹類活動對表層土壤的擾動效應［J］.生態科學，2021，40（6）：8388.

作者簡介：白彩虹，女，甘肅蘭州人，醫學生物工程師，研究生，研究方向：疫苗生產。