陜西省略陽(yáng)烏雞種雞場(chǎng)雞白痢、雞滑液囊支原體與雞毒支原體感染狀況調(diào)查與分析

摘 要：為了解陜西省略陽(yáng)烏雞種雞場(chǎng)雞白痢（Pullorum Disease，PD）、雞滑液囊支原體（Mycoplasma synoviae，MS）和雞毒支原體（Mycoplasma gallisepticum，MG）的流行情況，利用估計(jì)流行率的抽樣方法對(duì)略陽(yáng)烏雞種雞場(chǎng)開(kāi)展了調(diào)查。結(jié)果顯示，略陽(yáng)烏雞種雞場(chǎng)雞白痢個(gè)體陽(yáng)性率為4.73%（95%CI：3.1%～6.9%）；滑液囊支原體個(gè)體陽(yáng)性率為65.82%（95%CI：61.7%～69.8%）；雞毒支原體個(gè)體陽(yáng)性率為64.91%（95%CI：60.8%～68.9%）。風(fēng)險(xiǎn)因素調(diào)查發(fā)現(xiàn)，種雞場(chǎng)內(nèi)三種疾病的感染受到飼養(yǎng)管理方式、消毒措施以及長(zhǎng)期不當(dāng)使用抗菌藥物等因素的影響較大。因此，在實(shí)施種源病凈化時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)考慮這些因素，以更好地控制雞白痢、雞滑液囊支原體和雞毒支原體等種源性傳染病的流行。

關(guān)鍵詞：雞白痢;雞滑液囊支原體;雞毒支原體;陜西省

中圖分類號(hào)：S831.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A" 文章編號(hào)：0488-5368（2024）11-0089-05

收稿日期：2024-05-31 修回日期：2024-06-12

第一作者簡(jiǎn)介：師清博（1991-），女，獸醫(yī)師，碩士研究生，主要從事動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查工作。

通信作者：張智鵬。

Investigation and Analysis for Infection of Pullorum Disease， Mycoplasma synoviae

and Mycoplasma gallisepticum in Breeding Chicken Farms

in Lueyang County of Shaanxi Province

SHI Qingbo HE Yongjun" CHEN Xinzhong DENG Puyuan XIONG Weiman ZHANG Li LI Yanming ZHAO Li LIU Yang ZHANG Zhipeng

（1.Hanzhong Animal Disease Prevention and Control Center，Hanzhong，Shaanxi 723000，China;

2.Agricultural Comprehensive Service of Laozhuang Town， Chenggu， Shaanxi 723200， China;

3. Lueyang Animal Husbandry and Veterinary Technology Extension Center， Lueyang， Shaanxi 724300， China）

Abstract： To understand the prevalence of Pullorum Disease（PD）， Mycoplasma gallisepticum （MG） and Mycoplasma synoviae （MS） infections in breeding farms of Shaanxi province， an investigation was carried out at Lueyang Breeding Chicken Farm by using the sampling method to estimate prevalence.The results showed that the individual positive rate of PD， MG and MS in the farm were 4.73%（95%CI：3.1%～6.9%），64.91%（95%CI：60.8%～68.9%）and" 65.82%（95%CI：61.7%～69.8%）， respectively. The investigation of risk factors found that the infection of the three diseases in the breeder flock was greatly influenced by factors such as breeding methods， disinfection practices， and prolonged misuse of antibiotics. Therefore， when implementing avian embryo purification measures， these factors should be given priority to better control the spread of diseases like Pullorum Disease and avian mycoplasmosis.

Key words：Pullorum Disease; Mycoplasma synoviae; Mycoplasma gallisepticum; Shaanxi Province

雞白痢（Pullorum Disease，PD）是由雞白痢沙門氏菌引起的各種年齡階段雞均可發(fā)生的一種細(xì)菌性傳染病，雛雞感染后可造成嚴(yán)重白痢，甚至急性敗血癥，死亡率較高，成年雞被感染后多呈慢性或隱性感染，會(huì)長(zhǎng)期帶菌，導(dǎo)致產(chǎn)蛋率、受精率和孵化率下降。目前對(duì)家禽危害較大的兩種支原體為雞毒支原體，又稱雞敗血支原體（Mycoplasma gallisepticum，MG）和滑液囊支原體（Mycoplasma synoviae，MS），MS、MG感染后可導(dǎo)致肉雞生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、飼料利用率低和胴體降級(jí)等，產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能下降和淘汰率增加等[1，2]。MG在家禽中會(huì)引起以氣囊炎為特征的慢性呼吸道疾病，并伴有黏膜卡他性炎癥[1]，MS 主要造成關(guān)節(jié)炎、滑液囊膜炎，二者均可通過(guò)水平和垂直傳播，各個(gè)日齡的雞群都易感，無(wú)明顯的季節(jié)性。

略陽(yáng)烏雞在陜西省略陽(yáng)縣的17個(gè)鎮(zhèn)街均有飼養(yǎng)，略陽(yáng)烏雞種源主要分布在略陽(yáng)縣黑河流域的黑河、仙臺(tái)壩、觀音寺、兩河口等區(qū)域[5]。據(jù)2023年春季防疫信息統(tǒng)計(jì)，略陽(yáng)縣烏雞存欄100 羽以上的場(chǎng)戶有 46個(gè)，烏雞總存欄量約 11.4 萬(wàn)羽。建有1個(gè)略陽(yáng)烏雞核心育種場(chǎng)，10個(gè)略陽(yáng)烏雞良種繁育場(chǎng)，通過(guò)核心育種場(chǎng)和繁育場(chǎng)為全縣略陽(yáng)烏雞生態(tài)養(yǎng)殖場(chǎng)戶提供種源純正、品質(zhì)優(yōu)良的烏雞苗。目前對(duì)略陽(yáng)烏雞養(yǎng)殖危害最嚴(yán)重的種源性疫病為PD、MS和MG。做好略陽(yáng)烏雞種源性疫病的本底調(diào)查工作是有序推進(jìn)略陽(yáng)烏雞種源病凈化、提升略陽(yáng)烏雞這一優(yōu)良地方品種核心競(jìng)爭(zhēng)力，促進(jìn)漢中市略陽(yáng)烏雞產(chǎn)業(yè)持續(xù)健康發(fā)展的重要措施。本研究重點(diǎn)對(duì)這三種略陽(yáng)烏雞常見(jiàn)種源病的感染情況進(jìn)行調(diào)查，旨在為略陽(yáng)烏雞種源病的凈化提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本 對(duì)漢中市略陽(yáng)縣11個(gè)烏雞種雞場(chǎng)（即核心育種場(chǎng)和良種繁育場(chǎng)）進(jìn)行抽樣檢測(cè)和現(xiàn)場(chǎng)問(wèn)卷調(diào)查。場(chǎng)內(nèi)個(gè)體的選擇按照估計(jì)流行率的樣本量計(jì)算公式n=（Z ×p（1-p））/e ，取置信度（CL）95%，15%預(yù)期流行率為（p），10%可接受絕對(duì)誤差（e），計(jì)算得出每個(gè)場(chǎng)戶內(nèi)應(yīng)抽取的雞只數(shù)量為49只[3]，實(shí)際每場(chǎng)內(nèi)的抽樣數(shù)量為50只?，F(xiàn)場(chǎng)抽樣時(shí)，采取系統(tǒng)隨機(jī)抽樣方法，按一定的籠位間隔進(jìn)行抽樣。

1.1.2 主要試劑 雞白痢雞傷寒多價(jià)染色雞平板凝集試驗(yàn)抗原，批號(hào)20210906，強(qiáng)陽(yáng)性血清，批號(hào)20211112，弱陽(yáng)性血清，批號(hào)20210702（北京中海生物科技有限公司）；BioCheck D群沙門氏菌（GroupD）抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)FS8152（荷蘭百測(cè)）；BioCheck雞滑液囊支原體（MS）抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)FS8381（荷蘭百測(cè)）；BioCheck敗血支原體（MG）抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)FS8447（荷蘭百測(cè)）。

1.1.3 主要儀器 高速離心機(jī)LG10-2.4A"""""" ，北京醫(yī)用離心機(jī)廠；自動(dòng)洗板機(jī)，北京普朗新技術(shù)有限公司；Multiskan FC酶標(biāo)儀，美國(guó)Thermo ScientificTM公司；微量振蕩器，北京海淀電子醫(yī)療儀器廠。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法 具體如下。

1.2.1.1 雞白痢 采用中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《雞白痢和雞傷寒診斷技術(shù)》（NY/T 536-2017）血清平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行初篩，對(duì)出現(xiàn)50%及以上凝集的樣品再進(jìn)行D群沙門菌（GroupD）抗體ELISA檢測(cè)，具體操作步驟參考荷蘭百測(cè)公司BioCheck D群沙門菌（GroupD）抗體ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.2.1.2 禽支原體病 采用ELISA方法對(duì)MS、MG進(jìn)行抗體檢測(cè)，具體操作方法參考荷蘭百測(cè)公司雞滑液囊支原體、雞毒支原體抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.2.2 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查 調(diào)查方法如下。

1.2.2.1 調(diào)查對(duì)象及方式 針對(duì)略陽(yáng)縣11個(gè)種雞場(chǎng)（核心育種場(chǎng)和良種繁育場(chǎng)），采取現(xiàn)場(chǎng)查看、座談、訪談等方式進(jìn)行調(diào)查與信息收集。

1.2.2.2 問(wèn)卷設(shè)計(jì) 在采集樣本的同時(shí)開(kāi)展現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，設(shè)計(jì)統(tǒng)一的問(wèn)卷，對(duì)每個(gè)調(diào)查場(chǎng)的基本養(yǎng)殖信息與養(yǎng)殖場(chǎng)概況（建場(chǎng)年份、存欄量、雞苗來(lái)源企業(yè)、養(yǎng)殖方式等）、飼養(yǎng)管理（飲水來(lái)源、雞舍內(nèi)溫濕度監(jiān)測(cè)、飼養(yǎng)用具使用、藥物治療等）生物安全管理措施（消毒、防鳥(niǎo)防鼠、糞污處理、病死雞處理等）以及當(dāng)前養(yǎng)殖過(guò)程中存在的技術(shù)困難等問(wèn)題進(jìn)行調(diào)查。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)與分析 用 Excel 2019 軟件進(jìn)行檢測(cè)數(shù)據(jù)的整理、計(jì)算及圖表繪制；應(yīng)用IBM SPSS Statistics 25軟件對(duì)收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)比較不同陽(yáng)性率的差異顯著性，Plt;0.05代表差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 略陽(yáng)烏雞種雞場(chǎng)PD、MS、MG檢測(cè)結(jié)果

采用垂直試驗(yàn)的檢測(cè)方法，對(duì)血清平板凝集試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性的樣品再進(jìn)行D群沙門菌 （GroupD）抗體ELISA檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有26 份樣品為陽(yáng)性，個(gè)體陽(yáng)性率為4.73%（95%CI：3.1%～6.9%），11個(gè)種雞場(chǎng)中有7個(gè)種雞場(chǎng)檢測(cè)到陽(yáng)性樣品，群體陽(yáng)性率為63.64%（95%CI：30.8%～89.1%），陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)內(nèi)個(gè)體陽(yáng)性率從0.00%～26.00%不等；對(duì)采集的550份血清樣品進(jìn)行MS抗體檢測(cè)，有362 份樣品為陽(yáng)性，個(gè)體陽(yáng)性率為65.82%（95%CI：61.7%～69.8%），群體陽(yáng)性率為90.91%（10/11）（95%CI：58.7%～99.8%）；對(duì)采集的550份血清樣品進(jìn)行MG抗體檢測(cè)，有357份樣品為陽(yáng)性，個(gè)體陽(yáng)性率為64.91%（95%CI：60.8%～68.9%），11個(gè)種雞場(chǎng)均檢測(cè)到陽(yáng)性樣品，群體陽(yáng)性率為100.00%，陽(yáng)性場(chǎng)點(diǎn)內(nèi)個(gè)體陽(yáng)性率從4.00%～100.00% 不等。檢測(cè)詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 MS、MG檢測(cè)結(jié)果比較

所調(diào)查種雞場(chǎng)MS、MG的感染較為嚴(yán)重，由圖1可以看出，有5個(gè)場(chǎng)的MS、MG的場(chǎng)內(nèi)個(gè)體陽(yáng)性率均在60%以上。

2.3 不同飼養(yǎng)方式下PD、MS、MG檢測(cè)結(jié)果

由表2可知，在不同飼養(yǎng)方式下，PD、MS、MG的感染情況有所不同。PD的感染情況由高到低依次為網(wǎng)上平養(yǎng)（6.33%）、生態(tài)放養(yǎng)（6.00%）、籠養(yǎng)（0.67%）；MS的感染情況由高到低依次為生態(tài)放養(yǎng)（86.00%）、網(wǎng)上平養(yǎng)（63.67%）、籠養(yǎng)（56.67%）；MG的感染情況由高到低依次為網(wǎng)上平養(yǎng)（93.00%）、生態(tài)放養(yǎng)（45.00%）、籠養(yǎng)（22.00%）?？梢钥闯觯诨\養(yǎng)狀態(tài)下，三種病的陽(yáng)性率都低于另兩種飼養(yǎng)方式。

2.3.1 不同飼養(yǎng)方式下PD的感染情況 籠養(yǎng)、網(wǎng)上平養(yǎng)和生態(tài)放養(yǎng)條件下PD的陽(yáng)性率分別為0.67%（1/150）、6.33%（19/300）、6.00%（6/100），三組數(shù)據(jù)總體存在著統(tǒng)計(jì)差異（χ" =7.569，Plt;0.05）。生態(tài)放養(yǎng)條件下PD陽(yáng)性率與網(wǎng)上平養(yǎng)相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Pgt;0.05），籠養(yǎng)條件下PD陽(yáng)性率與網(wǎng)上平養(yǎng)、生態(tài)放養(yǎng)均存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Plt;0.05），見(jiàn)表3。

2.3.2 不同飼養(yǎng)方式下MS的感染情況 籠養(yǎng)、網(wǎng)上平養(yǎng)和生態(tài)放養(yǎng)條件下MS的陽(yáng)性率分別為56.67%（85/150）、63.67%（191/300）、86.00%（86/100），三組數(shù)據(jù)總體存在著統(tǒng)計(jì)差異（χ" =24.305，Plt;0.001）。網(wǎng)上平養(yǎng)條件下MS陽(yáng)性率與籠養(yǎng)相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Pgt;0.05），生態(tài)放養(yǎng)條件下MS陽(yáng)性率與籠養(yǎng)、網(wǎng)上平養(yǎng)均存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Plt;0.05），見(jiàn)表4。

2.3.3 不同飼養(yǎng)方式下MG的感染情況 籠養(yǎng)、網(wǎng)上平養(yǎng)和生態(tài)放養(yǎng)條件下MG的陽(yáng)性率分別為22.00%（33/150）、93.00%（279/300）、45.00%（45/100），三組數(shù)據(jù)總體存在著統(tǒng)計(jì)差異（χ" =242.587，Plt;0.001）。MG的陽(yáng)性率在三種不同的飼養(yǎng)方式下，兩兩之間均存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Plt;0.05），見(jiàn)表5。

2.4 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查情況

2.4.1 基本情況 本次調(diào)查的種雞場(chǎng)中，有54.5%的場(chǎng)啟用時(shí)間超過(guò)10 a，其余場(chǎng)的啟用年限為2～6 a；有兩個(gè)場(chǎng)為自繁自養(yǎng)，其余場(chǎng)的雞苗均來(lái)源于略陽(yáng)烏雞核心育種場(chǎng)。養(yǎng)殖方式主要有籠養(yǎng)、網(wǎng)上平養(yǎng)或生態(tài)放養(yǎng)，養(yǎng)殖模式均為全進(jìn)全出模式。大部分養(yǎng)殖場(chǎng)的飲用水來(lái)源為山泉水，少部分為井水或自來(lái)水。在商品雞或雞蛋的銷售方式方面，以上門收購(gòu)或本場(chǎng)外送的方式為主，部分養(yǎng)殖場(chǎng)戶還采用微信、直播平臺(tái)等網(wǎng)絡(luò)銷售方式。

2.4.2 生物安全措施 在消毒管理方面，多數(shù)養(yǎng)殖場(chǎng)均能做到進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)前換裝、換鞋、消毒；所有場(chǎng)點(diǎn)對(duì)生產(chǎn)區(qū)進(jìn)行不定期的消毒，其中大部分場(chǎng)戶雞舍每月（帶雞）消毒次數(shù)為4次，少數(shù)雞場(chǎng)每天消毒1次。所調(diào)查的種雞場(chǎng)均能做到種蛋孵化前消毒，孵化前孵化室及所有用具的消毒，場(chǎng)內(nèi)孵化、育雛育成及種雞飼養(yǎng)三區(qū)獨(dú)立，孵化廢棄物進(jìn)行無(wú)害化處理；在糞污處理方面，所調(diào)查的場(chǎng)均能實(shí)現(xiàn)機(jī)械清糞，多數(shù)場(chǎng)戶能夠做到每天清糞1次；在病死雞無(wú)害化處理方面，大部分場(chǎng)以掩埋的方式進(jìn)行處理，少數(shù)為焚燒處理。

2.4.3 略陽(yáng)烏雞種源病防控情況

在疾病發(fā)生方面，據(jù)養(yǎng)殖場(chǎng)反映，通常情況下，PD、MS及MG發(fā)病雞所處的階段為5～16周齡，且以MS感染較為常見(jiàn)；在藥物性預(yù)防或治療方面，除略陽(yáng)烏雞核心育種場(chǎng)外，其它種雞場(chǎng)均使用抗菌藥物防控雞白痢沙門菌、其它沙門菌或禽支原體感染；在凈化方面，僅略陽(yáng)烏雞核心育種場(chǎng)開(kāi)展過(guò)系統(tǒng)、規(guī)范的雞白痢凈化工作。經(jīng)調(diào)查顯示，多數(shù)養(yǎng)殖場(chǎng)認(rèn)為發(fā)生種源病的主要原因在于引種、飼養(yǎng)管理不善和不能及時(shí)診斷。

3 討論

本研究中對(duì)雞白痢的檢測(cè)采用了垂直試驗(yàn)的檢測(cè)方法，原因在于目前常用的全血或血清平板凝集試驗(yàn)由于其簡(jiǎn)便、快速、成本低廉等優(yōu)勢(shì)，在雞白痢凈化過(guò)程中的應(yīng)用比較廣泛，但存在敏感性、特異性有限，且部分檢測(cè)試劑批次間差異較大、平板凝集肉眼判斷結(jié)果主觀性強(qiáng)等缺點(diǎn)，因此本研究采用了平板凝集試驗(yàn)初篩，并進(jìn)一步使用ELISA方法進(jìn)行確診的方法。結(jié)果顯示，略陽(yáng)烏雞種雞場(chǎng)PD個(gè)體陽(yáng)性率為4.73%，MS的個(gè)體陽(yáng)性

率為65.82%，MG的個(gè)體陽(yáng)性率為64.91%。不同飼養(yǎng)方式情況下，三種病的感染狀況不同。在籠養(yǎng)狀態(tài)下，三種病的陽(yáng)性率都低于網(wǎng)上平養(yǎng)或生態(tài)放養(yǎng)的飼養(yǎng)方式。有研究指出，育成雞在林地生態(tài)放養(yǎng)方式下，PD、MS為兩種常見(jiàn)的多發(fā)病[4]。此外，部分養(yǎng)殖場(chǎng)戶的場(chǎng)址選擇在河道邊或山體旁，在放養(yǎng)狀態(tài)下，因雨季等氣候條件的影響，容易引起雞白痢、支原體病、球蟲(chóng)病等的發(fā)生。[5]

根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查情況以及疫病的傳播和發(fā)病特點(diǎn)，分析陽(yáng)性場(chǎng)可能存在的種源病感染風(fēng)險(xiǎn)因素主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面，一是在消毒方面，雞舍（帶雞）每月消毒次數(shù)不同，雞白痢和兩種支原體病的個(gè)體陽(yáng)性率也有所不同，消毒頻率越高，陽(yáng)性率越低，說(shuō)明合理的消毒措施能夠有效減少雞白痢和支原體病的水平傳播；二是在對(duì)雞白痢和禽支原體的藥物性預(yù)防和治療方面，除核心育種場(chǎng)外，其它種雞場(chǎng)均使用了抗菌藥物進(jìn)行預(yù)防或治療，但多數(shù)場(chǎng)依然存在雞白痢或支原體感染的現(xiàn)象，有研究表明，長(zhǎng)期不合理的使用抗菌藥物是一些雞場(chǎng)難以徹底根除雞白痢的重要原因[6，7]；三是在飼養(yǎng)管理方面，凡是不同棟舍交叉使用飼養(yǎng)用具及飼養(yǎng)人員隨意串舍的場(chǎng)均為雞白痢感染陽(yáng)性場(chǎng)，這充分說(shuō)明了水平傳播途徑在雞白痢、支原體病的傳播過(guò)程中發(fā)揮了重要作用[8，9]。

綜合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，略陽(yáng)烏雞常見(jiàn)種源病凈化工作的主要難點(diǎn)有以下幾個(gè)方面，一是底子差，本底陽(yáng)性率較高，尤其是MS、MG的感染情況較為嚴(yán)重，其群體陽(yáng)性率較高；二是生物安全水平參差不齊，存在環(huán)境衛(wèi)生、生物安全管理措施不健全等問(wèn)題；三是投入大，對(duì)于陽(yáng)性率較高的場(chǎng)戶來(lái)說(shuō)淘汰陽(yáng)性雞數(shù)量大，資金投入大，影響凈化積極性；四是對(duì)于PD、MS的凈化來(lái)說(shuō)診斷方法的選擇是影響凈化成功與否的關(guān)鍵因素之一，原因在于平板凝集診斷方法敏感性低，難以診斷出弱陽(yáng)性雞，且國(guó)產(chǎn)檢測(cè)試劑批次間差異較大、平板凝集肉眼判斷結(jié)果主觀性強(qiáng)[10，11]。ELISA方法則具有重復(fù)性好，機(jī)讀結(jié)果準(zhǔn)確，客觀性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，但存在進(jìn)口試劑價(jià)格昂貴使得凈化成本偏高的缺點(diǎn)。

4 建議

陜西省略陽(yáng)烏雞種雞場(chǎng)PD、MS和MG感染情況較為嚴(yán)重。三種病的感染受飼養(yǎng)方式、消毒措施、長(zhǎng)期不恰當(dāng)?shù)氖褂每咕幬锏纫蛩氐挠绊戄^大，建議在對(duì)種雞場(chǎng)實(shí)施種源病凈化時(shí)，可以著重考慮飼養(yǎng)管理方式、消毒措施及抗菌藥物使用這三個(gè)因素，以期更好地控制PD、MS和MG等種源性疫病的流行。

參考文獻(xiàn)：

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