IL-6R mRNA水平與雙相情感障礙主客觀睡眠的相關性研究

[摘要]"目的"探討雙相情感障礙患者外周血中單核細胞白細胞介素-6受體mRNA（interleukin-6"receptor"mRNA，IL-6R"mRNA）水平與其主客觀睡眠的相關性。方法"采用病例對照研究，選取紹興市第七人民醫院2022年6月至2023年6月精神科門診確診的25例雙相情感障礙患者作為病例組，選取同期25名無精神疾病的門診健康體檢者作為對照組。采用匹茲堡睡眠質量指數量表（Pittsburgh"sleep"quality"index"scale，PSQI）、多導睡眠圖（polysomnography，PSG）評估檢測兩組納入者的睡眠質量，并分析與IL-6R"mRNA的相關性。結果"病例組患者的外周血IL-6R"mRNA與睡眠質量、入睡時間、睡眠時間、睡眠效率、睡眠障礙、催眠藥物使用情況、日間功能及PSQI總分均呈顯著正相關（Plt;0.05），與睡眠總時間、睡眠效率、熟睡時間、快速動眼睡眠時間均呈負相關（Plt;0.01），與覺醒時間呈正相關關系（Plt;0.05）。結論"雙相情感障礙患者外周血中單核細胞IL-6R"mRNA水平顯著升高且與患者的主客觀睡眠質量降低密切相關。

[關鍵詞]"雙相情感障礙；單核細胞；白細胞介素-6受體；睡眠質量；匹茲堡睡眠質量指數量表；多導睡眠圖

[中圖分類號]"R749.91""""""[文獻標識碼]"A""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.30.005

Correlation"study"of"IL-6R"mRNA"levels"and"subjective"and"objective"sleep"in"bipolar"disorder

PAN"Yourang，"FENG"Hong

Department"of"Psychiatry，"the"Seventh"People’s"Hospital"of"Shaoxing"City，"Shaoxing"312000，"Zhejiang，"China

[Abstract]"Objective"To"explore"the"correlation"between"the"levels"of"interleukin-6"receptor"mRNA"（IL-6R"mRNA）"in"peripheral"blood"of"patients"with"bipolar"disorder"and"their"subjective"and"objective"sleep"conditions."Methods"By"using"the"case-control"study，"25"cases"of"bipolar"disorder"patients"diagnosed"by"psychiatric"clinic"of"the"Seventh"People’s"Hospital"of"Shaoxing"City"from"June"2022"to"June"2023"were"selected"case"group，"25"volunteers"with"outpatient"health"examination"without"mental"illness"were"selected"as"control"group."Pittsburgh"sleep"quality"index"scale"（PSQI）"and"polysomnography"（PSG）"were"used"to"evaluate"the"sleep"quality"of"two"groups，"and"respectively"analyzed"the"correlation"with"the"IL-6R"mRNA"levels"of"case"group."Results"In"case"group，"the"peripheral"blood"IL-6R"mRNA"was"positively"correlated"with"sleep"quality，"time"to"fall"asleep，"sleep"time，"sleep"efficiency，"sleep"disorder，"use"of"hypnotic"drugs，"daytime"function"and"PSQI"total"score"（Plt;0.05），"and"total"sleep"time，"sleep"efficiency，"time"of"deep"sleep，"rapid"eye"movement"sleep"time"were"negatively"associated"（Plt;0.01），"and"the"peripheral"blood"IL-6R"mRNA"was"positively"associated"with"awakening"time"of"patients"（Plt;0.05）."Conclusion"The"level"of"IL-6R"mRNA"in"monocytes"in"peripheral"blood"of"patients"with"bipolar"disorder"significantly"increases，"and"is"closely"related"to"the"decrease"in"subjective"and"objective"sleep"quality"of"patients.

[Key"words]"Bipolar"disorder;"Monocytes;"Interleukin-6"receptor;"Sleep"quality;"Pittsburgh"sleep"quality"index"scale;"Polysomnography

雙相情感障礙（bipolar"disorder，BPD）是一種以心境波動和活動水平紊亂為特征的復雜精神疾病，臨床上常表現為抑郁和躁狂交替發作[1]。睡眠障礙不僅是BPD的常見癥狀，也是其病理生理機制的一部分，但其確切神經生物學機制尚不明確[2-3]。Ritter"等[4]研究指出BPD患者睡眠質量變化與外周單核細胞中編碼白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）的mRNA表達升高有關。因此，IL-6"mRNA表達水平可作為BPD患者炎癥狀態和睡眠變化的潛在生物標志物。而IL-6受體（interleukin-6"receptor，IL-6R）通過結合IL-6發揮生物學效應，調節細胞的免疫反應和炎癥過程。外周血中IL-6受體mRNA（interleukin-6"receptor"mRNA，IL-6R"mRNA）的表達量可能在精神障礙患者的炎癥狀態下發生變化，通過調節神經炎癥影響睡眠質量。本研究旨在探討BPD患者外周血中單核細胞IL-6R"mRNA水平與其主客觀睡眠的相關性。

1""資料與方法

1.1""一般資料

采用病例對照研究，選取紹興市第七人民醫院2022年6月至2023年6月精神科門診確診的25例BPD患者作為病例組，選取同期25名無精神疾病的門診健康體檢者作為對照組。兩組納入者的一般資料比較，差異無統計學意義（Pgt;0.05），具有可比性，見表1。本研究經紹興市第七人民醫院醫學倫理委員會審批通過（倫理審批號：2022-002-01）。

納入標準：①BPD患者經紹興市第七人民醫院精神科主管醫師依據簡明國際神經精神訪談量表訪談后篩查，診斷標準參考《精神障礙診斷與統計手冊》[5]中關于BPD標準。患者均為首次診斷或既往診斷但未接受相關藥物治療，如患者既往有相關治療史則需經過至少１個月的藥物清洗期，患者的抑郁病情評價參考漢密爾頓抑郁評定量表評分（Hamilton"depression"rating"scale，HDRS）-17[6]標準：HDRS-17評分≥20分，且臨床總體印象量表嚴重性[7]評分≥４分；②年齡16～65歲；③首次發病，未用藥；④本人及其家屬于研究前均知情同意，并愿意接受研究方案中的檢查。排除標準："①患者存在自殺傾向或行為；②處于哺乳期、妊娠或正在備孕期的婦女；③納入研究前已接受相關藥物治療但不愿接受藥物洗脫的患者；④同時伴有心、肝、腎疾病或其他嚴重疾病（如腫瘤、血液病、癲癇病史）患者；⑤言語及聽力障礙者；⑥共病其他精神疾病，如精神分裂癥；⑦患者存在吸毒、長期使用鎮靜鎮痛藥物、酗酒等。

1.2""指標檢測

①標本采集：采集納入者空腹靜脈血5ml，在3500轉/min的速度下離心15min，取其血漿，置于–80℃環境中待檢。②提取外周血單個核細胞（peripheral"blood"mononuclear"cell，PBMC）mRNA：采用標準化的密度梯度離心法。首先將含有乙二胺四乙酸作為抗凝劑的血樣與單核細胞緩沖液（含有0.5%牛血清白蛋白和2mmol/L乙二胺四乙酸的磷酸鹽緩沖溶液）按1∶1的比例混合。然后從混合液中分離出約4×106個PBMC。隨后使用Trizol試劑（賽默飛世爾科技公司）按說明書步驟從PBMC中提取總RNA。最后，將提取的RNA樣品溶于75%乙醇中，并儲存于–70℃的環境中備用。③合成cDNA：進行逆轉錄反應，使用Promega公司的逆轉錄試劑盒，按說明書步驟進行操作。首先，將1μg的RNA樣本在70℃下加熱10min；隨后，依次向反應管中加入以下成分以達到20μl總反應體積：2μl"10×反應緩沖液、2μl"10mmol/L脫氧核糖核苷酸三磷酸（deoxynucleotide"triphosphate，dNTP）混合液、0.5μlRNA酶抑制劑、4μl"25mmol/L"MgCl2、0.6μl（15U）逆轉錄酶、1μg總RNA（2μl）、1μl"0.5μg寡聚核苷酸引物和7.9μl的無RNA酶水。之后的加熱步驟：在95℃下加熱5min，45℃下孵育60min，最后在4℃下冷卻5min。完成的逆轉錄產物可直接用于聚合酶鏈式反應（polymerase"chain"reaction，PCR）擴增，或儲存于–20℃環境中備用。④PCR擴增：進行PCR反應的25μl體系包括的成分：2.5U的Taq"DNA聚合酶（上海生物工程有限公司提供）、1μl"cDNA、0.5μl"10mmol/L的上游引物、0.5μl"10mmol/L的下游引物（上海生物工程有限公司合成）、2.5μl"10×PCR反應緩沖液、1.5μl"25mmol/L"MgCl2、0.5μl"dNTP（上海生物工程有限公司合成）和18.3μl"無RNA酶水。

β-肌動蛋白（β-actin）作為內部對照，各靶基因的PCR擴增反應條件及引物序列如下。①β-actin（180bp）：上游引物（正向引物）CAA"CTC"CAT"GAAG"TA"TAA"C，下游引物（反向引物）CCA"CAC"GGA"GTA"CTT"GCG"CTC。②IL-6R（309bp）：上游引物（正向引物）CAA"GCC"TCC"CAG"TGC"AAG"AT，下游引物（反向引物）ATT"GCT"GAT"GTC"ATA"AGG"GC。③TNFα受體（185bp）：上游引物（正向引物）CAA"GAG"CCT"GAG"TAG"GTG"GTT"TG，下游引物（反向引物）CTG"CTT"ATG"CAC"TAT"GAA"AAA"GG。

1.3""PSQI評估及多導睡眠圖監測

匹茲堡睡眠質量指數量表（Pittsburgh"sleep"quality"index"scale，PSQI）[8]包含19個條目，涉及患者的睡眠質量、入睡時間、睡眠時間、睡眠效率、睡眠障礙、催眠藥物使用情況、日間功能7個評價因子，PSQI總分gt;7分為存在睡眠障礙。

多導睡眠圖（polysomnography，PSG）監測[9]：將納入者安置在安靜舒適的病房環境中，室溫維持在18～26℃。于檢查當日下午安裝電極，確保符合Rechtschaffen和Kales的睡眠記錄標準。記錄內容包括心電圖、腦電圖、肌電圖、腿動、氧飽和度、口鼻氣流、胸腹運動和體位等，從晚上睡覺前持續到次日早上8點。儲存監測數據并采用Sandman"8.0睡眠分析軟件進行回放和自動分析，隨后進行人工核對。

1.4""統計學方法

采用SPSS"21.0統計學軟件對數據進行處理分析。計量資料以均數±標準差（）表示，比較采用t檢驗；計數資料以例數（百分率）[n（%）]表示，比較采用c2檢驗；外周血IL-6R"mRNA與客觀睡眠質量的相關性分析使用Pearson線性相關法。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2""結果

2.1""兩組納入者的外周血中IL-6R"mRNA水平比較

研究結果顯示病例組患者的外周血單核細胞中IL-6R"mRNA表達水平顯著高于對照組（Plt;0.05），見圖1。

2.2""兩組納入者的主觀睡眠質量比較

經PSQI量表評價，病例組患者的睡眠質量、入睡時間、睡眠時間、睡眠效率、睡眠障礙、催眠藥物使用情況、日間功能7個評價因子及PSQI總分均高于對照組（Plt;0.001），見表2。

2.3nbsp;"兩組納入者的客觀睡眠質量比較

經PSG檢測，病例組患者的初入睡時間長于對照組，中途起床次數多于對照組（Plt;0.001）；病例組患者的睡眠總時間、睡眠效率、熟睡時間、快速動眼睡眠（rapid"eye"movement，REM）時間短于對照組（Plt;0.05），見表3。

2.4""病例組患者外周血IL-6R"mRNA與主觀睡眠質量的相關性分析

線性相關分析顯示病例組患者的IL-6R"mRNA水平與睡眠質量、入睡時間、睡眠時間、睡眠效率、睡眠障礙、催眠藥物使用情況、日間功能及PSQI總分均呈顯著正相關（Plt;0.05），見表4。

2.5""病例組患者外周血IL-6R"mRNA與客觀睡眠質量的相關性分析

相關性分析顯示病例組患者外周血IL-6R"mRNA與睡眠總時間、睡眠效率、熟睡時間、REM睡眠時間均呈負相關（Plt;0.01）；外周血IL-6R"mRNA與患者的覺醒時間呈正相關（Plt;0.05），見表5。

3""討論

睡眠問題在BPD的整個病程中普遍存在，無論是在抑郁發作、躁狂發作還是穩定期均可出現。這種睡眠障礙不僅給患者帶來身體上的不適，還可影響心理健康，加重抑郁或焦慮癥狀，降低患者的生活質量[10]。因此，深入理解BPD患者睡眠障礙的病理機制對提高治療效果和改善患者生活質量至關重要。孫莉等[11]研究通過對BPD患者的睡眠質量和IL-6"mRNA表達量的變化，間接證明BPD睡眠質量與IL-6R"mRNA水平之間的關系。

本研究通過PSQI量表和PSG監測發現，BPD患者的睡眠質量顯著低于健康對照組。BPD患者的入睡時間更長，睡眠時間更短，且睡眠中斷次數更多。BPD患者外周血單核細胞中IL-6R"mRNA的表達水平顯著高于健康對照組，且與其睡眠質量呈顯著正相關，即IL-6R"mRNA水平越高，睡眠質量越差。說明BPD患者的睡眠質量較差，而IL-6及其受體可能在BPD患者睡眠障礙的發生中發揮關鍵作用。由Manchanda等[12]和Zielinski等[13]進行的動物研究表明，長期缺乏睡眠可導致腦內微膠質細胞的活化，并增加炎癥細胞因子的表達，提示慢性睡眠剝奪可能觸發神經系統的炎癥反應。具體來說，M1型小膠質細胞具備生成多種對神經具有毒性作用的細胞因子的能力，如IL-1β、IL-6、腫瘤壞死因子-α等，它們通過特定的受體和信號傳遞途徑發揮炎癥介質的作用。李華玉等[14]研究顯示睡眠障礙的發生風險與促炎癥細胞因子IL-1β和IL-6的表達水平升高有關聯，這一發現與Tucker等[15]在宮頸癌患者中觀察到的結果一致。宋利等[16]研究顯示IL-1β和IL-6可激活下丘腦-垂體-腎上腺軸，進而改變動物和人類的睡眠-覺醒行為。Barreto等[17]研究發現，IL-6可影響5-羥色胺系統，刺激吲哚胺2，3-雙加氧酶的活性，從而降低血清素的生成。血清素在大腦中發揮調節睡眠-覺醒節律的作用。因此，IL-6通過多種機制誘導生理性睡眠，有助于增加睡眠的持續時間和深度，從而鞏固睡眠。然而，當BPD導致生理系統出現失衡時，睡眠和免疫系統的交互作用路徑發生失調，導致睡眠模式的雙向轉變：低水平炎癥可增加總睡眠時間和睡眠的連續性，而高水平的炎癥則可能導致睡眠時間縮短，并引起睡眠碎片化。這可能是由于負反饋途徑如促腎上腺皮質激素釋放激素（corticotropin-releasing"hormone，CRH）-糖皮質激素軸上調導致：IL-6刺激CRH產生，而CRH有促進清醒的作用。此外，Bjurstr?m等[18]在對類風濕關節炎患者的研究中觀察到良好的睡眠維持和深度可中和夜間及早晨單核細胞產生的IL-6水平。這一發現揭示睡眠維持、慢波睡眠與炎癥細胞因子之間存在的相互作用機制。炎癥細胞因子在免疫反應中調控睡眠的同時，睡眠的深度和周期也對炎癥細胞因子的分泌產生顯著影響。

綜上所述，BPD患者外周血中單核細胞IL-6R"mRNA水平顯著升高且與患者的主客觀睡眠質量降低密切相關。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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（收稿日期：2024–05–31）

（修回日期：2024–10–11）

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