FOXC1和SOX10預(yù)測(cè)三陰性乳腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的價(jià)值

【摘要】 目的：探討叉頭框蛋白C1（forkhead box C1，F(xiàn)OXC1）和性別決定區(qū)盒基因10（SRY-related HMG-box gene 10，SOX10）對(duì)三陰性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值。方法：收集2019年1月—2020年12月在撫州市第一人民醫(yī)院診治的100例TNBC患者的石蠟組織標(biāo)本，采用免疫組化法檢測(cè)FOXC1和SOX10的表達(dá)。術(shù)后隨訪3年，記錄復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況。基于復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況將患者劃分為復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組31例和未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組69例。對(duì)比兩組患者的臨床資料、FOXC1和SOX10的表達(dá)，并構(gòu)建ROC曲線分析FOXC1和SOX10對(duì)TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值。結(jié)果：兩組年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、乳腺癌家族史和病理類型比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），而兩組臨床分期、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ki-67水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組FOXC1和SOX10的陽(yáng)性率均明顯高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組（Plt;0.05）。FOXC1和SOX10聯(lián)合預(yù)測(cè)TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的AUC為0.816，敏感度為93.5%，特異度為69.6%。結(jié)論：FOXC1和SOX10的表達(dá)水平在TNBC術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者中較高，且二者聯(lián)合使用具有高度的預(yù)測(cè)效能，可以作為預(yù)測(cè)TNBC術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的有效生物標(biāo)志物。

【關(guān)鍵詞】 乳腺腫瘤 三陰型乳腺癌 叉頭框蛋白 C1 性別決定區(qū)盒基因 10

The Value of FOXC1 and SOX10 in Predicting Postoperative Recurrence and Metastasis of Triple-Negative Breast Cancer/WENG Siming， XIONG Jianhua， SUN Xiaowei. //Medical Innovation of China， 2025， 22（01）： 139-143

[Abstract] Objective： To explore the predictive value of forkhead box C1 （FOXC1） and SRY-related HMG-box gene 10 （SOX10） for postoperative recurrence and metastasis in patients with triple-negative breast cancer （TNBC）. Method： Paraffin-embedded tissue samples from 100 TNBC patients treated in the First People's Hospital of Fuzhou from January 2019 to December 2020 were collected， and the expressions of FOXC1 and SOX10 were detected by immunohistochemistry. The patients were followed up for 3 years and the recurrence and metastasis were recorded. Based on recurrence and metastasis， the patients were divided into recurrence and metastasis group （31 cases） and non-recurrence and metastasis group （69 cases）. Clinical data， FOXC1 and SOX10 expression were compared between the two groups， and ROC curve was constructed to analyze the predictive value of FOXC1 and SOX10 for postoperative recurrence and metastasis in patients with TNBC. Result： There were no significant differences between the two groups in terms of age， menopausal status， family history of breast cancer， and pathological type （Pgt;0.05）， but there were significant differences in clinical stage， axillary lymph node metastasis and Ki-67 level between the two groups （Plt;0.05）. The positive rates of FOXC1 and SOX10 were significantly higher than those in non-recurrence and metastasis group （Plt;0.05）. The combined prediction of FOXC1 and SOX10 for postoperative recurrence and metastasis in TNBC patients showed an AUC of 0.816， with a sensitivity of 93.5% and specificity of 69.6%. Conclusion： The expression levels of FOXC1 and SOX10 were higher in patients with recurrence and metastasis after TNBC， and their combined use exhibits a high predictive efficiency， making them effective biomarkers for predicting postoperative recurrence and metastasis in TNBC.

[Key words] Breast tumor Triple-negative breast cancer Forkhead box C1 SRY-related HMG-box gene 10

First-author's address： Department of Thoracic Surgery， the First People's Hospital of Fuzhou， Fuzhou 344000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2025.01.032

三陰性乳腺癌（TNBC）是乳腺癌的一種亞型，約占所有乳腺癌患者的15%，由于缺乏特異性的藥物靶點(diǎn)，其治療方案相對(duì)有限，且預(yù)后相對(duì)較差[1-2]。TNBC的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率高，一旦發(fā)生復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，患者的生存率顯著降低。因此，探索和發(fā)現(xiàn)能夠有效預(yù)測(cè)TNBC復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的生物標(biāo)志物，對(duì)于改善TNBC患者的預(yù)后和指導(dǎo)臨床治療具有重要意義。在眾多研究TNBC的分子標(biāo)志物中，叉頭框蛋白C1（forkhead box C1，F(xiàn)OXC1）和性別決定區(qū)盒基因10（SRY-related HMG-box gene 10，SOX10）引起了研究者的廣泛關(guān)注。FOXC1是一種轉(zhuǎn)錄因子，參與調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和遷移，近年來(lái)的研究表明，F(xiàn)OXC1在多種腫瘤中的表達(dá)與腫瘤的侵襲性、轉(zhuǎn)移性和患者的預(yù)后密切相關(guān)[3]。SOX10作為一種高度保守的轉(zhuǎn)錄因子，主要參與神經(jīng)嵴細(xì)胞的發(fā)育，同時(shí)在某些腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也扮演著重要角色[4]。近期研究發(fā)現(xiàn)，SOX10在TNBC中的表達(dá)與患者的預(yù)后有關(guān)，提示其可能作為一種新的治療靶點(diǎn)或預(yù)后指標(biāo)[5-6]。盡管FOXC1和SOX10在其他腫瘤類型中的研究已有一定進(jìn)展，但是它們?cè)赥NBC中的作用及其機(jī)制仍然不是完全清楚。此外，F(xiàn)OXC1和SOX10是否可以作為聯(lián)合預(yù)測(cè)標(biāo)志物，提高TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性，也是目前研究中尚未充分探討的問(wèn)題。本研究旨在通過(guò)分析FOXC1和SOX10在TNBC患者組織樣本中的表達(dá)水平及其與疾病復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，探討這兩種分子標(biāo)志物作為預(yù)測(cè)TNBC術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的潛在價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2019年1月—2020年12月在撫州市第一人民醫(yī)院診治的100例TNBC患者的石蠟組織標(biāo)本。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)手術(shù)病理組織學(xué)或穿刺活檢確診為TNBC。（2）未接受過(guò)任何形式的乳腺癌治療，包括手術(shù)、放療、化療或內(nèi)分泌治療。（3）具備完整的臨床數(shù)據(jù)和隨訪資料，包括但不限于病理報(bào)告、治療記錄和隨訪結(jié)果。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）同時(shí)患有其他類型的惡性腫瘤或過(guò)去5年內(nèi)有其他惡性腫瘤的治療史。（2）有嚴(yán)重的心臟病、肝病、腎病或其他重大器官功能不全，不適宜參與本研究。（3）孕婦或哺乳期婦女。（4）精神疾病或認(rèn)知功能障礙。（5）參與了其他臨床試驗(yàn)，或在研究開(kāi)始前3個(gè)月內(nèi)接受過(guò)任何實(shí)驗(yàn)性藥物治療。術(shù)后隨訪3年，基于復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況將患者劃分為復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組31例和未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組69例。本研究已獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審查和批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化 本研究采用的FOXC1和SOX10抗體分別是：Anti-FOXC1抗體（EPR20685），購(gòu)自福州邁新生物科技有限公司；SOX10抗體（ZA-0642UM），購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

實(shí)驗(yàn)步驟如下：（1）將石蠟包埋的TNBC組織切片進(jìn)行脫蠟水化處理，以便于抗體的滲透。（2）進(jìn)行抗原修復(fù)，通常采用高壓或微波加熱的方法，以恢復(fù)抗原的活性，提高抗體的結(jié)合能力。（3）將上述提到的Anti-FOXC1抗體按照1︰500稀釋，SOX10抗體按照1︰200稀釋。使用稀釋后的抗體分別與組織切片孵育，通常在4 ℃下過(guò)夜孵育，以確保抗體與目標(biāo)蛋白充分結(jié)合。（4）使用二次抗體進(jìn)行孵育，通常選用帶有熒光標(biāo)記或者HRP（辣根過(guò)氧化物酶）標(biāo)記的二次抗體，以便于信號(hào)的檢測(cè)。（5）通過(guò)DAB（二氨基苯胺）染色或其他適合的染色方法，對(duì)結(jié)合于目標(biāo)蛋白的抗體進(jìn)行可視化。（6）使用核染料（如蘇木精-伊紅）對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色，以便于在顯微鏡下觀察。（7）最后，通過(guò)顯微鏡分析腫瘤組織中的FOXC1和SOX10蛋白表達(dá)情況，均設(shè)陰陽(yáng)性對(duì)照。根據(jù)本研究設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)，腫瘤細(xì)胞核染色強(qiáng)度≥1%的切片被認(rèn)定為陽(yáng)性表達(dá)。

1.2.2 隨訪 本研究的隨訪期為3年。隨訪計(jì)劃詳細(xì)如下：隨訪頻次：術(shù)后第1年，患者每3個(gè)月進(jìn)行一次隨訪；從第2年開(kāi)始，隨訪頻次調(diào)整為每6個(gè)月一次。隨訪內(nèi)容包括但不限于臨床檢查、影像學(xué)檢查（如乳腺X光、超聲、CT掃描或MRI），以及血液檢測(cè)（包括腫瘤標(biāo)志物）。

復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的評(píng)估方法包括：（1）臨床檢查，通過(guò)觸診等方法檢查原發(fā)部位及鄰近淋巴結(jié)區(qū)域，尋找復(fù)發(fā)的跡象。（2）影像學(xué)檢查，利用MRI、CT或PET-CT等影像學(xué)手段，檢測(cè)體內(nèi)是否存在復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移性病灶。（3）血液檢測(cè)，定期檢測(cè)血液中的腫瘤標(biāo)志物水平，如CA15-3，以及其他相關(guān)生物標(biāo)志物，作為復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的間接證據(jù)。

術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的認(rèn)定標(biāo)準(zhǔn)：（1）局部復(fù)發(fā)，在原乳腺癌切除部位或術(shù)后放療區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)新的腫瘤生長(zhǎng)。（2）遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，通過(guò)影像學(xué)檢查或組織病理學(xué)證實(shí)，腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散到乳腺以外的其他器官，如骨骼、肝臟、肺部或腦部。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS 23.0分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例、率（％）表示，用字2檢驗(yàn)。ROC曲線用SPSS 26.0軟件作圖。Plt;0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床資料比較

兩組年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、乳腺癌家族史和病理類型比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），而臨床分期、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ki-67水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見(jiàn)表1。

2.2 兩組FOXC1和SOX10的表達(dá)比較

復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組FOXC1和SOX10的陽(yáng)性率均明顯高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組（Plt;0.05），見(jiàn)表2。

2.3 FOXC1和SOX10的表達(dá)預(yù)測(cè)TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的ROC曲線

FOXC1和SOX10聯(lián)合預(yù)測(cè)TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的AUC為0.816，敏感度為93.5%，特異度為69.6%，見(jiàn)表3和圖1。

3 討論

TNBC是一種特殊類型的乳腺癌，其特點(diǎn)是雌激素受體、孕激素受體和人表皮生長(zhǎng)因子受體2的表達(dá)均為陰性。TNBC因其侵襲性高、預(yù)后差及治療選擇有限而受到廣泛關(guān)注[7-9]。由于缺乏有效的靶向治療方法，TNBC患者的治療主要依賴于化療，這在一定程度上限制了治療效果的提升[10-12]。因此，尋找能夠有效預(yù)測(cè)TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的生物標(biāo)志物，對(duì)于指導(dǎo)臨床治療和改善患者預(yù)后具有重要意義。

FOXC1和SOX10是近年來(lái)在多種腫瘤中研究的熱點(diǎn)。FOXC1是一種轉(zhuǎn)錄因子，參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和遷移等多種生物學(xué)過(guò)程，已被發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤中表達(dá)異常，與腫瘤的侵襲性、轉(zhuǎn)移性和患者預(yù)后緊密相關(guān)[13-14]。SOX10作為一種神經(jīng)嵴細(xì)胞發(fā)育的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，在黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也扮演著重要角色[15-16]。在TNBC中，F(xiàn)OXC1和SOX10的表達(dá)與患者的預(yù)后密切相關(guān)[17-19]，但其具體機(jī)制和作用尚需進(jìn)一步研究。國(guó)內(nèi)外關(guān)于FOXC1和SOX10在TNBC中作用的研究日益增多，但目前對(duì)其在TNBC術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移中的預(yù)測(cè)價(jià)值的研究還相對(duì)有限。現(xiàn)有研究多集中在這兩種蛋白的表達(dá)水平與TNBC患者臨床特征及預(yù)后之間的關(guān)系，而對(duì)其如何影響TNBC患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制探討不足。

本研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組與未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組在年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、乳腺癌家族史及病理類型方面的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這表明這些基線特征在本研究中對(duì)于復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)不具有顯著影響。然而，兩組臨床分期、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ki-67水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，該結(jié)果表明臨床分期、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ki-67水平與TNBC的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。因此，較高的臨床分期、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ki-67水平可能與TNBC患者較高的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)。這一發(fā)現(xiàn)與以往研究結(jié)果相似[20]，進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了這些臨床參數(shù)在TNBC預(yù)后評(píng)估中的重要性。更值得注意的是，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組中FOXC1和SOX10的陽(yáng)性率均高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組。這一結(jié)果表明，F(xiàn)OXC1和SOX10在TNBC復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移過(guò)程中可能起到促進(jìn)作用。此外，F(xiàn)OXC1和SOX10聯(lián)合預(yù)測(cè)TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的AUC為0.816，敏感度達(dá)到93.5%，特異度為69.6%，顯示出較高的預(yù)測(cè)效能。這一發(fā)現(xiàn)意味著，通過(guò)評(píng)估FOXC1和SOX10的表達(dá)水平，可以較為準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)，從而為臨床提供有力的指導(dǎo)。本研究首次展示了FOXC1和SOX10聯(lián)合使用在預(yù)測(cè)TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移中的高敏感度和特異度，提供了一種新的、有效的預(yù)測(cè)工具。這對(duì)于臨床上精準(zhǔn)識(shí)別高風(fēng)險(xiǎn)TNBC患者、制定個(gè)體化治療方案、從而提高患者生存率和生活質(zhì)量具有重要意義。

綜上所述，本研究基于FOXC1和SOX10的表達(dá)情況，為TNBC患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)提供了新的生物學(xué)依據(jù)，為TNBC的治療和預(yù)后評(píng)估提供了新的思路和方法。未來(lái)的研究應(yīng)進(jìn)一步探討FOXC1和SOX10在TNBC中的作用機(jī)制，以及如何將這些發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化為臨床應(yīng)用，以期為TNBC患者提供更有效的治療策略和改善其預(yù)后。

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（收稿日期：2024-04-23） （本文編輯：田婧）