





摘" 要:為探究低魚粉飼料添加不同復方中草藥對大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼魚生長、腸道消化酶活性、抗病力及養殖水質的影響,實驗以450尾大菱鲆幼魚為研究對象,分為5組,每組3個重復,每個重復30尾,設計1個正常魚粉組作為正對照組(含50%魚粉,D1組)、1個低魚粉組作為負對照組(30%魚粉,D2組),在負對照組基礎上分別添加2%的3組不同復方中草藥,分別命名為D3、D4和D5組。養殖周期8周。結果顯示,低魚粉條件下,添加3組不同復方中草藥對大菱鲆幼魚成活率無顯著影響;幼魚終末體重、增重率和蛋白質效率在D5組顯著高于負對照組,與正對照組無顯著差異;D5組飼料系數最低,顯著低于負對照組,與正對照組無顯著差異。血清總蛋白和球蛋白含量在D4、D5組顯著高于正負對照組(Plt;0.05),血清溶菌酶含量、堿性磷酸酶活性、IgM和髓過氧化物酶活性在D3~D5組顯著高于負對照組(Plt;0.05)。與負對照組相比,飼料中添加中草藥(D3~D5組)后顯著提高了幼魚腸道胰蛋白酶活性(Plt;0.05),淀粉酶和脂肪酶活性則在D4和D5組顯著升高(Plt;0.05)。投喂6 h后,D2~D5組水體氨氮、亞硝酸鹽、磷酸鹽含量均顯著降低,均在D5組出現最低值(Plt;0.05);通過鰻弧菌攻毒實驗48 h,三組復方中草藥均能不同程度的提高幼魚成活率,其中以D5組幼魚累積死亡率最低。研究結果表明,在30%低魚粉條件下,飼料中添加2%的復方中草藥(白術∶綿馬貫眾∶板藍根∶麩炒神曲=1∶1∶1∶1)可促進大菱鲆幼魚生長性能,提高抗病力、消化酶活性、血清生化指標,降低水體氨氮、亞硝酸鹽氮、活性磷酸鹽含量。
關鍵詞:大菱鲆(Scophthalmus maximus);復方中草藥;生長;酶活性;抗病力;水質
中圖分類號:S965.399文獻標志碼:A
大菱鲆(Scophthalmus maximus)自1992年從歐洲引進中國,因其生長速度快、肉質鮮美,已成為中國北方重要的海水養殖經濟魚類[1]。近年來,由于水產養殖的快速發展和養殖水質的污染等原因,導致病害頻發,2006年及2015年的大菱鲆藥物殘留事件給大菱鲆產業造成了嚴重的經濟損失[2],中華人民共和國農業農村部也規定,自2020年7月1日起,飼料端全面禁抗。因此,亟需開發安全、無殘留的水產飼料免疫增強劑以提高海水魚的免疫能力。
中草藥富含生物堿、有機酸、揮發油、氨基酸和植物多糖等多種活性成分,具有營養和藥效雙重功效 [3],研究表明,中草藥具有促進魚體生長性能,調節腸道健康,刺激消化酶分泌和增強魚體免疫力等多種功能,因此,開發海水魚配合飼料中各種有效的中草藥飼料添加劑替代抗生素成為必然的發展趨勢。然而,目前關于中草藥在水產上的應用研究報道較少,其使用的復配形式和應用主體的各異使其效果差異也較大,而且中草藥對水產動物確切的作用機理并不清楚[4]。金銀花(Lonicera japonica)、連翹(Forsythia suspensa)、蒲公英(Taraxacum mongolicum)、綿馬貫眾(Mianma Guanzhong)和板藍根(Isatis tinctoria)具有抗菌、抗病毒和增強機體免疫的效果,其成分多為有機酸(金銀花)、黃酮類物質(綿馬貫眾)、苯乙醇苷(連翹)、蒲公英寡肽(蒲公英)、萜類(連翹、綿馬貫眾)、吲哚類(板藍根)等[5-9];黨參(Codonopsis pilosula)、焦山楂(Crataegus pinnatifida)、山藥(Dioscorea polystachya)、白術(Atractylodes macrocephala)、麩炒神曲(Triticum aestivum L.等)等具有健脾益氣、消食導滯等功效,其有效成分多為5-羥甲基糠醛(焦山楂)、麥角固醇(麩炒神曲)、黃酮類(麩炒神曲、焦山楂)、多糖(黨參、白術、山藥)、皂苷(黨參、山藥)[10-13]。據此,該研究根據“促消化、提免疫”的中草藥配伍理論,將金銀花、連翹、炒麥芽(Hordeum vulgare)、炒谷芽(Oryza sativa L.或Setaria italica(L.)Beauv.)、麩炒神曲、黨參、山藥、蒲公英、白術、綿馬貫眾和板藍根11種中草藥配伍成三副不同的復方中草藥,考察不同配方中草藥在低魚粉飼料中對大菱鲆幼魚生長、免疫、腸道生理健康及養殖水質的影響,以期為中草藥在大菱鲆低魚粉飼料中的應用提供理論參考。
1 材料與方法
1.1 實驗設計與飼料制作
中草藥添加劑:根據中藥配伍理論,以提高腸道消化能力和增強免疫力為主要目的,設計3組復方中草藥配方(購于當地同仁堂)。配方Ⅰ由金銀花(50 g)、連翹(50 g)、炒麥芽(50 g)、黨參(50 g)組成;配方Ⅱ由焦山楂(50 g)、炒谷芽(50 g)、山藥(50 g)、蒲公英(60 g)組成;配方Ⅲ由白術(50 g)、綿馬貫眾(50 g)、板藍根(50 g)、麩炒神曲(50 g)組成。中草藥熬制常規操作[2],熬制成湯藥冷卻,6層紗布過濾殘渣,留中草藥煎液,定容到200 mL容量瓶,即1 mL藥液相當于1g中草藥,按組分裝瓶標號放4℃備用。飼料配方和營養組成見表1。以魚粉和酪蛋白為主要蛋白源,魚油和豆油為主要脂肪源。設計魚粉含量為50%的正對照組,魚粉含量為30%的負對照組(用大豆濃縮蛋白等蛋白替代魚粉)。在負對照組基礎上分別添加2%的3種不同復方中草藥藥液,共配制成5組實驗飼料,分別命名為D1、D2、D3、D4和D5組。制作飼料時,所有飼料原料粉碎過80目篩,按飼料配方表(表1)混合均勻,加入魚油及適量水再次混勻,經螺旋擠壓機加工成粒徑3 mm的飼料顆粒,60℃烘干后放置-20℃冰箱備用。
1.2 實驗用魚和實驗條件
養殖實驗在山東省海洋資源與環境研究院全封閉水循環系統進行。實驗魚苗購自山東科合海洋高技術有限公司。正式開始實驗之前將實驗魚放入藍色圓柱形塑料養殖桶(直徑70 cm、高80 cm、水深50 cm)中暫養1周。暫養結束后,禁食24 h,挑選體格健壯、規格均一的大菱鲆幼魚[初始體質量(23.35±0.02)g]隨機分成5組,每組3個重復,每個重復30尾魚。養殖周期8周,每天投喂2次(8∶30、16∶30),投喂量為魚體質量的1.2%~1.5%,投喂結束后統計殘餌量。養殖期間如有死魚記錄數量并稱重。整個實驗期間,養殖條件參照SONG Z D等[14]。
1.3 樣品采集
養殖實驗結束時,禁食24h,采用丁香酚麻醉,以桶為單位稱重量,記錄每桶實驗魚的尾數和體質量,計算成活率、增重率和飼料系數。每桶隨機選擇12尾幼魚,分別測體重、體長,解剖內臟并分離肝臟稱重,取其腸組織用于消化酶測定;血樣4℃靜置4h,4 000 r/min離心10 min,取血清,-70℃待測。另外,每桶取10尾魚,進行鰻弧菌攻毒實驗。
1.4 測定指標與方法
1.4.1 生長指標
存活率(survival rate, SR, %)=Nf /Ni×100;
增重率(weight gain rate, WGR,%)=(Wt–W0)/W0×100;
飼料系數(feed conversion ratio, FCR)=Wf /(Wt–W0);
肥滿度(codition factor, CF, g/cm3)=魚體重(g)/魚體長(cm)3×100
蛋白質效率(protein efficiency ratio, PER)=[Wt–W0]/[Wf×Cp]。
式中:W0為實驗開始時魚體質量(g),Wt為實驗結束時魚體質量(g),Wf為攝食量(g),Cp為飼料蛋白質量分數,Nf、Ni分別為實驗開始和結束時實驗魚存活尾數。
1.4.2 血清酶活性測定
血清中溶菌酶(lysozyme,LZM)、總蛋白(Total protein,TP)、白蛋白(Albumin, ALB)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、髓過氧化物酶(Myeloperoxidase, MPO)和堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定;免疫球蛋白M(Immunoglobulin M, IgM)采用上海酶聯生物公司ELISA試劑盒測定。
1.4.3 腸道消化酶活性測定
將3尾魚體腸道混合稱取于預冷的生理鹽水(樣品質量與生理鹽水體積比為1∶9)中冰浴勻漿,然后5 000 r/min離心10 min,取上清液用于消化酶指標測定。腸道胰蛋白酶(trypsin)、淀粉酶(amylase)、脂肪酶(lipase)活性均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定,具體操作嚴格按照各試劑盒說明書執行。酶液蛋白質濃度采用考馬斯亮藍法測定。
1.4.4 水樣采集及指標測定
在養殖實驗的中后期,于上午投喂飼料后排出殘餌后,封閉循環水,將養殖桶內水體積控制在0.10 m3左右,在封閉循環水后的第6個小時取水樣,方法如下:每桶均在同一部位取樣,即離水面15 cm處采集水樣,置于4℃冰箱保存,于48 h內測定水體中氨氮(NH3-N)、亞硝酸鹽氮(NO2-N)和活性磷酸鹽(PO4-P)的含量。取樣完畢,恢復循環水養殖。水質指標測定方法均采用《海洋調查規范》(GB/T 12763.4-2007)[15]。
1.4.5 鰻弧菌攻毒實驗
鰻弧菌培養方法參照郝甜甜等[16],8 000 r/min離心10 min,收集菌體沉淀,無菌PBS溶液稀釋至濃度為1×108 CFU/mL。每桶取10尾魚,每尾注射100 μL的鰻弧菌進行攻毒,注射后放入室內塑料養殖桶內,保證氧氣充足,每2 h觀察一次并及時撈出死魚,于48 h統計累積死亡率。
累積死亡率(Cumulative mortality rate, %)=100%×(病死魚尾數/初感染魚尾數)
1.5 數據分析
采用SPSS 17.0對所得數據進行單因素方差分析(One-Way ANOVA),差異顯著,則采用Duncan氏進行多重檢驗,顯著水平為0.05,統計數據以平均值±標準差(mean±SD)形式表示。
2 結果
2.1 復方中草藥對大菱鲆幼魚生長性能和飼料利用情況的影響
由表2可知,養殖8周后,各組成活率均在90%以上,無顯著性差異(Pgt;0.05)。與負對照組相比,低魚粉飼料中添加復方中草藥Ⅲ(D5組)顯著提高了幼魚的終末體重和增重率(Plt;0.05),顯著降低了飼料系數(Plt;0.05),但與正對照組無顯著差異(Pgt;0.05)。復方中草藥Ⅰ和Ⅱ組幼魚終末體重和增重率與負對照組無顯著差異(Pgt;0.05)。各組間幼魚肥滿度無顯著差異(Pgt;0.05),蛋白質效率呈現先下降后上升趨勢,D5組顯著高于D2和D3組(Plt;0.05),與D1和D4組無顯著差異(Pgt;0.05)。
2.2 復方中草藥對大菱鲆幼魚血清生化指標的影響
由表3可知,與正對照組相比,負對照組顯著降低了幼魚血清溶菌酶含量、白蛋白含量、堿性磷酸酶、IgM和髓過氧化物酶酶活性(Plt;0.05)。低魚粉中添加三組復方中草藥,均能不同程度提高魚體的血液生化指標。其中血清總蛋白和球蛋白含量在D4、D5組顯著高于正負對照組(Plt;0.05);溶菌酶含量、堿性磷酸酶活性、IgM和髓過氧化物酶活在D3~D5組顯著高于負對照組(Plt;0.05)。各組間幼魚血清超氧化物歧化酶活性無顯著差異(Pgt;0.05)。
2.3 復方中草藥對大菱鲆幼魚腸道消化酶活性的影響
由表4可知, 與正對照組相比,負對照組顯著降低了幼魚腸道胰蛋白酶和脂肪酶活性(Plt;0.05)。與負對照組相比,D3~D5組可提高魚體腸道胰蛋白酶(Plt;0.05),淀粉酶和脂肪酶則在D4和D5組顯著升高(Plt;0.05)。
2.4 復方中草藥對大菱鲆養殖水質的影響
該實驗結果(圖1)顯示,投喂6 h后,D2~D5組水體氨氮、亞硝酸鹽氮、活性磷酸鹽含量均有降低趨勢,均在D5組出現最低值。與正負對照組相比,D5組氨氮含量分別下降了37.46%、26.50%,亞硝酸鹽氮含量分別下降32.57%、14.97%,活性磷酸鹽含量分別下降15.21%、8.78%。
2.5 復方中草藥對大菱鲆幼魚抗鰻弧菌感染能力的影響
五種飼料持續投喂大菱鲆幼魚8周后,以鰻弧菌攻毒48 h的累積死亡率見圖2,低魚粉飼料中添加復方中草藥能夠顯著降低魚體的累積死亡率,其中以D5組幼魚累積死亡率最低(46.67%),與正負對照組相比,分別降低了33.33%、46.15%(Plt;0.05)。
3 討論
3.1 低魚粉飼料中添加復方中草藥對大菱鲆幼魚生長性能的影響
該實驗中植物蛋白源替代魚粉后,幼魚增重率顯著降低,與其他植物蛋白源替代魚粉在大菱鲆上的應用研究結果一致[14,17]。與負對照組相比,在低魚粉飼料中添加復方中草藥Ⅲ顯著提高了幼魚的增重率和蛋白質效率,降低了幼魚飼料系數,表明復方中草藥Ⅲ可提升植物蛋白在大菱鲆體內的轉化率,增強魚體對營養物質的吸收,促進魚體的生長發育[18],這與復方中草藥Ⅲ中的白術、麩炒神曲的健脾益氣、消食導滯等功效有關。張奕強等[19]研究表明白術揮發油成分中的白術內酯物質可以調節動物胃腸道運動,改善胃腸道功能,促進機體生長。麩炒神曲的有效成分麥角固醇、黃酮類等物質具有提高動物攝食率和飼料消化吸收率等等功能[13]。但該實驗結果表明,在低魚粉飼料中添加復方中草藥Ⅰ和Ⅱ對幼魚的生長性能與負對照組無顯著差異,表明復方中草藥配方的不同,其產生的藥效也不同,其多樣成分共同影響著機體生長機制[20]。此外,一些研究表明,飼料中添加復方中草藥可以提高養殖魚體的肥滿度[2,21],但在該實驗中發現復方中草藥在低魚粉飼料中并未影響大菱鲆魚體的肥滿度。出現此差異的原因可能與飼料營養水平和養殖周期的不同有關[20]。以上實驗結果也表明了,在大菱鲆低魚粉飼料中添加適量的復方中草藥不會對幼魚的生長造成不利影響。
3.2 低魚粉飼料中添加復方中草藥對大菱鲆幼魚血清生化指標的影響
中草藥中含有的多種免疫活性物質,如多糖、生物堿和有機酸等,能夠通過調節魚體的非特異性免疫能力來提高機體的免疫功能[22]。該實驗中,與負對照組相比,飼料中添加3組復方中草藥均有一定的促免疫和抗氧化作用。其中由白術、綿馬貫眾、板藍根、麩炒神曲組成的D5組顯著提高了大菱鲆幼魚血清中的溶菌酶、白蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶和髓過氧化物酶。其原因與D5組中的白術、綿馬貫眾、板藍根等可提高免疫系統的作用有關[23-24]。JI等[25]研究發現,麩炒神曲可顯著提高真鯛魚體的免疫能力,魯振國等[26]研究表明板藍根多糖可通過提高雛雞的血液生化指標來調節其免疫系統;陳俊良等[27]發現白術多糖在促進南海麻黃雞免疫器官發育及血清生化指標方面均有一定的意義,這也與該實驗中提高血清溶菌酶等指標結果一致;Jasamai等[28]研究表明,綿馬貫眾中的活性成分乙酸乙酯、甾體類等可通過影響機體生化指標來抑制炎癥介質生物,從而提高動物機體的免疫性能。這些中草藥在動物機體上的應用均與該實驗結果一致。在該實驗中,雖然三組復方中草藥均能增強魚體的免疫能力,但是響應免疫指標變化劑量并不一致,可能原因是不同配伍的中草藥制劑調控機體的免疫通路各有特點[29],具體機理還需進一步研究。
3.3 低魚粉飼料中添加復方中草藥對大菱鲆幼魚腸道消化酶活性的影響
腸道是魚類消化、吸收營養物質、免疫的重要場所,其消化酶活性高低也是評價魚類消化生理功能的重要指標[30]。該實驗中的3組復方中草藥配方理論上均有保肝護膽、提高消化能力的功效。D3組中的炒麥芽具有促進腸道蠕動,上調腸道水通道蛋白2、3的表達,中和自由基,具有“炒香醒脾”的作用[31];D4組中的焦山楂、炒谷芽、山藥等具有消食健胃、行氣散瘀等功效[32];D5組的麩炒神曲和白術具有化水谷宿食,癥結積滯,健脾暖胃等功能,綿馬貫眾、板藍根具有保肝護膽,消炎抗病毒等功效[33]。該實驗中由白術、綿馬貫眾、板藍根、麩炒神曲組成的D5組顯著提高了魚體腸道胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性,由金銀花、連翹、炒麥芽、黨參組成D3組顯著提高了魚體腸道胰蛋白酶活性,由焦山楂、炒谷芽、山藥、蒲公英組成的D4組顯著提高了魚體腸道淀粉酶和脂肪酶活性,與復方中草藥在歐洲鰻鱺(Anguilla anguilla)[34]、日本花鱸(Lateolabrax japonicus)[3]上的研究結果一致。其作用機理可能為:中草藥中的活性成分及營養成分可以促進機體代謝和蛋白及酶類的合成,這可能是導致大菱鲆幼魚腸道消化酶活性提高的原因之一[22];此外,中草藥的某些有效成分可以通過調節“腦-腸”軸和腸道菌群來平衡動物體內的生態環境,從而增強機體的消化能力[32,35-36]。
3.4 低魚粉飼料中添加復方中草藥對養殖水環境的影響
Chai等[37]研究表明在魚類養殖中,魚體貯存利用的氮比例不超過飼料所輸入的氮的50%,且飼料主要的蛋白源魚粉中磷含量較高,不易被水產動物利用[38],因此不能被消化吸收的氮和磷便被排放進入養殖水體,造成水體污染。該實驗結果表明,負對照組水體氨氮、亞硝酸鹽氮、活性磷酸鹽含量均顯著低于正對照組,表明通過合理配比動植物蛋白源替代部分魚粉可在一定程度上提高飼料轉化率,降低水體中的氮磷排放,與在大西洋鮭上的研究結果一致[39];同時,3組不同復方中草藥均可以降低水體氨氮、亞硝酸鹽氮、活性磷酸鹽含量,且以D5組(白術∶綿馬貫眾∶板藍根∶麩炒神曲=1∶1∶1∶1)降氮磷效果最佳,其作用機理一方面與中草藥促消化、提高飼料的轉化率有關[22];另一方面可能與中草藥中的天然活性成分有關,其天然活性成分可以調節機體能量代謝,使其更多的能量用于魚體生長,減少了脫氨基作用[3,40]。
3.5 低魚粉飼料中添加復方中草藥對大菱鲆幼魚抗鰻弧菌感染能力的影響
基于中醫理論配伍成的復方中草藥在水產養殖中抗菌、抗病毒的應用已有報道[41]。該實驗鰻弧菌攻毒后,低魚粉飼料中添加3種復方中草藥均顯著降低了大菱鲆幼魚的累積死亡率,與中草藥在軍曹魚(Rachycentron canadum)[42]、譚曉晨等在團頭魴[43]上研究結果一致。其中以D5組(白術50 g、綿馬貫眾50 g、板藍根50 g、麩炒神曲50 g),累積死亡率最低(46.67%),其作用機理可能如下:1)中草藥藥劑中的多糖成分在一定程度上可以通過調控動物機體的免疫器官發育和免疫指標變化來增強其抵御外源致病菌的能力[27,44];2)中草藥的皂苷、多糖等成分可通過調節腸道菌群及代謝物而上調魚體免疫能力,從而緩解機體受到的弧菌脅迫[45-46];3)中草藥中的活性成分如生物堿、芳香族化合物等可通過干預炎癥相關細胞因子的釋放,增強對病原微生物的抑制作用,從而提高機體的免疫能力[47]。
4 結論
綜上所述,在30%低魚粉條件下,飼料中添加2%的復方中草藥(白術∶綿馬貫眾∶板藍根∶麩炒神曲=1∶1∶1∶1)可促進大菱鲆幼魚生長性能,提高抗病力、消化酶活性、血清生化指標,降低水體氨氮、亞硝酸鹽氮、活性磷酸鹽含量。
參考文獻:
[1]JIA Yudong, LEI Jilin. Molecular function of gonadotrophins and their receptors in the ovarian development of turbot (Scophthalmus maximus)[J]. General and comparative endocrinology, 2019,277:17-19.
[2]高學政,張配瑜,史雪瑩,等.飼料中復方中草藥對大菱鲆生長、飼料利用及非特定性免疫的影響[J].水生生物學報,2022,46(2):257-264.
[3]WANG Chenying, LI Zhongbao, SUN Y Z, et al. Effects of Chinese herbal medicines mixture on growth performance digestive enzyme activity immune response of juvenile Japanese seabass, Lateolabrax japonicus[J]. Aquaculture nutrition,2018,24(2):683-693.
[4]刁菁,李樂,葉海斌,等.1種中草藥復方和11種單方的體外抑菌效果及對大菱鲆腸道菌群的影響[J].水產科學,2018,37(4):433-440.
[5]張永會,羅福蘭,胡紅娟.連翹提取物對慢性盆腔炎模型大鼠的干預作用及對ICAM-1和INF-r水平的影響[J].西部醫學,2022,34(2):190-194.
[6]徐楠,杜麗樺,劉一涵,等.基于網絡藥理學探索金銀花抗菌有效成分及其分子機制[J].生命的化學,2022,42(4):797-807.
[7]王倩楠,石錦峰,鄭家勤,等.HPLC測定蒲公英中4種有機酸含量并優化提取純化工藝[J].當代化工研究,2022(9):39-41.
[8]閆艷韜,王娟,耿東浩,等.綿馬貫眾中間苯三酚類化合物抗H1N1流感病毒神經氨酸酶的活性成分篩選[J].北京中醫藥大學學報,2018,41(1):71-75.
[9]劉敏超,楊羚,呼永河.通過網絡藥理學和分子對接研究板藍根治療新型冠狀病毒肺炎的潛在作用機制[J].中藥與臨床,2022,13(2):51-57+99.
[10]楊自豪,周亨露.黨參多糖調控miR-361-5p/TLR4/NF-κB通路對胃癌細胞AGS增殖、凋亡和炎癥因子表達的影響[J].免疫學雜志,2022,38(4):347-353.
[11]黃玉瑤,張洪坤,郭長達,等.焦山楂炮制過程中成分動態變化研究[J].貴州醫藥,2022,46(3):352-354.
[12]潘景芝,孟慶龍,崔文玉,等.山藥功能性成分及藥理作用研究進展[J].食品工業科技,2023,44(1):420-428.
[13]張翠翠.六神曲炮制工藝及鑒別要點[J].光明中醫,2021,36(22):3806-3807.
[14]SONG Zhidong,LI Peiyu,WANG Jiping,et al.Dietary inclusion of hydrolyzed soybean and cottonseed meals influence digestion, metabolic enzymes, and growth-related hormones and growth of juvenile turbot(Scophthalmus maximus)[J]. Aquaculture International,2018,26(4):1017-1033.
[15]國家海洋標準計量中心.海洋調查規范:第4部分 海洋化學要素調查:GB/T 12763.4—2007[S].北京:中國標準出版社,2007,16-23.
[16]郝甜甜,王際英,潘金敏,等.核糖蛋白替代魚粉對大菱鲆幼魚生長性能、腸道消化酶活性、免疫能力及血清生化指標的影響[J].漁業科學進展,2022,43(1):86-96.
[17]RNASON J, IMSLAND A K D, HELMIG T, et al.Fishmeal replacement by mixed plant proteins and effect on growth and sensory attributes in on growing turbot[J].Aquaculture nutrition,2018,24(3):1041-1047.
[18]閆如霞,唐德富,金賀偉,等.中草藥飼料添加劑在雞生產中的應用[J].中國飼料,2021(7):50-55.
[19]張奕強,許實波,林永成.白術內酯系列物的胃腸抑制作用[J].中藥材,1999,22(12):636-640.
[20]董曉慧,李明,葉繼丹,等.復方中草藥對凡納濱對蝦生長性能和血清非特異性免疫因子的影響[J].大連水產學院學報,2009,24(2):162-165.
[21]張超,張其中,楊瑩瑩,等.復方中草藥對草魚生長和血細胞數量的影響[J].水產科學,2012,31(1):7-11.
[22]徐安樂,黎中寶,上官靜波,等.復方中草藥對珍珠龍膽石斑魚生長、非特異性免疫及消化酶活性的影響[J].海洋學報,2018,40(12):49-57.
[23]RECIO M C, CERDA-NICOLAS M, POTTERAT O, et al. Anti-inflammatory and antiallergic activity in vivo of lipophilic lsatis tinctoria extracts and tryptanthrin[J].Planta medica, 2006,72(6):539-546.
[24]WANG Lichuan, Research progress on chemical composition and efficacy of Lonicera spp[J]. Journal of anhui agricultural sciences,2009,37:2036-2037.
[25]SEUNG J I, TAKAOKA O, JEONG G S, et al. Dietary medicinal herbs improve growth and some non specific immunity of red sea bream Pagrus major[J].Fisheries science, 2007,73(1):63-69.
[26]魯振國,李美娣,武力,等.玉竹多糖和板藍根多糖對環磷酰胺致雛雞免疫抑制的調節作用研究[J].中國獸醫學雜志,2021,40(1):74-77.
[27]陳俊良,陳家雪,師調調,等.白術多糖的提取及其對南海麻黃雞免疫調控作用的研究[J].中國家禽,2021,43(10):39-47.
[28]JASAMAI M, JALIL J, SAADAWI S,et al.Inhibitory Effects of mitrella kentii extracts on inflammatory mediators biosynthesis and binding[J].Journal of herbs spices amp; medicinal plants,2019,26(2):1-10.
[29]李立,杜雅薇,寇爽,等.金銀花、連翹對甲型H1N1流感免疫調節通路影響的生物信息學分析[J].中國實驗方劑學雜志,2017,23(10):201-204.
[30]郝甜甜,張利民,李寶山,等.飼料中添加糖萜素對大菱鲆幼魚體成分、消化酶活力、血脂及腸道組織結構的影響[J].上海海洋大學學報,2015,24(3):391-402.
[31]吳璐,賴艷,王瑩,等.基于Maillard反應從消化功能的角度探討麥芽“炒香醒脾”作用機制[J].中華中醫藥學刊,2019,37(12):2905-2910.
[32]WANG Fan, LIU Haifang, LIU Fei, et al.Effects of Chinese yam (Dioscorea oppositifolia L.) dietary supplementation on intestinal microflora, digestive enzyme activity and immunity in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)[J].Aquaculture Research,2020,51(11):4698-4712.
[33]張叢敏,朱曉靜,魏金鎧,等.神曲消食口服液對功能性消化不良小鼠胃腸運動的影響及機制[J].中國比較醫學雜志,2021,31(6):83-88.
[34]HUANG Zhangfan, LU Jing, YE Youling, et al. Effects of dietary Chinese herbal medicines mixture on growth performance,digestive enzyme activity and serum biochemical parameters of European eel, Anguilla anguilla[J].Aquaculture Reports,2020,18:100510.
[35]湯菊芬,吳灶和,簡紀常,等.復方中草藥對吉富羅非魚生長及腸道菌群的影響[J].廣東海洋大學學報,2009,29(6):46-49.
[36]WANG Yun, LV Min, WANG Ting, et al. Research on mechanism of charred hawthorn on digestive through modulating \"brain-gut\" axis and gut flora[J].Journal of ethnopharmacology,2019,245:112166.
[37]CHAI X J, JI W X, HAN H, et al. Growth, feed utilization, body composition and swimming performance of giant croaker, Nibea japonica Temminck and Schlegel, fed at different dietary protein and lipid levels[J]. Aquaculture nutrition, 2013, 19(6): 928-935.
[38]VIELMA J, RUOHONEN K, PEISKER M. Dephytinization of two soy proteins increases phosphotus and protein utilization by rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)[J]. Aquaculture, 2002, 204: 143-456.
[39]柳陽,李勇,周邦雄,等.脂肪和蛋白質水平對工業養殖大西洋鮭消化酶、非特異性免疫及水質的影響[J].水產學報,2014,38(3):433-442.
[40]BEAMISH F W H, THOMAS E. Effects of dietary protein and lipid on nitrigen losses in rainbow trout, salmo gairdneri[J]. Aquaculture, 1987, 41(4): 359-371.
[41]李超,張其中,朱成科,等.增強草魚免疫功能的復方中草藥免疫增強劑篩選.西南師范大學學報(自然科學版)[J],2012,37(4):121-129.
[42]馮娟,林黑著,郭志勛,等.幾種中草藥混合劑對軍曹魚稚魚生長性能、全魚營養組成及免疫的影響[J].廣東農業科學,2012,39(22):136-141.
[43]譚曉晨,麻艷群,董升輝,等.中草藥復方制劑對團頭魴非特異性免疫機能和抗病力的影響[J].飼料研究,2022,45(4):56-60.
[44]蔡冰,陳萬光,王凡,等.復方中草藥對弧菌感染下虹鱒免疫相關基因表達的影響[J].水產科學,2020,39(5):727-733.
[45]張櫟婧,戰麗彬,杭天怡,等.基于腸道菌群探討參苓白術散改善慢性炎癥防治ZDF大鼠肥胖2型糖尿病[J].中國中藥雜志,2022,47(4):988-1000.
[46]Tzu Lunglin, Chia Chenlu, Wei Fanlai,et al.Role of gut microbiota in identification of novel TCM-derived active metabolite[J].Proteinamp;Cell,2021,12(5): 394-410.
[47]王長福,徐嘉智,王思宇,等.六神曲抗菌有效部位化學成分研究[J].時珍國醫國藥,2020,31(10):2350-2353.
Effects of compound Chinese herbal medicine on growth, intestinal digestive enzyme activity, disease resistance and aquaculture water quality of juvenile Scophthalmus maximus
JIANG Kejun1, XIANG Zhiwei2, LI Xiangpeng1, HOU Shimin1, LI Zhou 1
(1.Modern Marine Indusrty Development Promotion Center Zhifu District Yantai City, Yantai 264006, Shandong China; 2.Shandong Marine Resource and Environment Research Institute, Shandong Key Laboratory of Marine Ecological Restoration, Yantai 264003, Shandong China)
Abstract:In order to investigate the effects of adding different compound Chinese herbs to low-fish meal diet on the growth, intestinal digestive enzyme activity, disease resistance and aquaculture water quality of juvenile Scophthalmus maximus, 450 juvenile Scophthalmus maximus were divided into 5 groups with 3 replicates per group and 30 fish per replicate. One normal fishmeal group was used as a positive control group (containing 50% fishmeal, D1 group) and one low fishmeal group was used as a negative control group (30% fishmeal, D2 group). On the basis of the negative control group, three groups of different compound Chinese herbs were added with 2% respectively, which were named as D3, D4 and D5 groups. The breeding cycle is 8 weeks. The results showed that the survival rate of juvenile Scophthalmus maximus was not significantly affected by adding 3 groups of different compound Chinese herbs under the condition of low fish meal. The final body weight, weight gain rate and protein efficiency of juvenile fish in D5 group were significantly higher than those in negative control group, but there was no significant difference between D5 group and positive control group. The feed conversion ratio of D5 group was the lowest, which was significantly lower than that of negative control group, but had no significant difference from positive control group. Serum total protein and globulin contents in D4 and D5 groups were significantly higher than those in positive and negative control group (Plt;0.05), serum lysozyme content, alkaline phosphatase activity, IgM and myeloperoxidase activities in D3~D5 groups were significantly higher than those in negative control group (Plt;0.05). Compared with the negative control group, the supplementation of Chinese herbal medicine (D3~D5 groups) significantly increased the intestinal trypsin activity of juvenile fish (Plt;0.05), and the amylase and lipase were significantly increased in D4 and D5 groups (Plt;0.05). After 6 h feeding, the contents of ammonia nitrogen, nitrite and phosphate in D2~D5 groups were significantly decreased, and the lowest values were found in D5 group (Plt;0.05). Through Vibrio anguillae challenge test for 48 h, the three groups of compound Chinese herbs can improve the survival rate of juvenile fish in different degrees, and the cumulative death rate of juvenile fish in D5 group is the lowest. In summary, under the condition of 30% low fish meal, adding 2% compound Chinese herbal medicine (atractylodes∶dryopteris crassirhizoma∶isatis tinctoria∶massa medicata fermentata=1∶1∶1∶1) can promote the growth performance of juvenile turbot, improve disease resistance, digestive enzyme activity, serum biochemical indexes, and reduce the contents of ammonia nitrogen, nitrite nitrogen and active phosphate in water.
Keywords:Scophthalmus maximus; compound Chinese herbal medicine; grow; enzyme activity; disease resistance; water quality
作者簡介:姜柯君(1988- ),女,碩士,工程師,主要主要從事水產養殖研究。E-mail:dbnydxjkj@163.com。