異牡荊素通過miR-339-5p/HSPA8軸調節胰腺癌細胞的生物學行為

摘要：目的 探究異牡荊素（Isov）對胰腺癌細胞的生物學行為的影響及作用機制。方法 采用Isov處理人正常胰腺導管上皮細胞HPDE和PC細胞系；CCK-8檢測細胞存活率并計算半數抑制濃度（IC50）。將PC細胞系PANC-1細胞依次分為Control組、Isov組、Isov+in-miR-NC組、Isov+in-miR-339-5p組、Isov+in-miR-339-5p+si-NC組和Isov+in-miR-339-5p+si-HSPA8組。CCK-8、劃痕愈合實驗和Transwell實驗檢測PANC-1細胞存活、遷移和侵襲情況；實時熒光定量PCR檢測PANC-1細胞中miR-339-5p和熱休克蛋白家族A成員8（HSPA8）mRNA表達情況；Western blot法檢測各組細胞中蛋白HSPA8的表達情況；雙螢光素酶報告基因檢測miR-339-5p與HSPA8的靶向作用；異種移植裸鼠模型驗證Isov的體內抗癌作用。結果 Isov可抑制PC細胞增殖，但對HPDE細胞幾乎沒有細胞毒性。Isov可顯著降低PANC-1細胞存活率和劃痕愈合率，減少侵襲細胞數量，上調miR-339-5p表達，下調HSPA8 mRNA和蛋白水平（P＜0.05），而這種作用可被下調miR-339-5p阻斷（P＜0.05）。HSPA8是miR-339-5p的靶標基因，敲低HSPA8后逆轉了Isov對PANC-1細胞惡性生物學行為的調控作用（P＜0.05）。體內研究證實，Isov治療后，裸鼠腫瘤體積和質量減小，且miR-339-5p表達升高，HSPA8 mRNA表達降低（P＜0.05）。結論 Isov可能通過miR-339-5p/HSPA8軸抑制PC細胞的增殖、遷移和侵襲。

關鍵詞：牡荊素；胰腺腫瘤；細胞增殖；HSPA8；miR-339-5p

中圖分類號：R735.9 文獻標志碼：A DOI：10.11958/20242056

Isovitexin regulates proliferation， migration and invasion of pancreatic cancer cells via the

miR-339-5p/HSPA8 axis

YAN Lingxin， LI Sen， GUO Gaili， MENG Wanqiu， XU Chao△

First Ward of Gastroenterology Department， Handan Central Hospital， Handan 056000， China

△Corresponding Author E-mail： xzgibrca@163.com

Abstract： Objective To explore the biological behavior and mechanism of isovitexin （Isov） on pancreatic cancer cells. Methods Isov was used to treat the human normal pancreatic ductal epithelial cells HPDE and PC cell lines， and CCK-8 was used to detect the cell proliferation and calculate the half inhibitory concentration （IC50）. The PC cell line PANC-1 cells were grouped into the control group， the Isov group， the Isov+in-miR-NC group， the Isov+in-miR-339-5p group， the Isov+in-miR-339-5p+si-NC group and the Isov+in-miR-339-5p+si-HSPA8 group. The survival， migration and invasion of PANC-1 cells were detected by CCK-8， scratch healing assay and Transwell assay. Real time fluorescence quantitative PCR was used to detect the mRNA expression of miR-339-5p and heat shock protein family A member 8 （HSPA8） in PANC-1 cells. Western blot assay was used to detect protein HSPA8 expression in various groups of cells. Dual luciferase reporter gene was used to detect the targeting effect of miR-339-5p and HSPA8. A xenograft nude mouse model was used to determine the in vivo anticancer effects of Isov. Results Isov inhibited PC cell proliferation but had little cytotoxicity to HPDE cells. Isov could obviously reduce the survival rate and scratch healing rate of PANC-1 cells， reduce the number of invasive cells， up-regulate miR-339-5p expression and down-regulate HSPA8 mRNA and protein levels （P＜0.05）， while these effects were blocked by down-regulated miR-339-5p （P＜0.05）. In addition， HSPA8 was the target gene of miR-339-5p， and knockdown of HSPA8 reversed the regulatory effect of Isov on the malignant biological behavior of PANC-1 cells. In vivo studies confirmed that after Isov treatment， the tumor volume and weight of nude mice decreased， the expression of miR-339-5p was increased and the expression of HSPA8 mRNA was decreased （P＜0.05）. Conclusion Isov may inhibit the proliferation， migration and invasion of PC cells through the miR-339-5p/HSPA8 axis.

Key words： vitexin; pancreatic neoplasms; cell proliferation; HSPA8; miR-339-5p

胰腺癌（pancreatic cancer，PC）侵襲性強，惡性程度高，在全球癌癥相關死亡中排名第6［1］。確診PC后的5年生存率僅為10%左右，而超過一半的PC患者在確診時處于轉移期，不適合手術治療，導致預后不良，生存率較低［2］。對于局部晚期或轉移性PC患者，吉西他濱為基礎的聯合化療藥物，但大部分PC患者在治療開始后數周內就會產生耐藥性，這是PC化療的主要障礙［3］。異牡荊素（Isovitexin，Isov）是牡荊素的異構體，具有多種藥理活性，如抗氧化、抗炎、抗菌，并有助于預防阿爾茨海默病［4］。研究表明，Isov具有抗癌作用，能夠通過信號因子抑制肝細胞癌等癌細胞的干性，進而調控疾病進展［5］。然而，尚不清楚Isov是否對PC有效，能否抑制PC生長和轉移。微小RNA（miRNA）是近年來發現的能夠調控癌細胞各項惡性行為的小分子RNA，miR-339-5p被證實與乳腺癌、肺癌等惡性腫瘤的發生及進展有關［6-7］。有研究發現miR-339-3p在急性胰腺炎患者血清中異常表達，且表達水平與疾病的嚴重程度有關［8］。熱休克蛋白家族A成員8（HSPA8）是多種癌癥的生物標志物，在肝癌的發生與發展中發揮著重要作用［9］。研究發現HSPA8可通過與下游因子" " " "β-catenin結合形成信號軸進而調控結腸癌等腫瘤的轉移及惡性進展［10］。近年來有研究證實，山楂酸可通過下調胰腺癌細胞中的HSPA8誘導自噬［11］，因此推測其與胰腺癌細胞的惡性行為具有一定相關性。本研究將基于HSPA8所引導的信號軸探討Isov介導的抗腫瘤分子機制。

1 材料與方法

1.1 細胞、主要試劑及儀器 人正常胰腺導管上皮細胞HPDE，PC細胞系AsPC-1、PANC-1和SW1990均購自美國ATCC；胎牛血清、青-鏈霉素、CCK-8試劑盒、Trizol提取試劑、RIPA裂解液、ECL試劑盒均購自上海Beyotime；DMEM培養基、Lipofectamine 3000試劑購自美國Thermo Fisher；Isov（純度：≥98%）購自美國Sigma；miR-339-5p抑制物/模擬物（in-miR-339-5p/miR-339-5p）及其陰性對照（in-miR-NC/miR-NC）、靶向沉默HSPA8的siRNA（si-HSPA8）及其陰性對照（si-NC）均由廣州Ribobio設計并合成；Transwell小室購自美國Corning；SYBR Green Master Mix購自南京Vazyme；兔源一抗HSPA8和β-actin購自美國CST；雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒購自上海漢恒生物。SpectraMax i3x多功能酶標儀購自美谷分子儀器（上海）有限公司；FusionScope多功能顯微鏡購自量子科學儀器貿易（北京）有限公司。

1.2 研究方法

1.2.1 細胞培養 采用DMEM培養基（含10%胎牛血清和1%青鏈霉素，37 ℃、5%CO2）培養HPDE和PC細胞系（AsPC-1、PANC-1和SW1990）。將其接種到96孔細胞培養板（5×103個/孔）中，用指定濃度的Isov（0、5、10、20和40 mmol/L）［9］處理細胞24 h，添加10 mL CCK-8溶液，于37 ℃下孵育2 h，在450 nm波長處測量吸光度，計算細胞存活率和半數抑制濃度（IC50）。Isov以劑量依賴性方式抑制PC細胞系增殖（P＜0.05）。AsPC-1、PANC-1和SW1990的IC50分別為29.39、20.61和34.27 mmol/L，HPDE的IC50高于40 mmol/L，Isov對HPDE的影響并未表現出明顯的細胞毒性，見表1。相較于AsPC-1和SW1990，PANC-1對Isov具有較高敏感度，基于此，本研究將PANC-1細胞用于后續研究，并根據PANC-1細胞的IC50值選擇20 mmol/L Isov進行后續實驗。

1.2.2 細胞分組 將PANC-1細胞依次分為Control組（正常培養）、Isov組（20 μmol/L Isov處理）、Isov+in-miR-NC組（轉染in-miR-NC后20 μmol/L Isov處理）、Isov+in-miR-339-5p組（轉染in-miR-339-5p后20 μmol/L Isov處理）、Isov+in-miR-339-5p+si-NC組（轉染in-miR-339-5p和si-NC后20 μmol/L Isov處理）和Isov+in-miR-339-5p+si-HSPA8組（轉染in-miR-339-5p和si-HSPA8后20 μmol/L Isov處理）。各組細胞均按照Lipofectamine 3000試劑盒說明書進行轉染，共處理24 h。

1.2.3 CCK-8檢測細胞存活率 收集按照上述分組處理的各組PANC-1細胞，接種到96孔細胞培養板（5×103個/孔）中再次培養24 h，添加10 mL CCK-8溶液孵育2 h，在酶標儀450 nm波長處測量吸光度并計算細胞存活率。

1.2.4 劃痕愈合實驗檢測細胞遷移情況 將按照上述處理的PANC-1細胞用無血清培養基稀釋后，接種在6孔板中" "（4×105個/孔），過夜孵育后，用移液槍頭尖端垂直劃過板，在每個孔中的細胞單層上刮擦，用PBS洗去脫落的細胞，隨后將細胞培養24 h。在0 h和24 h時拍攝圖像并測量傷口距離，計算劃痕愈合率。

1.2.5 Transwell檢測細胞侵襲情況 將按照上述處理的PANC-1細胞用無血清的培養基稀釋后，接種在涂有Matrigel的Transwell小室上室中（4×104個/孔），下室中添加完全培養基。37 ℃孵育24 h后，取出小室上表面未侵入的細胞，下表面侵入的細胞用甲醛固定后結晶紫染色，通過顯微鏡對侵襲的細胞進行計數。

1.2.6 實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測細胞mRNA表達情況 使用Trizol從上述處理的各組PANC-1細胞中提取總RNA，并通過反轉錄形成cDNA，通過SYBR Green Master Mix試劑盒在ABI 7900 qRT-PCR系統（美國Applied Biosystems）上進行實時PCR反應。反應條件：95 ℃ 10 min；94 ℃ 10 s，58 ℃ 25 s，72 ℃延伸30 s，進行40次循環。引物序列：miR-339-5p上游5'?GCCGAGTCCCTGTCCTCCAGG-3'，下游5'?CTCAACTGGTGTCGTGGA-3'；HSPA8上游5'?CGAATCATCAATGAGCCAACTG-3'，下游5'?TGCCACCCCCTAAATCAAAG-3'；U6上游5'?GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3'，下游5'?CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3'；GAPDH上游5'?TCATCCCTGCTTCTACTGGC-3'，下游5'?CCTGCTTCACCACCTTCTTG-3'。將miRNA和mRNA的表達分別歸一化為U6和GAPDH，并使用2-ΔΔCt法進行分析。

1.2.7 Western blot檢測各組細胞HSPA8蛋白表達 通過補充有2 mg/L的蛋白酶抑制劑的RIPA裂解緩沖液提取按照上述處理的各組PANC-1細胞中的總蛋白。然后采用10% SDS-PAGE對其進行分離，濕法轉膜并在室溫下用5%脫脂奶粉封閉1 h后，將膜與兔源一抗HSPA8（1∶1 000）和β-actin（1∶1 000）在4 ℃過夜孵育。洗滌后添加二抗（1∶" "5 000）室溫孵育2 h。通過ECL試劑盒觀察條帶。采用凝膠成像系統和Image J軟件分析并計算目的蛋白條帶灰度值。

1.2.8 雙螢光素酶報告基因檢測miR-339-5p與HSPA8的靶向作用 PANC-1細胞在96孔板中以每孔4×104個細胞的密度生長。將含有miR-339-5p結合位點的HSPA8的野生型（WT）或突變型（MUT）構建到螢光素酶報告載體pmir-GLO上，獲得pmir-GLO-HSPA8-WT（HSPA8-WT）或pmir-GLO-HSPA8-MUT（HSPA8-MUT）。使用Lipofectamine 3000將HSPA8-WT或HSPA8-MUT與miR-339-5p（miR-339-5p組）或miR-NC（miR-NC組）共同轉染至PANC-1細胞。48 h后，通過將螢火蟲螢光素酶標準化為海腎螢光素酶來計算螢光素酶的相對活性。

1.2.9 異種移植實驗驗證 從北京實驗動物研究中心獲得4周齡雌性BALB/c裸鼠10只，生產許可證號SCXK（京）2021-0006，使用許可證號SYXK（京）2022-0019。適應性生長1周后，將5×106個PANC-1細胞皮下注射到4周齡的雌性裸鼠中。1周后，將可觸及到腫瘤的動物采用隨機數字表法分為Isov組和Control組，每組5只。Isov組裸鼠腹腔注射20 mg/kg的Isov（溶解在5% DMSO和95%鹽水中）［12］，Control組腹腔注射對照溶劑（5% DMSO和95%鹽水）。每周3次，持續4周。處死裸鼠，取出腫瘤體，測量腫瘤組織體積和質量，并用于qRT-PCR檢測組織中miR-339-5p和HSPA8 mRNA的表達情況。步驟同1.2.6。

1.3 統計學方法 采用SPSS 22.0軟件進行數據分析。計量資料以[x]±s]表示。多組間比較采用單因素方差分析，組間多重比較采用SNK-q檢驗。2組間比較采用t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Isov對PC細胞存活、遷移和侵襲的影響 與Control組比較，Isov組細胞存活率、劃痕愈合率降低，侵襲細胞數量減少，miR-339-5p表達上調，HSPA8 mRNA和蛋白水平下調（P＜0.05）。與Isov+in-miR-NC組比較，Isov+in-miR-339-5p組細胞存活率、劃痕愈合率升高，侵襲細胞數量增加，miR-339-5p表達下調，HSPA8 mRNA和蛋白水平上調（P＜0.05）。與Isov+in-miR-339-5p+si-NC組比較，Isov+in-miR-339-5p+si-HSPA8組細胞存活率、劃痕愈合率降低，侵襲細胞數量減少，miR-339-5p表達變化差異無統計學意義，HSPA8 mRNA和蛋白水平下調（P＜0.05），見圖1—3、表2。

2.2 miR-339-5p與HSPA8靶向調控關系 生物信息學分析顯示，HSPA8存在與miR-339-5p相互作用的結合位點，見圖4。雙螢光素酶實驗顯示，與miR-NC組比較，miR-339-5p組轉染HSPA8-WT螢光素酶活性降低（P＜0.01）；而轉染HSPA8-MUT則未能改變螢光素酶活性（P＞0.05），見表3。

2.3 Isov對裸鼠體內腫瘤生長的影響 與Control組比較，Isov組腫瘤質量和體積降低，miR-339-5p表達上調，HSPA8 mRNA表達下調（P＜0.01）。見圖5、表4。

3 討論

既往研究表明，癌細胞增殖和轉移的失調是導致惡性腫瘤發展的重要因素之一［13］。因此，抑制癌細胞的增殖和轉移是治療腫瘤的主要方法。然而，目前用于腫瘤治療的西藥由于不良反應嚴重，限制了其臨床應用［14］。從中藥中提取高效、低毒的抗腫瘤藥物已成為開發新藥的重要途徑。Isov是一種天然類黃酮化合物，通常與牡荊素一起純化［15］。研究表明，Isov具有對抗結腸癌等多種癌癥的作用［12］。然而，Isov對PC的影響仍不清楚。本研究首先分析了Isov對人正常胰腺導管上皮細胞和3種PC細胞的影響，發現Isov可以降低PC的存活率。且Isov不會在人正常胰腺導管上皮細胞中誘導細胞毒性。基于IC50值，使用PANC-1細胞進行進一步的研究。從CCK-8實驗、劃痕愈合實驗和Transwell實驗的結果來看，Isov有效地抑制了PC細胞的增殖、遷移和侵襲。同時，體內研究證實，Isov對PC細胞的異種移植瘤生長具有明顯的抑制作用。以上結果說明，Isov可通過抑制PC細胞的增殖、遷移和侵襲發揮抗癌作用。

表觀遺傳修飾對癌癥發生發展至關重要。miRNA介導的mRNA調控被認為是癌癥進展的關鍵因素。miRNA可以作為癌基因、腫瘤抑制基因以及癌癥干細胞和轉移的調節劑［16-17］。miR-339-5p在各種類型的癌癥中充當腫瘤抑制因子。miR-339-5p在前列腺癌組織和細胞中低表達，且miR-339-5p的下調與Gleason評分、淋巴結轉移和TNM分期顯著相關，過表達miR-339-5p可抑制前列腺癌細胞的增殖、遷移和侵襲［18］。此外，miR-339-5p在肺癌中通過靶向抑制Nudix結構水解酶5（NUDT5）水平而增加A549細胞的放射敏感性［7］。Yu等［19］研究發現，miR-339-5p在PC中低表達，過表達的miR-339-5p可明顯抑制PC細胞的侵襲和遷移。本研究結果顯示，在Isov干預的PC細胞中，miR-339-5p高表達，表明Isov可能通過激活miR-339-5p發揮抗癌作用。進一步結果顯示，抑制miR-339-5p可部分逆轉Isov對PC細胞增殖、遷移和侵襲的影響，表明Isov通過調節miR-339-5p來抑制PC細胞增殖、遷移和侵襲。但Isov是否直接調節miR-339-5p的表達仍需進一步探索。為了進一步探索miR-339-5p參與Isov的抗癌機制，通過在線軟件對其靶點進行了篩選，生物信息學分析顯示，HSPA8存在與miR-339-5p相互作用的結合位點，且雙螢光素酶報告基因分析證明了miR-339-5p和HSPA8之間的直接相互作用。此外，miR-339-5p下調可誘導HSPA8表達上調。作為miR-339-5p的下游靶點，HSPA8是一種組成型表達的分子伴侶，在細胞應激反應中起著不可或缺的作用［20］。HSPA8在多種癌細胞中過度表達，其高表達可促進癌細胞生長［11，21］，且表達情況還會影響癌細胞的凋亡及細胞周期［22-23］。在本研究中，沉默HSPA8后逆轉了Isov的抗癌作用。因此推測Isov可能通過影響miR-339-5p/HSPA8軸抑制PC細胞增殖、遷移和侵襲。然而，本研究僅初步探究了Isov對miR-339-5p/HSPA8軸的影響，其作用機制可能涉及多種途徑。在未來的研究中，有必要評估Isov的其他生物學功能。

綜上，Isov可抑制PC細胞增殖、遷移和侵襲，在體內可抑制腫瘤組織生長，其有效機制可能與調節miR-339-5p/HSPA8軸有關。本研究為Isov作為潛在抗PC藥物提供了有利的證據。然而，Isov的療效還需要大量的臨床試驗來證實。

參考文獻

［1］ BRAY F，LAVERSANNE M，SUNG H，et al. Global cancer statistics 2022：GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries［J］. CA Cancer J Clin，2024，74（3）：229-263. doi：10.3322/caac.21834.

［2］ 劉亮，王文權，樓文暉. 未來提高胰腺癌臨床診治效果的十大方向［J］. 中華外科雜志，2022，60（1）：10-16. LIU L，WANG W Q，LOU W H. Ten directions for improving the clinical diagnosis and treatment effect of pancreatic cancer in the future［J］. Chin J Surg，2022，60（1）：10-16. doi：10.3760/cma.j.cn112139-20211109-00525.

［3］ 央茂，馮佳毅，劉穎斌. 胰腺癌化療中吉西他濱耐藥機制研究進展［J］. 中國實用外科雜志，2022，42（2）：225-229. YANG M，FENG J Y，LIU Y B. Advances in the mechanism of gemcitabine resistance in pancreatic cancer chemotherapy［J］. Chinese Journal of Practical Surgery，2022，42（2）：225-229. doi：10.19538/j.cjps.issn1005-2208.2022.02.19.

［4］ XIANG H，YANG P，WANG L，et al. Isovitexin is a direct inhibitor of staphylococcus aureus coagulase［J］. J Microbiol Biotechnol，2021，31（10）：1350-1357. doi：10.4014/jmb.2105.05013.

［5］ XU C，CAO X，CAO X，et al. Isovitexin inhibits stemness and induces apoptosis in hepatocellular carcinoma SK-Hep-1 spheroids by upregulating miR-34a expression［J］. Anticancer Agents Med Chem，2020，20（14）：1654-1663. doi：10.2174/1871520620666200424123139.

［6］ 吳衍，高文玉，高蘇平，等. 血清miR-196a-5p和miR-339-5p表達水平在乳腺癌診斷中的應用價值［J］. 中國普通外科雜志，2021，30（5）：551-557. WU Y，GAO W Y，GAO S P，et al. Application value of serum miR-196a-5p and miR-339-5p expression levels in diagnosis of breast cancer［J］. Chinese Journal of General Surgery，2021，30（5）：551-557. doi：10.7659/j.issn.1005-6947.2021.05.007.

［7］ 王柏霖，云天洋，王發鵬，等. miR-339-5p通過抑制NUDT5增強肺癌A549細胞的放射敏感性［J］. 中國腫瘤生物治療雜志，2020，27（8）：867-873. WANG B L，YUN T Y，WANG F P，et al. miR-339-5p inhibits NUDT5 and enhances radiosensitivity of lung cancer A549 cells［J］. Chinese Journal of Cancer Biotherapy，2020，27（8）：867-873. doi：10.3872/j.issn.1007-385x.2020.08.005.

［8］ 孫磊，吳海棠，熊建新. 血清miR-183-5p和miR-339-3p水平與急性胰腺炎患者嚴重程度及預后的關系［J］. 國際檢驗醫學雜志，2024，45（11）：1353-1357. SUN L，WU H T，XIONG J X. Relationship between serum miR-183-5p and miR-339-3p levels and the severity and prognosis of patients with acute pancreatitis［J］. International Journal of Laboratory Medicine，2024，45（11）：1353-1357. doi：10.3969/j.issn.1673-4130.2024.11.015.

［9］ WANG Y，ZHAO M，ZHAO L，et al. HBx-induced HSPA8 stimulates HBV replication and suppresses ferroptosis to support liver cancer progression［J］. Cancer Res，2023，83（7）：1048-1061. doi：10.1158/0008-5472.CAN-22-3169.

［10］ LI B，MING H，QIN S，et al. HSPA8 activates Wnt/β-Catenin signaling to facilitate BRAF V600E colorectal cancer progression by CMA-mediated CAV1 degradation［J］. Adv Sci（Weinh），2024，11（3）：e2306535. doi：10.1002/advs.202306535.

［11］ TIAN Y，XU H，FAROOQ A A，et al. Maslinic acid induces autophagy by down-regulating HSPA8 in pancreatic cancer cells［J］. Phytother Res，2018，32（7）：1320-1331. doi：10.1002/ptr.6064.

［12］ ZHU H，ZHAO N， JIANG M. Isovitexin attenuates tumor growth in human colon cancer cells through the modulation of apoptosis and epithelial-mesenchymal transition via PI3K/Akt/mTOR signaling pathway［J］. Biochem Cell Biol，2021，99（6）：741-749. doi：10.1139/bcb-2021-0045.

［13］ 劉丹陽，李永濤，張海燕，等. 乳腺癌細胞條件培養基對骨髓間充質干細胞生物學行為的影響［J］. 天津醫藥，2024，52（5）：454-458. LIU D Y，LI Y T，ZHANG H Y，et al. Effect of breast cancer cell conditioned medium on biological behavior of bone marrow mesenchymal stem cells［J］. Tianjin Med J，2024，52（5）：454-458. doi：10.11958/20231487.

［14］ 張穎慧，謝雁鳴，張寅，等. 基于關聯規則Apriori算法的真實世界復方苦參注射液治療食管惡性腫瘤聯用西藥特征的研究［J］. 中藥藥理與臨床，2018，34（4）：176-180. ZHANG Y H，XIE Y M，ZHANG Y，et al. A Real-world study based on hospital information system of association rules based analysis of Fufangkushen Injection in combination with modern medications in treating malignant esophageal tumors［J］. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica，2018，34（4）：176-180. doi：10.13412/j.cnki.zyyl.2018.04.042.

［15］ ABDULAI I L，KWOFIE S K，GBEWONYO W S，et al. Multitargeted effects of Vitexin and Isovitexin on diabetes mellitus and its complications［J］. Scientific World Journal，2021，2021：6641128. doi：10.1155/2021/6641128.

［16］ 呂朝陽，黃婷，徐在革，等. LncRNA TUG1通過調節miR-181b-5p/PDCD4軸對高糖誘導的心肌細胞凋亡的影響［J］. 天津醫藥，2023，51（12）：1281-1287. LYU C Y，HUANG T，XU Z G，et al. Impact of LncRNA TUG1 on high glucose-induced cardiomyocyte apoptosis by regulating the miR-181b-5p/PDCD4 axis［J］. Tianjin Med J，2023，51（12）：1281-1287. doi：10.11958/20230523.

［17］ ZHOU M，GAO Y，WANG M，et al. MiR-146b-3p regulates proliferation of pancreatic cancer cells with stem cell-like properties by targeting MAP3K10［J］. J Cancer，2021，12（12）：3726-3740. doi：10.7150/jca.48418.

［18］ PAN H，RUI X，WEI W，et al. Prognostic value of miR-339-5p in patients with prostate cancer and its effects on tumor progression［J］. Exp Ther Med，2021，21（4）：390. doi：10.3892/etm.2021.9821.

［19］ YU Z，ZHAO S，WANG L，et al. miRNA-339-5p plays an important role in invasion and migration of pancreatic cancer cells［J］. Med Sci Monit，2019，25：7509-7517. doi：10.12659/MSM.917038.

［20］ LOSMANOVA T，ZENS P，SCHERZ A，et al. Chaperone-mediated autophagy markers LAMP2A and HSPA8 in advanced non-small cell lung cancer after neoadjuvant therapy［J］. Cells，2021，10（10）：2731. doi：10.3390/cells10102731.

［21］ ZHANG C，WANG Y，WU G，et al. RPL35A promotes the progression of cholangiocarcinoma by mediating HSPA8 ubiquitination［J］. Biol Direct，2024，19（1）：16. doi：10.1186/s13062-024-00453-6.

［22］ HAN L，XU D，XI Z，et al. The natural compound oblongifolin C exhibits anticancer activity by inhibiting HSPA8 and cathepsin B in vitro［J］. Front Pharmacol，2020，11：564833. doi：10.3389/fphar.2020.564833.

［23］ KOU X，YANG X，ZHAO Z，et al. HSPA8-mediated stability of the CLPP protein regulates mitochondrial autophagy in cisplatin-resistant ovarian cancer cells［J］. Acta Biochim Biophys Sin（Shanghai），2024，56（3）：356-365. doi：10.3724/abbs.2023246.

（2024-12-02收稿 2025-01-20修回）

（本文編輯 李志蕓）

基金項目：邯鄲市科學技術研究與發展計劃項目（23422083233）

作者單位：邯鄲市中心醫院消化內科一病區（郵編056000）

作者簡介：閆玲新（1988），女，主治醫師，主要從事幽門螺桿菌感染、胃炎、胰腺炎等消化系統疾病的診治方面研究。E-mail：x96onx@163.com

△通信作者 E-mail：xzgibrca@163.com

引用本文：閆玲新，李森，郭改莉，等. 異牡荊素通過miR-339-5p/HSPA8軸調節胰腺癌細胞的生物學行為［J］. 天津醫藥，2025，53（3）：230-235. YAN L X，LI S，GUO G L，et al. Isovitexin regulates proliferation， migration and invasion of pancreatic cancer cells via the miR-339-5p/HSPA8 axis［J］. Tianjin Med J，2025，53（3）：230-235." doi：10.11958/20242056.