鐵皮石斛提取物多效乳液配方設(shè)計(jì)及功效研究

文章探討了復(fù)合鐵皮石斛提取物精簡(jiǎn)配方乳液在化妝品中的功效與應(yīng)用，以及其順應(yīng)純凈美肌的護(hù)膚理念。本研究設(shè)計(jì)了一款敏感肌人群可用且多效護(hù)膚的精簡(jiǎn)配方乳液，進(jìn)行穩(wěn)定性測(cè)試并通過人體功效試驗(yàn)測(cè)試33名乳酸刺痛陽(yáng)性志愿者使用乳液前后4周皮膚角質(zhì)層含水量、經(jīng)皮水分流失量、彈性參數(shù)、皺紋參數(shù)、平滑度、光澤度、粗糙度參數(shù)、乳酸刺痛評(píng)分、Primos-CR及Visia-CR等指標(biāo)的變化。結(jié)果顯示，該配方多效乳液穩(wěn)定性良好，使用后皮膚含水量顯著上升，經(jīng)皮失水顯著下降，彈性參數(shù)R2顯著上升而F4顯著下降，眼角皺紋深度、面積與體積也明顯減少，平滑度、光澤度、粗糙度、乳酸刺痛、Primos-CR與Visia-CR展示圖片也明顯改善。綜上，含復(fù)合石斛提取物的精簡(jiǎn)配方乳液具有保濕、修護(hù)、緊致、抗皺、滋養(yǎng)和舒緩的效果。

關(guān)鍵詞：鐵皮石斛；多效乳液；精簡(jiǎn)配方；人體臨床試驗(yàn)

石斛（Dendrobii caulis）作為我國(guó)“九大仙草”之首，為蘭科植物中珍稀名貴中藥材，最早見于《神農(nóng)本草經(jīng)》，以強(qiáng)陰補(bǔ)虛見長(zhǎng)。《中國(guó)藥典》2020年版收載石斛類藥材有鐵皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）、金釵石斛（Dendrobium nobile Lindl）和霍山石斛（Dendrobium huoshanense C. Z. Tang et S. J. Cheng）等的新鮮或干燥莖。其中，鐵皮石斛因較高的藥用價(jià)值和較完善的規(guī)模化種植被廣泛應(yīng)用[1]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，鐵皮石斛的主要活性成分為多糖、生物堿、氨基酸等[2]，因此在護(hù)膚品中的功效運(yùn)用具有很高價(jià)值。

目前對(duì)鐵皮石斛活性成分的研究主要集中在其莖部，而對(duì)鐵皮石斛花、葉部的研究較少[2]。隨著對(duì)鐵皮石斛花、葉部的化學(xué)組分及營(yíng)養(yǎng)成分的研究深入，發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛花和葉部營(yíng)養(yǎng)成分豐富，也具有一定的應(yīng)用價(jià)值。多糖是鐵皮石斛的主要活性成分[3]，其在葉部的多糖含量顯著高于花，且石斛葉部的DPPH自由基清除能力優(yōu)于莖部，二者在清除羥自由基方面具有類似功能[4]。李芳等[5]研究結(jié)果顯示，鐵皮石斛花中的黃酮含量和自由基清除能力均最高。鐵皮石斛花中有16種氨基酸，葉部檢出17種，葉部總氨基酸含量高于莖部[4]。唐文文等[6]研究表明發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛莖、葉、花中均含有多糖、黃酮、多酚和生物堿類等活性成分；莖中多糖含量高于葉和花，但葉和花的黃酮類、多酚及生物堿類含量甚至比莖還高。綜上，莖部含有較多的多糖，葉和花中含有較多黃酮和多酚，可為鐵皮石斛護(hù)膚品不同功效的運(yùn)用提供方向，三者搭配復(fù)合可能發(fā)揮更好效果。

在天然、環(huán)保和多元化的理念影響下，主打天然、有機(jī)、不致敏成分的“純凈護(hù)膚”賽道成為美妝個(gè)護(hù)新的消費(fèi)趨勢(shì)[7]，開發(fā)出兼具顯著護(hù)膚效果和高安全性的產(chǎn)品將成為護(hù)膚行業(yè)的重要競(jìng)爭(zhēng)力。目前市場(chǎng)上常見的針對(duì)敏感性皮膚的產(chǎn)品多以舒緩或修護(hù)為主[8]，較少同時(shí)具備兩者或更多功效。我國(guó)皮膚病專家共同發(fā)布的《中國(guó)敏感性皮膚診治專家共識(shí)》，將敏感性肌膚評(píng)定方法劃分為主觀評(píng)估、半主觀評(píng)估和客觀評(píng)估。而乳酸刺痛試驗(yàn)（LacticAcid Sting Test，LAST） 是該共識(shí)中提到的半主觀評(píng)價(jià)方法之一，同時(shí)也是目前評(píng)價(jià)敏感肌方法中認(rèn)可度最高、應(yīng)用最廣泛的方法[9-10]。并且精簡(jiǎn)成分對(duì)皮膚的潛在影響和刺激更少，精簡(jiǎn)配方能使產(chǎn)品更安全更溫和舒緩，更受消費(fèi)者青睞[11]。

本文通過人體乳酸刺痛與人體臨床試驗(yàn)探究了一種含鐵皮石斛莖提取物、鐵皮石斛花提取物和鐵皮石斛葉提取物為組合活性物的精簡(jiǎn)乳液的多種功效，為鐵皮石斛提取物在功效護(hù)膚品和敏感肌護(hù)膚品中的運(yùn)用實(shí)例提供參考。

Part 1實(shí)驗(yàn)部分

1.1 測(cè)試材料與測(cè)試儀器

測(cè)試儀器：Corneometer CM825型皮膚水分含量測(cè)試儀，Tewameter TM300型經(jīng)皮失水率測(cè)試儀，Cutometer MPA580 型皮膚彈性測(cè)試儀，VisioScan VC20 plus 型皮膚表面紋理測(cè)試儀，德國(guó)CK公司；Primos-CR，Visia-CR，美國(guó) Canfield公司。測(cè)試材料：乳酸（純度≥98%），美國(guó) Sigma-Aldrich公司。

1.2 測(cè)試樣品制備

為了順應(yīng)精簡(jiǎn)護(hù)膚的理念，設(shè)計(jì)了一款僅含有14種成分的精簡(jiǎn)配方，配方精選有安全使用歷史且溫和的常用化妝品原料，使用盡可能少的原料種類及添加量，未添加香精、著色劑、防腐劑和陽(yáng)離子表面活性劑，滿足敏感肌人群護(hù)膚追求。精簡(jiǎn)乳液配方的具體成分及含量見表1。

制備工藝：（1）清潔并消毒生產(chǎn)設(shè)備；（2）A相原料加入配料鍋后分散均勻，攪拌升溫至80℃-85℃，保溫10分鐘；（3） B相原料加熱80℃-85℃溶解均勻，保溫10分鐘；（4） B相原料加入A相原料中，均質(zhì)均勻后降溫至40℃-45℃；（5）加入C相攪拌均勻，檢驗(yàn)合格過濾出料。

1.3 穩(wěn)定性測(cè)試

耐熱測(cè)試：恒溫培養(yǎng)箱調(diào)節(jié)到 40 ℃，將前述制取的化妝品樣品裝于透明玻璃瓶中，裝樣量為 10mL/瓶，封口后置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，三個(gè)月后取出，恢復(fù)至室溫，觀察外觀變化。

耐寒測(cè)試：恒溫培養(yǎng)箱調(diào)節(jié)到零下10 ℃，將前述制取的樣品裝于透明玻璃瓶中，裝樣量為 10 mL/瓶，封口后置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，三個(gè)月后取出，恢復(fù)至室溫，觀察外觀變化。

常溫測(cè)試：將前述制取的樣品A和B裝于透明玻璃瓶中，裝樣量為 10mL/瓶，封口后常溫下放置 6 個(gè)月后，觀察外觀變化。

光老化測(cè)試：將前述制取的樣品裝于透明玻璃瓶中，裝樣量為 10mL/瓶，封口后白熾燈光下放置三個(gè)月后，觀察外觀變化。

1.4 功效測(cè)試方法

篩選出年齡在18歲至55歲之間的33位乳酸刺痛反應(yīng)陽(yáng)性的中國(guó)健康受試者連續(xù)使用測(cè)試產(chǎn)品4周。在產(chǎn)品使用前、使用2周和使用4周后，分別檢測(cè)皮膚角質(zhì)層水分含量、經(jīng)皮水分流失量、皮膚彈性參數(shù)、眼角皺紋參數(shù)（皺紋深度、皺紋面積、皺紋體積）、皮膚平滑度參數(shù)SEsm、光澤度、粗糙度參數(shù)SEr、乳酸刺痛評(píng)分、Primos-CR及Visia-CR等指標(biāo)變化，評(píng)價(jià)產(chǎn)品保濕、修護(hù)、緊致、抗皺、滋養(yǎng)與舒緩等效果。

面部敏感肌乳酸測(cè)試采用以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。將50μL的10%乳酸溶液滴在直徑為0.8cm的濾紙上，分別在30s、2.5min和5min詢問受試者刺痛感，按4分法進(jìn)行評(píng)分（0分為沒有刺痛感，1分為輕度刺痛，2分為中度刺痛，3分為重度刺痛）。反應(yīng)相2.5min和5min后的刺痛感累計(jì)≥3分者為乳酸刺痛陽(yáng)性者[8-10]，測(cè)試結(jié)果記錄在乳酸刺痛測(cè)試記錄表上。

1.5 數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用SPSS22.0對(duì)各測(cè)量值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。若結(jié)果呈正態(tài)性分布，則采用配對(duì)t檢驗(yàn)；若結(jié)果為非正態(tài)分布，則采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。“*”表示有顯著性差異（P<0.05）；“**”（P<0.01）、“***”（P<0.001）表示極顯著性差異。

Part 2結(jié)果與討論

2.1 穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果

穩(wěn)定性測(cè)試的目標(biāo)是確定化妝品產(chǎn)品在銷售的市場(chǎng)條件下是否具有足夠的貨架期。國(guó)家藥監(jiān)局發(fā)布的《化妝品安全評(píng)估技術(shù)導(dǎo)則》中規(guī)定應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品的具體情況評(píng)價(jià)相關(guān)理化指標(biāo)以確定產(chǎn)品的穩(wěn)定性，保障每批次上市化妝品的質(zhì)量穩(wěn)定，主要包括外觀、顏色、氣味、析出、沉淀等狀態(tài)的判斷[12]。本研究成功制備化妝品樣品，并進(jìn)行穩(wěn)定性測(cè)試，穩(wěn)定性結(jié)果表明，耐熱測(cè)試、耐寒測(cè)試、常溫測(cè)試、光老化測(cè)試均未觀察到析出、沉淀等現(xiàn)象，保持原來(lái)外觀，顏色與氣味正常，狀態(tài)良好。

2.2 皮膚角質(zhì)層含水量（MMV）與經(jīng)皮水分流失量（TEWL）

可通過皮膚水分含量（MMV）表征皮膚水分，MMV值越大，角質(zhì)層含水量越高，說明保濕效果越好。經(jīng)皮水分流失量（TEWL）用來(lái)評(píng)價(jià)皮膚屏障功能，是使用產(chǎn)品后考察皮膚修護(hù)的重要參數(shù)，其數(shù)值越小皮膚經(jīng)皮失水越少，皮膚屏障越好，修護(hù)效果越好。由圖1可知，使用石斛乳液2周與4周時(shí)，皮膚角質(zhì)層含水量在試驗(yàn)周期內(nèi)呈逐漸升高趨勢(shì)，相對(duì)于0周分別升高了15.2%和17.4%（P<0.001），即石斛乳液具有顯著提高皮膚角質(zhì)層含水量的保濕效果。而經(jīng)表皮水分流失量在試驗(yàn)周期內(nèi)呈逐漸降低趨勢(shì)，與0周相比分別降低了6.3%和10.4% （P<0.001），即石斛乳液具有顯著降低經(jīng)表皮水分流失的修護(hù)效果。

2.3 皮膚彈性分析（彈性參數(shù)R2、彈性參數(shù)F4）

緊致功效可通過彈性參數(shù)R2值和F4兩個(gè)維度來(lái)表征。R2為回彈部分與拉伸部分的彈塑性總量的比值，值越接近1說明粘彈性越好，即R2值越大皮膚彈性越好。F4值為所有測(cè)試周期施加負(fù)壓和消除負(fù)壓過程中所形成的包絡(luò)曲線內(nèi)的面積值，值越小表征皮膚越緊實(shí)[11]。由圖2可知，使用石斛乳液2周與4周皮膚彈性參數(shù)R2在試驗(yàn)周期內(nèi)呈逐漸升高趨勢(shì)，與初始值相比升高了4.6%和8.8% （P<0.001）。而皮膚彈性參數(shù)F4在試驗(yàn)周期內(nèi)呈逐漸降低趨勢(shì)，與初始值相比，分別降低了7.5%和21.4% （P<0.001），即石斛乳液具有增加彈性和增加緊實(shí)度的緊致功效。

2.4 眼角皺紋分析（Svm參數(shù)、皺紋面積參數(shù)、皺紋體積參數(shù)）

通過眼角皺紋深度、皺紋面積和皺紋體積三個(gè)維度可表征護(hù)膚品的抗皺功效[12]。皺紋深度Svm參數(shù)越低，表示皮膚輪廓線比較淺，皺紋越淺；皺紋面積與體積參數(shù)越小，表示皮膚皺紋越少。由表2可知，使用石斛乳液2周和4周后，眼角皺紋深度試驗(yàn)周期內(nèi)逐漸降低，分別比0周降低了3.1%和5.5% （P<0.05）。眼角皺紋面積在試驗(yàn)周期內(nèi)逐漸降低，分別比0周降低了9.2%和11.2%（P<0.001）。皺紋體積在試驗(yàn)周期內(nèi)也呈逐漸降低趨勢(shì)，分別降低了10.2%和12.2%（P<0.01），即石斛乳液具有降低皺紋深度、面積和體積的抗皺功效。

2.5皮膚平滑度、光澤度和粗糙度分析

滋養(yǎng)功效可通過平滑度、光澤度、粗糙度、角質(zhì)層含水量和緊致度5個(gè)維度來(lái)表征[13-14]。平滑程度（SEsm）可通過計(jì)算正態(tài)分布圖的平均寬度和水平與垂直方向上的皺紋的平均寬度得出。因越光滑的皮膚其不同的灰度等級(jí)的級(jí)數(shù)越少，其灰度等級(jí)正態(tài)分布圖的分布越小。SEsm 值越小，測(cè)量區(qū)域越光滑。粗糙程度（SEr）是粗糙度參數(shù)，與整個(gè)圖像的粗糙度相比，計(jì)算超過閾值的灰度級(jí)別。SEr 越小，皮膚越粗糙。由表3可知，使用石斛乳液2周和4周后，皮膚平滑度參數(shù)在試驗(yàn)周期內(nèi)呈逐漸降低趨勢(shì)，分別降低了7.0%和9.7%（P<0.01）；皮膚光澤度呈逐漸升高趨勢(shì)，分別升高了11.7%和15.6% （P<0.001）；皮膚粗糙度參數(shù)呈逐漸升高趨勢(shì)，分別升高了8.2%和16.1% （P<0.01），即石斛乳液具有改善皮膚平滑度、光澤度和粗糙度的功效。結(jié)合上述提高皮膚含水量和緊致度的功效，表明石斛乳液具有滋養(yǎng)功效。

2.6乳酸測(cè)試結(jié)果分析

乳酸刺痛試驗(yàn)評(píng)分降低，表明乳酸耐受增強(qiáng)，具有舒緩功效[15]。由圖3可知，使用石斛乳液4周后，受試者對(duì)乳酸刺激的耐受性改善人數(shù)占比為72.7%；受試者對(duì)乳酸刺痛的評(píng)分顯著降低了1.1分（P<0.001），即石斛乳液具有舒緩、改善肌膚敏感程度的功效。

2.7 Primos-CR及Visia-CR人體功效展示圖片

如圖4所示，使用石斛乳液4周后，Primos-CR展示出志愿者的皺紋深度、面積及體積都有所改善，Visia-CR結(jié)果顯示眼下皺紋與法令紋有所改善，皺紋明顯變淺，表明石斛乳液具有一定的緊致抗皺效果。

Part 3結(jié)論

本文設(shè)計(jì)了一款含復(fù)合鐵皮石斛提取物乳液的精簡(jiǎn)配方，并且進(jìn)行了人體功效測(cè)試，驗(yàn)證該乳液的多重護(hù)膚功效。穩(wěn)定性良好，且皮膚含水量與經(jīng)皮失水得到了顯著改善，說明該乳液有一定的保濕與修護(hù)功效；彈性參數(shù)R2顯著上升、F4顯著下降，眼角皺紋深度、面積與體積也明顯減少，說明該乳液有緊致、抗皺的效果；平滑度、光澤度、粗糙度與乳酸刺痛也明顯改善，說明有一定的滋養(yǎng)與舒緩功效；Primos-CR及Visia-CR人體功效展示圖片得到了很好的改善。綜上所述，含三重鐵皮石斛提取物的乳液具有保濕、修護(hù)、緊致、抗皺、滋養(yǎng)和舒緩等多種功效，且對(duì)乳酸刺激的耐受性增加，初步驗(yàn)證滿足敏感肌人群的多種護(hù)膚功效追求，可為復(fù)合鐵皮石斛提取物在配方中的搭配使用提供一定的參考意義。

作者介紹

第一作者 龐麗婷：供職于植物醫(yī)生（廣東）生物科技有限公司，主要從事化妝品配方開發(fā)和基礎(chǔ)研究

共同第一作者 袁道歡：供職于植物醫(yī)生（廣東）生物科技有限公司，主要從事化妝品配方開發(fā)和基礎(chǔ)研究E-mail： yuandaoh@126.com

沈惠珍，謝圓芳，何超華，田佳佳：供職于植物醫(yī)生（廣東）生物科技有限公司

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