甲酸與貯藏時間對柱花草青貯飼料化學成分及生物胺含量的影響

摘要：為評價甲酸與貯藏時間對柱花草（Stylosanthes guicmensis）青貯飼料化學成分及生物胺含量的影響，本試驗設置對照組和甲酸（ 處理組，每組分別青貯1個月和12個月，然后測定化學成分和生物胺含量，并分析兩者之間的相關性。結果表明，甲酸處理顯著降低了青貯飼料 值和氨態氮含量 ，顯著提高了干物質和可溶性糖含量 。貯藏1個月時，對照組青貯飼料中主要生物胺是尸胺 M）、腐胺1 ）及酪胺 ；隨著貯藏時間的延長，尸胺、酪胺及總生物胺含量顯著增加 。甲酸處理顯著降低了尸胺、腐胺、酪胺及總生物胺含量（ 。相關性分析結果表明，腐胺、尸胺、酪胺及總生物胺含量與pH值、游離氨基酸氮及氨態氮含量呈顯著正相關關系 。因此，建議在柱花草青貯時添加甲酸，以提高青貯飼料的品質和衛生安全性。

中圖分類號：S816.53 文獻標識碼：A 文章編號：1007-0435（2025）04-1335-08

Abstract：To evaluate the efect of formic acid and storage time on chemical composition and biogenic amines contents of stylo（Stylosanthes guicmensis） silage，the control and formic acid groups （ ）were preparedand stored forl and12 months in theexperiment，respectively.After silo opening，chemical composition and biogenic amines contents were determined and the correlation between the measured parameters was further analyzed. The results showed that the application of formic acid significantly decreased and ammonia nitrogen value （ ）and significantly increased dry matter and water soluble carbohydrates contents （ P lt; 0.05）.The main biogenic amines were cadaverine ，putrescine DM），and tyramine DM） in control silage stored for l month；With longer storage time， cadaverine，tyramine and total biogenic amine contents remarkably increased （ . Applying formic acid lowered cadaverine，putrescine，tyramine and total biogenic amine contents （ . The correlation analysis indicated that cadaverine，putrescine，tyramine and total biogenic amine were positively related to ，free amino acids nitrogen and ammonia nitrogen （ .Therefore，formic acid should be added to improve

silage quality and hygienic quality at stylo ensiling. Keywords：Stylo；Formic acid；Biogenic amine；Silage

青貯是一種常用的保存牧草技術1，青貯飼料質地柔軟，適口性好，消化率高，有利于養殖業集約化經營[2]。牧草青貯過程中真蛋白發生降解，游離氨基酸在氨基酸脫羧酶作用下脫羧形成生物胺3。生物胺是一類低分子量含氮有機化合物，按照化學結構將其分為脂肪胺（腐胺、尸胺、精胺及亞精胺）芳香胺（酪胺和苯乙胺）及雜環胺（組胺和色胺）4。生物胺廣泛存在于青貯飼料中，尤其是高蛋白青貯飼料[5]。燕麥自然青貯中主要生物胺是腐胺（ DM）、尸胺 D及酪胺（896.9 ；苜蓿自然青貯中主要生物胺是腐胺 尸胺 及酪胺 ；全株玉米自然青貯中主要生物胺是腐胺 、尸胺 及酪胺 。高含量生物胺會對反芻動物產生潛在的安全危害[9，如影響適口性，引起酮癥，引發亞硝酸鹽與亞硝酸胺發生反應導致癌癥的發生10，損害瘤胃微生物群和瘤胃黏膜，導致動物酸中毒和相關炎癥疾病[11]。目前，動物飼料中尚未規定生物胺安全標準，可參考食品標準。生物胺食用安全標準為：組胺上限為 ；酪胺上限為 苯乙胺上限為 ；總生物胺上限為 。因此，降低青貯飼料生物胺含量對于優質青貯飼料安全生產和畜牧業健康發展具有重要意義。常見的降低青貯飼料生物胺含量的添加劑有乳酸菌（植物乳桿菌、布氏乳桿菌及發酵乳桿菌）[14-16]、糖蜜[17-18]、蔗糖7]、甲酸[19-20]丙酸及苯甲酸鈉[6]，其中甲酸的效果最為突出[19-20]。

柱花草（Stylosanthesguicmensis）是我國熱帶地區主要豆科牧草和重要青貯原料[21-22]，其具有牧草產量高，營養價值豐富，粗蛋白含量高，富含多種維生素和氨基酸等營養物質，以及適口性好等優點[23]。目前，關于柱花草青貯飼料的研究主要集中在發酵品質、營養成分、細菌群落及體外瘤胃發酵特性上，而關于生物胺的研究尚未見報道。此外，甲酸作為發酵抑制劑常用來抑制青貯飼料中不良微生物的生長和增殖，降低青貯飼料生物胺含量。因此，本研究旨在探究甲酸與貯藏時間對柱花草青貯飼料化學成分及生物胺含量的影響，為熱帶地區調制優質安全的柱花草青貯飼料提供參考。

1 材料與方法

1. 1 試驗材料

試驗材料取自海南大學海甸校區農科基地0 ， ，于2022年6月2日收割第一茬現蕾末期柱花草。

1.2 添加劑

試驗所使用的添加劑為天津市大茂化學試劑廠生產的甲酸（分析純， ）。

1.3 試驗設計

試驗采用雙因素完全隨機設計。因素一為處理方式，包括蒸餾水對照（CK）和甲酸處理 ，記為FA）；因素二為貯藏時間，分別為1個月和12個月。每個處理組合進行4次重復。

1. 4 試驗方法

1.4.1青貯飼料調制將新鮮收割的柱花草用切紙刀切短至 ，混合均勻。配置甲酸添加劑溶液：量取 甲酸分析純溶液用蒸餾水定容至 。稱取 原料放入盆中，使用小型噴霧器噴灑溶液，CK組噴灑 蒸餾水；FA組噴灑 配置好的甲酸溶液，邊噴灑邊攪拌。拌勻后平均分成四等份，每份 裝入青貯袋，密封抽真空。每個處理組合4次重復，共計16個青貯袋；室溫 下分別貯藏1個月和12個月。

1.4.2測定方法稱取 樣品，加入 蒸餾水進行榨汁，將榨汁液通過兩層紗布過濾[24]，每個樣品取兩份濾液（ 備用，用于后續pH值、氨態氮（Ammonianitrogen， 及游離氨基酸氮（Freeaminoacidsnitrogen，FAA-N）含量的測定[25]。 值采用 計進行測定（雷磁 PHS-3C，上海儀電科儀公司）， -N含量采用苯酚-次氯酸鈉比色法進行測定，FAA-N含量采用芘三酮比色法進行測定[26]

稱取 樣品裝入信封袋，放于凍干機凍干 所得凍干樣品用于測定干物質（Drymatter，DM）含量。取上述凍干樣品用粉碎機進行粉碎，粉碎后過 篩用于后續測定總氮（Totalnitrogen，TN）、可溶性糖（Watersolublecarbohydrates，WSC）及生物胺。TN采用凱氏定氮法進行測定[27]，粗蛋白（Crudeprotein，CP）含量采用TN含量乘6.25計算得到，WSC含量采用蒽酮比色法進行測定[28]。生物胺含量測定由福州貝瑞思生物科技有限公司完成，步驟如下：稱取上述凍干樣品 加入離心管中，加入 鹽酸，渦旋混勻，在室溫下提取 離心 ，取上清液。取 樣品到瓶中，加入 AccQ·TagUltraBorate緩沖液和 AccQ·Tag試劑，將反應混合物在 加熱 ，冷卻后進行高效液相色譜分析（HPLC）。數據采集儀器系統主要是超高效液相色譜（Vanquish，UPLC，Thermo，USA）和高分辨質譜（QExactive，Thermo，USA）。液相色譜條件：色譜柱：Waters BEH（ 流動相：A相為超純水（含 0 . 1 % 濃度甲酸），B相為乙腈（含 0 . 1 % 濃度甲酸）；流速 ；柱溫 ；進樣量 ；洗脫梯度為 9 5 % 水和 5 % 乙腈， 90 % 水和 10 % 乙腈， ， 7 5 % 水和 2 5 % 乙腈， ， 40 % 水和 60 % 乙腈， 9 5 % 水和 5 % 乙腈， 9 5 % 水和 5 % 乙腈。整個分析過程中樣品置于 自動進樣器中。質譜條件：采用美國Thermo公司的QExactive高分辨質譜檢測系統進行的采集。采用電噴霧離子源（Electrospray ionization，ESI），鞘氣 ；輔助氣 ；離子噴霧電壓 ；溫度 ；離子傳輸管溫度 。掃描模式為全掃（FullMS），掃描方式為正離子。一級掃描范圍： 。1.4.3數據分析相關的試驗數據使用Excel2020進行初步的匯總整理，隨后用SAS9.4數據處理軟件進行進一步的分析整理。利用一般線性模型對貯藏時間（S）添加劑（A）以及交互效應進行方差分析。使用SPSS24軟件對柱花草青貯飼料發酵品質和生物胺含量進行相關性分析，繪制成表。各處理均以“平均值\"來進行表示。所有統計學檢驗均以 為顯著性水平。

2 結果和分析

2.1 原料特性

柱花草原料特性如表1所示，pH值為5.43，DM含量為 FM，WSC含量為 DM，CP含量為 DM，TN含量為21.13 g. DM，FAA-N含量為

TN， -N含量為 TN。柱花草原料中主要生物胺是腐胺（112. DM），其次是亞精胺 。尸胺、酪胺、精胺、苯乙胺及色胺含量較少，組胺在原料中未被檢測到。

2.2 青貯飼料化學成分

青貯飼料化學成分見表2。貯藏時間為1個月時，與CK相比，FA顯著降低 值、FAA-N及 -N含量 ，顯著提高DM和WSC含量L 。貯藏時間為12個月時，與CK相比，FA組 值、FAA-N及 -N含量顯著降低（ P lt; 0.05），顯著提高WSC含量 。隨著貯藏時間的增加，CK組 含量顯著增高 P lt; 0.05），WSC和FAA-N含量顯著降低 。從總體均值上看，FA使用在DM、WSC、FAA-N及 -N上具有顯著差異 ，貯藏時間在pH值、DM、WSC、FAA-N和 -N上存在顯著差異 。貯藏時間和添加劑的交互效應僅顯著影響了柱花草青貯飼料WSC含量 0

2.3青貯飼料生物胺含量

青貯飼料生物胺含量相關數據見表3。柱花草青貯飼料中主要生物胺為尸胺 DM）、腐胺 DM）及酪胺（127.34 DM），其余5種生物胺含量均不超過20 。與CK相比，FA降低所有生物胺含量以及總生物胺含量。隨著貯藏時間的增加，CK組尸胺、酪胺、苯乙胺及總生物胺含量顯著增加（ P lt; 0.05），而組胺、色胺、精胺及亞精胺含量顯著降低（ P lt; 0.05）。從總體均值上看，FA在尸胺、腐胺、酪胺、色胺、苯乙胺、精胺、亞精胺及總生物胺上存在顯著差異 ，貯藏時間在8種生物胺和總生物胺上存在顯著差異 。貯藏時間和添加劑的交互效應顯著影響了柱花草青貯飼料中酪胺、色胺、苯乙胺、精胺、亞精胺及總生物胺含量 。

2.4青貯飼料化學成分和生物胺含量相關性

青貯飼料化學成分和生物胺含量相關性分析見表4。青貯飼料中腐胺與 FAA-N及 -N呈極顯著正相關 。尸胺與 ，FAA-N及 -N呈極顯著正相關 ，與WSC呈極顯著負相關 。酪胺與 ，FAA-N及 -N呈顯著正相關 。總生物胺與 FAA-N及 -N呈極顯著正相關 。

3討論

3.1 原料特性

青貯是在厭氧條件下乳酸菌將原料中WSC轉化為乳酸和乙酸等有機酸，當實現厭氧狀態并且pH值降至一定范圍時，霉菌等微生物的活動減少，達到保存飼草的目的[29]。在青貯過程中，除了需要創造厭氧環境，原料還必須保持適當的含水量，以及足夠的WSC，以確保乳酸菌發酵能夠順利進行[30]。而豆科牧草往往WSC含量低，緩沖能值高，直接青貯效果不佳[31]。在本試驗中，新鮮柱花草pH值為5.43，略低于田靜等32]報道的5.57；CP含量較高，為 ，與Dong等[33]研究結果相似。優良青貯原料的理想DM含量一般為 ，低DM水平會導致營養物質被稀釋，提高梭菌活性，從而使乳酸菌發酵底物濃度下降，降低發酵品質[35-36]。而高DM水平可能會導致牧草之間殘余空氣過多，不利于壓實和乳酸菌發酵[37]，發酵品質變差，青貯料發臭。乳酸菌快速發酵則需要原料含有 的 。本試驗中柱花草原料DM含量為 ，低于理想青貯DM含量，WSC含量也較低，為 DM，低于黃佩珊等[39]和吳碩等[40]報道的 DM和 ，可能不利于獲得高品質柱花草青貯飼料。因此，柱花草青貯時須應用添加劑，以改善青貯飼料發酵品質。

3.2甲酸與貯藏時間對青貯飼料化學成分的影響

值是衡量青貯飼料青貯品質好壞的一個重要指標[24]，青貯飼料pH值越高說明發酵品質越差，有害微生物的活動沒有被很好地抑制，而pH值越低抑制了青貯飼料中有害微生物及部分乳酸菌活動。一般情況下，優質青貯飼料pH值在4.2以下，但對于柱花草這類豆科牧草來說，其WSC含量低，很難使其青貯pH值達到4.2以下[24]。本研究中，添加FA后青貯料pH值降低，是因為FA直接酸化導致低pH值，而貯藏時間沒有對pH值產生顯著影響，這與李大璐等41和王子苑等42的研究結果相似。李大璐等41]的研究結果表明青貯pH值隨著青貯時間的延長呈現先降低后稍有升高的現象，本研究并未發現這種現象，可能是因為研究貯藏時間點少，后續將增加貯藏時間點進一步研究。

青貯飼料中乳酸是發酵的主產物，WSC可促進乳酸菌的生長和繁殖，乳酸菌利用WSC產生乳酸和乙酸，降低pH值，從而抑制有害微生物對WSC分解。因此，WSC含量越高說明青貯原料發酵底物越多，青貯料發酵品質可能越好[43]。本研究中隨著貯藏時間的增加，WSC含量顯著降低，這與王志敬等[44]和張潔等[45]的研究結果相似。這可能由于發酵初期柱花草WSC等物質為乳酸菌生長繁殖提供營養，隨著青貯的進行，青貯料中WSC逐漸降低，當下降到一定含量時進入穩定期，此時各種菌的活性均比較低，同型乳酸菌不再占主導地位，異型乳酸菌開始生成乙醇、乙酸和二氧化碳等[28.32]，乳酸菌繁殖到一定數量時，剩余WSC不足以供給乳酸菌繼續進行繁殖，并且WSC持續被消耗最終會慢慢抑制乳酸菌活動[46]。而添加FA顯著可以顯著提高青貯料中WSC含量，說明FA的添加抑制了微生物活性，從而降低了對WSC消耗，這與王輝47研究結果一致。

蛋白質轉化過程分為兩步，首先是肽鍵被水解形成游離氨基酸和肽，其次，氨基酸被進一步分解形成氨、有機酸及胺，氨基酸通過微生物脫氨作用形成 。 -N是衡量青貯飼料品質的重要指標，該值的大小可反映出蛋白降解程度， N含量越低表明青貯品質越好47]，相反，蛋白質在不良微生物的作用下發生降解，導致 -N含量升高，從而使青貯品質下降。FA作為一種發酵抑制劑，具有生產成本低和酸化能力強的特點，可以通過抑制發酵過程中梭狀芽孢桿菌和某些革蘭氏陰性菌活動，從而抑制蛋白質分解[48]。植物蛋白酶也被認為在青貯過程的蛋白質分解中起著重要作用[49]。本試驗中，隨著貯藏時間的延長， -N含量顯著升高，而添加FA會顯著降低其含量，說明FA抑制柱花草青貯料中蛋白質分解，營養物質得到了較好的保存，并且FA的添加使青貯飼料酸化，直接降低青貯飼料pH值和 -N含量，這與侯志江等[50]和曹欣等[51]的研究結果一致。

3.3甲酸與貯藏時間對青貯飼料生物胺含量的影響

生物胺是植物細胞的內源性代謝成分，有部分是天然存在的，也有部分是在儲存、老化和腐敗過程中通過微生物新合成的5，廣泛存在于青貯飼料和發酵飼料中[8.52]。生物胺的形成主要是通過微生物進行游離氨基酸脫羧反應，少數由植物酶引起[53]。青貯飼料中生物胺含量一般高于原料[54]，其類型和含量的差異可能是由于原料種類、附著微生物群落結構和發酵條件的變化[55]。在本研究中腐胺、尸胺及酪胺是柱花草青貯飼料中主要生物胺，這與Steidlova等15和Jia等6的研究結果一致。腐胺、尸胺及酪胺的前體分別是精氨酸、賴氨酸及酪氨酸。這些氨基酸在發酵的第一階段由植物蛋白水解酶水解生成，隨后脫羧形成生物胺[17]。紫花苜蓿青貯飼料中腐胺主要是由梭狀芽孢桿菌、大腸桿菌及檸檬酸桿菌形成；尸胺主要是由大腸桿菌和克雷伯氏菌形成；酪胺主要是由梭狀芽孢桿菌、大腸桿菌及克雷伯氏菌形成[。添加FA對精胺和亞精胺降低效果不顯著，而CK組隨著貯藏時間的延長，精胺和亞精胺含量顯著降低，這可能是因為精胺和亞精胺不是由氨基酸脫羧反應直接形成而是從腐胺轉化而來[55]，并隨青貯時間延長，腐胺含量有所降低，導致精胺和亞精胺含量隨之降低。

3.4青貯飼料化學成分和生物胺含量相關性

研究發現，組胺是組氨酸脫羧酶通過L-組氨酸脫羧形成的，與克雷伯氏菌和大腸桿菌呈顯著正相關[17]，而這些細菌即使在低細菌數等惡劣條件下也能夠產生大量組胺[56]。本試驗中，隨著貯藏時間的延長，FA對組胺降低效果不明顯，而CK組組胺含量顯著降低，尸胺、酪胺及苯乙胺顯著增加。這可能是青貯發酵開始的1個月，營養物質逐漸被植物細胞和微生物消耗，DM減少。腐胺和尸胺主要是由腸桿菌形成的，組胺和酪胺是由乳酸菌形成[17]，隨著青貯時間的延長，乳酸菌數量逐漸減少，組胺和酪胺含量增加緩慢，尸胺和腐胺含量逐漸累積，而FA的抑制效果對主要生物胺顯著[15]，對貯藏12個月的組胺抑制效果不明顯，可能是因為組胺含量較低，組胺含量在貯藏1個月時達到高峰，后期則逐漸減少。在本研究中CK組總生物胺含量隨著青貯時間的延長而增加，可能是因為CK組在青貯發酵過程中微生物活性不斷增強，添加FA后總生物胺含量急劇下降，結果表明FA對生物胺的形成具有很強的抑制作用，這與VanOs等[17]的研究結果相似。

4結論

柱花草自然青貯發酵品質差，主要生物胺是尸胺、腐胺及酪胺；隨著貯藏時間的延長，尸胺、酪胺及總生物胺含量顯著增加。貯藏時間為1和12個月時，甲酸處理均顯著改善了柱花草青貯品質，降低了尸胺、腐胺、酪胺及總生物胺含量。綜上所述，甲酸處理的青貯品質更好，因此，建議使用甲酸處理的青貯柱花草進行飼喂。

參考文獻

[1］高誠澤，趙璐潔，陳瑋瑋，等．不同添加量葡萄渣對苜蓿青貯 發酵品質及CNCPS蛋白組分的影響[J].草地學報，2024，32 （6）：1986-1994

[2]SCHERER R，GERLACH K，SUDEKUM K H. Biogenic amines and gamma-amino butyric acid in silages：formation， occurrence and influence on dry matter intake and ruminant production[J]. Animal Feed Science and Technology，2015，210： 1-16

[3]MAIJALARL，EEROLASH，AHOMA，etal.Theeffect of GDL-induced pH decrease on the formation of biogenic amines in Meat[J].Journal of Food Protection，1993，56（2）： 125-129

[4]LIB B，LU SL. The importance of amine-degrading enzymes on the biogenic amine degradation in fermented foods：a review [J].Process Biochemistry，2020，99：331-339

[5]TAUBERT J，ADOLPH S，SCHERER R，et al. Simultaneousdetection of biogenic amines and aminobutyric acid isomers in high-protein forages[J].Animal Feed Science and Technology，2019，258：114305

[6]JIATT，YUNY，YU Z.Propionic acid and sodium benzoate affected biogenic amine formation，microbial community，and quality of oat silage[J].Frontiers in Microbiology，2021，12： 750920

[7]LI R R， ZHENG M L， ZHENG M H，et al. Metagenomic analysis reveals the linkages between bacteria and the functional enzymes responsible for potential ammonia and biogenic amine production in alfalfa silage[J]．Journal of Applied Microbiology，2022，132（4）：2594-2604

[8]NISHINO N，HATTORI H，WADA H，et al. Biogenic amine production in grass，maize and total mixed ration silages inoculated with Lactobacilluscasei or Lactobacillus buchneri[J]. Journal of Applied Microbiology，2007，103（2）：325-332

[9]DRIEHUIS F，WILKINSON J M，JIANG Y，et al. Silage review：animal and human health risks from silage[J]. Journal of Dairy Science，2018，101（5）：4093-4110

[10]WOJCIK W，LUKASIEWICZ M，PUPPEL K. Biogenic amines：formation，action and toxicity -a review[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture，2021，101（7）：2634-2640

[11]MONIENTE M，GARCIA-GONZALOD，ONTANONI，et al.Histamine accumulation in dairy products：microbial causes，techniques for the detection of histamine-producing microbiota，and potentialsolutions [J]. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety，2021，2O（2）：1481- 1523

[12]周凱，黃開胤，張笑，等．發酵豆制品中生物胺與氨基甲酸乙 酯的污染與控制[J].中國食品學報，2024，24（4）：456-468

[13]KIMB，BYUN B Y，MAHJH.Biogenic amine formation and bacterial contribution in Natto products[J].Food Chemistry， 2012，135（3）：2005-2011

[14]OLT A，KAET O，KALDMAE H，et al. The effect of additive and dry matter content on silage protein degradability and biogenic amine content[J]. Agraarteadus，2005，16（2）：117

[15] STEIDLOVA S，KALAC P. The effects of lactic acid bacteria inoculants and formic acid on the formation of biogenic amines in grass silages[J]. Archives of Animal Nutrition，2OO4，58（3）： 245-254

[16]STEIDLOVA S，KALAC P. The effects of using lactic acid bacteria inoculants in maize silage on the formation of biogenic amines[J].Archives of Animal Nutrition，20o3，57（5）： 359-368

[17]VANOSM，VANWIKSELAARPG，SPOELSTRASF. Formation of biogenic amines in well fermented grass silages [J].The Journal of Agricultural Science，1996，127（1） ：97-107

[18] KRIZSAN S J，RANDBY ？ T. The effect of fermentation quality on the voluntary intake of grass silage by growing cattle fed silage as the sole feed[J].Journalof Animal Science，2007， 85（4）：984-996

［19］陳玉連，樊雪瑩，龍見華，等．甲酸和乳酸菌對構樹青貯品質 及微生物群落的影響[J]．飼料研究，2023，46（13）：93-97

[20］馮啟賢，張磊，李妍，等．甲酸處理對苜蓿青貯品質及瘤胃降 解率的影響[J].草地學報，2023，31（4）：1264-1272

[21］孫昊，張建禹，羅麗娟，等．光果柱花草轉基因毛狀根及其原 生質體制備體系的建立[J].草地學報，2024，32（5）：1583- 1591

[22］繆野，劉懷錦，劉莉婷，等．柱花草SgALMT1基因克隆與表達 分析[J].草地學報，2024，32（4）：1078-1086

[23］韓建成，吳群，葡紅玲，等．熱研2號柱花草和熱研4號王草混 合青貯對其營養成分及發酵品質的影響[J]．熱帶作物學報， 2023，44（4）：809-815

[24］田吉鵬，韋青，劉蓓一，等．復合添加劑對花生秧青貯品質的 影響[J].草地學報，2022，30（2）：464-470

[25]BRODERICK G A，KANG JH. Automated simultaneous determination of ammonia and total amino acids in ruminal fluid and in vitro media[J]. Journal of Dairy Science，198o，63（1）： 64-75

[26］張艷，劉楚楚，梅春水．大曲氨態氮測定的檢測方法應用研究 與分析[J]．釀酒，2023，50（2）：97-99

[27］陳何娟.凱氏定氮儀法測腐竹中蛋白質含量分析與研究[J]. 現代食品，2023，29（22）：183-186

[28］楊森，徐蓮，劉洪明．馬鈴薯蛋白質和水溶性糖含量測定[J]. 農產品加工，2022（9）：70-72

[29]MUGABE W，YUAN XJ，LI JF，et al. Effects of hexanoic acid，Lactobacillus plantarum and their combination on the fermentation characteristics of Napier grass[J]. Animal Feed Science and Technology，2019，253：135-140

[30］謝華德，謝芳，梁辛，等．乳酸菌和啤酒糟對象草青貯發酵品 質及營養價值的影響[J].飼料研究，2021，44（9）：99-103

[31]DENEKN，CAN A，AVCI M，et al. The effect of molassesbased pre-fermented juice on the fermentation quality of firstcut lucerne silage[J].Grass and Forage Science，2Oll，66（2）： 243-250

[32]田靜，曹彩霞，黃莉瑩，等．耐低營養乳酸菌篩選及對難青貯 牧草發酵品質的影響[J].草業學報，2023，32（9）：222-230

[33] DONG C X，LIU P，WANG X L，et al. Effects of phenyllctic acid on fermentation parameters，nitrogen fractions and bacterial community of high-moisture stylo silage[J].Fermentation， 2023，9（6）：572

[34] ZI X J，LIU Y，CHEN T，et al. Effects of sucrose，glucose and molasses on fermentation quality and bacterial communityof stylo silage[J]. Fermentation，2022，8（5）：191

[35]WANG C，HE L， XING Y，et al. Effects of mixing Neolamarckia cadamba leaves on fermentation quality，microbial community of high moisture alfalfa and stylo silage[J].Microbial Biotechnology，2019，12（5）：869-878

[36]GUYADER J， BARON V S，BEAUCHEMIN K A. Corm forage yield and quality for silage in short growing season areas of the canadian prairies[J]. Agronomy，20l8，8（9）：164

[37]HUANG Y，QIU C，WANG Y，et al. Effect of tea polyphenols on the fermentation quality，protein preservation，antioxidant capacity and bacterial community of stylo silage[J]. Frontiers in Microbiology，2022，13：993750

[38]LAWRENCE H S.Theoretical carbohydrates requirement for alfalfa silage production[J].Agronomy，1962，54（4）：291-293

[39]黃佩珊，張超，陳丹丹，等．辣木葉提取物對柱花草和象草青 貯品質的影響[J]．草地學報，2023，31（7）：2194-2202

[40]吳碩，鄒璇，王明亞，等．陳皮柑汁對柱花草和水稻秸稈青貯 品質的影響[J].草地學報，2021，29（7）：1565-1570

[41］李大璐，李尊嚴，丁葵英，等．青貯時間和處理方式對胡蘿卜 纓營養成分、發酵品質、活性物質及飼用安全性的影響[J].中 國畜牧雜志，2024，60（4）：233-240

[42]王子苑，舒健虹，陳光吉，等．不同比例和發酵時間對燕麥、光 葉紫花苕混合青貯品質的影響[J].中國飼料，2024（3）： 143-148

[43]KENNEDY S J. Comparison of the fermentation quality and nutritive value of sulphuric and formic acid-treated silages fed to beef cattle[J]. Grass and Forage Science，1990，45（1）：17-28

[44］王志敬，楊慧山，葛影影，等．發酵時間對青貯鳳梨渣pH·亞硝 酸鹽·氨態氮·可溶性糖和有機酸含量的影響[J].安徽農業科 學，2020，48（21）：100-102

[45］張潔，顧啟超，鄒承武，等．青貯時間對不同水溶性碳水化合 物含量甘蔗尾青貯品質的影響[J].動物營養學報，2022，34 （11）：7291-7306

[46]KUNGJL，STOUGH EC，MCDONELL EE，et al. The effect of wide swathing onwilting times and nutritive value of alfalfa haylage[J]. Journal of Dairy Science，2010，93（4）：1770- 1773

[47］王輝．不同添加劑對全株玉米和燕麥青貯品質的影響[D]. 昆明：云南農業大學，2022：13-14

[48]KUNG JL，STOKES M R，LIN C. Silage additives：silage science and technology[J].Madison：American Society of Agronomy，2003，42：305-360

[49]AMERS，BERTHIAUMER，MUSTAFAA，etal.Effectsof Water soluble carbohydrate content on ensiling characteristics， chemical composition and in vitro gas production of forage milletand forage sorghum silages[J].Animal Feed Science and Technology，2012，177（1-2）：23-29

[50］侯志江，劉彥培，蔡明，等．添加劑對萬壽菊莖葉青貯品質的 影響[J].河南農業科學，2022，51（1）：134-140

[51]曹欣，王青蘭，徐圣明，等．甲酸添加濃度對紫花苜蓿、稻秸和 DDGS混合青貯的影響[J].草學，2020（6）：25-29

[52]SKL KLADANKAJ，ADAMV，ZITKAO，etal.Comparison ofbiogenic amines and mycotoxins in alfalfa and red clover fodder depending onadditives[J]. International Journal of EnvironmentalResearchamp;PublicHealth，2Ol7，14（4）：418

[53]羅璇，程成，張琦，等．發酵豆制品理化性質與微生物群落對 生物胺形成的影響[J].食品科學，2023，44（14）：72-78

[54]PHUNTSOKT，FROETSCHELMA，AMOSHE，etal. Biogenicamines in silage，apparent postruminal passage，and therelationship between biogenic amines and digestive function and intakeby steers[J].Journal ofDairy Science，1998，81（8）： 2193-2203

[55]STEIDLOVA S，KALAC P. Levels of biogenic amines in maize silages[J].Animal Feed Science and Technology，2022， 102（1-4）：197-205

[56]MACPHERSONHT，VIOLANTEP.Theinfluenceof pH onthe metabolism of arginineand lysine in silage[J]. Journal of theScience ofFood and Agriculture，1966，17（3）：128-130

（責任編輯付宸）