雨淋對苜蓿干燥過程中營養(yǎng)品質(zhì)及真菌菌群結(jié)構(gòu)的影響

中圖分類號：S816 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1007-0435（2025）07-2132-08

引用格式：，等.雨淋對苜蓿干燥過程中營養(yǎng)品質(zhì)及真菌菌群結(jié)構(gòu)的影響[J].草地學(xué)報(bào)，2025，33（7）： 2132—2139 LIU Li-ying，WANG Yu-zhi，LIU Zhi-gang，et al. Efects of Rainfallon Nutritional Quality and Fungal Community Structure in Alfalfa During Drying Process[J]. Acta Agrestia Sinica，2O25，33（7） ：2132—2139

Effects of Rainfall on Nutritional Quality and Fungal Community Structure in Alfalfa During Drying Process

LIU Li-ying1，WANG Yu-zhi1，LIU Zhi-gang2，LIU Hong-mei1， YANG Yi-wen1，DING Xia ³ ， SUN Lin4* （1.IerogoldtrcybtKbto andEngieignaoteogoliai；ergoliatooueiotalogaid substatioda goliaO102o，ina;4ergoladegiculturalndimalHusbadrieesotrongolia）

Abstract：exposing rain is very easy to cause mildew and deteriration during the drying process of the second and thirdcutings of alfalfa hay innorthern areas.To investigate the impactof rainfallon thenutritional quality and fungal community succession in alfalfa （Medicago satioa L.）during the drying process，this study analyzed the moisture content，nutritional components，and fungal diversity in alfalfa under rain-exposedand rain-free conditions.The findings revealed that rainfallat theharvest stage extended the drying period by 3to 4 days.At the ninth day of drying，the concentrations of crude protein（CP），soluble protein （SP），and water-soluble carbohydrates（WSC）in the exposed-rain group significantly decreased by 6.49% ， 0.92% ，and 0.83% ，respectively，while neutral detergent fiber （NDF） and acid detergent fiber （ADF） significantly increased by 3.60% （20號 and 3.81%（Plt;0.05） ，respectively，compared to the non-rain group. As the drying duration extended，DM， NDF，and ADF levels significantly increased，whereas CP，SP and WSC levels significantly decreased in both groups. Seven predominant mold genera（Alternaria，Mycocentrospora，Ascochyta， Fusarium，Moesziomyces，Stemphylium，Cladosporium）were identified on the surface of the hay during the drying process.Rainfall increased the sum abundance values of the 7 types of fungi in alfalfa hay by 13.89% . Additionally，Mycocentrospora exhibited an extremely significant negative correlation with CP and significant negative corelations with SPand WSC. In summary，rainfallsignificantly prolonged the drying timeof alfalfa，and exacerbated the loss of nutrients and the risk of mildew.

Key Words： Rainfall; Drying ;Alfalfa;Nutritional quality ; Fungi

紫花苜蓿（MedicagosatiuaL.）作為栽培面積最大的全球性優(yōu)質(zhì)飼草和現(xiàn)代草牧業(yè)發(fā)展的首選牧草[1]，其產(chǎn)業(yè)化水平和經(jīng)濟(jì)價(jià)值最高，在現(xiàn)代畜牧業(yè)發(fā)展中具有重要戰(zhàn)略意義。首蓿干草作為現(xiàn)代畜牧業(yè)應(yīng)用的主要飼草類型，其品質(zhì)已成為影響家畜健康和畜產(chǎn)品安全的重要因素。由于我國苜蓿種植區(qū)多雨熱同季，尤其是北方苜蓿產(chǎn)區(qū)2、3茬草收獲期與雨季重疊，苜蓿干草大田生產(chǎn)的環(huán)境條件難以把控，生產(chǎn)的苜蓿干草品質(zhì)參差不齊，嚴(yán)重影響著我國優(yōu)質(zhì)苜蓿干草生產(chǎn)及飼草安全[2]。

目前，雨淋、潮濕等氣候是造成苜蓿干草品質(zhì)損耗和霉?fàn)€變質(zhì)的主要因素。雨淋可使苜蓿粗蛋白損失率達(dá) 35% 左右3，連續(xù)陰雨天可使苜蓿營養(yǎng)物質(zhì)損失 50% 以上[4]。雨季收獲的苜蓿干草極易滋生霉菌、產(chǎn)生大量霉菌毒素，導(dǎo)致苜蓿干草霉?fàn)€變質(zhì)。研究表明，影響干草品質(zhì)的主要霉菌有鐮刀菌屬、曲霉菌屬、青霉菌屬、葡萄球菌屬和頭孢菌屬[5-7]，飼草霉變后危害其品質(zhì)安全的主要毒素有：黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、T2毒素、嘔吐毒素和玉米赤霉烯酮8，引發(fā)飼草霉?fàn)€變質(zhì)與干燥環(huán)境、飼草原料中的霉菌數(shù)量與種類等息息相關(guān)。目前，國內(nèi)外關(guān)于雨淋對苜蓿干草調(diào)制影響的研究主要集中在雨淋對干草品質(zhì)耗損方面，但有關(guān)雨淋對苜蓿干草調(diào)制過程中真菌群落結(jié)構(gòu)的影響研究鮮有報(bào)道。本研究為進(jìn)一步明確苜蓿自然干燥過程中雨淋對其營養(yǎng)品質(zhì)及真菌群落結(jié)構(gòu)變化的影響，以北方常見栽培種‘中苜3號'紫花苜蓿為研究材料，對自然干燥過程中雨淋和未雨淋苜蓿干草的含水量、營養(yǎng)成分及真菌群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，為北方地區(qū)優(yōu)質(zhì)苜蓿干草安全生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)概況

試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院草原研究所鄂爾多斯沙地草原試驗(yàn)示范基地開展，基地位于市達(dá)拉特旗樹林召鎮(zhèn)關(guān)碾房村，地處鄂爾多斯高原西部，黃河南岸，地理位置為 109^°00^′E，40^°05^′N， 海拔937m ;屬典型的溫帶大陸性氣候，干燥多風(fēng)少雨，冬寒夏熱，晝夜溫差大，年均氣溫 6.1～7.1^°C，7 月平均氣溫 22.5～23.1^°C，1 月平均氣溫 -13.7^°C ；無霜期135～150d ，年平均蒸發(fā)量 2094mm ，日平均風(fēng)速3m?s^-1 ；年均降水量 311.4mm ，全年 75% 降雨主要集中在6—9月份；全年日照時(shí)數(shù)3177h，年均日照時(shí)數(shù)約 3000h ，是全國日照最豐富的地區(qū)之一。

1. 2 試驗(yàn)材料及設(shè)計(jì)

依據(jù)2023年9月10日—9月17日市達(dá)拉特旗天氣預(yù)報(bào)中衛(wèi)星云圖未來一周降雨趨勢預(yù)測，于2023年9月12日上午10：00收獲種植第4年第3茬‘中苜3號'紫花苜蓿（中花期 25%～30% 開花，留茬 5～6cm， ，收獲后采用不壓扁自然晾曬，晾曬厚度為 10cm ，適時(shí)監(jiān)測含水量變化規(guī)律，當(dāng)含水量降至 40%～45% 時(shí)，翻曬一次;雨淋試驗(yàn)苜蓿含水量均下降至 14%～16% 時(shí)，停止晾曬。晾曬期間，日平均氣溫 18.1^°C，2023 年9月14日、9月15日均有降雨，其余干燥時(shí)間未降雨。采用傳統(tǒng)雨量器測量實(shí)際降雨量，具體降雨時(shí)間和降雨量如表1所示。試驗(yàn)設(shè)置晾曬過程中被雨淋苜蓿為試驗(yàn)組（K），以未淋雨（晾曬地自制遮雨棚遮雨）苜蓿為對照組（L），于晾曬1d（9月12日劉割前）3d（9月14日上午9：00）、5d（9月16日上午9：00）7d（9月18日上午 9：00），9d（9 月20日上午9：00）取樣，一部分苜蓿整株取樣，采用信封袋帶回實(shí)驗(yàn)室測定所有樣品的含水量及1d，5d，9d樣品的營養(yǎng)品質(zhì);另一部分苜蓿切碎至 2～3cm 后，取 20g 苜蓿樣品置于凍存管，并立即放入液氮中速凍，以備實(shí)驗(yàn)室測定真菌群落結(jié)構(gòu)。雨淋和未雨淋苜蓿干燥 ¹d，3d，5d，7d，9 1分別為 K₁，K₃，K₅ K₇，K₉ 和 _{L1，L3，L5，L7，L9}

表1試驗(yàn)期降雨情況

Table1 Rainfall situation during the trial period

1.3 測定指標(biāo)及方法

化學(xué)成分測定：干物質(zhì)（Drymatter，DM）含量、含水量（Moisturecontent）采用烘干恒重法測定，粗蛋白質(zhì)（Crudeprotein，CP）采用凱氏定氮法測定，可溶性蛋白（Solubleprotein，SP）采用三氯乙酸法測定，中性洗滌纖維（Neutraldetergentfiber，NDF）和酸性洗滌纖維（Aciddetergentfiber，ADF）采用使用范氏纖維分析法測定，可溶性碳水化合物（Watersolublecarbohydrate，WSC）采用蒽酮-硫酸比色法測定，各指標(biāo)測定方法具體參考《飼料分析質(zhì)量檢測技術(shù)》[9]。

真菌微生物群落結(jié)構(gòu)測定：采用ITS擴(kuò)增子測序分析技術(shù)測定苜蓿干草樣品真菌多樣性及群落結(jié)構(gòu)。采用E.Z.N.A. soil試劑盒對微生物進(jìn)行DNA抽提，DNA濃度和純度利用NanoDrop2000進(jìn)行檢測；用18SV4區(qū)引物（528F和706R）和ITS1區(qū)引物（ITS5-1737F和ITS2-2043R）對 ΔV3～V4 可變區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。使用 2% 瓊脂糖凝膠回收PCR產(chǎn)物，利用AxyPrepDNAGelExtractionKit進(jìn)行純化，Tris-HC1洗脫， 2% 瓊脂糖電泳檢測。利用Qubit和Q-PCR進(jìn)行檢測定量，根據(jù)NovaSeq6000平臺標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程將純化后的擴(kuò)增片段構(gòu)建PE250的文庫。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

本文試驗(yàn)數(shù)據(jù)分別采用MicrosoftOfficeExcel2016軟件和SAS9.4統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行預(yù)處理和方差分析，采用Origin軟件進(jìn)行制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1雨淋對苜蓿干燥過程中含水量的影響

干燥過程中，隨干燥時(shí)間延長，試驗(yàn)組（K）和對照組（L）首蓿含水量總體呈先快后慢的下降趨勢（如圖1所示），K組首蓿含水量呈現(xiàn)起伏下降趨勢，L組苜蓿含水量呈均勻下降趨勢。相比K組苜蓿十燥第3d，干燥至第5d苜蓿的含水量升高了 2.6% 。L組苜蓿干燥至第5d含水量降至 15.64% 。K組干燥9d時(shí)，苜蓿含水量降至 15.67% ○

2.2雨淋對苜蓿干燥過程中營養(yǎng)品質(zhì)的影響

苜蓿干燥過程中營養(yǎng)物質(zhì)變化如表2所示，干燥處理、干燥時(shí)間及兩因素互作對苜蓿干草DM含量影響顯著 （Plt;0.0001） 。隨干燥時(shí)間延長，K組和L組DM，NDF，ADF含量均顯著上升，干燥 1～9d，DM 分別顯著上升 63.47% 和 69.09% ，NDF分別顯著增加15.6% 和 12% ，ADF分別顯著增加 15.41% 和11. 38% （Plt;0.05） 。隨干燥時(shí)間延長，K組和L組CP，SP，WSC含量均顯著下降，干燥 1～9d ，CP分別顯著降低 9.55% 和 3.06% ，SP分別顯著降低 5.85% 和4. 93% ，WSC分別顯著降低 3.85% 和 3.02%（Plt; 0.05）。干燥第5d時(shí)K組的DM，CP，SP含量顯著低于L組，K組的ADF含量顯著高于L組 （Plt;0.05） ；干燥第9d時(shí)K組的CP，SP，WSC含量顯著低于L組，分別顯著降低了 6.49%，0.92%，0.83%（Plt;0.05） ：K組的NDF和ADF含量顯著高于L組，分別顯著升高了 3.60% 和 3.81%（Plt;0.05） 。

2.3雨淋對苜蓿干燥過程中真菌AIpha多樣性的影響

由表3可知，干燥時(shí)間對L組苜蓿干草的物種豐富度指標(biāo)Chao1指數(shù)和ACE有顯著影響 （Plt; 0.05），對K組苜蓿干草的Alpha多樣性指數(shù)無顯著影響；雨淋與對照處理苜蓿干草的Alpha多樣性指數(shù)無顯著差異。其中，L組干燥第1d的Chao1指數(shù)和ACE顯著高于其他時(shí)間 Plt;0.05） 。

表2首蓿干燥過程中營養(yǎng)物質(zhì)的變化

Table 2Changes in nutritional content of alfalfa during drying period

注：數(shù)據(jù)為平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差 （n=3 ，同列不同小寫字母表示同一處理不同時(shí)間下差異顯著 （Plt;0.05） ，同列不同大寫字母表示不同處理同一時(shí)間點(diǎn)差異顯著 （Plt;0.05） ，無字母標(biāo)注表示差異不顯著。T表示試驗(yàn)處理，D表示干燥時(shí)間， T×D 代表處理與干燥時(shí)間的交互作用。下同

Note：Dataaremean ± standarddeviation Δ_n=3 ），different lower case letterswithin the samecolumn indicate significant differenceatthe0.05levelatettiatftferenttreatmentseti.oletesidateotsignifcatdireeepreststetestteamet，Depreststdgtiad T×D represents the interaction between treatment and drying time.The same as below

2.4雨淋對苜蓿干燥過程中真菌群落結(jié)構(gòu)的影響

苜蓿干燥過程中OTUs分布由圖2所示，不同干燥時(shí)間的K組和L組苜蓿干草附著真菌共有296個(gè)OTUs，所有處理中真菌共有OTUs數(shù)量為42個(gè)，占總數(shù) 14.19% K₁，K₅ K₉ 和 L₁，L₅ L₉ 獨(dú)有真菌的OTUs數(shù)量分別為95，21，32和72，22，12。隨干燥時(shí)間延長，K組真菌OTUs數(shù)量呈先降低后增加趨勢，L組真菌呈逐漸降低趨勢。

苜蓿干燥過程中真菌群落組成如圖3所示，優(yōu)勢菌門分別為：子囊菌門（Ascomycota， 30.31%～ 74.54% ）、未分類（Fungi_phy_incertae_sedis，24.30%～62.74%） 、擔(dān)子菌門（Basidiomycota，（204號 1.09%～15.63%） 、壺菌門（Chytridiomycota，0.0007%～10. （204號 28% ）、被孢霉門（Mortierellomycota，0.0014%～0.15%） ，占真菌總數(shù)的 99.99% 。隨著干燥時(shí)間的延長，K組苜蓿干草表面附著的優(yōu)勢菌門子囊菌門豐度值呈先升高后降低趨勢，干燥第5d豐度值為 60.86% ，顯著高于干燥第 1d（49.89%） 和9d（33.89%）（Plt;0.05）; K組苜蓿干草中未分類菌門逐漸增加，豐度值由 34.2% 增加至 62.74% 。K組苜蓿干草中擔(dān)子菌門呈先降低后增加趨勢，干燥第5d豐度值為 1.49% ，顯著低于干燥第 1d（15.63% ）和 9d（3.23%）（Plt;0.05） 。隨著干燥時(shí)間的延長，L組苜蓿干草表面附著的優(yōu)勢菌門子囊菌門豐度值呈先升高后降低趨勢，干燥第5d豐度值為 74.54% ，顯著高于干燥第 1d（30.32%） 和 9d（43.95% ） Plt; 0.05；L組苜蓿干草中未分類菌門先降低后增加趨勢，干燥第5d豐度值為 24.30% ，顯著低于干燥第1d（59.90% 和 組苜蓿干草中擔(dān)子菌門呈先降低后增加趨勢，干燥第5d豐度值為 1.09% ，顯著低于干燥第 1d（9.76%） 和9d（2.26%）（Plt;0.05） 。

苜蓿干燥過程中真菌群落相對豐度前十的真菌屬有：鏈格孢屬（Alternaria）、菌刺孢屬（Mycocentrospora）、殼二孢屬（Ascohyta）、阿太菌屬（Amphinema）鐮刀菌屬（Fusarium）、火絲菌（Pyronemataceae）、黑粉菌（Moesziomyces）、枝孢霉菌（Cladosporium）匍柄霉菌（Stemphylium），占真菌總數(shù)的 34.14%～74.63% 。其中，主要霉菌屬類有：鏈格孢屬、菌刺孢屬、殼二孢屬、鐮刀菌屬、黑粉菌、匍柄霉菌屬、枝孢霉菌。干燥第1d，K組和L組7類霉菌豐度值之和分別是 33.93% 和 33.06% ，干燥第9d，7類霉菌豐度值之和分別是 47.82% 和 34.24% ，霉菌豐度值分別增加了 13.89% 和 1.18% 。隨著干燥時(shí)間的延長，K組苜蓿干草表面附著的優(yōu)勢菌屬鏈格孢屬豐度值由 39.44% 降低至 27.96% ，而未分類的真菌豐度值由 34.20% 增加至 62.73% 。干燥第1d時(shí)，K組苜蓿干草表面附著的阿太菌屬的豐度值為 10.63% ，干燥后期未檢出。干燥第5d時(shí)，K組苜蓿干草表面附著的菌刺孢屬和殼二孢屬的豐度值分別為 13.73% 和 8.36% ，顯著高于干燥1d和 9d（Plt; 0.05）。隨著干燥時(shí)間的延長，L組苜蓿干草表面附著的鐮刀菌屬由 1.88% 增加至 7.56% ；干燥第5d，L組苜蓿干草的優(yōu)勢菌屬鏈格孢屬和菌刺孢屬豐度值分別為 35.58% 和 26.53% ，顯著高于干燥1d（22. 41% 和 0.07% 和 9d（29.71% 和 1.2%）（Plt; 0.05），而未分類的真菌豐度值為 24.31% ，顯著低于干燥 1d（59.90%） 和 9d（53.79%）（Plt;0.05） 。

2.5苜蓿雨淋干燥過程中真菌與營養(yǎng)成分及含水量的相關(guān)性

由圖5首蓿水分與屬水平真菌的相關(guān)性分析可知。阿太菌屬與CP，SP，WSC呈極顯著正相關(guān)性?Plt;0.01） ，與ADF，NDF呈極顯著負(fù)相關(guān) Plt;0.01），與苜蓿含水量呈正相關(guān)，與干物質(zhì)呈負(fù)相關(guān)。火絲菌屬與干物質(zhì)呈極顯著正相關(guān) （Plt;0.01）。殼二孢屬與干物質(zhì)呈顯著負(fù)相關(guān)（ （Plt;0.05）。菌刺孢屬與CP呈極顯著負(fù)相關(guān) （Plt;0.01），與SP，WSC呈顯著負(fù)相關(guān) ?Plt;0.05） 。

圖5苜蓿干草屬水平真菌與營養(yǎng)物質(zhì)及含水量的相關(guān)性分析

Fig.5Correlation analysis between species-level fungi and alfalfa nutrients and moistur

注：*顯著相關(guān)（ Plt;0.05 ，**極顯著相關(guān)（ Plt;0.01 ）

Note： means significantcorrelation at theO.O5 level， ^** means significant correlationat theO.Ol level

3討論

3.1 雨淋對首蓿干燥過程中含水量的影響

含水量是影響苜蓿干草品質(zhì)及安全的關(guān)鍵指標(biāo)[10-11]，雨淋導(dǎo)致苜蓿干燥過程中含水量下降緩慢，甚至出現(xiàn)反潮現(xiàn)象[12-13]。因此，雨淋是影響苜蓿干燥進(jìn)程的重要環(huán)境因素。劉麗英等14發(fā)現(xiàn)降雨會使首蓿干草在陰雨天氣下水分保持不易揮發(fā)，從而延長干燥時(shí)間，增加濕度并使含水量升高。尹強(qiáng)等[15]研究表明雨淋顯著增加了苜蓿含水量，降低了苜蓿干草的干燥速率。本試驗(yàn)中，雨淋組苜蓿在干燥過程中含水量下降較慢，尤其是在降雨量較大（干燥第3d和第4d）時(shí)，含水量呈現(xiàn)小幅度反彈，出現(xiàn)返潮現(xiàn)象，干燥時(shí)間延長了 3～4d 。本研究結(jié)果與上述結(jié)論一致。

3.2雨淋對首蓿干燥過程中營養(yǎng)品質(zhì)的影響

營養(yǎng)品質(zhì)是評定牧草質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)，直接影響家畜的健康和畜產(chǎn)品的質(zhì)量。雨淋對苜蓿干燥過程中的營養(yǎng)品質(zhì)有顯著的負(fù)面影響，特別是在陰雨潮濕的環(huán)境條件下，苜蓿的蛋白質(zhì)和可溶性碳水化合物的損失加劇，進(jìn)而影響了首蓿的飼料價(jià)值[16-17]。王志軍等[18]研究指出，苜蓿在干燥12小時(shí)內(nèi)，非結(jié)構(gòu)性碳水化合物（如蔗糖和果糖）減少了4.5% ，這一損失占原料中非結(jié)構(gòu)性碳水化合物的50.5% 。賈婷婷等[19研究發(fā)現(xiàn)，連續(xù)陰雨天苜蓿的粗蛋白、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、胡蘿卜素、維生素以及可消化養(yǎng)分等損失率約 50% 以上。本試驗(yàn)中，與未雨淋苜蓿相比，雨淋組苜蓿干燥第9d時(shí)，其CP，SP，WSC含量分別降低了 6.49% ，0.92% ， 0.83% ;NDF和ADF含量分別升高了3.60% 和 3.81% 。這是因?yàn)檐俎８刹荼挥炅芎螅苄院镔|(zhì)和水溶性碳水化合物隨雨水流失，增加了首蓿結(jié)構(gòu)性碳水化合物的比例20；有研究表明，當(dāng)牧草刈割后短時(shí)間內(nèi)牧草體內(nèi)的細(xì)胞并未死亡，還在進(jìn)行生理生化過程，造成牧草的營養(yǎng)物質(zhì)的損失[21-22]。苜蓿干燥生化變化階段所需時(shí)間漫長，通過酶的分解造成的蛋白質(zhì)、維生素、胡蘿卜素及可消化養(yǎng)分等營養(yǎng)物質(zhì)的損失達(dá) 15%～30% ，如果在此階段遭遇雨淋，其營養(yǎng)物質(zhì)的損失率可達(dá)50% 以上[12]。本研究結(jié)果表明，隨干燥時(shí)間延長，雨淋組和未雨淋組苜蓿的DM，NDF，ADF含量均顯著上升，CP，SP，WSC含量均顯著下降。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果一致，再一次驗(yàn)證了首蓿干燥時(shí)間越長，營養(yǎng)品質(zhì)越低。

3.3雨淋對首蓿干燥過程中真菌群落結(jié)構(gòu)的影響

苜蓿干燥過程中，真菌的生長與繁殖對干草的品質(zhì)和安全性有著至關(guān)重要的影響。真菌主要包括霉菌和酵母菌[23]。真菌門水平中，子囊菌門中的霉菌大都屬于腐生菌，產(chǎn)生的纖維素酶可分解纖維素、木質(zhì)素和有機(jī)物，因此其對飼草危害較大[24]。本研究發(fā)現(xiàn)，苜蓿干草附著優(yōu)勢菌門子囊菌門的豐度值達(dá) 30.31%～74.54% 。干燥過程中，K組和L組苜蓿干草附著豐度值前十的真菌屬有7類是霉菌，主要有鏈格孢屬、菌刺孢屬、殼二孢屬、鐮刀菌屬、黑粉菌、匍柄霉菌屬、枝孢霉菌，均屬異養(yǎng)型微生物，具有胞內(nèi)和胞外酶系統(tǒng)，可將淀粉、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)分解成細(xì)胞新陳代謝可利用的葡萄糖、氨基酸等小分子物質(zhì)[25]。其中，鏈格孢屬為苜蓿干草附著的主要優(yōu)勢菌屬，且隨干燥時(shí)間延長，L組鏈格孢屬豐度值由 35.58% 降低至 29.71% ，真菌OTUs數(shù)量呈逐漸降低趨勢。王志軍等2研究表明，苜蓿干燥過程中，真菌OTUs數(shù)量由150降低至74，苜蓿附著優(yōu)勢菌群鏈格孢屬豐度值隨干燥時(shí)間延長而降低，與本研究結(jié)果一致。雨淋會加速飼草干燥過程中的可溶性營養(yǎng)物質(zhì)分解外滲，且潮濕環(huán)境下霉菌可快速生長繁殖，分解消耗大量可溶性營養(yǎng)成分，從而加速飼草霉?fàn)€變質(zhì)2。李改英等28研究表明，雨淋通過增加紫花苜蓿體表濕度促進(jìn)霉菌生長繁殖，雨淋后苜蓿真菌豐度值增加。本試驗(yàn)雨淋后，K組苜蓿干草附著鏈格孢屬豐度值由22.41% 增加至 39.44% ，之后隨干燥時(shí)間延長，鏈格孢屬豐度值由 39.44% 降低至 27.96% ，與上述研究基本一致。雨淋的沖刷作用所致，雨淋后K組附著真菌OTUs數(shù)量降低，后續(xù)干燥過程中由于K組苜蓿干草濕度大，適合真菌生長繁殖，且干燥時(shí)間較長，導(dǎo)致真菌OTUs數(shù)量增加。霉菌屬于異養(yǎng)型微生物，其分泌的細(xì)胞壁降解酶可將大分子營養(yǎng)物質(zhì)分解為小分子物質(zhì)進(jìn)而吸收利用，因此霉菌繁殖生長不利于飼草干燥及品質(zhì)保存[29]。賈濤等[30]研究發(fā)現(xiàn)，霉菌導(dǎo)致CP，SP，WSC、粗纖維以及含氮物質(zhì)損失。本研究表明，雨淋條件下調(diào)制的首蓿十草霉菌豐度值增加 13.89% ，真菌OTUs數(shù)量也顯著高于未雨淋調(diào)制干草。這是由于鏈格孢菌等霉菌通過分泌的脂肪酶降解消耗植株細(xì)胞內(nèi)的甘油和游離脂肪酸等物質(zhì)，實(shí)現(xiàn)快速增殖[31]。因此，雨淋環(huán)境下調(diào)制苜蓿干草極易引發(fā)霉菌增殖及品質(zhì)損耗。

阿太菌屬和菌刺孢屬均屬于異養(yǎng)型微生物，阿太菌屬產(chǎn)生的纖維素酶可分解NDF和ADF，菌刺孢屬可分解利用CP、SP及WSC，真菌的生長繁殖會大量分解消耗苜蓿干草的可溶性營養(yǎng)物質(zhì)，對苜蓿干草調(diào)制產(chǎn)生會不利影響[32-33]。本研究中，阿太菌屬與CP、SP、WSC呈極顯著正相關(guān)性，與ADF、NDF呈極顯著負(fù)相關(guān)；菌刺孢屬與CP呈極顯著負(fù)相關(guān)，與SP、WSC呈顯著負(fù)相關(guān)。綜上所述，苜蓿干燥過程中遇雨淋，會導(dǎo)致干燥時(shí)間延長，干草營養(yǎng)品質(zhì)降低，霉菌豐度值增加。因此，雨淋可嚴(yán)重影響苜蓿干燥過程中的干草品質(zhì)及真菌群落結(jié)構(gòu)，雨熱同季極不利于北方地區(qū)2，3茬苜蓿干草調(diào)制。

4結(jié)論

苜蓿干燥過程中雨淋可導(dǎo)致干燥時(shí)間延長 3～4d，使干草CP，SP，WSC含量顯著降低，NDF和ADF含量顯著升高。雨淋可使苜蓿干草附著的鏈格孢屬、菌刺孢屬、殼二孢屬、鐮刀菌屬、黑粉菌、匍柄霉菌屬、枝孢霉菌7類霉菌豐度值之和增加13.89% ，加劇首蓿干燥過程中的營養(yǎng)成分損耗與霉菌污染，進(jìn)而增加苜蓿干燥過程中的霉變風(fēng)險(xiǎn)。

參考文獻(xiàn)

[1]郭文亮，李科南，杜海東，等．苜蓿干草與青貯的調(diào)制技術(shù)及其在反芻動物日糧中的應(yīng)用進(jìn)展[J].草業(yè)科學(xué)，2024，41（1）：218-231

[2]劉亞釗，王明利，蔣年華，等．中國草產(chǎn)品貿(mào)易格局和發(fā)展趨勢分析[J].草業(yè)科學(xué)，2018，35（11）：2765-2772

[3]周倩，衛(wèi)瑩瑩，玉柱，等．調(diào)制方式對淋雨后紫花苜蓿品質(zhì)的影響[J].中國草地學(xué)報(bào)，2018，40（1）：68-72

[4]劉麗英，賈玉山，王志軍，等．苜蓿干燥過程中葉綠素與營養(yǎng)物質(zhì)含量的變化及相關(guān)性[J].中國草地學(xué)報(bào)，2021，43（11）：60-68

[5］何嘯峰.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法在檢測食品霉菌毒素中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代食品，2017，23（24）：56-58

[6]ORINA A，GAVRILOVAO，GAGKAEVA T，etal. The con-tamination of Fabaceae plants with fungi and mycotoxins[J].Agricultural and Food Science，2020，29（3）：265-275

[7]PANASIUK L，JEDZINIAK P，PIETRUSZKAK，et al. Fre-quencyand levels of regulated and emerging mycotoxins insilage in Polande[J].MycotoxinResearch，2O19，35（1）：17-25

[8］李宇宇，賈玉山，格根圖，等．飼用草產(chǎn)品主要真菌毒素污染檢測、風(fēng)險(xiǎn)評估與控制研究進(jìn)展[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2021，30（4）：191-204

[9]楊勝．飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，1993：10-21

[10]ANOWER M R，BOE A，AUGER D，et al.Comparativedrought response in eleven diverse alfalfa accessions[J]. Jour-nal of Agronomy and Crop Science，20l7，203（1） ：1-13

[11]HE Y，QIU QH，SHAO TQ，et al. Dietary alfalfa and calciumsaltsof long-chain fattyacids alter protein utilization，microbialpopulations，and plasma fatty acid profile in holstein freemartinheifers[J].Journal ofAgricultural and Food Chemistry，2017，65（50）：10859-10867

[12］劉麗英.首蓿干燥過程中環(huán)境因子對營養(yǎng)物質(zhì)的影響機(jī)制及田間調(diào)控策略研究[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018：37-40

[13]李宇宇，格根圖，降曉偉，等．雨淋及草條厚度對天然牧草干燥特性和營養(yǎng)品質(zhì)的影響[J].草地學(xué)報(bào)，2019，27（5）：1419-1424

[14］劉麗英，賈玉山，范文強(qiáng)，等．影響苜蓿自然干燥的主要環(huán)境因子研究[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2022，31（2）：121-132

[15］尹強(qiáng)，武海霞，王志軍，等．環(huán)境因子對苜蓿田間自然干燥的影響[J].草地學(xué)報(bào)，2013，21（1）：188-195

[10」八刀， 里見幾 附日佰 早明質(zhì)時(shí)影響[J].草地學(xué)報(bào)，2010，18（6）：848-853

[17]MARTINSONKL，HATHAWAYM，JUNGH，etal.Theeffectof soaking on protein and mineral loss in orchardgrass andalfalfahay[J].JournalofEquineVeterinaryScience，2O12，32（12）：776-782

[18]王志軍，王建英，董航飛，等．干燥條件對苜蓿品質(zhì)指標(biāo)的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，40（6）：101-105

[19］賈婷婷，趙苗苗，吳哲，等．雨淋及干燥方式對紫花苜蓿干草品質(zhì)的影響[J]．草地學(xué)報(bào)，2017，25（6）：1362-1367

[20］董寬虎，王常慧，牧原，等．干燥方法對苜蓿草粉營養(yǎng)價(jià)值的影響[J].草地學(xué)報(bào)，2003，11（4）：334-337

[21]鄭先哲，王建英，董航飛，等．干燥條件對苜蓿品質(zhì)指標(biāo)的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，40（6）：101-105

[22]HUMPHREYS M O.Water-soluble carbohydrates in peren-nial ryegrass breeding. II.Cultivar and hybrid progeny perfor-mance in cutplots[J].Grassand Forage Science，1989，44（2）：237-244

[23]MUCK R E. Initial bacteria numbers on lucerne prior to ensiling[J].Grass and Forage Science，1989，44（1）：19-25

[24]ALEXANDER N J，PROCTOR R H，MCCORMICK S P.Genes，gene clusters，and biosynthesis of trichothecenes andfumonisins in Fusarium[J].Toxin Reviews，2O09，28（3）：198-215

[25]邵力平．真菌分類學(xué)[M]．北京：中國林業(yè)出版社，1984：15-21

[26]王志軍，盧強(qiáng)，丁霞，等．干燥時(shí)間對鹽堿地苜蓿營養(yǎng)品質(zhì)及真菌菌群結(jié)構(gòu)的影響[J].草地學(xué)報(bào)，2023，31（12）：3661-3667

[27]KOZALI M，UCHIMURA T，OKADA S. Experimentalmanual of lactic acid bacterial[M.Tokyo，Japan：Asakurasyoten，1992：34-37

[28］李改英，楊艷玲，傅彤，等．不同淋雨模式對苜蓿霉菌生長規(guī)律及其品質(zhì)的影響[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2011，26（4）：184-188

[29]DUNIEREL，MARINS，HEBRAUDE，etal.Dynamicsofmicrobial communities during fermentation of maize and sor-ghum silages in Argentina[J].Animal Feed Science and Tech-nology，2013，185（1）：151-162

[30]賈濤，王有月．霉變飼料的處理方法與預(yù)防措施[J].北京農(nóng)業(yè)，2007，12（4）：36-38

[31]MARIN S，RAMOS D，SANCHIS G，et al. Mycotoxin-pro-ducingfungi isolated from storedmaizeand sorghuminArgentina[J].International Journal of Food Microbiology，2004，93（2）：319-326

[32]靳玉婷，李先藩，蔡影，等.秸稈還田配施化肥對稻一油輪作土壤酶活性及微生物群落結(jié)構(gòu)的影響[J].環(huán)境科學(xué)，2021，42（8）：3985-3996

[33］崔云鳳，黃云，蔣伶活.農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上幾種重要的赤霉屬真菌研究進(jìn)展[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2007，23（7）：441-446

（責(zé)任編輯劉婷婷）