子宮頸HSIL患者陰道微生態變化與HPV感染的亞型分布及HPV轉歸的影響因素分析

Analysisof VaginalMicroecological Changes，SubtypeDistributionof HPVInfection inPatients with Cervical HSIL，and Influencing Factors of HPVOutcome/YUAN Aiqin，XUMeihua，YUJiamei.//Medical Innovation of China，2025，22（18）：157-162

[Abstract]Objective：To explore the vaginal microecology changes and the subtype distribution of human papillma virus （HPV） infection in patients with cervical high-grade squamous intraepithelial lesion （HSIL），and toanalyzethe influencing factorsofHPVoutcome.Method：A totalof15Opatients withcervical HSIL diagnosed bypathological examination inYichun Maternal and Child Health Center from January 2O21 to December 2022 were selected as the disease group，and another1OO healthy women who underwent physical examinations at the Outpatient Department durig the same period were selected as the control group.The disease group was divided into the HPV persistent infection group and the HPV negative conversion group based on whether HPV turned negative after one year of treatment.The vaginal microecology of the disease group and the control group was compared，thedistributionof high-risk HPV（HR-HPV）infectionsubtypes wasanalyzed，andtheinfluencing factors of HPVoutcome were analyzed.Result：The proportions of patients with densityof normalflora，the diversityof normal floraand normal flora in thedisease group were allower thanthose in the control group，the proportions of patients with hydrogen peroxide （ H₂0₂ ） deficiency，sialidase （SNa） positive，leukocyte esterase （LE） positive， N-acetylaminohexosidase （NAG） positive and pH value gt;4.5 in the disease group were all higher than those in the control group，the differenceswere all statistically significant（ P lt;0.05）.Among the 150 patientswith cervical HSIL， the infection rate of HPV16 was the highest，folowed by HPV18.Compared with the HPV negative conversion group， age，infection subtype 16/18，pathological diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia （CIN） at grade || ，and the proportions of patients with abnormal flora density，abnormal flora diversity，flora imbalance， H₂O₂ deficiency， SNa （+），ndpHgt;4.5intheHPVpersistentinfectiongroupwereallhigher，thediferences werestatisticallysignificant （ P lt;0.05）.Multivariate logistic regresson analysis showed that age，infection subtype 16/18，pathological diagnosis of CIN grade II，abnormal flora density，abnormal flora diversity，flora dysbiosis， H₂₂ deficiency， SNa （+） ，and pH gt;4.5 were independent risk factors for persistent HPV infection （ P lt;0.05）. Conclusion： Patients with cervical HSIL may present vaginal microecological changes.Age，infection subtype，pathological grade，microbiota density， microbiota diversity，dominant bacteria，and changes in H₂O₂ ，SNa and pH are independent risk factors for persistent HPV infection.

[Key words] Cervical high-grade squamous intraepithelial lesion Vaginal microecology Human papilloma virus

First-author'saddress：Department of Obstetricsand Gynecology，Yichun Maternaland Child Health Center，Yichun33600o，China doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2025.18.036

子宮頸癌是危害女性健康的惡性腫瘤之一，據世界衛生組織（WHO）統計，2022年我國新發子宮頸癌約有15萬例，死亡人數約為5.6萬，我國子宮頸癌防控形勢嚴峻，發病人數占全球的 18.6%^[1] 子宮頸癌的主要病因是人乳頭狀瘤病毒（HPV）的持續感染，尤其是高危型HPV（HR-HPV），其主要發病特點為經過10年以上的癌前病變期，即子宮頸鱗狀上皮內病變（SIL），包括低級別鱗狀上皮內病變（LSIL）和高級別鱗狀上皮內病變（HSIL）。SIL與女性感染年齡、HPV感染亞型及病毒載體數量等密切相關，大部分LSIL可自然消退，而HSIL存在癌變的可能。SIL若不及時接受有效治療，進展為浸潤性癌和原位癌的可能性極大[2]。HPV感染患者中有 10%～30% 繼續進行性發展，既往研究證實，陰道微生態在HSIL進展的過程中具有重要影響[。健康女性陰道內環境以乳酸、過氧化氫0 H₂O₂ ）、乳酸菌素等革蘭氏陽性乳桿菌為優勢菌，主要發揮預防感染、維持陰道微生態平衡的作用[4。據文獻報道，陰道菌群長期失調可影響病毒清除，增加子宮頸HPV感染的風險，促進子宮頸病變的進一步發展5。基于此，本研究旨在探討子宮頸HSIL患者陰道微生態變化及與HPV感染的相關性，報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2021年1月—2022年12月宜春市婦幼保健院經病理檢查確診的150例子宮頸HSIL患者，設為疾病組。另擇同期門診體檢的健康女性100例納入對照組。納入標準：（1）疾病組參照文獻[6]《婦產科學》診斷，均經陰道鏡活檢、病理學檢查確診子宮頸HSIL且HPV感染；（2）對照組體檢健康；（3）非妊娠期、非月經期；（4）育齡期且有性生活史。排除標準：（1）近3個月內使用過激素，近1周內有陰道灌洗放藥；（2）急性生殖道感染；（3）近2周內有抗生素用藥史；（4）合并造血系統疾病；（5）宮腔手術史，全子宮切術及放化療；（6）伴有陰道炎癥、伴有嚴重內分泌系統疾病；（7）合并惡性腫瘤、免疫性疾病;（8）合并腎、肝、心臟系統疾病；（9）合并精神疾病或認知障礙。本研究經宜春市婦幼保健院醫學倫理委員會批準；患者自愿參與本研究并簽字。

1.2 方法

1.2.1病理學檢查采集子宮頸脫落細胞，細胞洗液植入新柏氏保存液中，Bethesda分級系統進行細胞學診斷，對宮頸上皮內瘤變（CIN）者進行組織切片檢查，最終診斷為HSIL。

1.2.2陰道微生態檢測擴陰器暴露陰道，2根無菌棉簽于陰道上1/3段處旋轉10s后平鋪于載玻片上，進行檢測。第一張涂片革蘭染色， 10×100 倍油鏡下進行觀察。（1）菌群密集度分級依據為視野平均細菌數，共分為4個等級，視野平均細菌數為1＼～9個（I級）10＼～99個（Ⅱ級） ?100 個（Ⅲ級）細胞聚集或密集覆蓋黏膜上皮細化（IV級）分別記為 +.++.+++.++++.+++ 為正常，+、 ⁺⁺⁺⁺⁺ 為異常。（2）菌群多樣性：分級依據為能分辨的細菌菌群數目，共分為4個等級，能分辨的細菌菌群數目為1＼～3種（I級）4＼～6種（Ⅱ級）7＼～10種（Ⅲ級） ?11 種（IV級）分別記為 +、++、+++ ⁺⁺⁺⁺⁺ ： ⁺⁺ 、 ⁺⁺⁺ 為正常， + 、 ⁺⁺⁺⁺ 為異常。（3）優勢菌：第二張涂片蘇木素伊紅染色， 10×40 倍鏡下觀察陰道桿菌、滴蟲、線索細胞等病原微生物；優勢菌為乳酸桿菌為正常菌群，優勢菌為線索細胞或其他病原體感染判定為菌群失調，包括需氧菌性陰道炎。（4）另測定唾液酸苷酶（SNa）、過氧化氫（ H₂O₂ ）、 ΔpH 值、N-乙酰氨基己糖苷酶（NAG）、白細胞酯酶（LE）等，其陽性判定標準為： H₂O₂ 濃度 lt;2μmol/L 為 H₂O₂ 缺乏；SNa水平 ?7.0U/L 為SNa （+） ；LE水平 ?9.0U/L 為LE （+） ;NAG水平 ?6.0U/L 為NAG （+）。

1.2.3HR-HPV檢測（1）采樣：無菌取樣刷于子宮頸口取樣本，送檢。（2）檢測：實時熒光聚合酶鏈式反應（PCR），儀器為全自動基因擴增儀（ABI7500），試劑盒購自中山大學達安基因股份有限公司。（3）HR-HPV亞型：68、59、58、52、51、45、39、35、33、31、18、 16 （4）術后3個月再次檢查，2次檢查結果為同一分型（+）則表明患者HPV持續陽性。

1.3 觀察指標

（1）對比疾病組和對照組的陰道微生態。（2）統計疾病組HR-HPV亞型感染檢出情況。（3）根據治療1年后HPV是否轉陰，將疾病組分為HPV持續感染組與HPV轉陰組，比較兩組陰道微生態及臨床資料。（4）分析HPV轉歸的影響因素。

1.4 統計學處理

本研究數據采用SPSS20.0統計學軟件進行分析和處理，計量資料以（ ）表示，采用 χ_t 檢驗；計數資料以率（ % ）表示，采用 χ² 檢驗；應用logistic回歸分析HPV轉歸的影響因素。以 Plt;0.05 為差異有統計學意義。

2結果

2.1 兩組基線資料比較

疾病組年齡23-62歲，平均（ 45.02±7.54 ）歲；體重指數（BMI） 18.3～28.7kg/m² ，平均（ 24.31±3.57 ） kg/m² 。對照組年齡20＼～64歲，平均（ 44.86±7.79 ）歲；BMI 18.7～28.5kg/m² ，平均（ 24.19±3.22 ） kg/m² 。兩組基線資料比較，差異均無統計學意義（ Pgt;0.05 ），有可比性。

2.2 兩組陰道微生態比較

與對照組比較，疾病組正常菌群密集度、正常菌群多樣性及正常菌群患者占比均更低， H₂O₂ 缺乏、SNa （+） 、LE （+） 、NAG （+） 及 pH 值 gt;4.5 患者占比均更高，差異均有統計學意義（ Plt;0.05 ），見表1。

2.3疾病組HR-HPV亞型感染檢出情況

HR-HPV感染亞型為16和18的占比明顯高于其他亞型，HPV16感染率最高。見表2。

2.4HPV轉歸的單因素分析

同HPV轉陰組比較，HPV持續感染組的年齡、HPV16/18型感染、病理診斷CIN為Ⅲ級、菌群密集度構成異常率、菌群多樣性構成異常率、菌群失調、 H₂O₂ 缺乏、SNa （+） 及 pHgt;4.5 患者占比均更高，差異均有統計學意義（ Plt;0.05 ），見表3。

2.5 HPV轉歸的多因素分析

將表3中比較有統計學意義的數據納入多因素logistic回歸分析，結果顯示，年齡、感染亞型16/18、病理診斷CIN為Ⅲ級、異常菌群密集度構成、異常菌群多樣性構成、菌群失調、 H₂O₂ 缺乏、SNa （+） 及 pHgt;4.5 是HPV持續感染的獨立危險因素（ Plt;0.05 ），見表4。

3討論

陰道微生態失衡與宮頸病變進展密切關聯，相關研究指出，陰道菌群失調可導致宮頸HR-HPV感染，而HR-HPV感染可能會促進SIL進展為HSIL，HSIL具有明顯的惡變潛能，若果未能及時治療，可能進展為浸潤性子宮頸癌。文獻[8]報道，未接受治療的CINI平均13年內有 15%～23% 的患者會發展為浸潤性癌，終身風險可達 40% 。陰道微生態失衡的病理機制復雜，涉及多種因素，包括女性雌激素水平的變化、微生物群落結構變化、免疫系統及內分泌系統的影響及年齡和生理周期等因素[9-10]。早期發現患者陰道微環境改變并及時采取相應的干預治療措施，對降低HR-HPV感染率、延緩子宮頸癌發生有重要意義。

本研究中，同對照組比較，疾病組正常菌群密集度、正常菌群多樣性及正常菌群患者占比均更低，H₂O₂ 缺乏、SNa （+） 、LE （+） 、NAG （+） 及 pH 值gt;4.5 患者占比均更高（ Plt;0.05 ）。同HPV轉陰組比較，HPV持續感染組異常菌群密集度構成、異常菌群多樣性構成及菌群失調率均更高（ Plt;0.05 ）。表明子宮頸HSIL患者的陰道菌群構成發生變化，且HR-HPV持續感染與陰道微生態改變有關。乳酸桿菌是健康女性陰道微生態中的優勢菌，通過多種機制維持陰道微生態平衡：一方面，乳酸桿菌可通過將單糖轉化為乳酸，維持陰道局部 pH 值保持在3.8＼～4.4，有效抑制部分病原體生長；另一方面，乳酸桿菌能夠通過分解陰道黏膜中的糖原，產生 H₂O₂ 和乳酸，促進微生態平衡的同時，還能發揮自凈作用，總之，陰道乳酸桿菌在維持女性生殖道健康中起重要作用[11-13]。孔林等[4]研究顯示，子宮頸病變與子宮頸卷曲乳酸桿菌相對豐度相關聯，卷曲乳酸桿菌相對豐度變化可預測子宮頸病變及HPV感染。劉慧等[15]報道，相較于低危HPV，HR-HPV患者陰道菌群多樣性、菌群密集度異常率更高，細菌性陰道炎、需氧菌性陰道病及外陰陰道假絲酵母菌病的檢出率更高，提示陰道微生物失調可導致HR-HPV感染，參與宮頸病變進展。細菌性陰道炎是子宮頸癌的高危因素，線索細胞陽性患者的陰道微生物中黏蛋白降解酶增加，可對陰道上皮保護性黏膜屏障造成破壞，為病原微生物黏附入侵提供條件[。此外，細菌性陰道炎還可通過影響炎癥因子分泌干擾子宮頸組織內免疫平衡的輔助因子分泌。伏晨陽等[研究發現，與正常HPV陰性患者對比，HPV陽性患者線索細胞、SNa、LE陽性占比、陰道微生態失調占比均更高，說明陰道微生態失衡容易導致HPV感染，引發宮頸病變。鄭晶晶等[8]研究表明，HPV持續感染組與轉陰組對比，前者陰道菌群密集度異常、菌群多樣性異常及滴蟲陰道炎發生率均更高，且持續感染組患者陰道微生態失衡率更高，陰道微生態失衡預測HPV持續感染的曲線下面積為0.601，提示陰道微生態失衡的病理改變可能參與HPV感染的獲得過程，其對HPV感染具有一定的預測價值，檢測患者陰道微生態有重要意義。

此外，本研究結果還發現，HR-HPV感染亞型為16和18的占比明顯高于其他亞型，HPV16感染率最高。經多因素logistic回歸分析得：年齡、感染亞型16/18、病理診斷CIN為Ⅱ級、異常菌群密集度構成、異常菌群多樣性構成、菌群失調、 H₂O₂ 缺乏、SNa （+） 及 pHgt;4.5 是HPV持續感染的獨立危險因素（ Plt;0.05 ）。靳榮等研究結果顯示，在HR-HPV感染患者中，16型占比為 23.81% ，18型占比為 16.67% ，HPV16型持續感染及HR-HPV感染是導致子宮頸癌前病變進展的高危因素。王憲偉等[報道，HPV16/18亞型、年齡 gt;40 歲及CIN為Ⅱ級的患者在術后更容易出現HPV持續性感染。本研究結果與上述報道一致。HPV16和HPV18的病毒載量較高，其在宿主體內的活躍度高，持續感染的可能性增大；此外，這兩種亞型的病毒可通過將自身基因整合到宿主細胞基因組中，抑制宿主細胞的正常功能，從而促使細胞持續增殖和癌變[20-21]。此外，有研究表明， H₂O₂ 缺乏、SNa （+） 及 pHgt;4.5 與高危型HPV感染呈正相關[22]。因此，臨床針對HPV感染亞型為16/18、CINII級及陰道微生態失衡的患者，應積極采取相應的針對性治療措施，加強此類病患的隨訪及管理，預防或延緩子宮頸病變進展。

綜上所述，微生態失衡是導致子宮頸HSIL及HPV持續感染的重要原因，對患者陰道微生態進行合理干預十分必要。此外，臨床醫師還需加強對HPV感染亞型為16/18、CINⅡI級患者的管理及隨訪，以盡早發現持續性感染患者，改善其預后。

參考文獻

[1]STELZLED，TANAKALF，LEEKK，etal.Estimatesoftheglobalburden ofcervical cancer associated with HIV[J].LancetGlobHealth，2021，9（2）：161-169.

[2]中國抗癌協會婦科腫瘤專業委員會.子宮頸錐切術后高危型人乳頭瘤病毒陽性者規范化管理的專家共識[J].中國實用婦科與產科雜志，2021，37（6）：650-653.

[3]靳榮，李紅芳.高危型HPV持續感染對宮頸癌前病變進展的影響[J].中國婦幼保健，2020，35（3）：406-409.

[4]ZHENGJJ，MIAOJR，WUQ，etal.CorrelationbetweenHPV-negative cervical lesionsand cervical microenvironment[J].TaiwanJObstetGynecol，2020，59（6）：855-861.

[5]LINSB，ZHANGB，LINYX，etal.Dysbiosis of cervicalandvaginal microbiotaassociatedwithcervicalintraepithelialneoplasia[J].FrontCell InfectMicrobiol，2022，12：767693.

[6]謝幸，孔北華，段濤.婦產科學[M].9版.北京：人民衛生出版社，2018：157-166.

[7]薛啟迪，許英慧，周曼林，等.高級別上皮內瘤變和不同型別人乳頭瘤病毒感染患者陰道微生態特征分析[J].中國微生態學雜志，2024，36（3）：327-331.

[8]趙超，畢蕙，趙昀，等.子宮頸高級別上皮內病變管理的中國專家共識[J].中國婦產科臨床雜志，2022，23（2）：220-224.

[9]胡佳貞，張鑫，涂少華，等.陰道微生態與絕經期女性盆腔器官脫垂的相關性[J].中國微生態學雜志，2023，35（2）：207-213.

[10]張頌婕，葉明珠，曲長萍，等.陰道微生態與宮頸HPV 感染患者炎性因子和T細胞亞群的相關性分析[J].中國微生態學雜志，2023，35（12）：1449-1453.

[11]王藍康，姜家康，遲文成.陰道微生態與HPV感染及宮頸癌的相關性研究[J].中國性科學，2023，32（10）：38-41.

[12]江海燕，周燕，陳曉玲.人乳頭瘤病毒感染患者陰道菌群分布及宮頸局部免疫功能變化的分析[J].中國性科學，2022，31（4） ： 83-87.

[13]歐楊，田莉，羅勇，等.乳桿菌對HSIL全子宮切除術后HR-HPV清除率及陰道微生態的影響[J].中國微生態學雜志，2023，35（9）：1079-1083.

[14]孔林，柴芝紅，蔡仙麗，等.子宮頸卷曲乳酸桿菌相對豐度與HPV感染和子宮頸病變的關聯性[J].中華醫院感染學雜志，2022，32（4）：582-585.

[15]劉慧，趙華，李洋.陰道微生態與人乳頭瘤病毒感染及宮頸病變的相關性[J].中華實用診斷與治療雜志，2024，38（2）：195-200.

[16]陳咪咪，王瑞.宮頸癌同步放化療對陰道微生態失調的影響及BV相關菌分布特征分析[J].檢驗醫學與臨床，2021，18（10）： 1420-1423.

[17]伏晨陽，周萍，張頻，等.陰道微生態與人乳頭瘤病毒感染和宮頸病變的相關性[J].實用臨床醫藥雜志，2023，27（16）： 37-42.

[18]鄭晶晶，張凡，秦晶晶，等.陰道微生態失衡聯合血清HLA-G、HLA-E水平評估HSIL 患者CKC術后HPV持續感染價值[J].中國計劃生育學雜志，2024，32（7）：1658-1662.

[19]王憲偉，袁風菊，徐培，等.高級別鱗狀上皮內病變病人子宮頸切除術后人乳頭瘤病毒持續感染的相關危險因素研究[J].安徽醫藥，2023，27（12）：2412-2416.

[20]李巧稚，王婭菲.子宮頸細胞系及子宮頸上皮病變中共刺激分子B7-H1的表達及與HPV16感染的關系[J].臨床與實驗病理學雜志，2020，36（10）：1138-1143.

[21]侯任，盧劍，楊曉宇，等.HPV16/18 基因DNA存在狀態與宮頸病變發展的研究[J].現代婦產科進展，2021，30（1）：45-49.

[22]李敏.子宮頸病變患者陰道微環境與高危型 HPV 感染及機體免疫功能的關系[J].當代醫藥論叢，2024，22（24）：39-42.

（收稿日期：2024-10-11）（本文編輯：馬嬌）