圖分類號:S567.19 文獻標識碼:A 文章編號:1001-9499(2025)04-0020-02
Study on Microsomal Rooting in Gas Method of Plantlet Cultured of Acanthopanax senticosus
TIAN Xinhua QIU XinyuWANG Fude** (Heilongjiang Forestry Institute,HeilongjiangHarbin150081)
AbstractThe sugarcane of excellent single plants of Acanthopanax senticosus were used as materials to induce rooting of sugarcane by a combination of the method rooting in gas and hormone treatment. Experimental results:Seedlings induced by 1/2MS+NAA 0.5mg/L+IBA 1.0mg/L+ boricacid 20mg/L medium had thick root system,large root volume and high rooting rate.
Key wordsAcanthopanax senticosus;culture in gas;rooting
刺五加(Acanthopanaxsenticosus)為五加科,多年生落葉灌木,主要分布在小興安嶺、吉林長白山區、華北、河南及陜西北部,朝鮮、日本及俄羅斯遠東地區[1]。性耐陰,喜濕潤和較肥沃的土壤。刺五加的根皮可入藥,具有調節神經、補腎安神、益氣健脾、抗腫瘤、改善血壓及心腦血管疾病等功效[2-3]。刺五加體內含有皂苷、黃酮、揮發油等特殊成分,營養價值非常高[4-6]。種子可榨油;嫩芽可作蔬菜、茶葉。
近年來,人們對于刺五加及其產品的需求與日俱增。2023年,刺五加根皮干品價格已達到7000元 μ 苗木供求矛盾日益突出。然而,刺五加種子存在后熟現象[7-9],經處理后萌發率仍低于 30%[10-11] ,扦插生根率也不高,組織培養過程中存在植株生長速度慢、生根困難等問題,組織培養體系尚不成熟,嚴重制約了刺五加良種產業化進程[12]。因此,本試驗針對刺五加優良單株的無性系展開研究,采用氣生培養與植物生長調節劑相結合的方法,誘導刺五加試管苗生根,篩選適宜的生根培養基配方,旨在解決微體生根瓶頸問題,建立完善的組織培養體系,從而推動良種產業化進程。
1試驗材料與方法
以伊春市金山屯林場的刺五加優良單株無菌
試管苗為試材。
1.1刺五加健壯基礎苗培養
在無菌環境的超凈工作臺上,將分化苗分割為單株,接種于 MS+KT0.5mg/L+NAA0.2mg/L+6-BA 0.5mg/L+30g/L 蔗糖 + 瓊脂粉 6g/L+ 椰子水 50g/L 培養基, pH 調至 5.8~6.0 。
1.2氣生培養誘導試管苗生根
在生根培養基配制滅菌1d后,在超凈工作臺上修剪試管壯苗的基部,將植株及部分葉片以30° 角斜嵌于培養基表層,苗木基部部分暴露于空氣中。由于苗木上部營養器官具有向上生長特性,根系具有向下生長特性,所以一旦誘導出氣生根,它就向下生長扎入培養基中吸收營養,供應苗木上部器官生長,糾正試管苗傾斜狀態,恢復苗木正常生長狀態。
1.3誘導刺五加生根培養基的篩選
將培養的試管壯苗利用氣生培養方法接種于基本培養基為1/2MS,添加不同激素及濃度的培養基中培養(表1),培養基中添加蔗糖 15g/L ,日產瓊脂粉 6g/L ,硼酸 20mg/L,pH 調至 5.8~6.0 。按照單因素隨機試驗設計進行試管苗生根培養基的篩選。每個處理接種8瓶,重復2次。培養 30d 后,再同號培養基轉接一次,培養 60d 調查苗木的生根狀況。
1.4培養條件
壯苗培養:光照培養箱中全光培養,光照強度3000Lux ,溫度控制在 (23±2)°C ,光照時長 12h/d
生根培養:先將培養瓶置于暗培箱中 1W ,然后轉入正常光培養,溫度控制在 (25±1)°C ,光照強度 2000Lux ,光照時長 12h/d 。
1. 5 數據處理與統計
采用MicrosoftExcel2013的統計工具進行計算,DPS19.05統計軟件進行方差分析和差異顯著性測驗(Tukey法)[13]。
2 結果與分析
首先將接種后的瓶苗放置于暗培養室中進行暗處理1W,然后轉移到光下培養。培養15d左右在切口處有白色愈傷組織球產生,培養22d左右有白色根芽產生,隨著培養時間的延長不同培養基生根狀況不同。生根培養30d,相同培養基轉接一次,將培養60d后生根狀況進行方差分析(表2)表明,各性狀的處理間差異顯著。經Tukey法多重比較(表3)顯示,經處理Ⅲ培養的試管苗生根數量較多,生根率最高,并且與其他處理差異顯著。結合表型觀察,處理Ⅱ和處理V培養的試管苗生根細長、柔軟,分支少或無分支,顏色青綠,生根率不高。處理Ⅲ培養的試管苗生根數量多、根系粗壯、色白、多分支、生根率較高。由此可見,誘導刺五加試管苗生根的激素有NAA與IBA,但NAA的誘導效果更好。但從處理V的生根情況來看,培養基中的NAA含量不易過高,否則易形成愈傷組織塊影響根系質量。結合上述試驗結果,選擇 1/2MS+NAA 0.5mg/L+IBA1.0mg/L+ 硼酸 20mg/L 為刺五加試管苗的生根培養基。
平均生根數 Σ=Σ 生根總數/已生根苗數;平均生根率 Σ=Σ 已生根苗數/苗木總數
3結論與討論
3.1植物組織培養可以不受季節限制,全年不間斷的培養遺傳基礎完全一致的優質苗木。然而刺五加試管苗生根問題一直是阻礙新品種推廣應用的瓶頸,本研究通過氣生培養和激素處理相結合的方法,有效地誘導試管苗生根,不同處理間差異顯著,其中 1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA1.0mg/L+ 酸 20mg/L 培養基誘導的苗木生根粗壯、色白、皮層生根、生根率較高。
3.2刺五加試管苗生根需要較長時間的前期積累,因此,需要將分化苗進行一個周期的壯苗培養,然后轉人生根培養基中誘導生根,才有利于根芽萌發。
3.3相對正常生根培養而言,氣生誘導發根速度更快,根量大。氣生根形成后便扎入培養基中吸取營養形成真正的根系,可以及時糾正植株的生長狀態,促進植株上部組織生長。
參考文獻
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