AMPK在糙皮側耳生長發育不同階段及非生物脅迫下的差異表達

中圖分類號： S646.1⁺41 文獻標志碼：A 文章編號：1673-2871（2025）08-045-07

Differential expression of AMPK in different stages of growth and developmentof Pleurotusostreatus and under abiotic stress

LI Huihui， CHEN Zhaoyang， ZHENG Xiukun， WEN Qing， LIU Qing， QI Yuancheng， WANG Fengqin，

HUYanru， SHENJinwen

（Collegeofifeiences，HenanAgriculturalUniversityengzhouo，Henana）

Abstract：To explore the expression characteristics of the three subunits α， β ，and γ ofAMPK（AMP-activated protein kinase）uring diferent stagesof the growthand developmentof Pleurotus ostreatus andunder various abiotic stresses，this study first obtained the sequencesof the three subunits ofAMPK in P. ostreatus through homology alignment.Then，qPCR was used to investigate the relative expression levels of the three subunits ofAMPK during diferent stages of growth anddevelopment，aswellasuderutritional stress，temperaturestress，heavymetal stress，oxidativestressandalt stres.The results showed that theAMPKa subunit was highly expressed during the initialstage offruiting body development， the primordium stage，the fruiting body stage of P. ostreatus，as well as under temperature stress， heavy metal stress， and oxidative stress.TheAMPKβ subunit was highly expresed during the initial stageoffruiting bodydevelopment，under nutritionaltress，eavymetalstres，andsalt stress.Theexpressionlevelof theAMPKysubunitonlyicreaseduring the initial stage offruitingbody developmentandunder heatstress within temperature stress.Theabove results indicate thathethree subunitsofAMPKrespond todiferent environmental stressesandmayhave differentregulatory functions. Among them，theAMPKasubunit playsakeyrole in theregulatory functionofAMPK.This studylaysafoundation for furtherin-depth explorationof thefunctions ofthe threesubunitsofAMPKduring the growthanddevelopmentof P. OStreatus and under diferent stresses，and also provides innovative ideas forthe studyof the stress resistance of P. ostreatus.

Keywords：AMPK;qPCR;Pleurotusostreatus;Abiotic stress

糙皮側耳（Pleurotusostreatus）俗稱平菇，是我國乃至世界主栽食用菌種類之一，栽培原料來源廣泛。糙皮側耳不僅具有豐富的營養價值和獨特風味，還能在抗氧化、抗炎、抗病毒和免疫刺激等方面發揮作用[2。我國糙皮側耳的種植以傳統大棚為主，該種植方式具有節省資源以及方便快捷等優勢，但是大棚環控能力差，糙皮側耳生長極易受到環境條件的影響。2021年河南遭受暴雨洪澇災害，全省香菇、平菇、木耳、草菇等食用菌產量受損，造成直接經濟損失近1億元。近年來，全球氣候變暖與極端天氣造成了我國各地食用菌一定程度的減產甚至絕收，由于食用菌生產對氣候變化的適應性不足，無法應對天氣變化帶來的挑戰，外界環境脅迫嚴重威脅糙皮側耳子實體的生長與品質[5]。

AMP 激活的蛋白激酶（AMPK）是由 a，β 和y亞基構成的異源三聚體，在真核生物中高度保守，作為一種感知和調節生物體胞內能量水平的關鍵因子，在維持生物體代謝平衡和調控生長發育中發揮著重要作用。AMPK在微生物中又稱Sucrose-nonfermenting1（SNF1），可以被氧化應激、葡萄糖剝奪、內質網應激等應激途徑激活，參與胞內的葡萄糖代謝、脂質代謝和蛋白質代謝等，此外，還可以調節線粒體的生物合成和自噬[7-8]。

AMPKα亞基是催化亞基，N端包含了絲/蘇氨酸蛋白激酶結構域和保守的蘇氨酸磷酸化位點，該位點磷酸化可以直接激活該激酶的催化活性，在C端含有一個與調節亞基形成復合物的調節結構域。在哺乳動物體內，存在2個AMPKα亞基，即AMPKa1和AMPKα2；真菌中存在一個AMPKα亞基的同源蛋白SNF1；植物中存在3個AMPKα亞基的同源蛋白，分別為蔗糖非發酵相關蛋白激酶1α1（SNRK1α1）、蔗糖非發酵相關蛋白激酶1α2（SNRK1α2）和蔗糖非發酵相關蛋白激酶1α3（SNRK1α3），不過SNRK1a3較為罕見[]。在植物遭遇鹽脅迫、高滲脅迫等非生物脅迫時，SNRK1α被誘導激活，進而調控細胞內可溶性糖、淀粉含量以及ADP-葡萄糖焦磷酸化酶（AGPase）活性，增強植株的抗逆能力[\"。在靈芝中，SNF1受熱脅迫誘導激活后，通過提高細胞內無氧糖酵解速率來減少活性氧積累，從而對靈芝的次生代謝產生影響[2]。

AMPKβ和y亞基作為調節亞基，可以和 α 亞基的調節結構域直接互作，協同發揮作用。 β 亞基通常作為連接 a 和γ亞基的橋梁，其N端是一段可變基序，含有一個糖類結合元件CBM，C端用來結合 a 和 γ 亞基；y亞基含有核苷酸結合位點，包含4個串聯的胱硫氨酸 β 合酶（CBS）基序，用來響應AMP、ADP和ATP水平的變化[13]。在釀酒酵母中，含有3個 β 亞基（SIP1、SIP2、GAL83）， β 亞基的亞細胞定位會影響SNF1在酵母中的調控功能，進而影響菌體對非生物脅迫的抗逆能力：在缺少葡萄糖時，SIP1、SIP2、GAL83分別定位于液泡、細胞質、細胞核，葡萄糖回補后則定位于細胞質中；SIP1過表達菌株在高乙醇條件下成活率較高；GAL83在堿性脅迫下定位于細胞核，負責調控碳源[14-15]。哺乳動物中有3個γ亞基AMPKy1、AMPKy2、AMPKy3;酵母和白色念珠菌中只有1個由SNF4編碼的γ亞基；白色念珠菌中的SNF4介導葡萄糖等碳源代謝、參與細胞壁合成、影響菌株對化學藥物的抵抗能力[16.17]。細胞受到外界環境的壓力，胞內代謝失衡，AMPK3個亞基通過形成復合物來調控代謝穩態；此外，AMPK的3個亞基也可以獨立于三聚體復合物響應多種非生物脅迫的誘導[18]。

AMPK蛋白激酶廣泛存在于各種真核生物中，參與生物體的生長代謝調控及多種非生物脅迫響應，但目前在食用菌中研究較少，并且AMPK3個亞基在糙皮側耳生長代謝及非生物脅迫下的調控機制尚不清楚。筆者旨在通過對AMPK3個亞基在糙皮側耳不同生長發育階段，以及各種非生物脅迫下的表達特性分析，初步解析3個亞基可能調控的抗逆途徑，為后續深入研究AMPK3個亞基在糙皮側耳不同脅迫下的調控功能提供借鑒和參考。

1 材料與方法

1.1材料

試驗于2023年12月至2024年5月在實驗樓進行。1.1.1菌株糙皮側耳（ P. ostreatus）菌株X831由河南農業大學真菌研究室保藏并提供。1.1.2培養基GYE（glucose yeast extract）培養基：酵母提取物 s_g. 葡萄糖 20g 、維生素B1 0.01g 、KH₂PO₄1g.MgSO₄?7H₂O0.5g，ddH₂O 溶解并定容至 下高壓蒸汽滅菌 30min 。MCM培養基：微晶纖維素 10g?MgSO₄? 7H₂O0.5g. （NH₄）₂HPO₄5g.KH₂PO₄4.6g. 微量元素 2mL （配方見表1）， 溶解并定容至 下滅菌30min 。SA培養基：蔗糖 20g，NH₄H₂PO₄2g. 天冬酰胺（Asn） 0.88g. 氨酸 （L-Val）1g?K₂HPO₄?3H₂O 0.224g?KH₂PO₄ 0.803g?MgSO₄?7H₂O 0.99g?CaCl₂

0.02g，ddH₂O 溶解并定容至 下高壓蒸汽滅菌 30min 。滅菌后加入 5mL 微量元素溶液I和微量元素溶液II。微量溶液 I：ZnSO₄?7H₂O 0.89g. MnSO₄?H₂O 0.765g.CuSO₄ 5H₂O 0.20g 溶解并定容至1L，使用 0.22μm 細菌過濾器過濾除菌。微量元素II：腺苷 1.65g 、硫胺素鹽酸鹽 0.02g 溶解并定容至1L，使用 0.22μm 細菌過濾器過濾除菌。

表1微量元素配方Table1Traceelementformulation

1.2 方法

1.2.1菌種活化在超凈工作臺中，將冰箱保藏的X831菌種用無菌接種針取適量置于新鮮的GYE平板上， 25^°C 恒溫避光培養箱培養 8～10d. 0

1.2.2平板菌絲培養平板培養模擬糙皮側耳出菇過程，將X831菌種轉接于SA固體培養基中，置于 25^°C 黑暗環境中培養7d至菌絲滿板（CK），收集部分樣品備用；隨后將剩余平板轉移至 16^°C 恒溫培養箱（ ^12h 光照、 .12h 黑暗）進行出菇管理，培養5d和10d后分別收集樣品備用；培養約15d左右時，收集原基期樣品；待長出平菇子實體（培養約22d）后，收集子實體樣品，置于 -80^°C 冰箱保存備用。

1.2.3液體菌絲培養將8～10塊活化的平菇X831菌種塊轉接至新鮮的GYE液體培養基中（其中放入8～10顆玻璃珠用來打碎菌絲），在 25^°C 、180r?min^-1 下培養6～7d，菌液呈現均勻的小米粥狀，用磁力攪拌器攪拌 30min 左右，進一步使菌絲均勻化，確保每瓶的接種量相同，然后以 5% 的接種量接到新鮮的GYE培養基中，在 25^°C?180r?min^-1 下培養5d，以葡萄糖為唯一碳源的處理組繼續用GYE液體培養基培養2d（CK），以纖維素為碳源的處理組需要把菌絲過濾出來，在超凈工作臺中用無菌水把菌絲表面的培養基沖洗干凈后轉接入新的以纖維素為唯一碳源的MCM液體培養基中培養2d。結束后用漏勺過濾掉培養基，把過濾得到的菌絲表面的培養基用去離子水沖洗干凈，然后用無紡布吸走菌絲表面的水分，錫紙包裹后液氮冷凍處理，然后將收集到的不同處理的菌絲放置- 80^° C冰箱保存。

1.2.4非生物脅迫處理溫度脅迫：將活化好的X831菌種轉接GYE平板，待長至平板的2/3時，分別在 42^°C，4^°C 培養箱脅迫培養 24h ，以 25^°C 為對照（CK），刮取菌絲后，液氮速凍，樣品置于 -80^°C 保存備用。氧化脅迫：將X831菌種轉接在 2mmol?L^-1 過氧化氫的GYE平板上，添加等體積去離子水作為空白對照， 25^°C 恒溫避光培養箱培養 8～10d. 。刮取菌絲后，液氮速凍，樣品置于 -80^°C 冰箱保存備用。重金屬脅迫：將X831菌種接種至0、5、10、15mg?L^-1 的硝酸鉛、氯化鎘和氯化汞的GYE培養基，添加等體積去離子水作為對照組， 25^°C 恒溫黑暗培養至對照菌絲滿板， -80^°C 冰箱保存備用。鹽脅迫處理：將X831菌種接種至含有 1%.2% NaCI的GYE培養基，以 0%NaCl 的GYE培養基為對照組，放入 25^°C 恒溫培養箱培養8～10d，刮取菌絲后，液氮速凍，樣品置于 -80^°C 冰箱保存備用。

1.2.5RNA提取及熒光定量PCR分析將 -80^°C 冰箱保存的樣品置于研缽中，液氮研磨至粉末狀，然后使用南京諾維贊FreeZolReagent試劑盒進行RNA提取。用分光光度計測定RNA濃度，反轉錄使用南京諾唯贊HiScriptIIIRTSuperMixforqPCR（+gDNAwiper）反轉錄試劑盒。實時熒光定量PCR反應體系為 20μL ，qPCR程序設定為 95^°C，30 s（保持階段）； 95^°C，10s;60^°C，30s （循環階段，40個循環）。熒光定量所用PCR引物如表2。

表2熒光定量PCR引物

Table2 Primersused forfluorescence quantitative PCR

1.3 數據分析

采用GraphPadPrism9.0對熒光定量數據進行可視化分析及統計學處理。試驗組與對照組間差異顯著性通過單因素方差分析（One-wayANOVA）判定。

2 結果與分析

2.1 AMPK3個亞基的鑒定

經過同源序列（BLASTP）比對，在糙皮側耳數據庫（https：//mycocosm.jgi.doe.gov/pages/blast-query.jsfdb ? PleosPC15_1）中獲得1個靈芝SNF1同源蛋白 AMPKα ，獲得釀酒酵母 β 亞基和 γ 亞基同源蛋白AMPK β 和AMPKy各1個，結果如圖1所示。

圖1AMPKa、AMPKβAMPKy基因結構Fig.1Gene structure of AMPKa，AMPKβ，andAMPKy

2.2AMPK3個亞基在不同生長發育時期相對表達量的變化

為了探究AMPK3個亞基在糙皮側耳不同生長發育時期的表達情況，筆者用平板培養模擬糙皮側耳出菇培養條件，qPCR檢測在不同發育時期內（菌絲期、 .16^°C 誘導出菇 5d，16^°C 誘導出菇10d、原基期、子實體期）3個亞基表達量，結果如圖2所示，AMPKa亞基的相對表達量在低溫誘導前期、原基期和子實體期都較對照組菌絲期升高了2倍以上，AMPKa亞基在子實體形成期大量合成，參與了糙皮側耳子實體形成的整個階段。AMPKβ亞基和AMPKy亞基在模擬子實體形成的低溫誘導前期表達量顯著上升，但是幅度不大，除AMPKβ亞基在原基期的相對表達量顯著降低外，AMPKβ亞基和AMPKy亞基其他時期的表達量與菌絲期相比均無明顯變化，說明AMPKβ和y亞基可能參與糙皮側耳子實體的形成。

2.3AMPK3個亞基在營養脅迫下相對表達量的變化

作為碳代謝調控關鍵元件，AMPK的基本功能就是在營養脅迫條件下調控能量代謝。為了探究AMPK3個亞基在糙皮側耳不同營養條件下的響應情況，筆者以非優勢碳源微晶纖維素替代優勢碳源葡萄糖，檢測在營養脅迫下3個亞基的表達量，結果如圖3所示。與以葡萄糖為唯一碳源相比，除 β 亞基顯著上調表達外， α 亞基和y亞基表達水平并無明顯變化，文獻報道，碳饑餓會導致AMPKα催化亞基磷酸化水平顯著增加，進而激活蛋白激酶酶活性來響應碳饑餓造成的代謝失衡[12]。結合本試驗結果與文獻報道可推測：在當前的營養脅迫（微晶纖維素替代葡萄糖）條件下， α 亞基和y亞基的轉錄水平未發生顯著變化，但 a 亞基可能通過文獻報道的磷酸化修飾途徑被激活；而 β 亞基則主要在轉錄水平上受到調控。這表明AMPK不同亞基響應營養脅迫可能存在差異化的調控機制。

注：不同小寫字母表示處理間在0.05水平差異顯著。下同。 Note：Differentsmallettrs indicatesignificant differenceamongdifferent treatmentsatO.O5level.Thesame below.

圖2 AMPKαMNPKβAMPKγ 在不同生長發育時期相對表達量變化 Fig.2Relativeexpressionlevel ofAMPKa，AMPKβ，and AMPKγ atdifferent growth and development stage

圖3 AMPKαAMPKβ，AMPKγ 在營養脅迫下相對表達量的變化

2.4AMPK3個亞基在溫度脅迫下相對表達量的變化

探究AMPK蛋白激酶3個亞基在冷熱脅迫下的表達特性，結果如圖4所示，AMPKα基因在冷熱脅迫下表達水平均顯著升高，AMPKβ亞基在溫度脅迫下表達量均無明顯變化，AMPKy亞基在冷脅迫下表達水平無明顯變化，在熱脅迫下顯著上調表達。上述結果表明，AMPKα亞基和AMPKy亞基響應熱脅迫的誘導轉錄水平升高，可能參與調控熱脅迫途徑緩解糙皮側耳熱損傷，AMPKα亞基還受冷脅迫誘導表達量升高，響應低溫脅迫。AMPKβ亞基不受溫度脅迫響應，不參與調控溫度脅迫。

圖4AMPKa、AMPKβ、AMPKy在溫度脅迫下相對表達量的變化

Fig.4ChangesinrelativeexpressionlevelsofAMPKa， AMPKβ，and AMPKγ under temperature stress

圖5 AMPKα、AMPKβ、AMPKγ 在重金屬脅迫下相對表達量的變化

2.5AMPK3個亞基在重金屬脅迫下相對表達量的變化

為了明確AMPK3個亞基是否響應重金屬脅迫，通過平板外源添加不同質量濃度的鎘（Cd）、汞（Hg） 、鉛（Pb），探究 α、β、γ3 個亞基的表達特性，結果如圖5所示。AMPKa和AMPKβ亞基表達量在10mg?L^-1Cd²⁺，10mg?L^-1Hg²⁺ 和 10mg?L^-1Pb²⁺ 處理下均顯著升高，約為對照組的2倍， AMPKγ 亞基表達量在3種重金屬脅迫處理下均無顯著變化。以上結果表明，AMPKα和 AMPKβ 亞基響應10mg?L^-1 處理的 Cd²⁺，Hg²⁺，Pb²⁺ 脅迫，AMPKy亞基不響應重金屬脅迫。

2.6AMPK3個亞基在氧化脅迫下相對表達量的變化

通過外源添加過氧化氫，模擬氧化脅迫條件，探究AMPK3個亞基對氧化脅迫的響應情況，結果如圖6所示。AMPKα亞基的表達量在 2mmol?L^-1 H₂O₂ 處理下顯著提高，AMPKβ和 AMPKγ 的表達量相較于對照組無顯著變化，由此可知，僅AMPKα亞基在轉錄水平響應氧化脅迫。

圖6 在氧化脅迫下相對表達量的變化

2.7AMPK3個亞基在鹽脅迫下相對表達量的變化

通過外源添加不同濃度NaC1，模擬鹽脅迫條件，探究3個亞基對鹽脅迫響應情況，結果如圖7

圖7AMPKa、AMPKβ、 AMPKγ 在鹽脅迫下相對表達量的變化

Fig.7Changes in relative expression levels of AMPKa， AMPKβ，andAMPKy under saltstress

所示，AMPKβ亞基在 2%NaCl 處理下表達量顯著上調，AMPKα和AMPKy亞基的表達水平無顯著變化，僅AMPKβ亞基響應 2%NaCl 處理的鹽脅迫誘導。

3 討論與結論

生物體在生長和發育過程中會遭遇外界環境的多種刺激，在多種應激條件下胞內代謝失衡，維持能量穩態是生物體生存的一個重要策略，AMPK蛋白激酶可以在多種信號通路中調控能量代謝，從而響應逆境脅迫[19]。糙皮側耳是我國主栽食用菌種類之一，生長發育受外界環境影響較大。外界脅迫不僅會阻礙菌絲生長，還會促使大量活性氧（ROS）積累，破壞細胞內氧化還原穩態，進而導致細胞內能量代謝失衡[20]。

筆者在本研究發現，AMPK復合體的 α，β，γ 亞基在糙皮側耳應對非生物脅迫時呈現顯著差異表達的特征。 α 亞基作為催化核心，在溫度脅迫、重金屬脅迫及氧化脅迫中均表現顯著上調，且貫穿子實體發育全程，提示其可能通過維持基礎能量代謝參與發育調控。而 β_?γ 亞基則表現出脅迫特異性： β 亞基在重金屬暴露及營養脅迫時激活， γ 亞基則特異性響應熱激。值得注意的是，三者在相同脅迫下缺乏表達同步性，暗示亞基可能存在獨立于經典三聚體復合物的調控路徑。這一現象在進化保守性研究中獲得佐證，番茄中編碼 α 亞基的基因PpSnRKlα可以提高抗氧化酶基因的表達水平和酶活性，調節活性氧代謝進而增強耐鹽性，也可以和ShCIGT蛋白質互作來改善番茄的耐寒和耐旱性[21-22]。黃曲霉菌AMPKβ亞基GAL83可以和Fus3相互作用調節黃曲霉菌的次生代謝產物[23]。AMPK的3個亞基可以和多種與其激酶活性無關的蛋白質相互作用響應逆境脅迫，具有獨立于三聚體復合物之外的激酶活性，由此通過3個亞基在相同的非生物脅迫下的不同表達模式，也可猜測3個亞基在不同的非生物脅迫下可能獨立于三聚體復合物發揮調控功能。

敲除小鼠中的AMPKα亞基會加劇鎘脅迫造成的氧化損傷，AMPK通路還可以減輕兔子大腦中鎘誘導的氧化應激和自噬[21-22]。在本研究中，AMPKα和AMPKβ在重金屬鎘、汞和鉛誘導下，轉錄水平均升高，暗示AMPKα和AMPKβ可能在糙皮側耳抵抗重金屬脅迫中發揮一定作用。在糙皮側耳遭遇由微晶纖維素替代葡萄糖引發的營養脅迫時，AMPKβ亞基的轉錄水平顯著升高，而 a 和 γ 亞基的轉錄水平則未發生顯著變化。筆者推測糙皮側耳在應對此類急性能量危機時， β 亞基在轉錄水平的上調可能反映了其調控的重要性或長期適應需求，糙皮側耳可能通過 α 亞基的變構調節（而非轉錄激活）響應能量危機[。這種多層次（轉錄與翻譯后）、多亞基 （β 與 a 的協同調控策略，使AMPK能夠靈活高效地應對急性營養脅迫。

綜上所述，AMPKα在子實體發育全過程及溫度脅迫、重金屬脅迫和氧化脅迫中均呈顯著上調表達，表明其可能通過基礎能量代謝調控參與生長發育與脅迫應答。 β 和y亞基表現出明顯的脅迫特異性： β 亞基特異性響應重金屬及營養脅迫，而y亞基僅在熱激條件下顯著激活。3個亞基在相同脅迫處理下呈現異步表達特征，且 β/γ 亞基在模擬子實體發育階段未檢測到顯著轉錄波動，提示各亞基可能通過獨立于經典三聚體復合物的非典型通路發揮調控功能。

參考文獻

[1] 董浩然，于海龍，姜寧，等.中國食用菌工廠化生產發展現狀及 趨勢[J].食藥用菌，2024，32（1）：1-9.

[2] 曹月剛，趙健，韓吉輝.食用菌營養價值及產品開發現狀分 析[J].中國食品工業，2024（1）：165-167.

[3] 唐廷廷，聶青玉，陳吉裕，等.現代農業發展背景下中國平菇產 業現狀及對策研究[J].中國瓜菜，2025，38（2）：184-194.

[4] 李虎，顏廷武，吳志旻.大食物觀下食用菌產業鏈韌性面臨的 現實挑戰與提升對策[J].食藥用菌，2024，32（5）：281-288.

[5] 常婷婷，趙妍，楊煥玲，等.食藥用菌高溫脅迫應答研究進展[J]. 食用菌學報，2021，28（1）：124-134.

[6] BHUTTAMS，GALLOES，BORENSTEINR.Multifaceted role of ampk in viral infections[J].Cells，2021，10（5）：1118.

[7] STEINBERGGR，HARDIEDG.Newinsightsintoactivation andfunction of the AMPK[J].Nature ReviewsMolecularCell Biology，2023，24：255-272.

[8] MENGL，LIUHL，LINX，etal.Enhancedmulti-stresstoleranceand glucose utilization of Saccharomyces cerevisiaeby overexpression of the SNF1 gene and varied beta isoform of Snfl dominates in stresses[J].Microbial CellFactories，2020，19 （1）：134.

[9] YANY，ZHOUXE，XU HE，et al.Structure and physiological regulation of AMPK[J].International Journal ofMolecular Sciences，2018，19（11）：3534.

[10]EMANUELLE S，HOSSAIN MI，MOLLERIE，et al. SnK1 fromArabidopsisthalianaisanatypical AMPK[J].Plant Journal，2015，82（2）：183-92.

[11]KUMARP，MADHAWANA，SHARMAA，etal.A sucrose non-fermenting-1-related proteinkinase1 gene fromwheat， TaSnRKlα regulates starch biosynthesis by modulating AGPase activity[J].Plant Physiology and Biochemistry，2024，207： 108407.

[12]HU YR，XU W Z，HU S，et al.Glsnfl-mediated metabolic rearrangement participatesin copingwith heat stressand influencingsecondary metabolism in Ganoderma lucidum[J].Free Radical Biologyand Medicine，2020，147：220-230.

[13]WILLOWSR，NAVARATNAMN，LIMAA，etal.Effect of different γ- subunit isoforms onthe regulation ofAMPK[J].Biochemical Journal，2017，474（10）：1741-1754.

[14]CHANDRASHEKARAPPAD G，MCCARTNEYRR，ODONNELL AF， et al. The β subunit of yeast AMP-activated protein kinase directs substrate specificity in response to alkaline stress[J].Cellular Signalling，2016，28（12）：1881-1893.

[15]SHYMANSKY C M， WANG G，BAIDOO E E K，et al.Flux-enabled exploration of the role of Sipl in galactose yeast metabolism[J].Frontiers in Bioengineering and Biotechnology，2017， 5：31.

[16] ZHOU Q，HAO B，CAO X，et al.Energy sensor AMPK gamma regulates translation via phosphatase PPP6C independent of AMPK alpha[J].Molecular Cell，2024，84（9）：1816-1816.

[17]KE CL，LEW S Q，HSIEH Y，et al.Convergent and divergent roles of the glucose-responsive kinase SNF4 in Candida tropicalis[J].Virulence，2023，14（1） ：2175914.

[18]MARTiNEZ- BARAJAS E，COELLO P. Review： How do SnRK1protein kinases trulywork？[J].Plant Science，2020， 291：110330.

[19]LINGNXY，KACZMAREK A，HOQUE A，et al.mTORC1 directly inhibits AMPK to promote cell proliferation under nutrient stress[J].Nature Metabolism，2020，2（1）：41-49.

[20]QIU ZH，WU XL，GAO W，et al.High temperature induced disruption of thecell wall integrity and structure in Pleurotus ostreatusmycelia[J].AppliedMicrobiology and Biotechnology， 2018，102（15）：6627-6636.

[21]WANG WR，LING JH，WANG G F，et al. Overexpression of PpSnRKlα intomato enhanced salt tolerancebyregulatingABA signaling pathway and reactive oxygen metabolism[J].BMC Plant Biology，2020，20（1）：128.

[22]YU CY，SONG L L，SONG JW，et al.ShCIGT，a trihelix family gene，mediates cold and drought tolerance by interacting with SnRKl in tomato[J].Plant Science，2018，270：140-149.

[23]MA L X，MA JN，TIANY Y，et al.Fus3 interacts with Gal83， revealing the MAPK crosstalk to Snf1/AMPK to regulate secondarymetabolic substrates inAspergillus flavus[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2024，72（17），10065-10075

[24]LIRY，LUO X，ZHUY J，et al.ATM signals to AMPK to promote autophagy and positively regulate DNA damage in response to cadmium-induced ROS in mouse spermatocytes[J].Environmental Pollution，2017，231（2）：1560-1568.

[25] XUE H T，CAO H B，XING C H，et al. Selenium triggers Nrf2-AMPK crostalk toaleviate cadmium-induced autophagy in rabbit cerebrum[J].Toxicology，2021，459：152855.